Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Лейцин меченый

    В одной из работ крысам вводили тяжелый изотоп азота в виде D-лейцина количество включенного в белки N было примерно таким же, как и в случае кормления животных М 5-Ь-лейцином. При введении D-лейцина, меченного дейтерием, некоторое количество дейтерия было найдено в тканевом L-лей-цине, что свидетельствует о частичном переходе углеродного остова D-лейцина в L-лейцин это превращение предполагает инверсию конфигурации ос-углеродного атома. Результаты упомянутых опытов представляют интерес в связи с тем, что есть данные, свидетельствующие о невозможности замены L-лейцина D-лейцином в питании (опыты по обеспечению роста молодых крыс). Очевидно, превращение D-лейцина в L-лейцин протекает со скоростью, недостаточной для обеспечения роста животных. По-видимому, D-аминокислоты дезаминируются оксидазой D-аминокислот с образованием соответствующих а-кетокислот и последние подвергаются переаминированию, превращаясь в соответствующие L-аминокислоты. [c.178]


    Ядра, митохондрии и хлоропласты растений, как сообщалось, также синтезируют белок. Ядра, тщательно выделенные из гороха, включают в белок меченый лейцин в присутствии других белковых аминокислот и АТФ. Синтез белка в митохондриях растений показан не очень убедительно, так как не было исключено загрязнение данной фракции рибосомами. Препараты хлоропластов, как обнаружено, также катализируют включение аминокислот в белок. [c.482]

    Об этом свидетельствуют многочисленные опыты. Прежде всего оказалось возможным заменить аминокислоты в питании а-кетокислотами. Кроме того, выяснилось, что если вводить в организм меченый азот в виде аммонийных солей, то он обнаруживается в а-аминогруппах всех аминокислот, за исключением лизина. Равным образом, вводя в организм меченную по азоту аминокислоту (например, лейцин), удается открыть изотоп азота в а-аминогруппах всех аминокислот, опять-таки за исключением лизина. Это означает, что а-кетокислоты, образующиеся при дезаминировании тех или иных аминокислот, в том числе и незаменимых, подвергаются вновь аминированию или переаминированию с образованием соответствующих аминокислот. Исключение составляют лизин, а-кето (окси)-кислота которого не аминируется и не пере-аминируется, а также треонин и оксипролин, обмен которых в животных тканях протекает необратимо. [c.344]

    Кормление разными аминокислотами, меченными тяжелым азотом, показало, что они неодинаково ведут себя в организме. Тирозин дает больше всего в белках печени и меньше — в белках плазмы. Обратное соотношение наблюдалось для лейцина, причем в белках печени за семь дней половина его заменялась меченым. Особенно подробно изучалась судьба глицина в теле. В печени введенный меченый глицин быстро обменивается с ранее содержавшемся в ней глицином других тканей. В печени крыс такое обновление глицина достигает 10% в день. [c.320]

    После добавления в пищу крысам /-лейцина или глицина с в аминогруппе [1398] тяжелый азот через короткое время появлялся во всех изученных аминокислотах (кроме лизина при питании лейцином). Позже эти процессы изучались более подробно. Крысе давали с пищей меченый глицин в течение 3 дней, после чего введение его прекращалось и наблюдалось изменение содержания N в разных аминокислотах [1399]. Большие количества его были в аминокислотах печени, где содержание его медленно падало после прекращения поступления с пищей. В аминокислоты мускулов, кожи и соединительной ткани входило меньше N , но в течение нескольких дней после прекращения питания меченым глицином содержание в них [c.490]


    Следующие примеры дают представление о скорости аминокислотного обмена. Из опытов по кормлению крыс меченым лейцином было найдено [1399], что 50% белков печени взрослого животного обновляется за 7 дней. Опыты с меченым глицином дали ту же величину обмена за 6—7 дней в печени и за 17 дней во всем теле. У человека время обновления белков на 50% равно 80 дням во всем организме, 10 дням в печени и плазме и 160 дням в мускулах, коже, мозге, костях и легочной ткани [1399]. При внутривенном введении собаке метионина, меченного 5 , радиоактивная сера уже через несколько часов появлялась в белках разных тканей, даже если у собаки была удалена печень [1407]. При таком же введении мыши глицина, меченного С , через несколько минут значительная радиоактивность обнаруживалась в печени и в циркуляции оставалось ее менее 3%. Из печени С также быстро уходит В ней круговорот радиоактивной аминокислоты составляет 50% за 1 час [1403]. [c.491]

    Введенный с пищей тирозин непосредственно и быстро используется для построения белковой молекулы. Помимо этого он отдает свою аминогруппу (до 25%) для образо- вания других аминокислот из а-кетокислот, находящихся в организме. Опыты с кормлением животных меченым тирозином и лейцином показали существование индивидуального отношения органов и тканей к отдельным аминокислотам в процессе обмена. Так, например, при введении крысам меченого тирозина наибольшее количество его азота оказалось В белках, печени, при введении же лейцина—в белках кровяной сыворотки. [c.308]

Рис. 29-9. Доказательство того, что полипептидные цепи растут за счет присоединения новых аминокислотных остатков к С-концу. Красным цветом отмечены те части цепей гемоглобина, которые содержат остатки радиоактивного лейцина через разные промежутки времени после добавления его в инкубационную смесь. Через 4 мин оказались мечеными лишь несколько остатков на С-конце а-гяобина. При более длительной инкубации с меченым лейцином мечеными становятся все большие и большие участки полипептидной цепи, причем меченые остатки лейцина всегда обнаруживаются в прилежащей к С-концу части цепи. Следовательно, полипептидные цепи растут в результате последовательного присоединения аминокислот к С-концу. Рис. 29-9. Доказательство того, что <a href="/info/31816">полипептидные цепи</a> растут за <a href="/info/1834092">счет присоединения</a> новых аминокислотных остатков к С-концу. <a href="/info/1011214">Красным цветом</a> отмечены те <a href="/info/602731">части цепей</a> гемоглобина, которые содержат остатки радиоактивного лейцина через разные промежутки времени после добавления его в инкубационную смесь. Через 4 мин оказались мечеными лишь несколько остатков на С-конце а-гяобина. При более длительной инкубации с меченым лейцином мечеными становятся все большие и большие участки <a href="/info/31816">полипептидной цепи</a>, причем меченые остатки лейцина всегда обнаруживаются в прилежащей к С-концу <a href="/info/602731">части цепи</a>. Следовательно, <a href="/info/31816">полипептидные цепи</a> растут в результате последовательного <a href="/info/437049">присоединения аминокислот</a> к С-концу.
    Описанные здесь опыты Швита подкрепляются и дополняются еще более убедительными опытами Динцеса, который поставил кинетический эксперимент на целых клетках ретикулоцитах. Условия синтеза гемоглобина брались стационарными, причем в среде содержался лейцин, меченный по С который, естественно, равномерно метил всю цепь гемоглобина (в молекуле гемоглобина 32 остатка лейцина). Импульс радиоактивности давался с помощью очень горячего , т. е. с высокой удельной активностью [c.455]

    Было высказано много предположений о возможности образования активного изопренового фрагмента из таких соединений, как лейцин и сенециевая (Р, 3-диметилакриловая) кислота. Многие ранние исследования в основном были посвящены изучению стероидов вследствие их важного биологического значения. Первые исследования биосинтеза начались вскоре после установления структуры этих соединений. В 1937 г. Зондерхоф [4] одним из первых применил метод меченых атомов для решения биосинтетических проблем. При выращивании дрожжевых клеток на среде, содержащей тридейтероуксусную кислоту, он обнаружил, что образующиеся в них стерины содержат большое количество дейтерия. Исследования, начатые в 1946 г. Блохом [5], Корнфортом и Прп-чаком [6], с использованием уксусной кислоты (1), меченной " С по метильной или по карбоксильной группе [1], привели к установлению пути ее превращения в стероиды. Этими экспериментами было показано, что атомы углерода метильной и карбоксильной групп чередуются в углеродном скелете холестерина (7) [7], а боковые метильные группы образуются из метильной группы уксусной кислоты. [c.483]

    Добавление фосфора в культуральную жидкость Str. griseus в период активного образования кандицидина останавливает этот процесс и восстанавливает первичный метаболизм культуры — возобновляет рост биомассы, усиливает дыхание и потребление продуцентом глюкозы (Martin е. а., 1976). В концентрации 10 мМ фосфат ингибирует включение меченых предшественников в кандицидин, не влияя на поглощение их клеткой и на включение лейцина в белок. Аналогичный [c.157]

    Уменьшение количеств белков и пептидов, необходимых для анализа их структуры, является одной из центральных проблем, стоящих перед исследователями. С целью ее решения ведется поиск новых методов изучения структуры, в частности более чувствительных способов идентификации производных аминокислот (см. с. 61). Один из перспективных подходов заключается в широком использовании радиоактивных методов анализа. В ряде лабораторий при деградации пептидов в секвенаторе применяется радиоактивный или С-ФИТ1Д. Можно вводить радиоактивную метку непосредственно в анализируемый белок. Для многих белков это достигается добавлением радиоактивно меченных аминокислот непосредственно в питательную среду, на которой выращивается культура, являющаяся источником исследуемого белка. Таким же путем оказывается возможным радиоактивно метить белок избирательно по определенным аминокислотным остаткам. Если белок, радиоактивно меченный, например, по остаткам лейцина, анализировать с помощью секвенатора, то простое измерение радиоактивности экстрактов, содержащих анилинотиазолиноны, позволяет безошибочно определить, в каких положениях полипептидной цепи в N-концевой области белка расположены остатки лейцина (рис. 31). Аналогичным образом можно определить положение и других аминокислотных остатков. Такой прием используется для анализа N-koh-цевой последовательности предшественников белков, доступных лишь в ничтожно малых количествах. Для исследования полной структуры он, однако, не применяется из-за дороговизны и трудоемкости. [c.79]


    Поскольку между удельной радиоактивностью и концентрацией аминокислот существует линейная зависимость, то можно сказать, что удельную радиоактивность нефракционированного белка для образца, весящего 100 мкг, или для белковой зоны в микрогеле йожно сравнивать с эквивалентными радиоактивностями образцов из идентичных участков мозга другого полушария того же животного, а также с образцами мозга других животных путем деления удельной радиоактивности белка на концентрацию аминокислот, содержащих тритий. Все значения удельной радиоактивности, таким образом, сравнивают при одной и той же концентрации аминокислоты, меченой тритием, названной здесь единичной конпентрацией Н-лейцина. [c.294]

    При дезаминировании аспарагиновой кислоты, аланина и глутаминовой кислоты образуются а-кетокислоты, принадлежащие к числу промежуточных продуктов обмена углеводов. Введение per os этих аминокислот, а также валина [97, 98], серина [99, 100], глицина [99, 101], треонина [102], аргинина [103, 104],. гистидина [104—106] и изолейцина [104, 107] вызывает у голодающих животных увеличение содержания гликогена в печени. В определенных условиях пролин [104], цистеин [104] и метионин [108] также могут вызывать добавочное образование у леводов, тогда как в результате обмена тирозина (стр. 417), фенилаланина (стр. 425) и лейцина (стр. 359) образуютсл кетоновые тела. Недостаток этих экспериментальных приемов состоит в том, что получаемые результаты касаются обмена аминокислот в нефизиологических условиях не удивительно, что некоторые аминокислоты проявляют при одних условиях гликогене-тическое действие, а при других — кетогенное. Для изучения превращения аминокислот в процессах обмена веществ наиболее удобно вводить изотопную метку в углеродный остов аминокислоты и затем выяснить судьбу меченого углерода путем исследования продуктов обмена. Работы этого рода, относящиеся к отдельным аминокислотам, подробно рассмотрены в гл. IV. [c.181]

    Хассан и Гринберг [450] исследовали превращения ОЬ-нор-лейцина и ОЬ-норвалина, меченных С , в организме крысы. Судя по выделению радиоактивной СО2, эти аминокислоты распадались довольно быстро, но в белки они, по-видимому, не включались. Гринберг [451] дает следующую схему катаболизма норвалина и норлейцина  [c.365]

    В первых опытах на целом организме было показано, что включение меченых аминокислот в белки происходит раньше всего в рибосомной фракции цитоплазмы. Так, Келлер обнаружил через 15 мин. после введения меченного С лейцина в организм крысы до 70% радиоактивности в рибосомной фракции (изучались белкп печени). Соотношение между удельной активностью белков в рибосомах и в других частях клетки составляло 5—10. Множество других экспериментов подтвердило, что напболее интенсивный синтез белка локализован в мельчайших частицах цитоплазмы, рибосомах, содержащих большую часть клеточной РНК. [c.441]

    Что касается того исключительного белка, который синтезируется конститутивно, т. е. в 50—100 раз быстрее остальных, то тут имеются две возможности. Если скорость синтеза каждой макромолекулы во много раз больше, чем у остальных белков, то синтезируемые за время т молекулы фосфатазы становятся пол-ностью меченьши с удельной активностью (по лейцину) такой же, как у аминокислоты. Если же кинетика синтеза одинакова, но отличается число рибосом, штампуюш,их белок, то степень меченности содержит тот же фактор . Сравнивая удельную радиоактивность избранного нами белка щелочно фосфатазы и остальных белков, мы даем однозначный ответ на поставленный вопрос. [c.463]

    На основании этих данных можно было бы заключить, что обновление молекул сывороточных белков происходит не в результате кратковременного размыкания пептидных цепей и подключения к месту разрыва новых аминокислот, а путем полного распада отдельных белковых молекул с последующим образованием новых белковых частичек. Если, однако, вместо N -глицинa подопытным кроликам вводился С -лейцин, то наблюдалось включение меченой аминокислоты в 51-антитела [60]. Эти последние опыты с а У(инокислотой, меченной изотопным углеродом, представляются более убедительными, чем опыты с аминокислотой, меченной изотопным азотом, так как меченый азот может отщепляться и обмениваться в результате процессов дезаминирования и переаминирования. Тем не менее трудно предположить, что белковые молекулы антител могут подвергаться непрерывному обновлению своего аминокислотного состава и в то же время сохранять в неизменном виде свои свойства антител. Эти свойства, вероятнее всего, обусловлены тем, что форма поверхности молекулы антитела геометрически дополняет форму детерминирующей группы антигена. Трудно себе представить, каким образом может сохраняться эта дополнительная форма, если молекулы антитела непрерывно обменивают входящие в их состав аминокислоты на аминокислоты окружающей среды. [c.391]

    Для многих исследований можно подобрать такой предшественник, который будет весьма специфичным ддя определенного класса макромолекул (например, лейцин для белка). В таких случаях меченые молекулы можно определить по их радиоактивности в присутствии других немеченых веществ. Однако для изучения различных вопросов метаболизма желательно использовать неспецифический предшественник, который будет включаться в пуклеиновые кислоты, белки и другие клеточные компоненты и метить их. В этом случае необходимо отделять и очищать каждый класс изучаемых молекул. Обзор методов химического фракционирования различных биополимеров приведен в ряде работ [2, 3]. Первая попытка использовать фильтры для улучшения фракционирования была сделана при разделении радиоактивности разных биополимеров после включения в них 1-С -глицина. Однако в этом случае полученные фракции нуклеиновых кислот были загрязнены пептидами, которые требовалось удалять [4]. [c.138]

    Шенгеймер и сотр. [1404] давали крысе с пищей лизин, NH2( H2)l D N Ha OOH, в котором одновременно водород при а-углероде мечен дейтерием, а азот соседней аминогруппы тяжелым Это давало возможность проследить за судьбой как углеродной цепи этой кислоты, так и ее аминогруппы. В выделенном из животного лизине отношение было тем же, что и во введенном с пищей. Это указывает на то, что лизин, принадлежащий к незаменимым аминокислотам, в животном не синтезируется и не пере-аминируется. Синтез новых углеродных цепочек вел бы к замене дейтерия на водород, а переаминирование — к замене меченых аминогрупп обыкновенными. В обоих случаях наблюдалось бы изменение отношения Иные результаты дал таким же образом меченный лейцин. (СНз)2СН-СН2- [c.491]

    Переаминирование есть основной процесс, вызывающий быстрый переход от одних аминокислот к другим. Этот процесс происходит в организме очень интенсивно и играет большую роль в круговороте аминокислот и получаемых из них белков. На стр. 377 механизм этой реакции был подробно рассмотрен. Наряду с ним, в небольшой степени переаминирование, по-видимому, может идти также по другому механизму окисления аминокислоты в аминокетокислоту, гидролитического отщепления от нее аммиака и присоединения последнего к другой аминокислоте. При этом механизме, в присутствии меченых групп N Hg, тяжелый азот должен переходить в образующуюся аминокислоту и в аммиак. Это обнаружил Шемин при действии гомогената сердечной ткани на смесь а-кетоглютаровой кислоты, бикарбоната аммония и Ы -аланина (или лейцина). Большая часть переходила в образующуюся глютаминовую кислоту, но некоторое его количество также оказалось в выделенном аммиаке. Этот механизм переаминирования, однако, отступает на второй план по сравнению с основным, идущим с промежуточным образованием оснований Шиффа. [c.492]

    Превращение орнитина в аргинин было окончательно доказано при помощи дейтерия и После того как мышам давали с пищей орнитин с дейтерием в а-положении, последний появлялся в аргинине из тканей [1427]. Орнитин с N H2 в а- или а-положеиии вводился в пищу крысам, после чего появлялся в тех же положениях в аргинине [1427]. Это показывает, что основная цепочка орнитина Ат(СН2)зЫН2— входит в аргинин, не разрушаясь. Амидиновая группа аргинина происходит из аммония или аминокислот пищи. При кормлении крыс меченым или разными -аминокислотами (глицином, лизином, лейцином, аргинином и др.) в аргинине, тканей оказывается в NHj-rpynne. Соизмеримые количества появляются в мочевине из мочи, что подтверждает ее образование из аргинина [1400, 1428). В дальнейшем почти весь меченый азот аргинина выводится с мочевиной. В опытах со срезами печени было подтверждено, что углерод из бикарбоната НСО или H Юg переходит в карбонил мочевины [1430]. Таким образом, были подтверждены основные звенья орнитинового цикла и внесены в него дополнительные данные. [c.495]

    Одним из важнейших результатов применения меченых атомов к изучению живых организмов было, как уже указывалось, открытие высокой динамичности процессов распада и ресинтеза жиров, углеводов и белков, ведуш,их к быстрому их обновлению в тканях и органах. В работах Шенгеймера [1061 и других биохимиков это было наглядно показано для жиров и углеводов путем применения дейтерия и изотопов углерода, а для белков, главным образом, путем применения тяжелого азота, радиоактивных изотопов фосфора и серы. При введении в пищу жирных кислот, меченных дейтерием в радикале, этот дейтерий быстро появляется в жирах всех органов и, прежде всего, в жировых запасах, откуда он переходит в другие места. Средняя продолжительность пребывания каждого атома меченого водорода в теле позвоночных близка к двум неделям. При кормлении крыс гидролизатом казеина, содержавшим дейтерий, было установлено, что за три дня обновляется 10% протеинов печени и 25% протеинов мускулов. При кормлении казеином с цитратом аммония, меченным тяжелым азотом, последний через несколько дней был обнаружен почти во всех аминокислотах тела (но не в несинтезирующемся в нем лизине), в креатине мышц, гиппуровой кислоте мочи и проч. Если животное имело бедную белками пищу, то оно усваивало около половины вводимого азота. При нормальной диете, когда животное находилось в состоянии азотного равновесия, усвоение азота уменьшалось, но качественная картина оставалась той же. Столь же быстрое усвоение и распределение азота в организме наблюдается при кормлении глицином, лейцином, тирозином и другими аминокислотами, меченными тяжелым азотом. Азот из пищи особенно быстро усваивается в виде синтезируемых глютаминовой и аспарагиновой кислот. Это, очевидно, связано с быстрым течением открытых А. Е. Браунштейном и М. Г. Крицман реакций энзиматического переаминирования этих кислот с а-кетокислотами, а также с их исключительной ролью в общем обмене аминокислот и протеинов [11]. [c.496]


Смотреть страницы где упоминается термин Лейцин меченый: [c.254]    [c.455]    [c.463]    [c.338]    [c.331]    [c.194]    [c.248]    [c.572]    [c.517]    [c.293]    [c.136]    [c.357]    [c.224]    [c.225]    [c.216]    [c.523]    [c.229]    [c.366]    [c.86]    [c.86]    [c.32]    [c.31]    [c.439]    [c.140]    [c.316]    [c.319]   
Общая органическая химия Т.10 (1986) -- [ c.248 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Лейцин

меченый



© 2025 chem21.info Реклама на сайте