Аденовирусы белки

Аденоассоциированные вирусы (ЛАВ) - это небольшие непатогенные вирусы человека с одноцепочечным ДНК-геномом (4,7 т. п. п.), который может интегрировать в специфический сайт 19-й хромосомы. Такое название они получили потому, что для продуктивной инфекции им необходимы белки другого вируса (вируса-помощника), например аденовируса. После того как ААВ попадает в ядро, его геном с помощью полимераз клетки-хозяина преобразуется в двухцепочечную ДНК и транскрибируется. [c.496]

При экспрессии поздних генов аденовируса одна и та же лидерная последовательность в результате сплайсинга может быть соединена с одной из нескольких различных кодирующих последовательностей. Происходящие при этом события схематично представлены на рис. 20.20. Здесь имеется одна единица транскрипции, экспрессия которой инициируется в одной-единственной точке. В начальной части транскрипционной единицы присутствуют три последовательности, которые при сплайсинге соединяются вместе, образуя нетранслируемую лидерную последовательность. (Такая ситуация показана на рис. 20.6 и 20.7.) Компоненты лидерной последовательности имеют небольщую длину и обозначены как лидерные экзоны 1, 2 и 3. Правее этих последовательностей находится несколько кодирующих участков, каждый из которых соответствует позднему белку вируса. Эти участки обозначены как кодирующие экзоны А, В, С и т. д. Для каждого первичного продукта транскрипции лидерная последовательность, состоящая из трех частей и образовавшаяся в результате первых двух этапов сплайсинга, затем может быть присоединена к одному из трех кодирующих участков. [c.257]

Некоторые линейные нуклеиновые кислоты вирусов содержат белки, ковалентно связанные с 5 -концевым основанием. Наиболее хорошо изучены ДНК аденовирусов, фага ф29 и РНК полиовируса. ДНК аденовирусов представляет собой большую линейную двухцепочечную молекулу оба ее 5 -конца ковалентно связаны с белком, имеющим мол. массу 55000 дальтон. Соединение осуществляется с помощью фосфодиэфирной связи с серином (рис. 33.11). Тот же тип организации установлен в ДНК вируса ф29, где к каждому из 5 -концов прикреплен белок с мол. массой 27 ООО дальтон. У полиовируса, содержащего одноцепочечную РНК, белок VPg из 22 аминокислот сцеплен через гидроксильную группу тирозина с 5 -концевым основанием. В каждом случае прикрепляемый белок кодируется вирусом и участвует в репликации. [c.429]

Белок, присутствующий на реплицирующихся цепях ДНК аденовируса, имеет мол. массу 80000 дальтон, т.е. он крупнее белка, найденного на зрелой вирусной ДНК. Крупный белок является родственным более мелкому. Предполагается, что белок с мол. массой 80000 дальтон участвует в инициации репликации, но на определенной [c.429]

Геном аденовируса — это линейная ДНК размером около 36 000 п. н. (36 т. п. н.) он содержит несколько десятков разных генов, кодирующие последовательности которых расположены в обеих цепях ДНК. На поздних стадиях инфекции клеток вирусом, незадолго до лизиса клеток, в основном транскрибируется одна из двух цепей ДНК ( поздняя , или Ь-цепь ), в которой находится не менее пяти генов, кодирующих белки, входящие в состав зрелого вируса (рис. 4). Эти гены рассеяны по всей длине Ь-цепи аденовируса. [c.35]

Молекулы МНС класса 1 Вирус цитомегалии мыши Аденовирус Ранние белки Белок ЕЗ Блокада транспорта вирусных пептидов, ассоциированных с молекулами МНС Блокада транспорта молекул МНС на поверхность клетки [c.313]

Полиаденилирование и терминация транскрипции. Транскрипция многих генов белков эукариот заканчивается далеко за сайтом, в котором происходит расщепление РНК с образованием З -конца зрелой РНК. Терминация осуществляется во множественных сайтах последовательности ДНК протяженностью в сотни, а иногда и тысячи пар нуклеотидов. Например, находящаяся за сайтом полиаденилирования область, в которой заканчивается транскрипция гена -глобина позвоночных, имеет длину более чем 1 т. п. н. Аналогичным образом, транскрипция первого из двух тандемно расположенных генов а-глобина млекопитающих заканчивается в разделяющей эти два гена промежуточной области размером почти 2 т.п.н. Еще более ярким примером служит транскрипция поздней области генома аденовирусов. В этом случае непрерывная транскрипция области, содержащей пять участков полиаденилирования, заканчивается только в конце вирусной ДНК. [c.43]

Г. У аденовируса имеются белки, присоединенные ковалентно к 5 - [c.34]

Недавно был выявлен новый аспект индукции интерферона вирусами или их компонентами. Было обнаружено, что некоторые структурные вирусные белки, а именно белок фибрилл аденовируса [240] и гликопротеин HN вируса Сендай [111] обладают митогенной активностью для В-лимфоцитов и индуцируют образование интерферона в клетках селезенки. Значение этого наблюдения для феномена индукции интерферона в ходе вирусной инфекции еще предстоит выяснить. [c.51]

На поздней стадии цикла развития аденовирусы блокируют синтез белков клетки и направляют синтез огромного количества белковых продуктов своих поздних генов, большая часть которых являются структурными белками вирионов. Сборка вирионов происходит в ядре клетки. Продуктивная инфекция аденовирусами заканчивается лизисом клеток. [c.373]

При другом способе терминальной инициации роль затравкн выполняет белок, точнее — ковалентное соединение белка с нуклеотидом. Такое соединение возникает в результате образования фосфодиэфирной связи между 5 -гидроксилом дезоксирибонуклео-тида (например, ёСМР) и гидроксилом оксиамииокислоты (например, серина) специального, так называемого терминального белка. В изученных вирусных системах терминальный белок — это всегда вирус-специфический (т. е. закодированный в вирусном геноме) полипептид, и фермент, осуществляющий присоединение нуклеотида, также всегда имеет вирус-специфическую природу. Нуклео-тид-белковый комплекс взаимодействует с З -концом одноцепочечной вирусной ДНК-матрицы при этом нуклеотид, входящий в комплекс с терминальным белком, комплементарен З -концевому нуклеотиду матрицы и служит затравкой, к которой присоединяются последующие нуклеотиды (рис. 136). Ясно, что к 5 -концу синтезированной таким образом цепи ДНК будет ковалентно присоединен белок. Рассмотренный способ инициации цепи ДНК реализуется, например, у аденовирусов и у фага ф29, у которых однонитевые ДНК-матрицы образуются в процессе репликации двунитевого гено-.ма (с.м. с. 267). [c.264]

Другая важная задача — выведение трансгенных животных, устойчивых к заболеваниям. Потери в животноводстве, вызванные различными болезнями, достаточно велики, поэтому все более важное значение приобретает селекция животных по резистентности к болезням, вызываемых микроорганизмами, вирусами, паразитами и токсинами. Пока результаты селекщш на устойчивость животных к различным заболеваниям невелики, но обнаде-живающи. В частности, созданы популяции крупного рогатого скота с примесью крови зебу, устойчивые к некоторым кровепаразитарным заболеваниям. Установлено, что защитные механизмы от инфекционных заболеваний обусловлены либо препятствием вторжению возбудителя, либо изменением рецепторов. Вторжению возбудителей, равно как и их размножению, препятствуют в основном иммунная система организма и экспрессия генов главного комплекса гистосовместимости. Одним из примеров гена резистентности у мышей служит ген Мх. Этот ген, обнаруженный в модифицированной форме у всех видов млекопитающих, вырабатывает у Мх -мышей иммунитет к вирусу гриппа А. Ген Мх был вьщелен, клонирован и использован для получения трансгенных свиней, экспрессирующих ген Мх на уровне РНК. Однако данные о трансляции Мх-протеина, обусловливающего устойчивость трансгенных свиней к вирусу гриппа А, пока не получены. Ведутся исследования в целях получения трансгенных животных, резистентных к маститу за счет повышения содержания белка лакто-ферина в тканях молочной железы. На культуре клеток из почек трансгенных кроликов было показано, что клеточные линии, содержащие трансгенную антисмысловую РНК, имели резистентность против аденовируса Н5 (Ads) более высокую на 90 — 98% по сравнению с контрольными линиями клеток. Л. К. Эрнст продемонстрировал также устойчивость трансгенных животных с геном антисмысловой РНК к лейкозу крупного рогатого скота, к заражению вирусом лейкоза. [c.130]

Репликационная система вируса полио.миелита изучена менее детально тем не менее здесь имеются явные отличия от только что рассмотренной фаговой системы. Так, на 5 -концах вновь синтезируемых (+) и (—)цепей полиовирусных РНК всегда присутствует низкомолекулярный вирус-специфический белок (VPg). Тирозино-вый остаток VPg соединен фосфодиэфирной связью с 5 -концевым уридиловым остатком вирус-специфических РНК (обе комплементарные цепи начинаются с уридилового остатка Большинство исследователей приписывают этому белку (или его комплексу с уридиловой кислотой) роль затравки при синтезе обеих нитей РНК Бо этой точке зрения, VPg функционально аналогичен терминальному белку аденовирусов (см. раздел 1 этс л главы). [c.320]

Эффективность аденовирус-опосредованно-го переноса генов можно повысить, если сконструировать вирус, проникающий преимущественно в определенную клетку-мищень. Для этого в ген, ответственный за образование нитей аденовируса, следует включить последовательность, кодирующую домен белка, который связывается с клеточноспецифичным рецептором. [c.496]

Рис 21 Схематичная модель аденовируса с внутрен ним ДНК протеиновым кором и внешним капсидом — икосаэдром (II гексон — 120000 Да III пептоновое основание — 85000 Да Ша VI VIII и IX белки ассоциированные с гексоном имеющие ММ соответ ственно 66000 Да 24000 Да 13000 Да и 12000 Да IV белковая нить — 62000 Да V и VII протеины кора с ММ 48000 Да и 18000 Да) [c.81]

Большинство вирусов растений и РНК-содержащих фагов состоит, как известно, только из нуклеиновой кислоты и белка, причем и нуклеиновая кислота и белок бывают у этих вирусов представлены преимущественно каким-то одним типом. Однако наряду с этими вирусами существует и много вирусов с более сложной организацией. Как уже указывалось, для многих мелких РНК-содержащих вирусов животных, мелких ДНК-содержащих фагов типа фХ174, аденовирусов и реовирусов характерно наличие в кансиде нескольких различных белков. Структура других вирусов еще сложнее их капсид покрыт оболочкой. Оболочка эта построена главным образом из белков, связанных с липидами и углеводами с оболочкой связана и ферментативная активность вирусов. [c.132]

Представление о квазиэквивалентности, введенное в вирусологию Каспаром и Клугом [67], допускает образование оболочек из 60 и более строительных блоков концепция эта наилучшим образом объясняет геометрическую укладку капсомеров у большинства изометрических вирусов. Основой этого геометрического построения является сосуществование капсомеров, состоящих из 6 субъединиц и образующих поверхности и (или) ребра треугольных граней, и капсомеров, состоящих из 5 субъединиц и образующих вершины икосаэдра. Таким образом, не все капсомеры имеют одинаковое окружение, т. е. они квязаэквивалеитны. Пептамерпые и гексамерные субъединицы либо состоят из одинаковых структурных субъединиц (что характерно для вируса желтой мозаики турнепса, РНК-содержащих фагов и некоторых других вирусов), либо их капсомеры содержат различные белки, что наблюдается у аденовирусов (см. гл. V, разд. В). Треугольные грани икосаэдра в свою очередь состоят из еще более мелких равносторонних треугольных граней, [c.151]

Другая группа вирусов, содержащих несколько белков (по крайней мере 9), представлена аденовирусами, вирионы которых имеют очень сложную структуру. Однако в ДНК этих вирусов, молекулярный вес которой составляет 23-10 , заложено достаточное количество информации, чтобы обеспечить такое сложное строение. Почти ничего не известно относительно трех белков, образующих собственно нуклеокапсид аденовирусов [408], и трех других более низкомолекулярных компонентов вириона, за исключением лишь того, что они обладают сильно основными свойствами, а также их приблизительных молекулярных весов и частичного состава. Объясняется это отчасти тем, что основное внимание исследователей привлекали эстетические и количественные аспекты изучения наружной оболочки этих вирусов, построенной из трех различных и поразительных по своей структуре белковых компонентов. Один из этих компонентов состоит из 240 гексонов, каждый из которых граничит с шестью соседними второй компонент составляют 12 пептонов, расположенных в вершинах многогранника таким образом, что каждый пентон граничит с 5 смежными гексонами, [c.159]

Изучение реконструкции вирусов растений и мелких бактериофагов in vitro указывает на то, что сборка простых вирусов — это спонтанный процесс, осуществляемый за счет общего повышения энтропии процесс этот происходит быстро — после того, как концентрация белка и нуклеиновой кислоты достигнет некоторой достаточной величины. С другой стороны, мы уже обсуждали необходимость в факторе созревания для стабилизации пикорнавирусов (гл. IX, разд. Б). Как показывают результаты полученные с аденовирусами и вирусом группы герпеса ДТП может носить более общий характер [407] Что касается созревания РНК-содержащих фагов то после того, как синтез потомства фага завершен (обычно когда накапливается около 10 ООО частиц на клетку) клетки Е. oli лизируют, а фаговые частицы высвобож даются в окружающую среду. В отличие от ДНК-содержа щих фагов в этом случае нет никаких указаний на суще ствование лизирующего фермента. Вирусы же растений остаются в клетках до тех пор, пока механические причины или же биологические переносчики не доставят их новому хозяину. [c.260]

Рис. 33.11. 5 -концевой фосфат в каждом конце аденовирусной ДНК ковалентао присоединен к серину в белке (55 ООО дальтон), связывающимся с аденовирусом. [c.430]

Каким образом прикрепление белка решает проблему затравки Способность белка ковалентно связываться с (1СТР в экстрактах клеток, инфицированных аденовирусом, объясняет роль крупного белка. На рис. 33.13 изображен предполагаемый механизм его действия. Большой белок, связанный с цитидином, имеющим свободную З -ОН-группу, взаимодействует с концом аденовирусной ДНК. Он вытесняет имеющийся 5 -конец, который узнается благодаря его связи с белком, имеющим мол. массу 55 000. Затем свободный З -ОН-конец взаимодействует с поступившим нуклеотидом, который спаривается с матричной цепью при участии ДНК-полимеразы. Белок с мол. массой 80000 дальтон может образовывать комплекс с ДНК-полимеразой. Вся серия реакции, по-види- [c.430]

Пластичность, обусловленная сплайсингом РНК, впервые была обнаружена у аденовирусов, у которых, собственно, и был открыт этот процесс. Геном аденовирусов детерминирует синтез очень длинных транскриптов РНК, кодирующих различные белки В нормальной эукариотической клетке этого не происходит. Здесь каждая отдельная молекула мРНК кодирует лишь один белок, трансляция инициируется только вблизи 5 -кэпа и останавливается на первом же терминирующем кодоне. Однако у аденовируса существует определенный механизм сплайсинга РНК, который может использовать кодирующие последовательности в качестве нитронов и удалять их, при этом один и тот же 5 -кэп способен соединяться с любой из лежащих за ним кодирующих последовательностей, образуя различные мРНК в соотношениях, необходимых для жизнедеятельности вируса. Такой альтернативный сплайсинг РНК дает возможность использовать один и гот же 5 -кэп в качестве сигнала инициации синтеза различных белков (рис. 9-85). Этот способ широко используется вирусами, что позволяет небольшому числу различных транскриптов РНК кодировать значительное количество белков. [c.158]

В связи с тем, что вирус использует для своего размножения клеточный аппарат, изучение цикла развития вируса часто помогает понять механизмы клеточных процессов. Например, геном аденовируса представляет собой двухцепочечную молекулу ДНК, которая реплицируется и транскрибируется в ядре клетки-хозяипа. На поздних стадиях инфекции транспорт хозяйской РНК из ядра останавливается, в результате большая часть РНК, попадающей в цитоплазму, оказывается принадлежащей аденовирусу. Генетический анализ показал, что для такого изменения в избирательности переноса РНК из ядра необходимы два образующихся на ранних стадиях инфекции аденовирусных белка. Таким образом, взаимодействие аденовируса с клеткой-хозяином может служить перспективной модельной системой для изучения контроля за транспортом РНК. [c.228]

Онкогенные участки генома ДНК-содержащих вирусов всегда расположены в районах, которые работают на ранних стадиях жизненного цикла вируса. Эти гены лучше всего изучены у вирусов полиомы и SV40. Анализ функций этих генов осложняется, однако, тем, что эти онкогены входят в группу перекрывающихся генов, один из которых (кодирующий большой Т-антиген, см. разд. 8.1.6) необходим для репликации вирусной ДНК. Еще не вполне ясно, сколько продуктов, кодируемых перекрывающимися генами, участвует в опухолевой трансформации. Известно лишь, что для трансформации нужен средний Т-антиген вируса полиомы в частности, молекулы этого белка обнаружены на внутренней поверхности плазматической мембраны, где они, возможно, связаны с протеинкиназами, фосфорилирующими тирозин (см. ниже). У более крупных ДНК-содержащих вирусов, например аденовирусов, геном гораздо более сложен по-видимому, он кодирует несколько различных онкогенных белков, и для полной трансформации необходимо определенное их сочетание. [c.154]

В отличие от клеточных геномов эукариот, в геноме SV40 и аденовирусов расстояние между генами очень мало (рис. IV.5.). Иногда кодирующие и регуляторные последовательности перекрываются, а у аденовирусов важная генетическая информация в некоторых областях генома может быгь закодирована даже в обеих цепях. Аденовирусная ДНК в семь раз длиннее ДНК паповавирусов. Такое увеличение кодирующей емкости связано с усложнением жизненного цикла и структуры вириона, хотя последняя все-таки остается достаточно простой это геном, заключенный в белковый капсид. В отличие от этого вирион герпесвирусов окружен липидным бислоем, который покрыт гликопротеинами, кодируемыми вирусом. Информация о сложном жизненном цикле герпесвирусов закодирована в линейной дуплексной молекуле ДНК длиной 250 т.п.н. вирион содержит примерно 30 разных вирусных белков (у SV40 их всего три, а у аденовирусов - примерно 10). Семейство герпесвирусов включает несколько вирусов, являющихся возбудителями серьезных заболеваний у человека и животных. Например, вирусы простого герпеса типов [c.346]

Главные защитные антигены икосаэдрических вирусов также расположены на поверхности. Антитела к капсидному белку пикорнавирусов VP1, а также к белкам гексона и фибрилл у аденовирусов нейтрализуют инфекционность и обеспечивают резистентность in vivo [14, 24, 95, 11, 112, 196]. Главным защитным антигеном реовирусов является гемагглютинин — поверхностный белок S1 [193]. Кроме того, что он реагирует с антителами, этот белок служит также мишенью для цитотоксических Т-клеток, лизирующих зараженные Т-клетки [46]. Аналогичным образом стимулирует образование нейтрализующих антител наружный капсидный гликопротеин ротавируса gp 35 [59, 72]. [c.147]

Ферменты. Некоторые исследователи для выделения нуклеиновых кислот предварительно обрабатывают вирусную суспензию протеолитическими ферментами, что об легчает их удаление при последующей фенольно-детер-гентной экстракции от вирусных белков. Для этого обычно используют папаин или проназу в концентрации 500 мкг/мл. Так, Пфау и Мак Кри [631] для выделения ДНК двух типов обрабатывали вирус осповакцины прона-ЗОЙ. Серов и Беккер [709] усовершенствовали этот метод, Палаин был использован, при выделении ДНК из некоторых аденовирусов [377], [c.167]

Относительно высокий уровень трансфекции полностью депротеинизированной ДНК Ad2 и Ad5 достигается в клетках линии 293, которую получили Ф. Грэхем с соавторами (1977 г.) в результате трансформации клеток почки эмбриона человека фрагментом ДНК Ad5. В клетках 293 происходит конститутивный синтез полипептидов, кодируемых генами Ela и Elb аденовируса. Наличие в клетках определенной концентрации этих вирусных белков обусловливает повышенный уровень инфекционности ДНК аденовирусов. Трансфекцию молекулами ДНК аденовирусов человека обычно проводят именно на данной линии культивируемых клеток или ее производных. [c.375]

Смотреть страницы где упоминается термин Аденовирусы белки: [c.320] [c.424] [c.494] [c.158] [c.193] [c.86] [c.153] [c.40] [c.52] [c.179] [c.183] [c.183] [c.184] [c.148] [c.311] [c.428] [c.447] [c.206] [c.71] [c.90] [c.86] [c.88]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология