Аминокислоты разделение

Наиболее совершенным методом для количественного анализа аминокислотного состава белков и пептидов в настоящее время является их определение с помощью автоматических приборов — анализаторов аминокислот. Разделение аминокислот в них происходит по [c.125]

Коэффициенты подвижности аминокислот, разделенных смесью н.бутилового спирта, уксусной кислоты и воды [c.377]

Разделение ДНС-аминокислот. Разделение проводят на пластинках размером 6x6 см, которые предварительно активируют в термостате при 120°С в течение 30 мин. Анализируемые образцы наносят тонким капилляром в угол пластинки на расстоянии 1 см от ее краев. Диаметр наносимых пятен не должен превышать 0,3—0,5 мм. Объем проб — около 0,5 мкл. На первую пластинку наносят 4-часовой гидролизат, на вторую — 16-часовой, на третью пластинку — смесь ДНС-аминокислот- свидетелей . Обычно берут стандартные растворы ДНС-производных тех аминокислот, которые входят в состав данного пептида. Пластинки помещают в камеру и проводят разделение вос- [c.151]

Число и последовательность связанных в пептид аминокислот называют первичной структурой. Для пептида с известной последовательностью формулу записывают, соединяя символы аминокислотных остатков черточками. Наконец, различают собственно пептид, например Ala-Ser-Asp-Phe--Gly и фрагмент -Ala-Ser-Asp-Phe-uly- (с черточками при концевых аминокислотах). Если часть последовательности пептида еще не известна, то аббревиатуры соответствующих аминокислот, разделенные (запятыми) указывают в скобках [c.86]

До настоящего времени проведены широкие исследования по разделению нескольких типов аминов, в частности катехоламинов и метаболитов триптофана. Разделению этих соединений самыми различными методами посвящено много публикаций. Что касается других аминов, например алифатических аминов, полиаминов и ароматических аминов, то их разделение представляет меньшие трудности, хотя иногда трудно добиться разделения этих аминов на указанные выше типы, так как они имеют близкие хроматографические характеристики. Кроме того, некоторые типы аминов, например триптамин и серотонин, хроматографируются вместе с аминокислотами. Разделение этих типов аминов не приводится ни в настоящей главе, ни в главе по хроматографированию аминокислот. Однако можно получить некоторое представление о разделении этих аминов на основе методов ионообменной, хроматографии, описанных в настоящей главе. Для разделения аминов широко применяются почти все варианты колоночной жидкостной ионообменной хроматографии. Скоростные методы и гель-проникающая хроматография в настоящее время не имеют широкого применения по всей вероятности, классические методы ионообменной хроматографии будут преобладать в области разделения аминов, так как они позволяют получать хорошее и быстрое разделение компонентов. Еще одним важным фактором является возможность использования для этой цели автоматических анализаторов аминокислот. [c.267]

При использовании денситометрического метода интенсивность окраски вещества в зоне измеряется непосредственно на хроматограмме. Впервые этот метод был использован для измерения концентрации аминокислот, разделенных на группы с помощью электрофореза, а позже — в хроматографии на бумаге для определения аминокислот, сахаров и стероидов. [c.79]

При гидролизе белковых тел получается около 20 различных аминокислот. Разделение этой смеси представляет собой довольно сложную задачу. Однако обычно одна или две кислоты Получаются в значительно больших количествах, чем все другие, и эти кислоты удается выделить довольно просто. [c.291]

Методы хроматографии аминокислот на бумаге получили многочисленные применения в биохимии животных и растений, в микробиологии и медицине. Для количественного анализа аминокислот наиболее удобен все же способ, использующий образование комплексных соединений с медью. Содержание аминокислоты определяется по количеству меди в таком комплексе. Этот метод можно применять к смесям аминокислот, разделенных в одномерной хроматограмме. [c.161]

Химические, физико-химические свойства белков и их структура определяются аминокислотным составом. Поэтому исследование аминокислотного состава является важным аналитическим методом характеристики этих соединений. Исследование аминокислотного состава белков и пептидов включает расщепление этих соединений до свободных аминокислот, разделение последних, их идентификацию и количественное определение. Изучению аминокислотного состава предшествует, как правило, определение однородности изучаемых препаратов. О чистоте препаратов белка судят на основании данных ульт-рацентрифугирования, электрофореза, в частности диск-электрофореза ) [c.122]

Степень прочности сорбции и десорбции на смоле разных аминокислот, определяемая главным образом величинами зарядов молекул, различна. Наиболее прочно на смоле сорбируются диаминокислоты и наименее прочно — дикарбоновые аминокислоты. Разделение аминокислот при ионообменной хроматографии происходит при десорбции их со смолы элюирующими буферными растворами, отличающимися от исходного буферного раствора большими величинами pH и (или) ионной силы. Обычно для элюции кислых и нейтральных аминокислот используют Ыа-цитратные буферные растворы с pH 3,25 и 4,25. Для десорбции со смолы наиболее прочно связанных (основных) аминокислот используют более щелочной Ыа-цитратный буферный раствор со значением pH 5,28 и более высокой ионной силой (0,35 М). [c.133]

Вследствие тенденции метильных групп к подаче электронов заряд на азоте диметиламинокислот несколько повышен, амфотерные свойства их выражены столь же ярко, как и у самих аминокислот. Разделение их методами электрофореза и хроматографией менее четко, чем разделение динитрофенильных производных аминокислот. Диметильные производные аминокислот не имеют широкого применения при исследованиях строения пептидов. [c.511]

На рис 7-7 изображена хроматограмма, полученная при градиентном элюировании смеси даисилпроизводных аминокислот, разделение проводилось на колонке, заполненной силикагелем, модифицированным ОДС [9] Предел обнаружения (при отношении сигнал/шум - 2) составлял около 0,1 пмоль [c.166]

Одноколоночный метод, смола 11Я-40. Повышение температуры колонки с 48,0 До 50,0 °С при постоянных значениях pH буфера, его концентрации и скорости течения приводит в основном к увеличению скорости элюирования аминокислот. Разделение треонина и серина уменьшается приблизительно до 0,01 (соотношение высот впадины и пика), а серина и глутаминовой кислоты— до 0,17. Подвижность цистина мало меняется с температурой, однако разделение пар глицин — аланин и тирозин — фенилаланин улучшается соответственно до 0,14 и 0,08. Из основных аминокислот только аргинин элюируется быстрее при повышении температуры. [c.46]

Кислые и нейтральные аминокислоты, смола UR-40. Повышение температуры колонки приблизительно на 1,5 °С при неизменных значениях pH буфера, концентрации ионов натрия и цитрат-ионов, а также скорости подачи буфера приводит в основном к ускорению элюирования аминокислот. Разделение аспарагиновой кислоты и треонина улучшается приблизительно до 0,12. Однако глутаминовая кислота элюируется настолько быстро, что не полностью разделяется с пролином. Цистин вымьшается быстрее на 2 мин, а пролин — глутаминовая кислота — цитруллин выходят более узкой зоной и поэтому разделяются хуже. При повышении температуры значительно улучшается разделение тирозина и фенилаланина, но несколько ухудшается разделение изолейцина и лейцина. [c.47]

Рис. и. Разделение с помощью проточной хроматографии в системе метилэтизше-тон — пиридин — уксусная к-та—вода (17 15 15 2) 18 аминокислот (разделение лейцина и изо-лейцина). Время хроматографии 4,5 час. Нанесено 0,5 мкг каждой аминокислоты в 0,5 мкл 0,1 н. [c.307]

В 1962 г. Зомзели и сотр. [42] методом ГЖХ проанализировали в виде бутиловых эфиров К-ТФАпроизводных смесь из 22 аминокислот. Разделение проводили на металлической колонке (200 X X 0,63 см), содержащей сорбент 1% НПГС на газхроме А зернения 60—80 меш, при программировании температуры от 75 до 220° С. Через 5 мин. после введения пробы температура изменялась со скоростью 5,6 град мин, через 21 мин.— со скоростью 7,9 град мин до достижения 220° С. [c.49]

Порату [21 ] удалось достичь большего успеха в разделении белков, пептидов и аминокислот при использовании гелей декстранов, имеющих различное количество поперечных связей. На фиг. 71 показаны кривые элюирования искусственной смеси белков и аминокислот, разделенной на геле с низким числом поперечных связей. [c.219]

Муссини и Маркучи [156] анализировали на слоях силикагеля G н-бутиловые эфиры 18 аминокислот. Разделение проводили смесью бензол—н-бутанол (3 1) этот элюент не вызывает смещения основных аминокислот — лизина, гистидина и орни-тина. Для этих эфиров применяли смесь н-бутанол—уксусная кислота—вода (12 3 5). Дальнейшая работа с этой же системой позволила разделить бутилпроизводные пролина, дегидро-пролина и оксипролина [41]. В то же время, используя систему н-бутил—уксусная кислота—вода (12 3 5), удалось разделить нитрозопроизводные этих аминокислот. Мухилл и Джексон [42] также провели хроматографический анализ нитрозопроизводных L-пролина и L-оксипролин а. [c.510]

Для спектрофотометрических измерений концентраций аминокислот, разделенных на тонких слоях, слои вначале опрыскивают реактивом на основе нингидрина, затем элюируют окрашенное соединение и измеряют поглощение при 570 нм [89, 247]. Рустоу и Хок [248] обнаруживали хроматограммы растворителями, содержавшими 1,3-дпметилалоксан. Красные пятна, появляющиеся после 90-мипутного нагревания при 70°С, более устойчивы, чем пятна, окрашенные нингидрином. Окрашенные зоны можно экстрагировать 70 %-ным водным ацетоном и затем измерить их поглощение при 530 нм. [c.520]

Разделение методом газовой хроматографии всех природных аминокислот. (Разделение 18 АК в виде их -бyтил-N TФA-пpoизвoд-ных.) [c.80]

Газохроматографическое определение аминокислот всегда считалось трудной задачей из-за их нелетучести. Одним из возможных путей ее рещения является приготовление летучих производных. Зомели [177] описал газохроматографическое разделение 22 встречающихся в природе аминокислот после превращения их в -бутиловые эфиры N-трифторацетильных производных. Разделение проводилось на колонке с 1% неопентилгликольсукцината на газохроме Q (60—80 меш) с использованием пламенно-ионизационного детектора. Температура колонки программировалась от 75 до 220 °С. Показано [178], что добавление аммиака к газу-носителю (азоту) позволяет повысить чувствительность детектирования и улучшить разделение этиловых или н-бутиловых эфиров гидрохлоридов пятнадцати аминокислот. Разделение проводилось на колонке с 22% полиэтиленгликольадипината на хромосорбе W (50— 100 меш). Эфиры аминокислот элюируются в следующем порядке метиловый, этиловый, пропиловый, бутиловый и ариловый [179]. В работе [180] описано разделение N-трифторацетильных производных эфиров 22 аминокислот на колонке с 2% неопентилгликольсукцината.на хромосорбе W. [c.249]

Не все спектры белков, претендующих на истинное -спи ральное строение, одинаковы это вызвано небольшим влиянием неароматических боковых групп на силу вращения пептидной связи и происходящему время от времени искажению а-спп-рали вследствие образования водородной связи между двумя аминокислотами, разделенными одной аминокислотой, а не тремя (как в структуре а-спи рали). [c.469]

Руководство по газовой хроматографии (1969) -- [ c.82 ]

Руководство по газовой хроматографии (1969) -- [ c.82 ]

Современные методы эксперимента в органической химии (1960) -- [ c.152 , c.160 , c.441 , c.448 , c.451 , c.462 ]

Руководство по газовой хроматографии (1969) -- [ c.82 ]

Методы органического анализа (1986) -- [ c.290 , c.493 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология