Антиген поливалентный

Рис. 18. Схема процесса образования комплекса поливалентного антигена с антителами АВ — антиген, А и В — антитела со специфичностью анти-А и анти-В

Как функционируют иммуноглобулины Одна из реакций, агглютинация, происходит в результате взаимодействия поливалентного антитела с двумя клетками. Чаще, однако, взаимодействие антитела с антигеном вызьшает другие эффекты. Один из таких эффектов — связывание белка СЦ, входящего в состав комплемента (дополнение 5-Ж). Было установлено, что с белком lq связывается Сн2-домен Рс- [c.384]

При применении метода (III) надо принимать во внимание, что антитела двухвалентны (по крайней мере обычно), а белковые антигены — поливалентны [5]. Поэтому если мы определяем равновесие, в котором каждое антитело соединяется с наибольшим возможным числом молекул антигена (с двумя в случае двухвалентных антител) в присутствии свободного антигена и комплекса Ат — Аг, где Ат — антитело и Аг — антиген, то константа равновесия определяется уравнением [c.167]

На 3-й день исследования чистую культуру выделенных бактерий сеют в среды пестрого ряда и проводят ориентировочную, а потом развернутую РА. Ставят реакции с поливалентной сывороткой, с сыворотками А, В, С, О, Е, и редких групп. При положительном ответе определяют группу, а также, с помощью моно-рецепторных О- и Л-сывороток, полную антигенную формулу (серовар) сальмонеллы. [c.148]

Реакция лектина с полисахаридом аналогична реакции антиген — антитело. При этом лектин играет роль поливалентного (обычно двухвалентного антитела), а полисахарид — поливалентного антигена. [c.98]

Во-первых, гетерогенностью антител по физико-химическим свойствам, в том числе по сродству к антигену. Во-вторых, сложностью определения общего количества антител, а также отдельных фракций. В-третьих, в случае поливалентных антигенов возможностью образования комплексов сложного состава, в том числе циклической структуры, в которых проявляется кооператив-ность Взаимодействия активных центров антител. Все это не позволяет применить традиционные методы для расчета истинных значений констант связывания. Более надежные данные могут быть получены для моноклональных антител и их РаЬ-фрагментов, так как в этом случае могут быть выделены индивидуальные антитела в гомогенном виде. [c.41]

Л — образование комплекса антиген—антитело между поливалентным антигеном и одновалентным антителом (антитело взято в избытке) Б —образование преципитатов при неспецифической агрегации комплексов антиген-антитело В—растворимый комплекс при избытке антигена. [c.343]

Преципитацию антигена антителом можно объяснить образованием сетки геля в результате взаимодействия двухвалентного антитела с поливалентным антигеном. Рост такой сетки может быть ингибирован избытком любого из реагентов, как это схематически изображено на рис. 131. Как и следовало ожидать, фрагменты одновалентного антитела могут конкурировать с двухвалентным антителом за гомологичный антиген, предупреждая таким образом преципитацию. Измеряя молекулярный вес комплекса, образующегося при насыщении антигена фрагментами одновалентного антитела, можно также определить функциональность антигена [1013]. [c.341]

Иммунохимические методы анализа, основанные на специфическом связывании определяемого соединения соответствующими антителами, широко вошли в аналитическую практику и используются в различных областях медицины, сельского хозяйства, микробиологической и пищевой промышленности, для целей охраны окружающей среды. Иммунохимическая реакция в растворе между антителами и антигенами (в гл. 1 будет введено точное определение термина антиген , однако здесь мы будем понимать под ним идентифицируемое вещество, против которого выработаны соответствующие антитела) протекает в несколько стадий., первой из которых является обратимое образование комплекса состава 1 1. Вследствие наличия в молекуле антител более одного центра связывания для поливалентных антигенов возможно дальнейшее многостадийное образование сложных комплексов с различным соотношением в нем компонентов. [c.5]

Сэндвич -метод основан на использовании иммобилизованных и меченых специфических антител и является одним из наиболее распространенных подходов для анализа поливалентных антигенов. Метод существует в нескольких модификациях. Наиболее щироко распространенная включает две стадии. На первой определяемый антиген взаимодействует с иммобилизованными антителами, затем иммуносорбент промывают и добавляют меченые ферментом антитела, степень связывания которых со свободными детерминантами пропорциональна начальной концентрации антигена. Вторично промывают носитель, добавляют субстрат и регистрируют количество метки, связавшейся с иммуносорбентом (см. схему гл. 5, 2). [c.246]

Вопросы, касающиеся реакции антител с поливалентными антигенами, будут рассмотрены в гл. 12. [c.107]

При использовании аффинной хроматографии для выделения антигена из раствора используют антитела, иммобилизованные на нерастворимом носителе. При этом ключевым параметром иммуносорбции становится аффинность моновалентного взаимодействия [17]. Благодаря высокой концентрации МКА, присоединенных к гелю, связывание антигена, как правило, происходит достаточно быстро, и лишь в исключительных случаях кинетические параметры иммуносорбции требуют скорости потока меньшей, чем обычно используемая — один объем колонки в час. Выявление МКА обычно основано на поливалентном связывании с антигеном (см. рнс. 5.1), в котором участвуют как низко-, так и высокоаффинные антитела. Однако для аффинной хроматографии требуются антитела, обеспечивающие моновалентное связывание. Поэтому среди имеющихся МКА необходимо провести дополнительный отбор препаратов, обладающих нужной аффинностью. Это можно сделать, например, по способности МКА вызывать иммунопреципитацию антигена или по торможению растворимым (одновалентным) антигеном связывания с поливалентным антигеном, иммобилизованным на поверхности клеток или пластиковых панелей [17]. На рис. 5.2 схематично изображены взаимодействия, возможные при реакции торможения. Очевидно, торможение происходит лишь в том случае, если время диссоциации 50% моновалентных связей примерно равно или превышает время проведения самого анализа. Антитела, у которых 1./, составляет более 10 мин. [c.171]

Поливалентный антиген на поверхности клетки-мишени [c.172]

Рис. 5.2. Зависимость подавления связывания антител с моно- или поливалентным антигеном определяется скоростью диссоциации иммунных комплексов

Концепция агглютинации известна с 1920-х гг. в микробиологическом анализе. Этот принцип можно положить в основу офазования комплекса между антителом и антигеном, где имеется поливалентное связывание. Поливалентный белок будет реагировать со своим антителом, образуя осаждающийся комплекс, но реакция в высокой степени зависит от таких факторов, как нонная сила и ионные частицы, и осложняется изменением реакционной способности различных антигенных связывающих центров на антителе В принципе, по мере протекания реакции образование комплекса может приводить к изменению способности среды рассеивать свет, но в адеале комплекс должен оставаться во взвешенном состоянии. [c.584]

Ввиду поливалентности белковых антигенов, бивалентности антител и присутствия в иммунной сыворотке популяции антител, специфичных к разным антигенным детерминантам, реакция взаимодействия между антигеном и антителом создает комплекс, образование решетки которого зависит от соотношения количеств антигена и антител. На рисунке 4.2 Л показаны три экстремальные ситуации. Эта характерная особенность реакции антигена и антитела очень важна для принципов нескольких иммунохимических методов. [c.95]

Имея дело с поливалентными антигенами, которые могут соединяться одновременно с несколькими молекулами антител, мы сталкиваемся с фактом чрезвычайного усложнения математического описания реакции, которое необходимо по возможности упростить, вводя некоторые допущения. Самое простое из них заключается в том, что свободная энергия соединения молекулы антитела с взаимодействующим участком антигена одинакова для всех этих участков и не зависит от числа ранее присоединенных к антигену молекул антител. С помощью этого допущения, которое едва ли является строгим, но которое, конечно, может быть использовано как первое приближение, можно легко разрешить задачу, что и сделали Линдерстром-Ланг [16], фон Муральт [17], Фаулер [8], Вимен [24] и Клотц [15]. Если мы обозначим константу ассоциации для образования единичной связи Ат — Аг через К и количество взаимодействующих участков на молекуле антигена (или на клетке) через т, то мы найдем отношение г, т. е. число молекул антител, соединенных с молекулой антигена [c.169]

Случай, приведенный в табл. 34 под номером 1, где отрицательное значение очень велико, довольно трудно объяснить. Однако можно было бы напомнить, что, во-первых, эта величина основана на весьма приближенной величине и, во-вторых, гемоцианин представляет собой с самых разных точек зрения довольно необычный антиген, поскольку молекула его гораздо больше по величине и гораздо более поливалентна, чем молекулы большинства антигенов, и, кроме того, она представляет собой систему, способную к диссоциации и ассоциации. Стейнер и Китцингер [22] предположили, что изменением степени ассоциации гемоцианина можно было бы объяснить наблюдаемое большое изменение энтальпии и большую отрицательную величину изменения энтропии, вычисленную из величины АЯ°. [c.174]

Реакция между конканавалином А и полисахаридом во всех отношениях аналогична реакции антиген — антитело [3, 20, 26, 27], причем белок выступает в роли поливалентного антитела (как было показано в [28, 29], двухвалентного), а полисахарид — поливалентного антигена. Многочисленные исследования свидетельствуют о том, что конканавалин А взаимодействует с терминальными невосстанавливающими гликозильными остатками полисахарида посредством образования нековалентных, главным образом водородных, связей [24—26, 30]. Осаждение проводят в водной среде или в различных гелях [21]. Типичную [c.89]

Встает законный вопрос как помочь организму преодолеть иммунодепрессию при онкологических заболеваниях Предлагаются, прежде всего, различные способы повышения антигенности опухолевых клеток, например, путем заражения их неонкогенными вирусами (см. [17]) или укрепления каркаса их мембраны введением поливалентных поверхностно активных веществ [7]. Далее, возможна неспецифическая стимуляция иммунной системы с помощью туберкулезной вакцины БЦЖ и т. п. Наконец, борьба с системным действием опухоли состоит, в частности, в поддержании нормогликемии введением достаточного количества глюкозы извне. [c.125]

Нарисованная картина опухолеспецифического антигенного строения довольно естественно подводит к ответу на вопрос об усилении ОСАГ. Усилить слабые ОСАГ можно, стабилизировав границы доменов клеточного каркаса и случайные ассоциации АГД с помощью поливалентных поверхностно-активных веществ (ППАВ). Особенно перспективными в этом плане могут оказаться экзогенные компоненты клеточных мембран протеогликаны, гликопротеиды и т. п. Здесь уместно вспомнить, что главную роль в иммунном ответе ор- [c.156]

Иммунометрическне. Вторая группа методов — иммунометрические, основана на принципе сэндвич -анализа. Особенность этих методов заключается в том, что на твердой фазе иммобилизован избыток антител, с которыми проводят инкубацию антигена. После удаления несвязавшихся компонентов в систему добавляют избыток меченых антител, которые взаимодействуют с антигеном. Очевидно, этот метод применим только к поливалентным антигенам (рис. 24, а). Чувствительность и точность иммунометри-ческих методов принципиально существенно выше конкурентных, так как используя избыток антител на твердой фазе, можно адсорбировать из раствора сколь угодно малое количество антигена, а затем избытком меченых антител определить его содержание. Кроме того, в этом случае гораздо менее строгие требования к количеству добавляемых компонентов. Чувствительность иммунометрических методов в большей степени зависит от нижнего предела детекции маркера. Однако на практике предельной чувствительности достигнуть трудно в силу того, что при большом избытке первичных и вторичных антител наблюдается значительная иеспецифическая сорбция, которая фактически и лимитирует чувствительность этих методов. Использование моноклональных антител в иммунометрическом анализе очень эффективно, так как, сорбируя на твердой фазе антитела одной специфичности, а проявляя связавшийся с ними антиген мечеными антителами другой специфичности, удается не только повысить избирательность детекции антигена, но и сократить время анализа (рис. 24,6). [c.118]

Рис. 24. Основные методы иммунометрического анализа поливалентных антигенов

Серодиагностика. Ставится РСК с сьшороткой крови больного и антигеном, представляющим собой поливалентнь актинолизат. Положительная реакция наблюдается у 80% боль ных людей. [c.170]

Термин специфичность антигена используется в двух смыслах во-первых, как способность избирательно реагировать со специфическими антителами, во-вторых, поскольку белковые антигены поливалентны, как набор определенных антигенных детерминант. Если два антигена имеют только часть одинаковых антигенных детерминант, их называют перекрестно реагирующими антигенами. Примерами таких антигенов являются гомогенные белки (например, альбумин) близкородственных видов жийотных. [c.12]

Процесс образования комплекса антиген — антитело состава 1 1, в котором реализуются поливалентные взаимодействия, также является обратимым и может быть охарактеризован константой комплексообразования. С энергетической точки зрения образование поливалентного комплекса намного выгоднее, чем моновалентного. Например, было показано, что 1дО-антитела с внутренней аффинностью к 2,4-динитрофенольному (ДНФ) гаптену 10 л/моль имеют функциональную аффинность по отношению к комплексу ДНФ — фаг 4-174—л/моль, т. е. бивалентные взаимодействия являются в 1000 раз более прочными, чем моновалентные. [c.38]

Взаимодействие одной субпопуляции антител с поливалентным антигеном. Рассматриваемый ниже случай может реализоваться, например, при связывании РаЬ-фрагментов моноклональных антител с клетками, вирусными частицами и т. д., имеющими на своей поверхности большое число одинаковых центров связывания. Выражение для константы равновесия взаимодействия антитела, имеющего по п эпитопов, записывается следующим образом [c.47]

Так как молекулы антител обладают, по крайней мере, двумя центрами связывания, то при взаимодействии с поливалентным антигеном возможно образование так называемых комплексных связей, когда после взаимодействия одного активного центра молекулы антитела с одним из эпитопов второй активный центр взаимодействует с расположенным поблизости вторым эпитопом той же молекулы антигена. Общая эффективность взаимодействия в этом случае существенно возрастает в частности, эффективная константа комплексообразования для молекулы IgG может в 10 раз и более превышать Ко одиночных связей. Частота образования таких связей зависит от концентрации реагентов и мо ет колебаться от нуля до максимальной, соответствующей общему количеству молекул IgG в Системе. [c.47]

Существенно, что высвобождению IBF клетками способствуют два фактора — активация клеток (антигеном или поликлональным митогеном) и присутствие специфического лиганда (т. е., иммуноглобулина определенного класса). При этом, если клетка способна экспрессировать два вида F -рецепторов (например, рецепторов для IgG н IgA), то в присутствии JgA в культуральную жидкость поступает только IBF . (У. Yodoi et ai., 1983). Если принять во внимание, что в препаратах иммуноглобулинов всегда присутствуют агрегаты этих белков, то нетрудно представить себе, что такие поливалентные лиганды способны сшивать между собой соответствующие по специфичности F -pe-цепторы. Последнее, как уже обсуждалось (см. разд. 5.1) служит необходимым условием для сброса с клеточной поверхности того или иного рецептора. На этом основании, а также исходя из того, что молекулярная масса IBF существенно меньше молекулярной массы F -рецептора, эти белки можно отнести к промежуточным продуктам катаболизма F -рецепторов. [c.85]

Если принять во внимание, что антигены поливалентны, т. е. содержат в молекуле несколько идентичных де-терминантиых групп, а антитела как минимум бивалентны, становится очевидным второй важный фактор стабильности формирующихся комплексов антиген-антитело. Согласно второму закону термодинамики [c.91]

Связывание IgE тучными клетками — основное условие возникновения каскада биологических реакций, обозначаемых термином — реакции гиперчувствительно-сти немедленного типа. Эти реакции возникают после взаимодействия поливалентного антигена аллергена) с фиксированными на клетках IgE-антителами. В этом разделе мы рассмотрим лишь проблему связывания ци-готропинов клетками. Процесс высвобождения субстанций анафилаксии под влиянием комплекса антиген-цито-тропины мы обсудим ниже. [c.126]

Н. Ерне (С. Henry, N. Jeme, 1968), изучавшие влияние IgM-антител на пролиферацию антителопродуцирующих клеток против эритроцитов барана. Механизм этого явления изучен недостаточно, но его специфичность не вызывает сомнения. Возможно, эффект IgM-антител связан с их способностью как поливалентного антитела эффективно концентрировать антиген и тем самым способствовать его процессированию в макрофагах. [c.226]

Существует определенная схема выявления специфического связывания антител с антигеном. Клетки-мишени могут быть живыми, зафиксированными глутаровым альдегидом, высушенными на стекле или же присутствовать в замороженных гистологических срезах. Тест неизбежно является непрямым, и реагентом для второй стадии могут служить антимышиные иммуноглобулины овцы, козы или кролика, меченные флуоресцеином, ферментом или радиоактивным иодом. Обычно пробу (одну каплю) супернатанта добавляют к 0,5-10 клеток-мише-ней в небольшом объеме в маленькой пластиковой пробирке или в лунке панели. После 30—60 мин инкубации при 4°С суспензию разбавляют, клетки осаждают центрифугированием, отмывают один раз и инкубируют в течение 30 мин при 4°С с соответствующими разведениями поливалентного антимышино-го иммуноглобулина, конъюгированного с флуоресцеином. Клетки вновь отмывают и регистрируют флуоресценцию непосредственно под флуоресцентным микроскопом или с помощью проточного цитофлуориметра системы FA S [14]. Более детально упоминаемые процедуры скрининга изложены в кн. 2. [c.136]

В тот же день приступают к изучению антигенной структуры выделенных бактерий с применением адсорбированных сальмонеллезных поливалентных и монорецепторных сывороток. Принцип серологической идентификации бактерий группы сальмонелл заключается в том, что в первую очередь определяется групповая принадлежность по 0-соматиче-ским сывороткам, затем в пределах установленной группы определяют типовую принадлежность бактерий с помощью Н-сывороток к специфическим фазам Н-антигена (табл. 33). [c.216]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология