Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Фаг цикл размножения

    Первым важным вкладом Дельбрюка в исследования фага была разработка опыта по изучению одиночного цикла размножения, сделанная им и Эллисом. С помощью этого опыта они убедительно показали, что потомство инфицирующего фага появляется только после определенного периода, на протяжении которого титр фага остается постоянным. Именно этот опыт с одиночным циклом размножения положил начало современным исследованиям в области бактериофагии. Более того, и в настоящее время он по-прежнему служит основным методом при изучении размножения бактериальных вирусов. [c.259]


    Рассмотрим теперь, какова же природа пятнообразующих единиц в опыте с одиночным циклом размножения, представленном на фиг. 130. Совершенно очевидно, что стерильные пятна, которые образуются, когда зараженную культуру высевают на чашки во время латентного периода, происходят не от отдельных свободных фаговых частиц эти пятна развиваются из заряженных фагом бактерий, внутри которых уже может находиться довольно многочисленное потомство фага. Тем не менее если поместить на чашку с агаром любую такую зараженную фагом бактерию до окончания латентного периода, то из нее разовьется только одно пятно. Дело в том, что в плотной агаризованной среде около сотни частиц [c.260]

    ОДИНОЧНЫЙ цикл РАЗМНОЖЕНИЯ [c.259]

    В технологии топливного цикла большое значение имеет то обстоятельство, работает ли реактор как конвертер (преобразователь). В реакторе используются вос-производ.я щие материалы и- или торий. Они превращаются в горючее под действием нейтронов, избыточных по сравнению с количеством, необходимым для поддержания процесса деления. Любой реактор, в кото-ро.м в качестве горючего используется слабообогащен-ный уран, является реактором-конвертером, причем при поглощении нейтронов образуется плутоний. Важным примером реактора-конвертера является реактор для производства плутония, в котором в одних и тех же тепловыделяющих элементах (твэлах) из естественного урана расходуется и образуется плутоний. Конверсия имеет огромное значение для экономии горючего в энергетических реакторах. Наиболее совершенным реактором-конвертером является реактор-размножитель (бридер) он производит по меньшей мере столько же горючего, сколько потребляет. Принципиально возможны два цикла размножения в одном из них используется в качестве горючего а в качестве воспроизводящего материала — торий, а в другом в качестве горючего применяется Ри- , а в качестве вос- [c.16]

    Понимание цикла размножения у человека продвинулось далеко вперед после того, как была установлена роль в этом цикле расположенного у основания мозга гипоталамуса и гипофиза (мозгового придатка). Они выделяют гормоны и медиаторы, управляющие циклом размножения. В ответ на химические сообщения гипоталамуса и гипофиза в других местах организма выделяются другие гормоны. Таким образом контролируется широкий набор реакций — от выхода яйцеклетки из яичника до включения механизма выработки грудного молока. После того как химики определили молекулярную структуру участвующих в цикле гормонов, стало возможным влиять на способность организма человека к размножению. [c.107]


    Ф и г. 130. Опыт с одиночным циклом размножения фага Т4. [c.260]

    Значительные изменения в ход биологических процессов у животных можно внести, применяя так называемые синхронизаторы спаривания. С помощью этих веществ можно управлять циклами размножения. Метод основан на том, что введение в кровь повышенных концентраций женских половых гормонов вызывает возникновение гонадотропина, действующего на половые железы, и тем самым оказывает влияние на весь цикл функционирования яичников, который в случае необходимости можно затормозить. [c.303]

    Для генетического метода самоуничтожения, или авто-цида, характерно использование вредителей одного и того же вида. При всех прежних методах борьбы с вредителями с помощью агрохимикатов или паразитов возможно приобретение вредителями резистентности. Это исключено при генетических системах, которые встроены в организм и действуют абсолютно целенаправленно. Так, используют стерилизованных или измененных в своей генетической конституции мужских особей, что частично или полностью нарушает индивидуальный цикл размножения. [c.260]

    Структурные вирусные белки, регистрируемые иммунологическими или электрофоретическими методами, начинают появляться спустя 2 ч, а к концу медленно протекающего цикла размножения (длится более 20 ч) можно наблюдать до 20 различных компонентов. Интенсивность синтеза ДНК, однако, достигает максимума уже через 2,5 ч, а через 5 ч становится незначительной. Первые зрелые вирусные частицы появляются через 6 ч, причем в течение предшествующего двухчасового периода осуществляются две промежуточные стадии, в процессе которых вирусная ДНК одевается различными компонентами капсида [16, 216). [c.235]

    Вирусы, которые большинство исследователей обоснованно рассматривает как внутриклеточных паразитов, приспособились к сложным условиям существования. Для многих из них внешней средой оказалась вода. Вирусы приспособились к существованию вне клетки и часто выживают до тех пор, пока не проникнут в новую восприимчивую клетку. Затем начинается следующий цикл размножения и выделения их во внешнюю среду. [c.76]

    РЕТРОВИРУС. РНК-содержащий вирус, цикл размножения которого проходит через стадию двухцепочечной ДНК. [c.525]

    Повреждения в некритических участках приводят к ненаследуемым эффектам (удлинение латентного периода одноступенчатого цикла размножения, периода лизиса) у бактериофагов, имеюш,их двухтяжевую ДНК или РНК. Эффект удлинения латентного периода носит кумулятивный характер, и для него, как и для обычного летального эффекта, характерно явление фотореактивации. Это означает, что ненаследственные повреждения в некритических участках ДНК, по-видимому, имеют димер- [c.281]

    Кривая нарастания титра в одиночном цикле размножения [c.113]

    Методика та же, что и приведенная в подписи к фиг. 130, за исключением того, что здесь через разные промежутки времени после заражения из ППРФ отбирали пробы, разводили их в 20 раз лизи-рующей средой, содержащей 4-1 0 частиц фага Т6 на 1 мл и О, 01 М раствор K N, и оставляли в этой реде не меньше чем на 30 мин после этого брали пробы и наносили их на агар, засеянный штаммом Е. соИ, устойчивым к фагу Тб (Т =х ), на котором может образовывать стерильные пятна только фаг Т4 (но не Тб). / — кривая внутриклеточного размножения // — опыт с одиночным циклом размножении. [c.261]

    Для определения продолжительности цикла размножения рабдовируса в культуре клеток вирус вносят в концентрации, достаточной для заражения всех клеток. После адсорбции вируса на монослое клетки отмывают от несвязавшегося вируса, добавляют предварительно нагретую культуральную среду и продолжают инкубацию при 37 °С. Через определенные промежутки времени в образцах зараженной культуры определяют содержание вируса. Для этого либо снимают клетки со стекла палочкой и разрушают их с помощью 3 циклов замораживания—-оттаивания (можно также один раз заморозить клетки при —60°С в бане из метанола и сухого льда и дать им быстро оттаять при 37°С), либо обрабатывают клетки I—2 мин ультразвуком, чтобы освободить вирус, ассоциированный с клетка- [c.113]

    Примерно через 24 ч после заражения клетки отделяются от стекла, что облегчает их извлечение из флаконов по окончании размножения вируса. В наших опытах включение трипсина в культуральную среду не оказывало какого-либо существенно положительного или отрицательного влияния на выход вируса, однако трипсин вызывает отделение клеток от поверхности стекла, что значительно упрощает их сбор. Это важно, поскольку большая часть вируса в конце цикла размножения остается ассоциированной с клетками. [c.211]

    По окончании цикла размножения вируса суспензию зараженных клеток переливают из культуральных бутылок в центрифужные стаканы объемом 250 мл и концентрируют вирус и клеточный дебрис центрифугированием 90 мин при 50 ООО g и 4 °С. [c.211]

    Продукционно-биологические методы изучения водных животных только начинают разрабатываться и охватывают пока в основном нормальные продукционные процессы. Данная методика является первой попыткой приложить к изучению влияния токсических факторов на водные организмы продукционно-биологический метод, а именно садковую методику, предложенную для изучения планктонных животных с партеногенетическим циклом размножения (Пидгайко, 1968а, б). [c.169]


Фиг. 51. Цикл размножения фага в зараженных клетках Е. oli. Фиг. 51. <a href="/info/1304843">Цикл размножения</a> фага в зараженных клетках Е. oli.
    Нужный штамм дрожжей обычно выращивают в лаборатории на скошенных питательных средах, из лиофилизованных культур или специальных активных сухих дрожжей. Через несколько последовательных циклов размножения через 3-4 дня полз ают конечную закваску, готовую к внесению в ферментер. Разведение дрожжей начинается в лаборатории с сухих дрожжей штамма Sa h. erevisiae. Сухие дрожжи определенной массы разводят в колбе со смесью теплой воды и тростникового сахара, оставляют на 15 мин, а затем вносят в дрожжанки. [c.341]

    Общеизвестны и трудности, встречаемые при отдаленной гибридизации низкая завязываемость зерен при скрещивании, пониженная жизнеспособность гибридных семян, стерильность гибридов первого поколения. Эти трудности встречаются, как правило, при инконгруентных скрещиваниях. Инконгруентность (генетическая несовместимость) участвующих в скрещивании организмов может проявляться на разных этапах формирования гибридного организма. Соответственно этому можно выделить следующие причины трудной скрещиваемости при отдаленной гибридизации препятствия к опылению и оплодотворению (несовпадение циклов размножения, несовместимость пыльцевых трубок с тканью пестика, генетическая несовместимость ядер, несущих разные геномы, физиологическая несовместимость ядра и цитоплазмы) нежизнеспособность или малая жизнеспособность гибридной зиготы (зародыша). [c.138]

    Таким образом, цикл размножения двух популяций серой зерновой совки продолжался 3 года. Такая цикличность размножения характерна для данного вредителя (Кузин, 1940 Шек, 1962 Григорьева, 1965 Шек, Сливкина, 1969). Массовым размножениям совки, как показали наши исследования, сопутствуют болезни (главным образом гранулёз), которые подавляют размножение вредителя. При этом гранулёз проявляется уже в период нарастания его численности и достигает наибольшего развития к концу лета в год максимальной численности гусениц. [c.330]

    Обычно лабораторные культуры заражают либо адаптированным к размножению in vitro вирусом, либо неадаптированным, содержащимся в зараженных тканях или выделениях. Многие первичные клеточные культуры и перевиваемые линии, используемые для выделения рабдовирусов, детально рассмотрены в недавно опубликованном обзоре [8]. ВВС эффективно размножается почти во всех известных в настоящее время линиях клеток млекопитающих и птиц. Особенно высокий выход ВВС дает на первичной культуре фибробластов куриного эмбриона [9] или перевиваемой линии клеток ВНК-21 [Ю], причем одинаково высокие титры получают как при размножении вируса в монослойной, так и в суспензионной культурах [И]. Кривые нарастания титра ВВС в одиночном цикле размножения практически совпадают для двух типов культур. Выход дочерних частиц ВВС из клеток начинается через 2 ч после заражения после этого в течение 6—8 ч выход вируса нарастает по логарифмическому закону. Максимальный выход, достигающий 1000 БОЕ/кл, наблюдается через 10—12 ч после заражения. [c.113]

    Опыт с одиночным циклом размножения четко продемонстрировал общую природу и общую кинетику размножения вирусов бактерий в клет-ках-хозяевах. В результате этого на первый план был выдвинут вопрос фундаментальной общебиологической важности что же происходит внутри зараженной клетки на протяжении латентного периода, во время которого родительская фаговая частица стократно воспроизводит саму себя При рассмотрении этого вопроса прежде всего следует остановиться на том, как именно происходит увеличение числа фаговых частиц внутри зараженной клетки с момента заражения и до момента лизиса. Это можно выяснить с помощью искусственного лизиса, т. е. разрушая зараженные клетки во время латентного периода и определяя инфекционность материала, освобождающегося в результате такого искусственного лизиса. Впервые подобный эксперимент был поставлен в 1948 г. Дёрманом. Результаты этого эксперимента представлены на фиг. 131. [c.261]

    Эта гипотеза не только объясняет образование лишь одного из двух комплементарных рекомбинантов при единичном акте генетического обмена. Она обладает еще одним, даже более существенным свойством, отличающим ее от рекомбинации за счет разрывов и воссоединений. В случае перемены матриц рекомбинанты обязательно должны состоять из вновь синтезированной ДНК и не должны содержать ни одного атома ДНК родительских фагов, участвовавших в скрещивании. В случае же генетической рекомбинации за счет разрывов и воссоединений следует ожидать возникновения рекомбинантов, содержащих родительский материал. Меселсон и Уэйгл дали первое убедительное доказательство того, что рекомбинанты фагов действительно содержат часть ДНК родительских геномов, участвовавших в скрещивании, и, следовательно, генетический обмен происходит за счет разрывов и воссоединений, а не за счет перемены матриц приУкопировании. В своих опытах они использовали фаг Я, паразитирующий на Е. соН. Этот фаг, частица которого имеет массу приблизительно в 4 раза меньшую массы частицы Т-четных фагов, и содержит в 4 раза меньше ДНК, сыграл важную роль в исследованиях, которые мы рассмотрим в последующих главах. Цикл размножения и генетика фага Я и Т-четных фагов в общем очень сходны, в частности тем, что примерно половина атомов родительской ДНК фага К передается потомству. Однако между ними имеется и одно существенное различие. Оказывается, что частота генетических обменов у фага X значительно ниже, чем у Т-четных фагов. Анализируя результаты скрещивания гене- [c.299]

    Теперь мы уже вполне подготовлены к тому, чтобы приступить к вопросу, поставленному в гл. VU, а именно к вопросу о молекулярном механизме возникновения тех изменений в последовательности нуклеотидов ДНК, которые приводят к мутациям. Действительно, исследование характера возникновения мутаций Т-четных фагов с использованием методов генетического анализа с высоким разрешением дает большие возможности для проникновения в природу мутационного процесса. Использование фагов имеет еще одно важное преимущество по сравнению с ис-лользованием бактерий. Мутации фаговой ДНК можно изучать как в том случае, когда она находится в состоянии покоя вне клетки в составе инфекционной фаговой частицы, так и когда она находится в реплицирующемся, внутриклеточном, вегетативном состоянии. Уже самые первые исследования Херши и Лурия показали, что частота спонтанных мутаций в покоящейся ДНК очень мала — столь мала, что в течение многих лет считалось (как потом оказалось, ошибочно), что внеклеточные фаговые частицы вообще не мутируют месяцами и даже годами. Таким образом, новые мутации появляются в основном во время вегетативного размножения фага в клетке-хозяине. Рассмотрим следующий пример. Культуру Е. oli заражают препаратом фага Т2/- с титром 10 частица/мл. Фагу дают размножиться в течение нескольких циклов, пока все бактерии в культуре не подвергнутся лизису, а титр фага не достигнет величины 10 частица/мл. Оказывается при этом, что с каждым циклом размножения доля г-мутантов во всей популяции фагов увеличивается (примерно с 10" в начале до 10 в конце). Следовательно, мутанты фага возникают в результате ошибок копирования при внутриклеточной репликации его генетического материала. Репликация ДНК родительского фага является очень точным процессом. И все же при репликации иногда происходит ошибка, порождающая в одной из вегетативных реплик изменение последовательности нуклеотидов, или мутацию. Мутантная реплика генетического материала включается затем при созревании в инфекционную фаговую частицу, которая в свою очередь заражает новую бактериальную клетку. В этой клетке очень точно копируется уже измененная информация, содержащаяся в мутантной частице поэтому все потомство такой частицы оказывается тоже мутантным. Поскольку репликация ДНК вегетативного фага происходит в соответствии с постулированным Уотсоном и Криком полуконсервативным механизмом, размножение фагового генома можно рассматривать как процесс бинарного деления и с точки зрения статистического анализа совершенно аналогичным процессу размножения генома бактерий. Следовательно, уравнение, связывающее долю мутантных особей п среди общего числа N потомков одного исходного родителя, возникших после g генераций, с частотой мутаций а [c.315]

    Типичный случай такого ограничения и модификации, контролируемых хозяином, можно описать следующим образом. Фаг Р, выращенный на бактериальном штамме А, неспособен размножаться на бактериальном штамме В. Следовательно, фаг Р, выращенный на штамме А (обозначим его Р-А), обладает ограниченным спектром действия. Редкие частицы Р-А, способные размножаться на штамме В, дают при первом цикле размножения на этом штамме популяцию потомков с неограниченным спектром действия типа Р-В, способную размножаться эффективно на обоих штаммах, как А, так и В. Эти редкие частицы Р-А, способные размножаться на невосприимчивом хозяине В, не являются каким-то исключением, например мутантными формами. Исключение, напротив, составляют немногие восприимчивые бактерии В, так как частота их появления меняется с изменением физиологических условий роста. Однако после одного цикла размножения неограниченного фага Р-В на клетках штамма А все потомство фага, за небольшим исключением, вновь относится к ограниченному типу Р-А, способному размножаться только на штамме А, но не на штамме В. Изменение спектра действия под влиянием бактериального штамма, на котором осуществился последний репродуктивный цикл, представляет собой, следовательно, адаптивное изменение, фенотипическое, а не генотическое и совершенно отличное от мутаций, обусловливающих расширение спектра действия фага (см. гл. XII), [c.368]

Рис. 10.8. Сравнение кривых одиночного цикла размножения ВПГ и MV н фибробластах человека, а — титр инфекционного штамма ВПГ в культурал) ной среде б — титр в культуральной среде (1) и ассоциированного с клетке (2) инфекционного штамма MV. В обоих случаях множественность инфекци составляет 10 БОЕ/кл. По данным Смита и Де Харвена [27] Рис. 10.8. <a href="/info/391514">Сравнение кривых</a> <a href="/info/1304843">одиночного цикла размножения</a> ВПГ и MV н <a href="/info/91011">фибробластах человека</a>, а — <a href="/info/1896088">титр инфекционного</a> штамма ВПГ в культурал) ной среде б — титр в <a href="/info/195972">культуральной среде</a> (1) и ассоциированного с клетке (2) инфекционного штамма MV. В обоих случаях <a href="/info/1019855">множественность инфекци</a> составляет 10 БОЕ/кл. По данным Смита и Де Харвена [27]
    Образование замкнутых структур - колец, трубок или сферических частиц - дополнительно стабилизирует весь арегат общее число связей между белковыми субъединицами в этом случае увеличивается. Более того, поскольку такая структура формируется благодаря взаимозависимым кооперативным взаимодействиям, то сборка и разборка могут производиться относительно малыми изменениями, затрагивающими сами субъединицы. Особенно ярко это можно проиллюстрировать на примере белковых оболочек многих простых вирусов, имеющих форму полого шара Такие оболочки часто собраны из сотен идентичных белковых субъединиц, окружающих и защищающих вирусную нуклеиновую кислоту (рис. 3-43). Структура белков оболочки должна быть особенно гибкой, так как она должна допускать различные типы межсубъединичных контактов, а также обеспечивать изменение упаковки субъединиц при выходе нуклеиновой кислоты в начале цикла размножения вируса. [c.151]

    Только малая часть культивируемых клеток млекопитающих способна в любой момент времени так поглощать ДНК, что очень немного клеток из популяции оказываются первоначально инфицированными. Однако в течение нескольких следующих дней каждая из этих клеток поддерживает литическую инфекцию и продуцирует более 1 млн. вирусных частиц, которые способны внедряться в соседние клетки и инфицировать их с высокой эффективностью. Обычно лизат, полученный из одного набора инфицированных клеток, должен быть пассирован 1 или 2 раза для получения вирусного материала в высоком титре. В случае рекомбинантов ранней замены этот вирусный материал состоял исключительно из рекомбинантных геномов, инкапсидированных в белки оболочки SV40 в случае рекомбинантов поздней замены он включает приблизительно равные количества частиц вируса-помощника и рекомбинантов. Оба типа вирусного материала могут быть использованы для инфицирования пермиссивных клеток с высокой эффективностью и для индуцирования литических циклов размножения вируса. Во время таких инфекций вирусные геномы транспортируются к ядру, где они высвобождаются из капсидов. Ранний промотор вскоре становится активным и под его контролем экспрессируются гены. К 12 ч после инфекции происходит репликация вирусной ДНК и начинают экспрессироваться с высокой эффективностью гены позднего промотора. К 36—48 ч инфекции вновь синтезированные вирусные геномы начинают собираться в потомство вирусных частиц — процесс, который продолжается в течение следующих 24 ч, когда клетки отделяются от своего субстрата и погибают. [c.171]

    Как уже говорилось в начале предыдущей главы, половое поведение необходимо для сохранения вида. Цель полового поведения — спаривание, т. е. тесное сближение половых органов самца и самки, при котором становится возможным оплодотворение яйцеклетки (или яйцеклеток) самки сперматозоидами самца. Для спаривания необходим ряд условий, к которым относятся достаточная зрелость гонад и копулятивных органов, а также одновременная готовность самца и рецептивность самки. У тех животных, у которых оплодотворение происходит в организме самки, после зачатия наступает беременность, в течение которой организм претерпевает ряд внутренних изменений беременность заканчивается родами. На схеме, приведенной на рис. 28.1, показано место спаривания среди других фаз цикла размножения у общественного насекомого и у млекопитающего. [c.245]

    Нам удалось получить линии предшественников В-клеток из различных линий мышей, включая животных с генотипом nujnu и мутацией xid (у которых, как предполагают, нарушено созревание популяции В-клеток). Мы до сих пор не знаем, способствует ли ИЛ-3 размножению всех предшественников В-клеток мыши, или только некой их субпопуляции. Более того, остается неясным, все ли предшественники В-клеток, начинающие пролиферировать в ответ на ИЛ-3, дают начало постоянным линиям, или же некоторые из них под действием ИЛ-3 проходят кратковременный цикл размножения, а затем погибают вследствие генетически ограниченной продолжительности жизни. В настоящее время мы можем лишь утверждать, что при использованин тех препаратов клеток, которые были описаны выше, по крайней мере 1 из 250—500 клеток костного мозга и 1 из 1000—1500 клеток селезенки дают начало постоянным линиям, имеющим свойства В-клеточных предшественников. [c.313]

    Цикл размножения некоторых рабдовирусов, например ВВС, короткий и составляет несколько часов, других же, например вируса бешенства, — более длинный и составляет несколько суток. Точно неизвестно, почему одни вирусы размножаются более эффективно, чем другие, хотя предполагают, что эффективность размножения определяется уровнем активности вири-онной транскриптазы. [c.114]

    В момент заражения монослой должен быть еще не плотным. Для некоторых рабдовирусов иногда трудно обеспечить строгую синхронизацию, необходимую для прохождения одного цикла размножения, даже при очень высокой множественности инфекции. Тем не менее инфицирование клеток большим количеством вируса для того, чтобы заразить каждую клетку, позволяет приблизиться к таким условиям. Действительно, если все клетки заражены, то, естественно, может пройти только один цикл репродукции вируса. Однако существует и верхний предел множественности инфекции. При очень высокой множественности может наблюдаться аномальная картина размножения вируса, обусловленная накоплением дефектных интерферирующих частиц (см. разд. 3.1.1) и реадсорбцией вирионов потомства на клеточном дебрисе. По-видимому, лучше всего в первом опыте использовать множественность инфекции 10 БОЕ/кл, а затем в случае необходимости увеличивать или уменьшать ее в 10 раз. Можно добавить к вирусу или культуральной среде некоторые полиионы для стимуляции связывания вируса с клетками и повышения инфекционности [13]. Такое стимулирующее воздействие оказывают диэтиламиноэтил (ДЭАЭ)-декстран и протаминсульфат в концентрациях 50 и 100 мкг/мл соответственно, если их добавляют к клеткам до внесения вируса (за 4 ч или менее). После внесения вируса полиионы не оказывают стимулирующего действия. Важно отметить, что некоторые полиионы хотя и способствуют адсорб- [c.114]

    Осадок вируса ресуспендируют и наслаивают суспензию на преформированный градиент s l (1,2—1,4 г/мл градиент готовят на буфере с 50 мМ трис-НС1, pH 8,0, и создают 5— 10%-ный градиент глицерина, чтобы уменьшить вероятность перемешивания при формировании градиента). Центрифугирование ведут 2 ч при 24 000 об/мин и 4°С в роторе SW28, Be kman. Голубоватая опалесцирующая зона вируса должна сформироваться в середине пробирки, ее отбирают, как описано выше. В верхней трети пробирки должна быть видна зона, образованная пустыми (не содержащими РНК) капсидами, количество которых варьирует от одного цикла размножения к другому при необходимости эту зону можно отобрать отдельно. [c.206]

    Чтобы избежать размножения смесей вирусов, коадапти-рующихся к росту в культуре, при первой возможности следует провести три цикла размножения вируса из одного инфекционного вириона. Оптимальный способ проведения таких циклов состоит в очистке вируса из индивидуальных бляшек однако некоторые изоляты, хотя и размножаются в клетках МА 104, но не образуют бляшек. В этих случаях очистку вируса проводят методом предельного разведения. Для этого готовят последовательные разведения первого пассажа вируса, дающего выраженное ЦПД, и заражают монослойные культуры клеток МА 104, выращенные в планшетах с 24 или 48 лунками. После 1 ч адсорбции при 37 °С инокулят удаляют, в лунки вносят среду МЕМ с 0,5 мкг/мл трипсина и инкубируют культуру 48—72 ч при 37°С. Собирают урожай из нескольких индивидуальных лунок, зараженных вирусом в том разведении, которое дает ЦПД лишь в небольшой части лунок (5—10%). Вирус из этих лунок разводят и опять высевают на культуру клеток, как описано выше. Данную процедуру следует повторить по крайней мере три раза, прежде чем наращивать вирус для биохимических исследований. Если изолят ротавируса дает бляшки на клетках МА 104, следует провести три цикла размножения из индивидуальных бляшек, что является лучшим методом очистки вируса перед наращиванием для дальнейшей работы. [c.210]


Смотреть страницы где упоминается термин Фаг цикл размножения: [c.337]    [c.369]    [c.320]    [c.189]    [c.206]    [c.207]    [c.260]    [c.222]    [c.285]    [c.285]    [c.288]    [c.288]   
Молекулярная генетика (1974) -- [ c.252 , c.260 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Кривая нарастания титра в одиночном цикле размножения

СОДЕРЖАНИИ Сокурова Митоз у дрожжей (Клеточные циклы при вегетативном размножении)

Фаг одиночный цикл размножения



© 2025 chem21.info Реклама на сайте