Клетки маркеры поверхности

Ранние В-клетки- иммигранты (у человека на 17 неделе внутриутробного развития) в селезенке и лимфоузлах плода являются 5 М" -клетками, на поверхности которых присутствует D5 (предполагаемый маркер Т-клеток). В-клетки- [c.230]

Проточная цитометрия. Метод анализа клеточных популяций в суспензии, основанный на выявлении различий между клетками по маркерам поверхности. [c.562]

В принципе механизм нейронной специфичности мог бы иметь универсальное значение и повсюду в нервной системе определять, какне клетки должны связаться друг с другом. На практике же (хотя для многих частей нервной системы уже получены убедительные данные в пользу нейронной специфичности) очень трудно точно установить, насколько велика роль такой специфичности в организации всей системы. Недавно, однако, был сделан важный шаг на пути к выяснению молекулярного механизма нейронной специфичности. С помощью моноклональных антител на поверхности клеток сетчатки куриного эмбриона был идентифицирован гликопротеин, который, подобно гипотетической метке нейронной специфичности, позволял определить принадлежность клетки к той или иной области сетчатки. Концентрация этого маркера в сетчатке плавно изменяется-на одном ее полюсе его в 35 раз больше, чем на другом, и он присутствует почти на всех клетках сетчатки. Градиент концентрации маркера можно обнаружить уже на четвертый день эмбрионального развития, и он сохраняется в течение всего периода роста сетчатки. Возможно, что это и есть проявление позиционной метки, которую клетки приобретают уже на ранней стадии развития эмбриона и которая служит впоследствии направляющим фактором при образовании нервных связей. [c.148]

Антиген — это молекула, вызывающая образование антител. Все клетки несут на своей поверхности антигены, которые выступают в роли меток (маркеров), позволяющих клеткам распознавать друг друга. Обычно антигены представлены белками или гликопротеинами, т. е. белково-углеводными соединениями, хотя в принципе антигенными свойствами может обладать любая крупная молекула. Организм отличает свои антигены от чужих и в норме образует антитела только против чужих. [c.175]

Разнообразие и специфичность наборов рецепторов на поверхности клеток приводит к созданию очень сложной системы маркеров, позволяющих клеткам отличать своих от чужих . [c.448]

Маркеры клеточной поверхности позволяют различать и разделять Т- и В-клетки [4] [c.219]

Наконец, при дисперсивном способе сегрегации включение новых фрагментов должно происходить во множестве сайтов по всей поверхности клетки, что приводило бы к постепенному разбавлению старых структур новыми и равномерному распределению маркеров на поверхности дочерних клеток. [c.67]

Функционирование иммунной системы обеспечивается клетками многих типов. Совершенно очевидно, что понимание процессов иммунного ответа требует знания того, какие клетки принимают в них участие и взаимодействуют друг с другом. Один из подходов к изучению иммунной системы, которому отдавалось предпочтение в последние несколько лет, состоял в применении клонального анализа, например методов лимитирующих разведений с использованием клональных клеточных линий. Другой подход, который ни в коей мере не подменяет клональный анализ, а скорее дополняет его, заключается в определении гетерогенности популяций по экспрессируемым маркерам клеточной поверхности. В рамках этого второго подхода весьма популярными стали методы проточной цитометрии и сортировки клеток. [c.326]

К сожалению, эффективность этой реакции очень низка. Чтобы включить в клетки достаточное количество маркера, требуется избыток боргидрида (обычно включается 0,1% внесенной радиоактивности). Таким образом, если нужно пометить белок, содержащий сиаловую кислоту или галактозу, 0,1% которых доступна для реакции на клеточной поверхности, необходимо взять по меньшей мере 10 мКи NaB H4, чтобы получить включение 10 000 имп/мин. Даже при избытке боргидрида происходит восстановление не более чем 10% остатков сиаловой кислоты и галактозы, обычно же — меньше 1%. Однако этот метод вполне пригоден для маркирования углеводов и гликопротеидов тех клеток (например, эритроцитов и спермиев), которые не способны легко включать радиоактивные сахара. [c.186]

Однако после адсорбции химерной фаговой частицы на поверхности бактериальной клетки заключенная в ней ДНК проникает (вводится фаговой частицей) внутрь бактерии и начинает автономно реплицироваться как плазмида, размер которой составляет 30 0 т.п.о. Поскольку такая плазмида (космида) содержит в своем составе селектируемые маркеры в виде генов устойчивости к антибиотикам, ее поддерживают в бактериальных клетках путем выращивания бактерий на среде с соответствующими антибиотиками. Несмотря на то, что емкость космидных векторов значительно выше фаговых, эффективность клонирования в космидах ниже, хотя и достигает в ряде случаев [c.85]

Наиболее часто используемый в генно-инженерных исследованиях процесс поглощения экзогенной ДНК бактериальными клетками, сопровождающийся приобретением ими новых генетических маркеров, называют генетической трансформацией [201]. В том случае, если бактериальные клетки захватывают ДНК бактериофагов и в результате происходит образование зрелых фаговых частиц, говорят о трансфекции фаговой ДНК. Поглощение экзогенной ДНК в процессе трансформации и трансфекции может осуществляться лишь компетентными клетками. Под компетентностью понимается такое состояние бактериальных клеток, при котором они способны сорбировать экзогенную ДНК на своей поверхности и поглощать ее, после чего экзогенная ДНК может быть интегрирована в бактериальную хромосому или существовать в виде внехромосомного элемента (эписомы, плазмиды). [c.143]

Маркером, характеризующим линию Т-клеток, служит Т-клеточный рецептор для антигена (ТкР). Имеется два различных типа ТкР, и тот и другой — гетеродимеры из двух соединенных ди-сульфидными связями полипептидных цепей. ТкР первого типа образован цепями аир, второго типа, сходный по структуре — цепями у и 5. Оба рецептора ассоциированы на клеточной поверхности с пятью полипептидами СОЗ-комплекса, образуя вместе с ним рецепторный комплекс Т-клетки (ТкР-СОЗ-комплекс см. гл. 7). Пример- [c.23]

Ряд других молекулярных маркеров экспрессируется на В-клетках и мыши, и человека рис. 2.13). Большая часть В-клеток несет на поверхности антигены МНС класса II, которые важны для кооперативных (контактных) взаимодействий с Т-клетками. У мыши это антигены 1-А или 1-Е, у [c.26]

Недавно выявлены различия между Тх1- и Тх2-клетками по маркерам поверхности. Для клеточной мембраны Тх1 характерно наличие LAG-3 — антигена, относящегося к суперсемейству иммуноглобулин-подобных молекул. Клетки Тх2 экспрессируют в гораздо больщем количестве по сравнению с Тх1-клетками маркер D30, относящийся к семейству рецепторов для ФНО. [c.174]

Иногда для стабилизации связи между Тц-клеткой и ее мишенью требуются дополнительные взаимодействия (рис. 10. Ц) они могут способствовать и цитолизу. Например, цитолиз кле-ток-мишеней связавшимися с ними Тц-клетками in vitro можно вызвать антителами к СОЗ или D2, маркерам поверхности Тц. Вероятно, аналогичным образом цитолитическую активность Тц-клеток включает связывание с этими молекулами физиологических лигандов. [c.179]

Т-лимфоциты защищают организм от клеточных инфекций, в частности от внутриклеточных паразитов (микробных клеток, живущих внутри кле-ток-хозяев). Т-лимфоциты могут узнавать инфицированную клетку, если соответствующий антиген расположен на ее поверхности. Контакт с антигеном является ключевым моментом активации Т-клеток и их клонального отбора. Взаимодействие с антигеном возможно только в комплексе с поверхностными маркерами, которыми являются группы белков гистосовместимости МНС (от англ. Major histo ompatibility omplex). Идентифицированы гены, кодирующие три класса белков МНС, при этом во взаимодействии с антигеном принимают участие белки только классов 1 и 2. [c.477]

Вторая больщая популяция лимфоцитов у птиц первоначально заселяет фабрициеву сумку, или бурсу, где проходит инструктаж , в связи с чем они получили название В-лимфоцитов, или В-клеток. У млекопитающих и человека аналог бурсы пока не найден, поэтому В-лимфоциты нередко просто называют тимуснезависи-мыми или лимфоцитами костномозгового происхождения. Эта популяция лимфоцитов расселяется в мозговом и герминальном слоях лимфатических узлов, красной пульпе селезенки, пейеровых бляшках кишечника и представлена более мелкими и короткоживущими клетками с большим содержанием ДНК и плотно расположенными на поверхности иммуноглобулиновыми рецепторами, относящимися к классам 1дМ, 1 0, 1 Е и, возможно, к IgA. Эти рецепторы неоднозначны. Одни из них распознают детерминанты антигенов, т. е. специфичную группу атомов, являющуюся маркером всей молекулы, другие предназначены для соединения с комплементом, а третьи — для удерживания Рс-фрагментов (невариабельный, неспецифический участок антитела) 1 Т. Следует иметь в виду, что в ряде работ иммуноглобулиновые рецепторы называют антителами, что химически вполне оправдано, хотя и может несколько путать читателя. Основная функция В-лимфоцитов заключается в продукции антител. [c.9]

Это проверялось в следующем эксперименте. К ДНК, содержащей трансформирующие молекулы с маркером 8ш>, добавлялась ДНК из другого штамма пневмококков, перезистептного к стрептомицину. В пределах линейной части кривой добавка второй неактивной ДНК никак не сказалась, т. е. различные молекулы ДНК сорбировались независимо друг от друга. Однако высота плато понижается при наличии неактивной ДНК, что свидетельствует о конкуренции активных молекул ДНК и разбавляющих инертных молекул за места на клетках. Эта закономерность напоминает изотерму Лэнгмюра для обычной адсорбции в случае, когда число мест на поверхности ограничено. Количество молекул [c.345]

Что происходит с большим количеством нового мембранного материала, который добавляется к уже имеющейся плазматической мембране, в ходе все новых слияний с пузырьками В некоторых, активно секретирующих клетках растений, число транспортных пузырьков аппарата Г ольджи, участвующих в экзоцитозе, таково, что поверхность мембраны должна была бы удваиваться каждые 20 мин. Очевидно, однако, что плазматическая мембрана имеет постоянную площадь поверхности и, следовательно, существует какой-то механизм оборота мембранного материала. В плазматической мембране клеток растений существуют многочисленные окаймленные ямки (рис. 20-44, А). Полагают, что они участвуют в рециклировании мембраны, как это имеет место в клетках животных (см. разд. 6.5.4). Подобный путь жидкофазного эндоцитоза недавно был обнаружен у растительных клеток при анализе поглощения протопластами электрононлотных маркеров, таких как ферритин или коллоидное золото. Эти маркеры, введенные в протопласты, быстро попадали в сложную сеть мембранных трубочек, которые были названы частично покрытым (окаймленным) ретикулумом (рис. 20-44, Б и В). Полагают, что эта органелла функционально эквивалентна эндосомному компартменту клеток животных (см. разд. 6.5.4). Отсюда маркер попадает в крупные пузырьки и в конечном счете оказывается в вакуоли. Таким образом, основные внутриклеточные пути синтеза метаболитов, их сортировка, упаковка, секреция и эндоцитоз весьма сходны в клетках растений и животных. [c.419]

Для определения полярности актиновых и тубулиновых полимеров используют связывание их со специфическими белками. Например, S1-фрагменты миозина, представляющие собой его головки , присоединяются к актиновому филаменту строго упорядоченно, образуя характерные стрелки , показанные на рис. 10-14. Для микротрубочек не найдено такого удобного маркера, однако недавно выяснилось, что в определенных, не совсем обычных экспериментальных условиях молекулы тубулина могут присоединяться к поверхности уже сформировавшихся микротрубочек, в результате чего образуются искривленные пластинки из протофиламентов, напоминающие в поперечном сечении крючок. Полярность микротрубочки проявляется в том, что этот крючок может загибаться либо по часовой стрелке, либо против часовой стрелки. Оказалось, что микротрубочки в аксонах нервных клеток, в ресничках и около центриолей в митотических и интерфазных клетках имеют одинаковую полярность относительно направления роста. [c.102]

Изучение способов сегрегации поверхностных слоев осуществляется методом введения в эти структуры меченых предшественников с последующим прослеживанием их судьбы через несколько генераций после переноса клеток в среду, не содержащую метки (ри18е-сЬа8е — эксперименты). Другой метод прослеживание образования определенных компонентов поверхностных структур после их индукции с целью выявления распределения на поверхности клетки новообразованных участков. В этом случае вместо меченых предшественников удобно использовать специфические маркеры клеточной стенки (рецепторы фагов, колицинов, а также матриксные белки) или цитоплазматической мембраны (интегральные мембранные ферменты), а также такие общие маркеры, как жгутики. [c.66]

Секретируемые антитела могут сорбироваться на поверхности так называемых натуральных киллеров (НК-клеток) — особой популяции лимфоцитов, не имеющих маркеров Т- и В-клеток. Цитофильность антител к НК-клеткам обеспечивается взаимодействием F -участка иммуноглобулинов с соответствующим рецептором на поверхности НК-клеток. В результате НК-клетки, свя-завщие иммуноглобулин, приобретают способность к антителозависимому цитолизу клеток трансплантата. [c.211]

Хорошими маркерами жидкофазного пиноцитоза являются 198Аи, 2 1-пероксидаза, Ьсывороточный альбумин, поливинил-пирролидон. Длительность пиноцитоза зависит от типа клеток и характера субстрата. Многие клетки (макрофаги, фибробласты, клетки эпителия, почек, семявыносящих протоков и др.) в случае жидкофазного пиноцитоза образуют пиносомы постоянно, в течение длительного времени, хотя и с различной скоростью. Клетки, обладающие высокой скоростью обновления макромолекул, характеризуются высокой степенью фагоцитоза. Например, клетки эпителия почечных канальцев, молочных желез после лактации, остеокласты. Нейтрофилы или макрофаги в про-дессе фагоцитоза не снижают способности транспортировать нуклеотиды и аминокислоты, даже при условии, когда 30—50% клеточной поверхности интернированы внутрь клетки. [c.13]

Иммуноглобулиновые рецепторы В-лпмфоцитов достаточно строго рестриктированы по аллотипу, т. е. у гетерозиготного индивидуума иммуноглобулиновые рецепторы индивидуальной В-клетки имеют, как правило, легкие и тяжелые цепи одного аллотипа. Способность клетки экспрессировать полипептидные цепи иммуноглобулинов только одного из двух возможных аллотипов получила название аллельного исключения (S. Sell, 1977). Аллельное исключение не абсолютно, так как небольшое число В-лимфоцитов экспрессирует оба аллотипа, если этп клетки принадлежат гетерозиготным особям. Однако нх число уменьшается после антигенной или митогенной стимуляции. Зрелые плазматические клетки синтезируют иммуноглобулины только одного аллотнпа (см. гл. 1). Необходимо особо подчеркну-ть, что лимфоциты способны экспрессировать неаллельные варианты генов, контролирующих аллотипическую специфичность разноименных полипептидных цепей. Так, в случае одновременной экспрессии двух изотипов (например, рецепторов IgM- и IgD-изотипов) па поверхности лимфоцита выявляются аллотипические маркеры, характерные для [х- и 6-цепей (см. гл. 3). [c.198]

Прямое окрашивание включает инкубацию клеток с флуоро-хром-конъюгированным реагентом, специфичным по отношению к исследуемому клеточному маркеру. Непрямое окрашивание предполагает два этапа. Сначала клетки обрабатывают реагентом, специфически взаимодействующим с выявляемым маркером клеточной поверхности, а потом добавляют конъюгированный с флуорохромом агент, специфически связывающийся с реагентом, использованным на первом этапе. Для обоих вариантов окрашивания основная процедура одна и та же. Клетки инкубируют с насыщающими концентрациями реагентов в течение 30 мин, а затем отмывают от несвязавшихся агентов. Для определения оптимального при окрашивании количества реагентов проводят предварительные эксперименты. В идеале следует использовать минимальные дозы реагентов, при которых наблюдается насыщение лиганда. При этом сводятся к минимуму эффект неспецифического окрашивания и ошибка в дозировке соответствующих реактивов. Некоторые реагенты, например агглютинин из проростков гороха или некоторые IgM-aнтитeлa, нужно использовать в более низких концентрациях, для того чтобы избежать агглютинации клеток. [c.336]

Для иммунологических исследований на клеточном уровне важно уметь четко идентифицировать популяции Т- и В-лимфоцитов. Анатомическая и функциональная разобщенность тимуса и фабрициевой сумки у кур позволяет проводить уникальные экспериментальные манипуляции, которые могут быть использованы для получения Т/В-клеточных химер. Цель этих экспериментов состоит в том, чтобы получить животное, у которого иммунная система функционирует нормально, но Т- и В-клетки несут различные маркерные половые хромосомы, легко распознаваемые в препаратах делящихся клеток. Использование некоторых инбредных линий позволяет ввести в эту систему дополнительные маркеры, так как В-клетки донора можно отличить от клеток хозяина по аллоантигенам клеточной поверхности лимфоцитов либо с помощью аллоантисывороток, либо с помощью моноклональных антител. Совершенно очевидно, что использование недавно полученных моноклональных антител к субпопуляциям Т-клеток (Traill et al., 1984) и к клеткам гемопоэтической системы ( hen et al., 1984) в сочетании с упомянутыми химерами может еще более расширить возможности этой и без того весьма ценной модели для изучения онтогенеза и функционирования лимфоидной и гемопоэтической систем птиц. [c.411]

Клетки-предшественники, принесенные кровью из костного мозга, выходят из кровотока в ткань тимуса на границе коркового и мозгового вещества. На их поверхности еще сохранены белки, характерные для более ранних предшественников. В частности, белок 5С-1-г-маркер стволовых кроветворных клеток и белок ТЬВ — маркер общих предшественников для Т- и В-лимфоцитов. Далее, по мере созревания и приобретения способности синтезировать новые белки лимфоциты тимуса прекращают синтезировать белки 8С-1 и ТЬВ. Кроме того, уникальна для тимических клеток и их непосредственных костно-мозговых предшественников продукция фермента Тс1Т — терминальной дезоксинуклеотидилтрансфе-разы. [c.123]

Следует подчеркнуть, что маркеры, экспрессируемые лимфоцитами, можно обнаружить и на клетках иных линий. Так, С044 часто выявляется на клетках эпителия. Молекулы клеточной поверхности можно выявить с помощью флуоресцирующих антител, используемых в качестве зондов (рис. 2.9). На этом подходе основан метод проточной иммунофлуоресцентной цитометрии, позволяющей сортировать и подсчитывать клетки в зависимости от их размеров и параметров флуоресценции (см. гл. 29). С помощью этого метода удается проводить детальную сортировку популяций лимфоидных клеток. [c.23]

Цитотоксические Т-клетки распознают специфические антигены (например, вирусные пептиды на поверхности инфицированных клеток) в ассоциации с молекулами МНС. Большая часть Тц-клеток несет маркер DS " и распознает антиген, презентируемый в ассоциации с молекулами МНС класса I, но примерно 10 % МНС-рестриктированных цитотоксических Т-клеток относятся к субпопуляции D4" и распознают антиген в ассоциации с молекулами МНС класса II. [c.179]

По мере созревания гранулоцитов на их поверхности исчезают или появляются поверхностные дифференцировочные маркеры (рис. 12.3). Например, клетки КОЕ-ГМ экспрессируют молекулы МНС класса II и маркер С038, отсутствующие на зрелых нейтрофилах. К другим молекулам поверхности, экспрессируемым в процессе дифференцировки, относятся СО 13, СОИ [c.217]

Экспрессия Т-клеточных маркеров в процессе созревания Т-клеток у человека. В стволовых клетках тимуса присутствует фермент терминальная дезоксинуклеотидил-трансфераза (ТдТ) на стадии II ее активность уменьшается, а в клетках мозговой зоны полностью исчезает. В процессе дифференцировки появляется несколько поверхностных гликопротеинов. На мебране корковых тимоцитов, находящихся на II стадии развития, присутствует молекула D1. которой уже нет на клетках мозгового слоя. Маркеры D2 и D7 (общий маркер Т-клеток) появляются на очень ранних стадиях дифференцировки и сохраняются до стадии зрелой Т-клетки. Зрелые Т-клетки сохраняют и молекулу D5, которая также появляется на ранней стадии. Молекула СОЗ вначале, на стадии I, экспрессируется в цитоплазме (цито), а затем и на клеточной поверхности, одновременно с ТкР. У большинства клеток на стадии II поверхностные молекулы СОЗ и аР-ТкР присутствуют в небольшой концентрации, но она значительно возрастает на стадии [c.222]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология