Нуклеозиды фосфору

Фосфорилирование нуклеозида хлорфосфатом аналогично образованию пептидной связи, происходящему при взаимодействии амина с ацилхлоридом. Вероятно, один из простейших таких примеров— реакция рибонуклеозида с хлороксидом фосфора. В соответствующих условиях (триметил- или триэтилфосфат в качестве растворителя, О С, а затем обработка смесью диоксан — пиридин, комнатная температура) происходит фосфорилирование в основном [c.171]

Задача 0-77. Пиримидиновое основание и углевод, полученные при гидролизе нуклеозида, сожгли раздельно в избытке кислорода. Продукты сгорания углевода пропустили через трубку с оксидом фосфора (V), ее масса при этом увеличилась на 3,60 г. Продукты сгорания нуклеинового основания пропустили через избыток раствора щелочи при этом образовалось 27,6 г карбоната калия. Установите строение нуклеозида. [c.140]

В связи с этим фосфорилирование нуклеозидов хлорокисью фосфора, примененное Левиным, проводится очень редко и лишь в тех случаях, когда нельзя по каким-либо причинам пользоваться другими методами. [c.219]

Содержание иммобилизованных нуклеозидов наиболее часто рассчитывают, исходя из общего содержания фосфора [33, 44, 66], методики определения которого описаны в работах [5, 39, 51]. [c.248]

И 5 углеводного компонента. Участие этих групп в формировании межнуклеотидных связей подтверждается результатами электрометрического титрования, поскольку при титровании в области pH от 12,0 до 13,5 не обнаружено свободных гидроксильных групп сахара. При помощи такого рода титрования и химических анализов установлено также наличие четырех первичных фосфорильных групп, трех аминогрупп и двух гидроксильных групп пурина — пиримидина на каждые четыре атома фосфора. Эти данные, а также почти полное отсутствие вторичных фосфорильных диссоциаций согласуются с предположением Левина о том, что молекула ДНК имеет вид длинной неразветвленной цепи. Молекулу ДНК можно изобразить в виде полинуклеотидной цепи с фосфо-диэфирными связями между углеродами в положениях 3 и 5 (фиг. 24). Обработка препаратов ДНК соответствующими ферментами, действие которых рассматривается в следующей главе, приводит к распаду ДНК с образованием нуклеозид-З -фосфатов или нуклеозид-5 -фосфатов. [c.68]

Если же включающийся УМФ мечен но фосфору (Р ) и присоединяется к концу цепи, то, разумеется, выделенный после щелочного гидролиза уридин не будет радиоактивным. Метка будет обнаружена в нуклеозид-3 (2 )-монофосфате, содержащем основание Ъ и занимающем в цепи предпоследнее место (фиг. 79). Если же УМФ включается не с конца молекулы, то после щелочного гидролиза уридин-3 (2 )-монофосфат не будет радиоактивным, а нуклеозид-3 (2 )-монофосфат, содержащий основание X и рас- [c.229]

По своему химическому поведению аминогруппа в компонентах нуклеиновых кислот наиболее близка, по-видимому, к аминогруппе ароматических аминов, содержащих сильные электроноакцепторные заместители, например к аминогруппе п-нитроанилина. Дополнительное осложнение состоит здесь, однако, в том, что даже простейшие производные данного ряда (нуклеозиды) содержат также и другие функциональные группы, способные вступать в реакцию с электрофильными реагентами. Это атомы азота пиридинового типа в гетероциклическом ядре, гидроксильные группы остатка моносахарида. При переходе от нуклеозида к нуклеотиду проведение реакции осложняется еще больше за счет появления в молекуле функциональной группы с сильными нуклеофильными свойствами — остатка фосфорной кислоты — создается возможность новых побочных реакций. При реакциях с олиго- и полинуклеотидами вследствие таких побочных реакций могут возникать три-замещенные производные фосфорной кислоты, в которых крайне облегчена атака нуклеофильных агентов на атом фосфора, что может приводить к расщеплению полимерной цепи. Поэтому подбор оптимальных условий проведения реакции по экзоциклическим заместителям ядер на полинуклеотиде является обычно достаточно трудной задачей. [c.402]

Гидроксильная группа остатка сахара в нуклеозидах и нуклеотидах может подвергаться ацилированию под действием производных кислот фосфора, серы, бора и кремния. [c.521]

Лабильность связи нуклеозид—фосфор в исследованных структурах свидетельствует о том, что эта связь, устойчивая в свободных нуклеотидах, молсет расщепляться в некоторых их производных. По-видимому, это необходимо учитывать при анализе нуклеотидного материала, выделенного из биологических объектов, поскольку весьма возможно существование в них нуклеотидов в связанной форме. Поэтому очень интересные результаты были получены прн выделении из кислотнорастворимой фракции нуклеотидов, среди которых в значительных количествах были оф1аружены уридин и аденозин [43]. Скорее всего соответствующие нуклеотиды находились в клетке в связанной форме и даже при очень мягкой обработке расщеплялись до нуклеозидов. [c.369]

Первоначально использовали /г-толуолсульфохлорид. Однако первичный гидроксил нуклеозида может атаковать либо атом фосфора, либо атом серы промежуточного ангидрида, так что в большой степени проходит сульфирование. Эта проблема была частично преодолена путем введения в орго-положение бензольного кольца объемистых заместителей, так что атака по атому фосфора становится предпочтительней. Обычно используют мезитиленсульфохлорид (MS) и 2,4,6-триизопропилбензолсульфохлорид (TPS). [c.176]

В литературе [89] описаны два надежных метода получения цитозиновых нуклеозидов, исходя из соответствующих урацильных производных. Фокс использовал реакцию пентасульфида фосфора для превращения 4-оксогруппы в тиольную группу, которая далее может быть замещена обработкой аммиаком. Альтернативно, при использовании реагента Вильсмеера-Хаака [47] (хлорметиленди-метиламмонийхлорида) или хлороксида фосфора получают 4-хлор-производное, в котором хлор замещают при обработке аммиаком. [c.96]

Поскольку реакции углеводных и гетероциклических остатков в нуклеозидах обстоятельно обсуждались выше (см. гл. 22.2), в этом разделе будут описаны только реакции, затрагивающие атом фосфора в нуклеотидах. Так, будут рассмотрены некоторые детали химического и ферментативного гидролиза моно- и полинуклеотидов, в то время как другие гидролитические реакции нуклеиновых кислот, например кислотная апуринизация, будут лишь упомянуты в связи с тем, что в результате этой реакции происходит увеличение лабильности фосфодиэфирной связи. [c.140]

Фосфорилхлорид в растворе триалкилфосфата интенсивно используется для фосфорилирования незащищенных нуклеозидов основным продуктом после гидролиза является 5 -фосфат [53] схема (25) . Точный механизм этой реакции не установлен причиной стереоселективности может являться образование объемистого комплекса между фосфорилхлоридом и растворителем. Нежелательное образование ди- и триэфиров при синтезе нуклеотидов можно предотвратить применением в качестве фосфорилирую-щего агента монохлорфосфорной кислоты (Н0)2Р0С1. Хотя эта кислота очень нестабильна, диэфиры монохлорофосфорной кислоты стабильны и интенсивно использовались в качестве фосфори- пирующих агентов. Предложен ряд диэфиров, позволяющих при- [c.155]

Фосфорилирование нуклеозидов. Прямое фосфорилирование незащищенных нуклеозидов, как правило, приводит к образованию трех возможных фосфатов. Однако при обработке 2, 3 -0-изопропи-лидеинуклеозидов хлорокисью фосфора с хорошим выходом получаются 5 -дихлорфосфаты, Реакция происходит более гладко в присутствии триметилфосфата (СН.-,0),чР0 или триэтилфосфата, в которых субстраты достаточно растворимы После гидролиза 5 -нуклео-тиды-получают с почти количественным выходом (1 ]. По этой методике адениннуклеозиды типа (1) легко иревращаются в 3, 5 -цикличе-ские монофосфаты типа (2) [2], [c.316]

Ферменты, расщепляющие РНК. Большинство известных рибо-нуклевз (РНаз) относится к классу фосфотрансфераз — ферментов, катализирующих нуклеофильную атаку 2 -ОН-группы рибозы на атом фосфора фосфодиэфирной связи. В результате на первом этапе реакции образуются олигонуклеотиды, содержащие 2, 3 -циклофосфат на 3 -к нце и нуклеозид-2, 3 -циклофосфаты [c.312]

Фосфорилирование нуклеозидов. В синтезе олигонуклеотидов разработаны два пути фосфорилнрования нуклеозидов. В одном из них используются стабильные производные фосфорной кислоты, содержащие высокореакционноспособную группировку. В другом такая группировка создается прямо в процессе реакции за счет взаимодействия производного фосфорной кислоты с активирующим реагентом. В обоих случаях фосфорилирование гидроксильных групп сахара проходит в результате нуклеофильного замещения у атома фосфора фосфорилирующего компонента. [c.355]

Первый путь реализуется, например, при взвимодействии оксн-хлорида фосфора с нуклеозидами, при этом с максимальной скоростью фосфорилируется 5 -0Н-группа. Первичный продукт реакции, содержащий связанные с фосфором атомы хлора, гидролизуется водой [c.355]

Дорман и Робертс [56] описали спектры 9 нуклеотидов в водных растворах, в том числе п спектр АТФ. В целом положение сигналов от фуранозного кольца и от основания близко к наблюдаемому для нуклеозидов. Атом С-5, который всегда наиболее экранирован, в спектре АТФ дает сигнал, несколько смещенный в сильное поле по сравнению с сигналом в спектре АМФ, Наблюдается небольшое расщепление этого сигнала (около 4 Гц) на ядре фосфора. Для сигнала С-4 спин-спиновое взаимодействие с фосфором через три связи несколько больше (около 8 Гц). Этот факт несколько неожиданный, но не беспрецедентный. Он позволяет однозначно проводить отнесение сигнала С-4. Необходимо изучить зависимость этого спин-спинового взаимодействия от геометрии молекулы, поскольку оно может служить источником информации [c.422]

Рассматриваемое превращение обычно проводят без растворителя или в инертном растворителе, таком как толуол, действием галогенида фосфора, например оксихлорида фосфора или его смеси с пентахлоридом фосфора. Последняя смесь может вызывать побочное хлорирование в ядро (см. разд. 17.5.10). Часто в качестве катализаторов и/или веществ, связывающих кислоту, используют третичные алифатические или ароматические амины (например, диметиланилин), хотя в этом случае отмечены некоторые побочные реакции, в частности замена атомов галогена на аминные фрагменты, что наблюдается, например, при превращении (120) в (121) схема (29) , или перегруппировки алкилзамещенных с дезаминированием [108]. Последний реагент может использоваться даже для получения хлорпроизводных из нуклеозидов, если гидроксильные группы сахара защищены ацетилированием или бепзоилированием. Из других реагентов следует упомянуть тионилхлорид в диметилформамиде и хлорметилендиме-тиламмонийхлорид в хлороформе. [c.616]

Если таким способом синтезированные нуклеозиды могли бы с помощью соответствующей фосфокиназы и АТФ стать фосфори-лированными, то был бы открыт путь для биосинтеза рибонуклеотидов из предварительно синтезированных пуринов. [c.177]

С помощью химического и ферментативного гидролиза было показано, что синтетические полинуклеотиды, как и РНК, состоят из нуклеозид-5 -монофосфатных единиц, связанных между собой 3, 5 -фосфодиэфирными связями (стр. 46). Анализ концевых групп показал, что на конце полипептидной цепи находится фосфатная группа, этерифицированная по С-5 концевого нуклеозида. При гидролизе щелочью, фосфодиэстеразой змеиного яда, фосфодиэстеразой из селезенки или панкреатической рибонуклеазой эти полимеры дают точно такие же продукты, как и РНК. Очоа и его сотрудники воспользовались перечисленными свойствами, чтобы выяснить природу межнуклеотидных связей, образуемых с помощью фермента. Они синтезировали (А, Г, У, Ц)-полимер из смеси нуклеотидов, содержавшей АДФ, меченный по фосфору, и затем гидролизовали его фосфодиэстеразой змеиного яда (фиг. 87). Из полученных после гидролиза четырех нуклеозид-5 -фосфатов меченым оказался только АМФ, и его удельная радиоактивность соответствовала удельной радиоактивности первоначально включенного АМФ. Следовательно, во время синтеза фосфоэфирпая связь АМФ не затрагивалась. Если же синтезированный полимер гидролизовали щелочью или фосфодиэстеразой селезенки, то метку включал каждый из четырех пуклеозид-З -монофосфатов. Значит, в ходе синтеза полинуклеотидфосфорилаза формирует связи А—ф—А, Ц—ф—А, У—ф—А и Г—ф—А. Аналогичные результаты были получены с Р -УДФ. [c.253]

В ферментативную полимеризацию вводят смесь нуклеозид-5 -трцфосфатов (см. стр. 98), один из компонентов которой содержит радиоактивный фосфор. Образующийся полимер расщепляют далее до мононуклеотидов таким образом, что разрывается связь Р—О (О при С-5 ) для этой цели в случае ДНК используется гидролиз смесью ДНК-азы микрококков и фосфодиэстеразы змеиного яда, в случае РНК — гидролиз щелочью. После такого расщепления радиоактивный фосфат оказывается в составе нуклеозид-З -фосфата, остаток которого в полимерной цепи был соседним с остатком введенного меченого предшественника. Так, например, относительное содержание динуклеотидных последовательностей АрА, GpA, UpA и СрА можно определить, вводя в полимеризацию а- Ф-аденозин-5 -трифосфат и измеряя радиоактивность соответствующих нуклеозид-З -фосфатов после расщепления [c.63]

Как уже указывалось выше (см. стр. 489), введение электроноакцепторных заместителей в углеводный остаток понижает, а удаление гидроксильных групп значительно повышает скорость кислотного гидролиза гликозидных связей в пиримидиновых производных. N-Гликозидные связи в фосфорилированных 2 -дезоксири-бозилпиримидипах в условиях кислотного гидролиза значительно более устойчивы, чем в соответствующих нуклеозидах (см. стр. 492) эта устойчивость возрастает при переходе от моно- к дифосфатам. Такая закономерность связана, по-видимому, с тем, что недиссоциированные (в условиях кислотного гидролиза) фосфатные группы являются довольно сильными электроноакцепторными заместителями, поскольку атом фосфора в них несет частичный положительный заряд. [c.495]

Смотреть страницы где упоминается термин Нуклеозиды фосфору: [c.447] [c.360] [c.14] [c.136] [c.208] [c.299] [c.425] [c.92] [c.121] [c.131] [c.142] [c.153] [c.360] [c.644] [c.359] [c.136] [c.646] [c.69] [c.323] [c.614] [c.614] [c.614] [c.614] [c.477] [c.616]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология