Определение витамина А в сыворотке

Определение витамина А в сыворотке [c.177]

В книгу внесены следующие крупные изменения 1) сильно расширен отдел определения витаминов, 2) добавлено определение некоторых гормонов, 3) добавлено определение ряда ферментов, 4) совершенно переработана глава об определении белков сыворотки, 5) сильно расширена глава об определении пигментов и желчных кислот, 6) добавлено определение связанных углеводов крови, 7) добавлено описание хроматографии на бумаге и электрофореза на бумаге, 8) дано описание работы с некоторыми приборами (КОЛ-1, ФЭК, СФ-4, ЭФЗ и т. п.). Многие методики заменены другими — менее трудоемкими или более безопасными. Ввиду невозможности увеличения объема книги это сделано за счет более трудоемких методик, постепенно выходящих из употребления. [c.3]

Полярография нужна для непрерывного автоматического контроля производства, для исследований минерального сырья, готовых сплавов, для контроля качества продукции, для определения содержания гормонов, витаминов, ядовитых веш еств в организме. В научной литературе неоднократно обсуждалась возможность ранней диагностики раковых заболеваний путем полярографического исследования сыворотки крови. [c.57]

Как известно, для роста и размножения клеток млекопитающих, кроме комплекса аминокислот и витаминов (АВК), в состав среды должна входить сыворотка крупного рогатого скота. Компоненты АВК и сыворотки, только дополняя друг друга, образуют полный набор компонентов, необходимых для синтеза биомассы клеток млекопитающих. При увеличении концентрации аминокислот и витаминов в условиях постоянного содержания сыворотки выход клеток повышался лишь до определенного уровня, причем этот уровень неодинаков при разном содержании сыворотки в питательной среде (рис. 2.31, 2.32). Данный пример показывает, что нельзя связывать запас субстрата в среде с концентрацией одного какого-либо компонента независимо от содержания других. Только увеличивая концентрацию всех без исключения компонентов субстрата, можно ожидать существенного увеличения выхода. На рис. 2.33 показано изменение равновесной концентрации клеток линии Ь и ВНК-21 при пропорциональном увеличении содержания сыворотки и АВК в питательной среде. [c.160]

Творожную массу отделяют, прессуют, придавая желаемую форму, и высушивают. Сыворотку можно использовать в качестве источника питания при выращивании дрожжей, которые в свою очередь после определенной обработки можно добавлять в корм скоту. Продукт содержит много белка и ряд витаминов. [c.76]

При взаимодействии витаминов с рядом химических соединений наблюдаются характерные цветные реакции, интенсивность окраски которых пропорциональна концентрации витаминов в исследуемом растворе. Поэтому витамины можно определить фотоколориметрически, например витамин B - при помоши диазореактива и т.д. Эти методы позволяют судить как о наличии витаминов, так и о количественном содержании их в исследуемом пищевом продукте или органах и тканях животных и человека. Для выяснения обеспеченности организма человека каким-либо витамином часто определяют соответствующий витамин или продукт его обмена в сыворотке крови, моче или биопсийном материале. Однако эти методы могут быть применены не во всех случаях. Встречаются трудности при подборе специфического реактива для взаимодействия с определенным витамином. Некоторые витамины обладают способностью поглощать оптическое излучение только определенной части спектра. В частности, витамин А имеет специфичную полосу поглощения при 328-330 нм. Измеряя коэффициент поглощения спектрофотометрически, можно достаточно точно определить количественное содержание витаминов в исследуемом объекте. Для определения витаминов B , В, и других применяют флюорометрические методы. Используют и титриметрические методы [c.207]

Провитамины В могут быть обнаружены обычными реакциями на стерины. Химические методы определения витамина В несколько ненадежны, так как реакции, предложенные для этого, не являются специфичнылш. Для суждения о недостаточности витамина В часто прибегают к косвенным способам. Так, напри- мер, падение содержания неорганического фосфора в сыворотке крови с 4—5 мг% в норме до 1—2 мг% может указывать на недостаточность витамина В. [c.205]

Кибардин С. А. Определение витамина Е в сыворотке крови. Биохимия, 1951, 16, вып. 6, с. 511—514. Библ. 6 назв. 7357 Киверин М. Д. К оценке некоторых микрометодов определения сахара в крови и о применимости их для определения сахара в коже. Биохимия, 1952, 17, вып. 4, с. 403—408. Библ. 8 назв. 7358 [c.280]

Нормальная моча витамина А не содержит, хотя его находили в моче, содержащей белок при поражениях почек и при пневмониях. Обычно витамин А определяют в крови. Для этого можно использовать как его способность давать синее окрашивание с треххлористой сурьмой, так и его абсорбцию в ультрафиолетовом свете при 325—328 тц,. Для последнего метода требуется спектрофотометр, лучше всего типа СФ-4. Согласно Лоури, Бесси и Броку этим путем можно вести определение витамина А в 0,1 мл сыворотки крови и даже в еще меньших количествах. [c.360]

Пример расчета. 1,2 мл сыворотки после вссй описанной обработки цветность по кривой отвечает 4,18 .1г витамина Е холестерин кровн равен 145 мг%. Извлечение велось 60 мл эфира, в определение витамина Е пошло 55 мл. По кривой для холестериновой поправки 145 мг% дают высоту 85, а высота 85 для поправки витамина Е = 1,16 [.и. Кривая для поправки сделана с расчетом на 1 мл, а было взято 1,2 мл сыворотки, следовательно, 1,16 X 1,2 = 1,39 мг. [c.372]

Реакция с треххлористой сурьмой, найденная для природного витамина А [38], положена в основу физико-химических методов, широко применяемых для определения витамина А. Недавно опубликована работа, дающая теоретические обоснования механизма этой реакции и объясняющая причину появления окраски [130, 131]. В дальнейшем было найдено, что цветную реакцию с витамином А дает и обычный (продажный) [172] или активированный [171] дихлоргидрин глицерина (активирование достигается перегонкой в вакууме дихлоргидрина глицерина в присутствии треххлористой сурьмы) и что эта реакция пригодна для определения витамина А в свежем рыбьем жире и в сыворотке [170]. Этот последний реактив дает устойчивую окраску (от 2 до 10 мин.), не чувствителен к следам влаги и не корродирует приборов. Но, с другой стороны, величина (или i Ti) составляет примерно только четвертую [c.211]

Спектрофотометрическое определение витамина А после превращения в ан-гидровитамин А (отщепление воды в бензольном растворе при действии -толуол-сульфокислоты)—см. [31]. Спектрофотометрическое определение витамина А наряду с витаминами Ог и Оз в маслах с помощью пирокатехина и трихлоруксусной кислоты — см [32]. Разработан спектрофотометрический метод определения витамина А в таблетках поливитаминов, рыбьем жире, человеческой сыворотке и др. [33] описаны также другие методы определения витамина А в рыбьем жире [34]. [c.484]

Съемка газовая, оператор полевой партии 2777 Сыворотка крови определение белка 740и 7916, 7979 витамина Е 7357 воды 7204 пенициллина 7208 холестерина 8277 Сыворотки лошадиные, титрование потенциометрическое 8073 Сывороточно-вакцинное производство, определение pH 650 Сыпучие тела, отбор проб 2510 Сыр анализ 6466 определение азотистых соединений 8494 [c.391]

Имеются также микрофлюорометры, рассчитанные на определение флюоресценции в очень малых количествах вещества С их помощью можно определять витамины Bi и Вг в 20 мм- сыворотки. Возникающее в них свечение очень сильно усиливается системой фотоусилителей. [c.97]

Возможность определения малых количеств витамина А в сыворотке тем больше, чем большее количество сыворотки берется для анализа. Если экстракт сыворотки растворен в 0,3 мл хлороформа, из которых в кювету колориметра помещены 0,2 мл и обработаны 1 мл раствора сурьмы, то предельное количество витамина А, которое еще может быть определено в колориметре Аутенрита, следующее [c.365]

Имеются указания, что при содержании ватамина А в крови ниже 21—23 [1Г% всегда имеются расстройства темновой адаптации, что содержание его ниже 6—8 [гг /о сопровождается остановкой роста у молодняка, тяжелыми расстройствами зрения (слепота) и общего состояния организма животных. Длительная недостаточность витамина А у беременных крыс и свиней сопровождается рождением уродов. Впрочем, и чрезмерная нагрузка беременных животных этим витамином тоже вeдet к рождению уродов. Цифры ниже 6—8 цг встречаются и у больных людей, хотя и не часто. Поэтому желательно брать для исследования 3—4 мл сыворотки (при работе с колориметром Аутенрита). Тогда отсутствие голубого окрашивания укажет на катастрофически низкое содержание витамина А у данного больного. Отсутствие же окраски при определении в 1. мл сыворотки прн растворении в 0,3 мл хлороформа еще не указывает на сколько-нибудь серьезную недостаточность. Больше 4 мл сыворотки брать нецелесообразно, так как все цифры ниже 6 мг7о уже очень низки. [c.365]

Определение. 2—3 мл сыворотки переносят в сухую делительную воронку на 50 ыл, туда же добавляют 10 мл этилового спирта и смесь энергично встряхивают в течение 3 минут, после чего экстрагируют дважды 10 мл бензола при встряхивании в теченне 3—5 минут. Объединенный бензоловый экстракт со следами спирта высушивают безводным сернокпслым натрием, после чего растворитель отгоп.чют из колбы Вюрца в токе СОг-Маслянистый остаток, растворенный в 10 мл бензола, очищают от витамина А и каротиновых пигментов при помощи хроматографической адсорбции на диатомите. Колонку, наполненную адсорбентом, сначала промывают чистым бензолом, затем фильтруют исследуе.мый бензольный экстракт витамина Е, после чего адсорбент вновь промывают чистым бензолом до тех пор, пока в капле фильтрата не исчезнут следы токоферола (проба вынесенной капли фильтрата на железопиридиловый реактив). [c.373]

В настоящее время одним из лучших в этом отношении объектов являются культуры животных клеток. Эти в некоторой степени искусственные системы представляют собой отдельные клетки, выделенные из тканей какого-либо животного, которые в процессе адаптации к условиям существования in vitro претерпевают дедифференцировку с потерей специфических функций. Вместе с тем такие микрообъекты приобретают способность к стабильному самостоятельному росту, характер которого определен общими законами роста и развития популяции. Существует большое число таких перевиваемых клеточных линий, достаточно полно охарактеризованных и сохраняющих на протяжении многолетних наблюдений свои свойства. Что касается питательных сред, то, являясь в большинстве своем полусинтетическими, они компонуются на основе индивидуальных аминокислот и витаминов, растворяемых в глюкозо-солевом растворе при добавлении некоторого количества сыворотки крови (чаще всего крупного рогатого скота). Прописи используемых в настоящее время питательных сред созданы путем исключения тех компонентов в исходных, достаточно сложных питательных средах, которые не принимают участия в процессе роста популяции. Широко используемая в подобного рода исследованиях так называемая минимальная среда Игла или ее модификация—среда ПС [144] представляет собой минимальный набор компонентов, действительно необходимых для роста и размножения животных клеток. [c.230]

Определение содержания витамина Ва в различных природных продуктах привело к идентификации его с желтыми флуоресцирующими пигментами, названными флавинами . Из молочной сыворотки был выделен лактофлавин (из 5400 л 1 г), из яичного белка — овофлавин (из 10000 яиц 180 мг сырого пигмента), из печени — гепатофлавин, из лимона — цитрофлавин (из 3 т 0,6 г) и т. д. Все эти флавины в чистом виде обладают одинаковой В2-витаминной активностью, а по своей химической структуре оказались одним и тем же веществом, названным (по наименованию входящего в его молекулу остатка D-рибозы) рибофлавином. [c.400]

Для определения соединений группы витамина А в различных сортах маргарина используют хроматографию на лихросор-6е Si 60 в системе гептан — диизопропиловый эфир (19 1). Поскольку глицериды, токоферолы,. .чецнтины н другие полярные соединения сорбируются на колонке, в нее можно вводить неочищенные препараты, причем регенерировать колонку необходимо лишь после 20—50 анализов [534]. На этом же сорбенге проведено определение ретинола в сыворотке крови [535], а также разделение аналогов ретиноевой кислоты и их метаболитов в системах гексан — тетрагидрофуран — уксусная кислота (980 15 6) или гексан — метилбензоат — пропионовая кислота (1750 250 7) [536]. С помощью обращенно-фазовой хроматографии на лихросорбе (10 мкм) в 90%-ном водном метаноле проводят анализ молока и детских питательных смесей [537], а в системе метанол — вода (99 1) разделяют каротины. [c.263]

В ранних исследованиях поддержание роста клеток обычно обеспечивалось экстрактами эмбриональных и взрослых тканей, но в настоящее время такие экстракты редко добавляются в культуральную среду — и то лишь для культивирования определенных первичных клеток (см. разд. 2.1 и 2.2). Среда, используемая в наше время, помимо аминокислот, витаминов, солей и глюкозы, включает в себя, как правило, сыворотку (до 10%), а в ряде случаев и другие добавки, такие, как бакто-пептон и триптозофосфат (приложение 1). [c.74]

Этот метод, лишенный многих недостатков, типичных для плазменного сгустка, позволяет избежать разжижения сгустка и дает возможность использовать химически определенные среды. Впервые техника агарового сгустка была предложена Спраттом [10], который использовал 3%-ный агаровый гель на растворе Рингера, а впоследствии 4%-ный гель, содержащий забуференный бикарбонатом солевой раствор, глюкозу, 11 аминокислот, 10 витаминов и агар [11]. Вольф и Хаффен модифицировали метод Гейларда [9] для изучения развития и дифференцировки органов или зачатков органов амфибий, птиц и млекопитающих. Они использовали агаровый гель в эмбриологическом часовом стекле. Первоначально предложенная ими среда состояла из 1%-ного агара, растворенного в растворе Гэя с 50%)-ным экстрактом куриных эмбрионов и раствором Тиро-де. В более поздних модификациях в агар добавлялась куриная или лошадиная сыворотка либо эмбриональный экстракт заменялся на некоторые аминокислоты и витамины [39]. [c.225]

Сорбция из других сред. Кремнеземы, модифицированные различными привитыми группами, используют не только для концентрирования органических соединений из морской и пресной воды и из почв. Такие кремнеземы оказались весьма эффективными и для извлечения разнообразных классов биологически активных веществ из сыворотки и плазмы крови, мочи, желчи и экстрактов различных органов, подготовки проб продовольственного сырья, пищевых продуктов и кормов. Показана эффективность таких сорбентов для концентрирования, очистки и количественного определения стероидов, пептидов, некоторых витаминов, нуклеотидов, простаглаидинов, сахаров, ряда лекарственных препаратов и метаболитов [38] в медицинских и фармацевтических исследованиях, для определения нормируемых токсикантов (например, микотоксинов) в пищевой промышленности. Уже в 1993 г. было известно более 400 методик подготовки проб с помощью ТФЭ [39], а в настоящее время их уже несколько тысяч. [c.388]

Гипервитаминоз. Введение витамина даже в тысячекратной по сравнению с физиологическои, дозе не оказывало токсического эффекта Оценка обеспеченности организма витамином В, . Для этой цели слу жит определение содержания витамина в сыворотке крови, либо оп ределение суточной экскреции метилмалоновои кислоты котора возрастает при низкои обеспеченности организма кобаламином в десятки и сотни раз. Иногда применяется также метод нагрузки с помощью парентерального введения меченного по кобальту витамина В Суточная потребность. Пищевые источники. Синтез кобаламинов в природе осуществляется исключительно микроорганизмами. Животные и растительные клетки такой способностью не обладают Основ ные пищевые источники витамина печень, мясо (в нем обалами на в 20 раз меньше, чем в печени), морские продукты (крабы лососевые, сардины), молоко, яйца. У строгих вегетарианцев, исключающих из пиши не только мясные, но и молочные про укты р но или поздно развивается В, -дефицитная анемия. [c.49]

Оценка обеспеченности организма витамином Д. Обеспеченность орга-низма витамином Д оценивается на основании определения активных форм витамина Д в крови и тканях методом радиоконкурентного анализа содержания кальция, фосфора и активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови уровня экскреции с мочой фосфатов. Применяются также нагрузочные пробы с приемом фиксированных доз кальция при парентеральном введении с последующим определением содержания кальция в крови и его экскреции с мочой. [c.77]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология