Спектрофотометрические измерения

Выбор длины волны поглощаемого излучения при спектрофотометрических измерениях [c.254]

Определение белка. Для определения белка используют метод Лоури (с. 81). При спектрофотометрическом измерении определяют оптическую плотность при 280 нм и рассчитывают концентрацию с помощью коэффициента Л им =9,0. [c.217]

Большая часть спектрофотометрических измерений проводится с растворами. При выборе растворителя необходимо учитывать следующее растворитель не должен поглощать в той же области, что и исследуемое вещество растворитель не должен взаимодействовать с исследуемым веществом. Растворители должны быть химически устойчивыми и хорошо очищенными. Растворитель перед употреблением должен быть проверен на спектральную чистоту. Ароматические растворители не пригодны для УФ-области ниже 300 нм четыреххлористый углерод поглощает излучение, начиная с 250 нм. Наиболее прозрачными растворителями для УФ-области до 200 нм являются вода, насыщенные углеводороды, этиловый и метиловый спирты, этиловый эфир. Коротковолновые пределы (длина волны, ниже которой пропускание растворителя в кювете толщиной 10 мм меньше 20%, т. е. поглощение больше [c.17]

Спектрофотометрические измерения при разных температурах позволяют определить изменения энтальпии АН, энтропии Д5 и свободной энергии АО. [c.27]

Иогансен А. В. О спектрофотометрических измерениях. Докл. АН СССР, [c.657]

Если при спектрофотометрических измерениях принять Лмин = 0,001. е акс=ЫО и 1=1 см, то Смин составит 1 10 моль/л. При фотоколориметрических измерениях Лмин 0,002, значение эффективного молярного коэффициента светопоглощения по меньшей мере в 2 раза меньше емакс- Следовательно, при аналогичных условиях фотометрирования Смин ориентировочно будет в 4 раза больше. [c.185]

ПРОГРАММА ВЫЧИСЛЕНИЯ КОНСТАНТ ДИССОЦИАЦИИ ОРГАНИЧЕСКИХ РЕАГЕНТОВ ИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИХ ИЗМЕРЕНИЙ [c.193]

При спектрофотометрических измерениях монохроматический поток света с Хмакс выделяют при помош,и монохроматора. При колориметрических измерениях только приблизительно выделяют светофильтрами нужную область спектра. Максимум пропускания светофильтра должен лежать в области спектра, которая соответствует максимуму поглощения определяемого вещества (рис. 97). [c.255]

Неводные растворители, например циклогексан, сероуглерод и другие, должны быть оптически чистыми, т. е. не содержать никаких примесей, которые могут поглощать лучи тон области спектра, в которой проводят спектрофотометрическое определение. Растворители, применяемые для спектрофотометрических измерений в инфракрасной области спектра, не должны содержать воды, потому что вода разрушает кюветы из каменной соли или сильвина. [c.259]

Определите концентрации веществ А и В в растворе 3. Для определения константы диссоциации К индикатора jii-нитрофенола (Hin) был приготовлен его 6,36-10" М раствор и выполнены следующие спектрофотометрические измерения этого раствора при 25° С и 300 нм. В одном из опытов раствор был сильно кислым и его поглощение А составляло 0,142. В этих условиях все индикаторы принимают форму Hin. В другом опыте раствор был сильно щелочной и поглощение А2 составило 0,943. При этих условиях все индикаторы принимают форму 1п". Затем, в серии дополнительных опытов, pH раствора индикатора регули- [c.141]

На рис. X. 21 в качестве примера приведена кривая поглощения раствора нейтрального красного. Она содержит две полосы поглощения. Положение полосы определяется длиной волны или волновым числом, соответствующим максимуму поглощения, а ее интенсивность — значением оптической плотности на длине волны этого максимума. Интенсивность характеризуют молярным или удельным коэффициентом поглощения. Условия, при которых производились спектрофотометрические измерения, фиксируются в виде краткой записи в подписи к рисунку, иногда также указываются значения молярного коэффициента поглощения на максимумах и минимумах кривой поглощения. [c.646]

Определение истинной константы диссоциации кислоты НА заключается в нахождении значений р/С с помощью измерений э.д.с. элемента (VII) с переменным содержанием M I и спектрофотометрических измерений, позволяющих найти логарифм отношения концентраций протолитических форм кислоты. Полученные значения р/С представляют графически (рис. X. 30) в виде функции корня квадратного из ионной силы, а для I — I-валентного электролита — корня квадратного из концентрации соли M I. [c.658]

Экспериментальная часть работы заключается в измерении электродвижущей силы Е элемента (VII) и спектрофотометрических измерениях оптической плотности исследуемого раствора. Кроме того, необходимо найти стандартную э.д.с. элемента (VII) и определить значения молярных коэффициентов поглощения кислоты к ее аниона, т. е. значения и бд-. Экспериментально найденные величины позволяют вычислить значения р/С по уравнению (X. 131). [c.664]

Потенциометрические и спектрофотометрические измерения следует проводить при одной и той же температуре. [c.664]

Растворы для потенциометрических и спектрофотометрических измерений готовят так, чтобы обе протолитические формы находились в эквимолекулярных количествах. Добавлением рассчитанного количества хлорида натрия следует получить не менее 3—5 растворов со значениями / = 0,005—0,1, [c.664]

Изучение факторов, влияющих на точность спектрофотометрических измерений [19] — [27], показывает, что причины ошибок в спектрофотометрии могут быть весьма разнообразны и многочисленны. Ошибки возникают, например, за счет действий оператора, условий проведения реакций, недостаточной чистоты кювет, непостоянства их установки в кюветные отделения, невоспроизводимости настройки шкалы прибора на О и 100% пропускания, непостоянства излучения источника освещения, нестабильности работы фотоэлектрической системы [24] — [27]. [c.30]

Пользуясь экспериментальными данными спектрофотометрических измерений, подтвердить графически применимость закона Ламберта — Бера к гидрозолю сернистого черного красителя и определить концентрацию золя при D = 0,55. [c.44]

Спектрофотометрические измерения при разных температурах позволяют найти такие термодинамические ха- [c.33]

Молярный коэффициент погашения е, как показывает опыт, в интервале I—2° от температуры не зависит. Это означает, что необходимость термостатирования в спектрофотометрических измерениях вызывается лишь соображениями о влиянии температуры на константу равновесия. Под точностью термостатирования имеются в виду не только колебания температуры в каком-то данном опыте, но и воспроизводимость заданной температуры в параллельных опытах. [c.234]

Механизм действия оксиэтилированных ПАВ связан с их адсорбцией на глинистых частицах [79, 49]. Рентгеновские, спектрофотометрические измерения, применение радиоактивных изотопов и другие методы показали, что адсорбция проходит с образованием монослоя, перекрывающего активную поверхность глинистых частиц. Такой сильно гидратированный защитный слой действует как барьер, ограничивающий физико-химические взаимодействия между частицами, и проявляется уменьшением пластической вязкости и предельного напряжения сдвига. Плотность укладки и интенсивность притяжения стабилизирующих слоев сохраняются на достаточно высоком уровне и при температурных воздействиях. Это позволяет поддерживать рабочую консистенцию буровых растворов при забойных температурах, доходящих до 200° С. [c.349]

Определение фермента церулоплазмина основано на спектрофотометрическом измерении начальной скорости окисления п-фенилендиамина. Для выбора оптимальных условий эксперимент проводили при постоянной концентрации фермента 13,6 мг/л. На первой стадии исследований был вьшолнен полный факторный эксперимент 2 , где факторами являлись величина pH, температура и концентрация субстрата — п-фенилендиамина (ФДА). [c.500]

УФ-спектрофотометрическое измерение проводят обычно в растворах. В качестве растворителей используется дистиллиро- [c.49]

Спектрофотометрические измерения показали, что в случае пиридоксина ]д/С1=8,89, а 1д/С2=4,94. Эти значения в сочетании с экспериментально определенной величиной таутомерного отношения Я позволили-определить микроскопические константы. [c.255]

Данные по растворимости гидроокиси [3, гл. 9] и салицилата плутония(IV) [100] в концентрированных карбонатных растворах, а также спектрофотометрические измерения [60, стр. 73], несомненно, указывают на комплексообразование Pu(IV) с карбонат-ионами. Константа устойчивости иона Ри( Оз) + равна [c.45]

Отмеченные эффекты незначительны, но для точных спектрофотометрических измерений необходимо поддерживать концентрацию кислоты в более узких пределах. [c.152]

Несмотря на то, что растворы комплекса тория с реагентом стабильны в течение 24 час. [1946], спектрофотометрические измерения производят в двухчасовом интервале после приготовления раствора, чтобы свести к минимуму источник ошибок, возникающих в связи с уменьшением светопоглощения вследствие окисления реагента небольшим количеством присутствующей в растворе азотной кислоты. [c.190]

Окисление гуматов ведет к уменьшению их молекулярного веса и конденсированности и появлению новых функциональных групп. Это усиливает взаимодействие с глиной лишь до определенного предела. Ультрафильтрация и диализ показали, что по мере снижения молекулярного веса сужается диапазон добавок хроматов, обеспечивающих разжижение фракции с молекулярной степенью дисперсности уже не обладают стабилизирующей способностью. Об уменьшении конденсированности свидетельствуют спектрофотометрические измерения (табл. 8), в частности, уменьшение оптической плотности и рост отношения коэффициентов экстинкциж при длинах волн 465 и 665 ммк (Е /Е ). Это отношение у гуминовых кислот находится в пределах 3—5, а у фульвокислот — 6—8,5. [c.117]

В настоящее время метод остановленной струи широко приме-ляется для решения многих задач химической кинетики установление механизмов химической реакции, определение стадий, лимитирующих протекание реакции обнаружение промежуточных комплексов, определение кинетики ферментативных реакций, установление числа и концентрации активных центров фермента, изучение быстрых конформационны5( переходов в белках и нуклеиновых кислотах. Метод требует быстрой регистрации это единственное существенное ограничение его применимости. Особое внимание при применении метода остановленной струи необходимо уделять тер-мостатированию, так как разница в температурах в кювете наблюдения и растворе смеси реагентов может привести к большим оптическим ошибкам, затрудняющим установление механизма наблюдаемой реакции. Точность определения констант скоростей данным методом примерно такая, как и при обычных спектрофотометрических измерениях кинетики химических реакций. [c.28]

Отклонения, вызываемые не строго монохроматическим излучением. Закон Бугера — Ламберта — Бера точно справедлив только для монохроматического излучения. В спектрофотометрических измерениях применяют монохроматоры, т. е. спектральные аппараты, которые снабжены выходной щелью, вырезающей из спектра узкий участок. Но монохроматор может дать строго монохроматическое излучение только в том случае, если он снабжен бесконечно узкой щелью. В действительности реальные аппараты снабжены щелью какой-то определенной ширины, что вызывает некоторое отклонение от закона Бугера — Ламберта—Бера. Особое значение немонохроматичность излучения приобретает при измерениях в инфракрасной области спектра. [c.246]

Неизвестные молярные коэффициенты поглощения протони-рованной формы индикатора (енл), его аниона (ед) и раствора (е), содержащего обе формы, определяют из данных спектрофотометрических измерений. Значения pH растворов находят с помощью стеклянного электрода. Для повыщения точности определения /Сн1п значения pH растворов задают близкими к искомому значению кажущейся константы диссоциации индикатора. Эта величина может быть найдена методом сравнительной колориметрии, который дает ее приближенное значение. [c.662]

Определение белка. Для определения концентрации белка методом Лоури необходимо предварительно осадить его трихлоруксусной кислотой (с. 81). Спектрофотометрическое измерение можно проводить при условии, когда из раствора фосфорилазы удален АМФ, при этом отнощение Л260М280 равно 0,52—0,55 для расчета используют коэффициент А ° 1см= 13,2 при 280 нм. [c.221]

Рассмотрим в первую очередь ошибки, вытекающие из самой сущности законов поглощения излучений, и основные закономерности, установленные еще в 1937 г. Туайменом и Лотианом [19]. Найденная ими зависимость ошибки измерения А от ее абсолютного значения является определяющей в оценке ошибок спектрофотометрических измерений. [c.30]

Определение белка. Для определения концентрации фосфоглюкомутазы используют метод Лоури (см. с. 81). При спектрофотометрическом измерении регистрируют оптическую плотность при 278 нм, учитывая, что Л °А1см=7,0. [c.228]

Начиная с 50-х годов XX в. большой вклад в изучение ИК-спектров поглощения внесли ученые японо-американской школы (С. Мидзусима, К. Накамото, К. Наканиси, Ф. А. Миллер, К. Уилкинс и др.), немецкие исследователи (А. Симон, Г. Зиберт, В. Бек и др.), ученые других стран. ИК-спектры поглощения сотен неоргантеских и координационных соединений подробно изучены в шестидесягые—восьмидесятые годы XX в. в Институте общей и неорганической >лмии имени Н. С. Курнакова в Москве. В результате всех этих исследований ученых различных стран было выяснено, что ИК-спектр каждого индивидуального соединения специфичен и неповторим, подобно отпечаткам пальцев индивидуального человека, установлены интервалы групповых характеристических частот, созданы многочисленные атласы ИК-спектров поглощения различных соединений, разработаны методики количественных спектрофотометрических измерений в ИК-области спектра. [c.45]

Обычно спектрофотометрические измерения проводят в таких условиях, когда оптическая плотность исследуемого раствора лежит в 1феде-лах А = 0,2—0,8, так как именно при таких значениях оптической плотности достигается минимальная ошибка спектрофотометрических измерений. [c.528]

Структуру свеженапыленных пленок молибдена и ванадия, а также отожженных при температурах 600, 900, 1150° С исследовали методом поглощения света в области длин волн 350 —500 нм в случае молибденовых пленок, и 350—580 нм для пленок ванадиевых, а также методом электронной микроскопии. Спектрофотометрические измерения давали также информацию об образовании промежуточных фаз и установлении химических связей металлическая пленка — подложка. [c.16]

Принципы работы с этими оптическими метками во многом те же, что и с радиоактивными метками, за исключением того, что метод детектщ)Ования включает спектрофотометрическое измерение. Однако большинство прямых методов с колориметрической меткой, когда длины волн возбуждения и детектирования совпадают, редко достигают высокой чувствительшсти в иммунном анализе. Но можно получить улучшение на порядок величины, разделив эти длины волн. Существует дна основных класса меток, пригодных для этого флуорофоры и хемилюминесцеитиьш реагенты. [c.585]

Спектрофотометрические измерения [169 241, стр. 112 560] показали, что спектр гидратированного иона РиОа " сохраняется неизменным до pH 3,3—3,6. При pH более 3,5 происходит падение интенсивности абсорбционной полосы при 830 ммк, появление полосы в области 845 ммк, и некоторый сдвиг максимумов в длинноволновой части спектра. Очевидно, эти довольно значительные изменения связаны с гидролизом Ри(У1). [c.36]

Весьма интересен метод приготовления Pu(V), предложенный Маркиным и Мак-Кеем [536] и основанный на быстром установлении равновесия между ионами плутония по реакции (22) (стр. 55). Равные объемы растворов Pu(VI) и Pu(lII) в 0,2 М HNO3 с концентрацией каждого компонента 2 мг/мл смешивают в присутствии 0,1%-ного раствора дибутилфосфата в бензоле. Образующийся в процессе реакции между Pu(Vl) и Pu(lll) четырехвалентный плутоний экстрагируется в органическую фазу, а пятивалентный плутоний остается в водном слое. Pu(Vl) и Pu(lll) полностью превращаются в Pu(IV) и Pu(V) благодаря выводу Pu(lV) из системы. Как показали спектрофотометрические измерения, после 15-минутной экстракции в водной фазе оставался только Pu(V). [c.67]

Анализ объединенного фильтрата показал, что коэффициенты очистки плутония от примесей составляют 111 (Fe) 300 (Со) 52 (Zr) 47 (Мо) >16 (Ru) и 44 (Се). Очистка от этих элементов по той же методике проходит гораздо хуже на анионите ам- ерлит IR4B. Как показали спектрофотометрические измерения светопоглощения Ри(И1) при 602 ммк [449], десорбция плутония с анионита дауэкс-1 10%-ным раствором NH2OH HNO3 проходит на 99,7—99,8%. [c.362]

При спектрофотометрических измерениях для сравнения используют раствор, содержащий ту же самую кони- И гр цчл р1ч1гснта с тем же значе-ннe i pH. Из tepelIllя светопоглощения растворов проводят на спектрофотометре (модель 01) при длине волны 545 [c.192]