Колонки размеры

Вторая группа параметров включает в себя кинетические и диффузионные параметры хроматографического опыта, определяющие процесс размывания хроматографической полосы и не связанные с селективностью непосредственно. К этим параметрам относятся размеры колонки (длина слоя сорбента и поперечное сечение колонки) размер и форма частиц сорбента давление, скорость потока природа газа-носителя температура колонки количество вводимой в колонку анализируемой смеси (доза) и способ ее введения содержание неподвижной жидкой фазы в колонке или эффективная толщина пленки неподвижной жидкой фазы, давление. Совокупность параметров хроматографического опыта, входящих во вторую группу, от которых, так же как и от селективности, зависит качество разделения, условно (для отличия от селективности) можно назвать общим термином — эффективность. Эффективность выражается высотой, эквивалентной теоретической тарелке (ВЭТТ), или числом тарелок N. [c.128]

Ионообменная хроматография, имея свои особенности, подчиняется общим законам сорбции. На процесс ионного обмена оказывают влияние природа ионообменника и ионов раствора, а также ряд экспериментальных факторов параметры колонки, размер зерен ионообменника, скорость пропускания раствора, состав подвижной фазы, температура и др. [c.224]

На степень разделения влияют химические и физические факторы. К химическим факторам относятся значение pH раствора, природа разделяемых ионов (их заряд, атомная масса, ионный радиус), склонность ионов к гидратации, природа ионита и др. Физические факторы — это скорость протекания раствора через колонку, размер зереи ионита, высота колонки, температура раствора и др. [c.110]

При отсутствии высокоэффективной насадки, имеющей ВЭТТ около 2 см, часто трудно достичь на колонке обычных размеров требуемого числа теоретических тарелок. В лабораторном помещении высотой 3,5 м можно разместить колонку, имеющую высоту ректифицирующей части не более 2,5 м. В этом случае наилучшие результаты можно получить, если установить две колонки, работающие последовательно так, как это показано на рис. 143. Дистиллат первой колонки непрерывно поступает на питание второй колонки [26]. Ввод питания расположен несколько выше куба второй колонки, размеры которого могут быть меньше, чем куба первой колонки. [c.233]

Колонку после проведения процесса первичного старения включают в газовый хроматограф и присоединяют к детектору. Чтобы можно было сравнить ее с прежними и будущими колонками, применяют онределенный газ-носитель и определенную скорость его потока. Устанавливают точно эту скорость и измеряют разность давления между входом в колонку Ра отсчитывают по манометру соответствующей точности) и выходом пз колонки (рь как правило, это атмосферное давление отсчитывается по барометру). Величина разности давлений зависит главным образом от скорости потока газа, температуры, диаметра колонки, длины колонки, размера зерен твердого носителя, плотности его набивки и природы газа-посителя. Эти параметры следует учитывать. [c.108]

А — первая ступень очистки иа колонке размером 2,5 X 300 см Б — вторая ступень очистки на колонке размером 1,5 X 420 см на вторую колонку вносили материал из заштрихованной области профиля элюции первой колонки [c.141]

Применявшийся кумол представлял собой чистый реактив фирмы Eastman или фирмы Phillips , который подвергался дополнительной очистке для удаления полярных ингибиторов, главным образом гидроперекиси кумола. Метод очистки состоял в пропускании кумола при комнатной температуре со скоростью 5 maJmuh через цилиндрическую колонку размером 5 см на [c.330]

Хроматографирование проводят в стеклянной колонке размером 20X1 см (см. рис. 111). Внизу колонки помещают ватный тампон и вносят небольшими порциями сорбент СаСОз или сахарный порошок. Уплотнение сорбента проводят постукиванием трубки о твердую поверхность. [c.296]

Вследствие влияния температуры на вязкость и плотность газа массовая скорость газа-носителя быстро уменьшается, если давление на входе в колонку поддерживать постоянным. Для колонки размером 100x0,3 см, заполненной сорбентом с диаметром зерен 0,15—0,25 мм, повышение температуры на 100 С сопровождается уменьшением расхода в 1,5—1,7 раза. Такой режим можно считать допустимым лишь в отдельных случаях при использовании потоковых детекторов, для которых площадь пиков анализируемых веществ не зависит от скорости газа и определяется только массой компонента. Кроме того, необходимо, чтобы изменение скорости не вызывало существенного дрейфа нулевой линии. Этому условию в первом приближении может отвечать лишь ДИП, причем только в узком интервале расходов газа-носителя (например, 1,5—2,5 л/ч). Эксплуатация детектора по теплопроводности в этих условиях оказывается совершенно невог можной. Таким образом, режим постоянной скорости газа-носнтеля во всех отношениях более предпочтительный, а для достижения приемлемой точности анализа — единственно возможный. Для под-держания постоянного расхода в процессе повышения температуры колонки используются рассмотренные выше регуляторы расхода, которые непрерывно восстанавливают первоначальный расход, увеличивая соответствующим образом давление на входе в колонку. [c.84]

Содержание воды в растворителе удобно контролировать с помощью газовой хроматографии. Обычно используется колонка размером 1,8 м X 6,35 мм, заполненная адсорбентом типа Рогарак Q . При 175°С проба объемом 50 мкл ацетонитрила с 2,2 мМ воды дает пик величиной 0,1 мВ на катарометре с чувствительными элементами фирмы Gow Ma типа W при токе 150 мА. [c.10]

В большинстве случаев перед хроматографическим процессом стоит задача надежного разделенпя двух илп более заранее известных компонентов исходной смеси. Еслп хроматографическая система j e определена, то в распоряжении экспериментатора етце остается возможность выбора целого ряда физических параметров процесса с целью оптимизации условий разрешения зон (пиков) в этой снстеме. Краткое знакомство с основами теории хроматографии имело целью дать обоснования для такого выбора. Теперь можно подвести итоги. Последовательно рассмотрим следующий ряд параметров геометрия колонки, размер гранул, набивка колонки, скорость элюции, физические свойства элюента (вязкость, температура) и, наконец, загрузка колонки. Рассмотрение будем вести с позиции улучшенпя разрешения и одновременно уменьшения продолжительности хроматографического процесса. Но сначала надо привести еще одну зависимость — скорости ЭоЛюции и от разности давлений иа входе и выходе колонкп Д/ ( перепад давления ) и от размера гранул. Ее описывает уравнение Дарси [c.36]

Персон и соавторы отделяли гель-фильтрацией гибрид ДНК— РНК от не включившейся в него РНК. В качестве низкомолекулярного партнера фигурировала суммарная РНК из клеток HeLa, зараженных аденовирусом. Ее гибридизовали с высокомолекулярной ДНК аденовируса. Естественно, что в этом случае для отделения РНК пришлось использовать весьма крупнопористый гель — сефарозу 2В. Колонка размером 0,9 X 20 см была уравновешена и элюировалась 0,05 IVi Трис-НС1, pH 7,9, содержавшим 0,5 1VI Li l, 0,5% ДДС-Na и 1 мМ ЭДТА. Препараты вносили прямо в гибриди- [c.144]

Никаких неприятностей не происходит, если воспользоваться сшитой агарозой. По данным Ансари и Мэйг, колонка с сефарозой L-6B выдерживала воздействие 6 М гуанидинхлорида без видимых изменений своих характеристик в течение 10 мес. Жесткость матрицы позволила им увеличить скорость элюции до 6,8 мл/см -ч. Авторы использовали колонку размером 1,5 х 90 см, а элюцию вели 6 М раствором гуанидинхлорида в 0,1 М Na-фосфатном буфере. pH 7. Для семи белков с молекулярными массами от 2900 до 69 ООО был получен совершенно линейный калибровочный график [Ansari, IVIage, 19771. [c.153]

Белев и соавторы для определения молекулярных масс денатурированных белков методом гель-фильтрацип использовали сефакрил S-200 Superfine . Колонку размером 1,6 х ЮО см калибровали четырьмя полипептидами с известным числом аминокислотных остатков N) — от 71 (токсин) до 579 (БСА). Элюцию вели 6 М водным раствором гуанидинхлорида (pH 5) со скоростью 3 мл/см -ч. Для точности объем элюента определяли по весу. График селектив- [c.153]

Еще в 1975 г. было обнаружено, что тонкое разделение [ H]Leu-тРНК на пять изоакцепторных фракций удается осуществить на колонке сефарозы 4В в обратном градиенте сульфата аммония (СА). Колонку размером 1,5 X 40 см уравновешивали 0,01 М Na-аце-татным буфером с pH 4,5, содержащим, кроме обычных добавок (Mg " и др.), еще и 1,3 М ((N 4)2804. На колонку вносили 100 мг суммарного препарата тРНК Е. соИ и вели элюцию 500 мл того же [c.176]

Рассмотренный только что для обычной сефарозы, этот вариант элюции, естественно, находит применение и при использовании гидрофобизированной агарозы. В качестве примера процитируем недавно опубликованную работу по мягкой очистке HMG-белка из ядер печени на колонке со-аминобутилагарозы. Этот белок растворим в растворе сульфата аммония вплоть до концентрации, достигающей 70% от насыщения. Сначала такой концентрацией СА в нейтральном 0,01 М трис-буфере высаливали из экстракта ядер большое количество балластного белка. Затем надосадочную жидкость, содержащую около 40 мг белка, вносили на колонку размером 2 X X 30 см, уравновешенную тем же раствором СА. Элюцию вели снижающимся линейным градиентом концентрации СА в том же буфере (500 мл) со скоростью 20 мл/ч, т. е. примерно 7 мл/см -ч. Низкая скорость элюции характерна для всех опытов такого рода ввиду повышенной вязкости концентрированных солевых растворов и соответствующего снижения скорости диффузии макромолекул. Около 30% белка не садилось на колонку и удалялось при первоначальной промывке. В ходе элюции выходило четыре пика, в первом из которых методом электрофореза идентифицировали HMG-белок [ onner. omings, 1981]. [c.181]

На такой же колонке размером 0,46 X 15 см удалось достаточно хорошо разделить все ФТГ-АК в иной системе органических растворителей А — 5 %-ный раствор тетрагидрофурана (ТГФ) в 4,2 мМ СН3СООН, титрованный NaOH до pH 5,16 В — 10%о-ный раствор ТГФ в ацетонитриле. Скорость элюции составляла 1,3 мл/мин, колонку термостатировали при 45 . Форма градиента и профиль элюции ФТГ-АК представлены на рис. 93. Как и в нредыдуш ем случае, многие пики выходят довольно тесными группами. Это означает, что небольшое изменение времени задержания па колонке может привес- [c.198]

Для очистки мембранной D-лактатдегидрогеназы Е. соИ хроматографией на оксиапатите [Pratt et al., 1979] был использован пологий линейный градиент концентрации (0—0,2 М) К-фосфатного буфера, pH 7,2 (500 мл для колонки размером 2,6 X 20 см). Растворимость белка обеспечивали включением в состав буфера детергентов (1% Тритона Х-100 и 0,1% ДДС-Na). Очистке на оксиапатите предшествовали освобождение фермента из ме.мбрин с помощью дезоксихолата натрия, хроматография на DE-52 и гель-фильтрация на сефадексе G-200. На всех хроматографических этапах очистки в составе элюентов тоже присутствовали детергенты. [c.234]

В этой области хроматографии делаются только первые шаги, В 1980 г. были опубликованы результаты модельньсх экспериментов по отработке условий ионообменной ЖХВД белков на крупнопористом продажном анионообменнике на основе силикагеля Syn hropak АХ-300 . На колонку размером 0,41 X 25 см вносили по [c.313]

Специалисты фирмы J. Т. Ваксг сообщили о разработке аналогичного аииоиообмениика. Полиатиленимин оии закрепляли иа силикагеле с диаметром пор 330 А и размером зерна 5 мкм. В модельных опытах разделение белков на колонке размером 0,46 X X 25 см осуществляли алюцией линейным градиентом концентрацип (0,025—0,5 М) К-фосфатного буфера (pH 6,8) со скоростью [c.314]

Колонку (размером 1,5x50 см) подготавливают так, как описано на с. 103. В нее вносят относительно густую суспензию полностью набухшего геля. Для предотвращения образования пузырьков воздуха в слое геля в колонке суспензию сефадекса перед заполнением колонки можно деаэрировать с помощью водоструйного насоса в колбе Бунзена или вносить его в колонку при температуре, значительно превышающей комнатную (50—60 °С). Сефадексу в колонке дают отстояться, затем с целью уравновешивания и достижения постоянной высоты столба геля колонку промывают 3—5 объемами буферного раствора. Гидростатическое давление для сефадекса G-100 не должно превышать 50 см /1=20—50 см (давление при разделении образца и при заполнении колонки должно быть одинаковым). Для проверки равномерности заполнения через колонку можно пропустить раствор окрашенного белка, например цитохрома с или голубого декстрана. При этом окрашенная зона должна быть компактной и двигаться по колонке параллельно ее основанию. [c.107]

Колонку размером 2X20 см подготавливают так, как это описано на с. 101, и заполняют густой взвесью геля фосфата кальция до тех пор, пока высота столба геля не достигнет 15 см. Необходимо, чтобы верхний слой геля имел гладкую горизонтальную поверхность. Колонку соединяют с резервуаром, заполненным 0,01 М фосфатным буферным раствором, pH 6,8. Скорость тока жидкости устанавливают равной 5 мл/мин. [c.115]

Колонку размером 1x20 см заполняют набухшим гелем (с. 106) и уравновешивают 0,05 М Na l. К 1 мл раствора РНК добавляют 1 мл раствора РНКазы и оставляют на 2 ч при 37°С. После инкубации смесь охлаждают и тотчас наносят на колонку. Элюцию проводят [c.176]

Высокоэффективная жидкостная хроматография (1988) -- [ c.182 , c.219 , c.220 ]

Высокоэффективная жидкостная хроматография (1988) -- [ c.182 , c.219 , c.220 ]

Газовая хроматография в практике (1964) -- [ c.54 , c.68 ]

Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам Часть 2 (1982) -- [ c.274 , c.282 , c.372 , c.377 ]

Газовая хроматография в биохимии (1964) -- [ c.47 , c.48 ]

Газовая хроматография в практике (1964) -- [ c.54 , c.68 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология