Определение аминокислотного состава белков

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА БЕЛКА [c.525]

IV, ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ [c.122]

Литература к разделу Определение аминокислотного состава белков и пептидов . [c.195]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА БЕЛКОВ [c.477]

Благодаря этим новым методам, разработанным очень детально, определение аминокислотного состава белка не является уже трудноразрешимой проблемой. [c.482]

Исследование аминокислотного состава белков. Определение аминокислотного состава белков обычными химическими методами, их разделение в виде солей, сложных эфиров и других соединений—одна из самых трудоемких и сложных работ. Применение хроматографического анализа позволяет значительно облегчить и упростить определение аминокислотного состава белков. [c.41]

Определение аминокислотного состава белков — одна из важнейших задач при изучении строения белков. Мы видели, что белки среднего молекулярного веса состоят из нескольких сотен аминокислотных остатков, поэтому одна из первых задач при изучении строения белковой молекулы — определение количества отдельных аминокислот в белке. [c.215]

Кроме этой теоретической задачи, определение аминокислотного состава белков крайне важно для установления пищевой и кормовой ценности сельскохозяйственных продуктов. Дело в. том, что в организме человека и животных могут синтезироваться не все аминокислоты, необходимые для построения белков различных органов и тканей. Часть аминокислот не может синтезироваться в животном организме, и такие аминокислоты человек и животные должны получать с пищей и кормом. Эти [c.215]

В последнее время при определениях аминокислотного состава белков широко применяется хроматографический метод, открытый русским ученым М. С. Цветом. Особенно большое распространение получил метод распределительной хроматографии на бумаге. Сущность этого метода состоит в том, что на хроматографическую бумагу, которая отличается от обычной фильтровальной большей однородностью и чистотой, наносится небольшая капля раствора, содержащего аминокислоты. Затем конец бумаги с каплей раствора погружают в ванночку с каким-либо органическим растворителем (насыщенные водой бутиловый спирт, фенол, коллидин и др.). Ванночку и бумагу устанавливают в камеру, насыщенную парами воды и растворителя, его пропускают вдоль листа бумаги в течение нескольких часов. Вместе с [c.216]

В связи с этим определение аминокислотного состава белков приобрело большое значение. Между тем разделение смеси аминокислот, изолирование из смеси каждой из них встречаются с рядом затруднений, так как физические и химические свойства многих аминокислот довольно сходны. [c.33]

Метод изотопного разбавления в органической химии. Метод изотопного разбавления (см. гл. VI, 3, 2) широко используется при анализе сложных и трудно разделимых смесей органических веществ, в особенности близких по свойствам. Например, определение аминокислотного состава белков в значительной мере облегчилось благодаря применению метода изотопного разбавления. [c.313]

В развитии биохимии аминокислот можно различить несколько этапов. Первый этап состоял в выделении аминокислот, встречающихся в природных объектах, и в изучении их свойств. Второй характеризуется работами по питанию экспериментальных животных и микроорганизмов. Отправной точкой этих исследований послужили наблюдения, продемонстрировавшие роль белков как необходимых компонентов пищи животных проведению таких исследований способствовало аналитическое определение аминокислотного состава белков и создание усовершенствованных методов выделения аминокислот. Эти работы привели к открытию ряда новых аминокислот и показали, что одни аминокислоты могут синтезироваться в организме, а другие — нет кроме того, были получены важные данные, указывающие на характер взаимосвязей в обмене различных аминокислот. [c.7]

Точное определение аминокислотного состава белков весьма существенно для их идентификации и для понимания их структуры. Аминокислотный анализ включает две главные стадии гидролиз белка до аминокислот и количественное определение продуктов гидролиза. [c.56]

Определение содержания иона металла (в металлопротеидах) или определение аминокислотного состава белка позволяет вычислить минимальные молекулярные веса. Такой расчет основан на допущении, что каждая молекула данного белка содержит один и только один атом металла или один и только один аминокислотный остаток данного типа. Если молекула бе.лка содержит более чем один такой компонент, то вычисленный молекулярный вес будет меньше истинного молекулярного веса во столько раз, во сколько число таких компонентов, входящее в молекулу белка, больше единицы. Можно, следовательно, написать [c.61]

Для определения аминокислотного состава белка применяют различные физико-химические методы, например распределительную хроматографию и ионообменную хроматографию. Распределительная хроматография на бумаге имеет преобладающее значение. Длительное и сложное определение аминокислотного состава гидролизатов сейчас автоматизировано по графику на ленте автомата находят абсолютное содержание аминокислот. [c.277]

Аминокислотный состав белка устанавливают методом его гидролиза кислотами, щелочами или ферментами. Широко применяется кислотный гидролиз (80% -ная серная или 20% -ная соляная кислота), протекающий наиболее полно. Для определения аминокислотного состава белка применяют различные физико-химические методы, например распределительную хроматографию и ионообменную хроматографию. Распределительная хроматография на бумаге имеет преобладающее значение. Длительное и сложное определение аминокислотного состава гидролизатов сейчас автоматизировано по графику на ленте автомата находят абсолютное содержание аминокислот. [c.278]

В последние годы достигнуты большие успехи в технике определения аминокислотного состава белка. Сконструированы автоматические аппараты, которые через 12 ч после введения в них гидролизата белка дают ответ о качественном и количественном содержании в данном белке различных аминокислот. [c.269]

Однако определение аминокислотного состава белков дает лишь одностороннюю их характеристику. Биологические свойства белковых веществ определяются не только входящими в их состав аминокислотными звеньями, а в еще большей степени последовательностью их соединения, т. е. строением белка. [c.390]

Фазовый анализ предполагает определение состава многофазных объектов (горные пароды, порошкообразные смеси) относительно индивидуальных соединений, образующих самостоятельные фазы. Аналогичным образом при анализе белковых веществ правомочна постановка задачи не только по определению элементарного состава, но и других задач определение аминокислотного состава белков, определение последовательности сочетания отдельных аминокислотных остатков в полипептидных цепях. Очевидно, что вторая и третья задачи являются более актуальными для химии пептидов наших дней, и сама их постановка и успешное решение отражают более глубокий уровень проникновения научного познания в структуру белковых тел. Не лишне отметить, что успехи координационной химии, накопление информации о формах и константах образования комплексных соединений в растворах ставят в повестку дня современной неорганической химии задачу определения состава растворов уже не только на ионном (элементарном), но и на надмолекулярном (координационном) уровне. [c.12]

Определение аминокислотного состава белка [c.217]

В настоящее время разработан более точный и быстрый метод определения аминокислотного состава белков с помощью ионообменных смол. [c.45]

Хроматографический анализ органических веществ развивался попутно с хроматографией неорганических веществ. В 1935— 1936 гг. появились первые сообщения об успешном применении метода Цвета в анализе синтетических красителей. Из жидкофазных вариантов хроматографии наиболее широкое применение в органической и биологической химии получила бумажная хроматография. Это тонкий микрометод, позволяющий разделять смеси нескольких десятков компонентов на полоске пористой бумаги, которая выполняет роль хроматографической колонки. Хроматограмма получается в виде пятен, окраска которых соответствует природной окраске разделяемых компонентов смеси. При анализе бесцветных веществ пятна проявляют, опрыскивая бумагу реактивом, образующим с разделяемыми компонентами окрашенные соединения. Например, при определении аминокислотного состава белков после их гидролиза бумагу опрыскивают раствором нин-гидрина, в результате чего на поверхности бумаги появляются пятна розового цвета, соответствующие индивидуальным аминокислотам (см. рис. 1.2). Если разделяемые бесцветные вещества обладают способностью к флуоресценции, бумагу облучают ультрафиолетовыми лучами (кварцевой или ртутной лампой) и тогда хроматограмма становится видимой. Этот случай можно наблюдать при разделении смеси антрахинонов, пятна которых в ультра- [c.9]

Поскольку в качестве одного из основных путей использования дрожжевой биомассы планируется получение аминокислот, было проведено определение аминокислотного состава белка выращенных дрожжей. Сравнение данного состава с таковым для паприна (используемого в качестве кормовой добавки биомассы углеводородокисляющих дрожжей) [2] указывает на высокую кормовую ценность полученного продукта (табл. 4). Биомасса .tropi alis богата незаменимыми аминокислотами, в частности, содержание такой ценной аминокислоты, как лизин превышает 7 г/100 г белка, тогда как в паприне его содержится 4,5 г/ 100 г белка, а в рыбной муке до 6 г /100 г белка. [c.211]

Основные научные работы Мура, которые он проводил совместно с У. X. Стайном, посвящены исследованию строения белков. Они разрабатывали точные аналитические методы для определения аминокислотного состава белков. Развили (1951) метод ионообменной хроматографии, который применили для выделения и очистки рибонуклеазы. Благодаря сочетанию хроматографических методов анализа, разработанных Муром и Стайном, с предложенным ими фотометрическим нингидринным методом и их же автоматическим коллектором фракций они создали методику, позволяющую анализировать белковый гидролизат в течение двух недель. Применение синтетических ионообменных смол (сульфокатионитов) позволило им сократить (1950-е) это время до недели. Затем (1958) процесс ими был автоматизирован, а время анализа уменьшено до нескольких часов. Мур и Стайн установили [c.347]

Осуществленный таким способом гидролиз пептидньк связей-это необходимый шаг в определении аминокислотного состава белков и последовательности составляющих их аминокислотных остатков. Пептидные связи могут быть гидро-лизованы также под действием некоторых ферментов, таких, как трипсин и химотрипсин, представляющие собой протеолитические (белок-расщепляю-щие) ферменты, секретируемые в кишечник и способствующие перевариванию, т. е. гидролитическому расщеплению, белков, входящих в состав пищи. Если кипячение пептидов с кислотой или щелочью приводит к гидролизу всех пептидных связей независимо от природы и последовательности соединенных при их помощи аминокислотных звеньев, то трипсин и химотрипсин осуществляют каталитическое расщепление пептидов избирательным образом. Трипсин гидролизует только те пептидные связи, в образовании которьсс участвуют карбоксильные группы лизина или аргинина. Химотрипсин же атакует только те пептидные связи, которые были образованы с участием карбоксильных групп фенилаланина, триптофана и тирозина. Как мы увидим дальше, такой избирательный ферментативный гидролиз оказьшается очень полезным при анализе аминокислотных последовательностей белков и пептидов. [c.130]

Если определение аминокислотного состава белка может быть в настоящее время проведено относительно быстро, то выяснение последовательности соединения аминокислотных остатков — задача исключительно сложная. Выдающимся достижением в этой области было установление структуры и синтез гормона инсулина (Сенглер, 1963), состоящего из остатков 51 аминокислоты и имеющего молекулярную массу 5733 (рис. 22). Сочетанием из двух и трех букв на рисунке условно обозначаются остатки аминокислот. Черным показаны дисульфидные связи. [c.263]

В книге достаточно детально рассмотрены основные преимущества и недостатки классического метода определения аминокислотного состава белков с помощью ионообменной хроматографии по Муру и Стейну даны указания относительно выбора ионообменников, подготовки реактивов и численной интерпретации результатов. Значительное место также уделено изложению принципов анализа аминокислот методом газожидкостной хроматографии. Применение этого метода, обладающего на 2—3 порядка большей чувствительностью по сравнению с нингидринной реакцией по Муру и Стейну, позволяет значительно снизить количества белка, требуемые для определения его состава. Анализ аминокислот с помощью газожидкостной хроматографии пока еще не находит широкого применения, однако имеющиеся в ли-Фературе данные позволяют считать этот метод весьма перспективным. Кроме того, обсуждаются возможности использования газожидкостной хроматографии в сочетании с масс-спектромет-рией для определения состава и аминокислотной последовательности в пептидах. [c.4]

Отсюда ясно, какое огромное значение в питании человека имеет подбор белков пищи таким образом, чтобы получился оптимальный состав аминокислот для удовлетворения всех потребностей человека. В Советском Союзе Б. И. Збарским и сотрудниками проделана большая работа по определению аминокислотного состава белков органов и тканей человека. Так как в белках одних пищевых продуктов некоторые аминокислоты встречаются в небольшом количестве, то, естественно, надо стремиться добавлять эти аминокислоты путем одновременного потребления таких пищевых продуктов, в белках которых эти аминокислоты находятся в большом количестве. А. Э. Шарпенак провел большую работу по определению аминокислотного состава белков различных пищевых продуктов и составлению на основании этого рационов для человека, в которых белки различных пищевых продуктов дополняют друг друга своими аминокислотами и дают, таким образом, биологически ценное пита[ше. [c.310]

Укажем только на следующее для точного определения аминокислотного состава белка его нужно подвергнуть гидролизу (в вакуумированной запаянной ампуле с 6н. НС1 при температуре 110°) в течение 22 и 70 час [26]. При этом для глицина, аланина, валина, лейцина, изолейцина, метионина (с внесением поправки на 10%-е расщепление при хроматографии), фенилаланина, гистидина и лизина нужно использовать полученное при анализе содержание аминокислоты (в 22- или 70-часовом опыте). В то время как для аспарагиновой и глутаминовой кислоты, серина, треонина, пролина, тирозина и аргинина, которые частично разрушаются при гидролизе (по реакции 1-го порядка), их содержание рассчитывается путем экстраполяции на нулевое время по формуле [c.149]

Принцип метода. Определение аминокислотного состава белков и главным образом содержания незаменимых аминокислот — важнейший показатель их пищевой и кормовой ценности. Перед определением аминокислотного состава белков необходимо провести их гидролиз, вследствие чего в белках разрываются пептидные связи и освобождающиеся аминоки слоты переходят в раствор. [c.65]