Белки биуретовая реакция

БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — цветная реакция, которую дают с солями меди в щелочной среде биурет H2N ONH ONH2, амиды и имиды кислот, полипептиды, белки и другие соединения, содержащие группировки —СО—NH—, Б. р. — цветная реакция на белок — лежит в основе его количественного колориметрического определения. Если к щелочному раствору белка прибавить раствор uSO , появляется фиолетовое окрашивание. Чувствитель-1юсть Б. р. невысока. [c.45]

Белки относятся к высокомолекулярным соединениям. Молекулярная масса их 20 000 и даже 15 000 000 у. е. Они растворяются в воде, образуя коллоидные растворы (вследствие огромных размеров молекул). Белки устойчивы лишь в определенных условиях. При повышении температуры происходит необратимая коагуляция белков, а под действием электролитов — обратимая. Первая характерная для белков реакция ксантопротеиновая—реакция с азотной кислотой. Под действием азотной кислоты белок свертывается, образуя сгусток оранжевого цвета. Вторая характерная реакция на белки — это биуретовая реакция — фиолетовое окрашивание белка при взаимодействии его с гидроксидом меди. [c.371]

Цветные реакции белков. Биуретовая реакция. При взаимодействии в щелочной среде с солями меди (Си504) все белки дают фиолетовое окрашивание. Аналогичную реакцию дает уже упомянутый ранее биурет (стр. 215), откуда и происходит название этой реакции [c.296]

Раствор белка Раствор гидроксида калия раствор сульфата меди Окраска красно-фиолетовая (биуретовая реакция) [c.241]

Продукты распада белка — полипептиды — также дают биурето-вую реакцию. Цвет образующихся медных комплексов определяется числом аминокислот, связанных пептидной связью. Дипептиды дают синюю окраску, трипептиды — фиолетовую, а тетрапептиды и более сложные пептиды — красную. Фиолетовый цвет медного комплекса с белком в условиях проведения биуретовой реакции указывает на преобладание в сложной белковой частице трипептидных группировок (это подтверждается и другими данными). [c.120]

Биуретовая реакция на белки. В пробирку с 1 мл 10%-ного раствора яичного альбумина вливают 1 мл 10"6-ного раствора едкого натра и 2 капли 2%-ного раствора медного купороса. Появляется красно-фиолетовое окрашивание, указывающее на наличие в белковой молекуле пептидных связей —СО—КН—. [c.120]

В чем заключается сущность биуретовой реакции на белках [c.394]

Вулканическая деятельность во всех ее проявлениях играла в этом отношении выдающуюся роль. Обогащая обширные зоны поверхности, в том числе и те, которые граничили с водоемами, соединениями металлов, вулканы способствовали развитию каталитических реакций. Вещества, выбрасываемые во время извержений, получаются в активном состоянии это, например, оксид кремния (IV) в форме высокопористой массы —пемзы, образующейся при застывании кислых лав (ее пористость достигает 80%) и др. Другой важной породой, которая могла функционировать и как адсорбент, фиксирующий на своей поверхности разнообразные частицы, и как катализатор, является глина. Глины относят к числу древнейших пород. Глинистые минералы (например, монтмориллонит) имеют пластинчатое строение силикатные слои, максимальное расстояние между которыми равно приблизительно 1,4 нм, разделены слоями молекул воды толщина этих слоев может изменяться в широких пределах. Глины обратимо связывают катионы и таким образом могут служить в качестве регулятора солевого состава окружающей водной среды. Скопление органических веществ на поверхности глинистых минералов, возможно, сыграло решающую роль в появлении предбиологических структур и возникновении жизни (Д. Бернал). По Акабори, из формальдегида, аммиака и циановодорода в абиогенную эру образовался амино-ацетонитрил, который подвергался гидролизу и полимеризации на поверхности глин, образуя вещества, близкие к белкам. Акабори показал, что нагревание аминоацетонитрила с кислой глиной ведет к появлению продукта, дающего биуретовую реакцию (реакция на белок). Твердые карбонаты, которые входят в большом количестве в состав земной коры, вероятно, катализировали процесс образования углеводов. Гидроксид кальция также может служить катализатором в таких процессах. Исходным веществом для синтеза углеводов служит формальдегид. Прямым опытом доказано (Г. Эйлер и А. Эйлер), что гликолевый альдегид и пентозы получаются из формальдегида в присутствии карбоната кальция. Схему образования углеводов из простейших соединений предложил М. Кальвин. [c.377]

Характерная для пептидов и белков биуретовая реакция заключается в образовании комплекса Си с пептидной группой [c.455]

Белки, их химические и физико-химические свойства. Методы выделения и очистки белков классические —диализ, высаживание из растворов современные — распределительное и ионообменное хроматографирование, хроматографирование па молекулярных ситах, электрофорез. Индивидуальность белков. Цветные реакции белков биуретовая, ксантопротеиновая, нингидринная, реакция Миллона. Первичная, вторичная, третичная и четвертичная структуры белков, факторы, опре- [c.248]

Биуретовая реакция является не только качественной, но и количественной. Она позволяет следить за ходом гидролиза белков и устанавливать содержание пептидов в смесях с различной длиной цепи. Значительный вклад в изучение биуретовой реакции и способов ее использования для определения строения белков внесли Н. И. Гаврилов,. М. И. Плехан и К- Т. Порошин. [c.504]

Еще в 1888 г. А. Я- Данилевский высказал гипотезу о том, что различные а-аминокислоты, образуя белки, соединяются за счет аминогрупп и карбоксильных групп при помощи группировки —СО—НН—, впоследствии названной пептидной связью. Наличие пептидных связей в белках доказано многими фактами. В первую очередь оно подтверждается присутствием в продуктах гидролиза белков полипептидов — веществ, содержащих пептидные связи. Белки, как и полипептиды, дают так называемую биуретовую реакцию, характерную для соединений с пептидными связями (стр. 296). [c.290]

Биуретовая реакция. Прн прибавлении к раствору белка едкого натра и нескольких капель разбавленного раствора сернокислой меди получается фиолетовое окрашивание. Этой реакциерТ часто пользуются для качественного открытия белка. [c.388]

Колориметрический метод определения количества белка по биуретовой реакции. Этим методом непосредственно определяют количество белка в растительных продуктах, используя цветную реакцию белка, обработанного концентрированным раствором щелочи с USO4. Белок исследуемого образца (муки, зерна и т. п.) переводят в раствор, с которым проводят биуретовую реакцию. Эта реакция характерна для пептидной связи, она получила свое название от производного мочевины — биурета, образующего с щелочным раствором USO4 комплексное соединение фиолетового цвета. [c.54]

Биуретовая реакция обладает высокой чувствительностью. При разбавлении белка 1 10 ООО получают положительную цветную реакцию. [c.55]

В щелочном растворе биурет при добавлении раствора медного купороса образует фиолетовую окраску. Это биуретовая реакция. Биуре-товая реакция характерна для всех белков. [c.416]

Для обнаружения пептидных связей в пептидах и белках жит биуретовая реакция (см. 7.5), в которую вступают Ь пептиды и белки, содержащие по крайней мере две такие 1зи. [c.335]

С фильтратом проделывают биуретовую реакци о. Кс-ли произошло полное осаждение белков, она должна быть отрицательной. [c.20]

Биуретовая реакция (реакция Пиотровского). В щелочной среде белки, а также продукты их гидролиза — полипептиды дают фиолетовое или красно-фиолотовос окрашивание с солями меди. Реакция обусловлена наличием пептидных связей. Положительная биуретовая реакция проявляется у соединений, содержащих не менее двух [c.6]

Проделывают с раствором белка биуретовую реакцию. [c.30]

Биуретовая реакция позволяет определять соединения, содержащие не меньше двух пептидных связей. Кроме белков, биуретовую реакцию дают мочевина и оксамид. [c.292]

Приблизительно через час берут из стакана по 1—2 мл воды и убеждаются в наличии там ионов хлора (реакция с азотнокислым серебром в присутствии азотной кислоты) и в отсутствии белка (биуретовая реакция отрицательна) [c.30]

Часть полученного вещества поместите в маленькую пробирку, капните немного, буквально 2-3 капли, азотной кислоты и дождитесь, пока муцин пожелтеет. Теперь капните столько же концентрированного раствора щелочи (можно взять раствор аммиака) - и цвет станет оранжевым. Такая реакция называется ксантопротеиновой, она характерна для белков. Вместо нее можно провести биуретовую реакцию, описанную в главе "Опыты с белком", -ив том и в другом случае подтвердится белковая природа вещества. [c.154]

Синтезированная по этому типу глициновая модель микромолекулы белка, содержавшая одно пиперазиновое ядро и две трипептидных белковых цепи, по данным авторов (И. Д. Зелинский, Н. И. Гаврилов, Л. Н. Акимова, Журнал общей химии, 18, 960, 1948), обладала амфотерным характером, давала типичную для белков биуретовую реакцию и гидролизовалась протеолитическими ферментами желудочного и кишечного сока. [c.131]

Биуретовую реакцию (сине-фиолетовое окрашивание в присутствии раствора сульфата меди в щелочной среде) дают как биурет, содержащий пептидную связь, так и белки, что также является доказательством наличия в белках аналогичных связей. [c.51]

Метод основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот с реактивом Фолина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные связи. Метод характеризуется высокой чувствительностью (10—100 мкг белка в пробе). На развитие окраски влияет большое количество веществ компоненты буферных систем (трис-буфер в концентрации 0,2 мМ, глицилглицин), восстановители (цистеин, дити-отреитол в концентрации 0,01—0,4 мМ, аскорбиновая кислота), комп-лексоны (ЭДТА в концентрации 0,5 мМ), детергенты (тритон Х-100 в концентрации 0,1—0,2% вызывает выпадение осадка), сернокислый аммоний в концентрации 0,15%, сахароза в концентрации 10% и др. [c.81]

СО—обладающего характерным максимумом поглощения при 555 нм. Интенсивность окраски определяется в данном случае лишь количеством пептидных связей. Биуретовая реакция пригодна для определения белка в концентрации 0,25— 25 мг/мл, причем выход окраски стандартизуют по чистому белку. Биуретовую реакцию можно проводить в пробирках и в проточной системе. 0,1—4 мл раствора белка (1—5 мг белка) разбавляют до 5 мл раствором А (0,85%-ный хлорид натрия), прибавляют 5 мл раствора Б и полученную смесь нагревают на водяной бане при 32 °С в течение 30 мин. Количество белка определяют путем измерения оптической плотности при 555 нм. Раствор Б готовят следующим образом к раствору виннокислого калия—натрия (45 г) прибавляют при перемешивании 15 г сульфата меди uS04 5НгО, 5 г иодида калия и разбавляют до 1 л 0,2 М гидроокисью натрия (не содержащей углекислого натрия). Раствор гидроокиси натрия готовят путем нагревания до 90 °С 50%-ного едкого натра в течение 24 ч и после отделения от выпавшего углекислого натрия разбавляют прокипяченной водой. [c.456]

В яичном белке, долго стоявшем с формалином, от прибавления 17V НС1 выпадал осадок, который при дальнейшем прибавлении НС1 растворялся. Такой яичный белок продолжал показывать биуретовую реакцию, но тон окраски при этом получался как у альбумоз, обработанных пепсином. То же явление наблюдается у яичного белка при долгом стоянии его и без формалина и при прибавлений кислот или щелочей. [c.172]

В отличие от других цветных реакций на белки биуретовую реакцию дают все без исключения белковые вещества, так как биуретовая реакция не является реакцией на те или иные отдельные аминокислоты. Ни одна аминокислота (за исключением гистидина, серина и треонина, которые в достаточно концентрированных растворах обусловливают появление сходного окрашивания) не дает положительной биуретовой реакции. Именно поэтому после достаточно продолжительного гид ролиза разбавленный гидролизат белка, состоящий из смеси аминокислот, не дает уже положительной биуретовой пробы. Биу]эетовой пробой можно, таким образом, пользоваться для установления конца гидролиза. В связи с этим биуретовая реаки,ия лежит в основе метода приближенного количественного определения малых количеств белка в разбавленных растворах, [c.37]

Какую группировку обнаруживают в белках биуретовой реакцией [c.383]

Это вещество интересно тем, что в щелочной среде с солями меди ( USO4) дает сиреневое окращивание — цветную реакцию, аналогичную той, что характерна для белков (биуретовая реакция см). [c.313]

Цветные реакции белков. Биуретовая реакция. При взаимодействии в щелочной среде с солями меди ( USO4) все белки дают фиолетовое (при сильном разбавлении сиреневое) окрашивание. Аналогичную реакцию дает уже упомянутый ранее биурет NHj—СО—NH—СО—NHj (см.), откуда происходит название этой реакции. В биурете имеются две пептидные группировки —СО—NH—, которые и обусловливают появление окраски при взаимодействии с солями меди. Таким образом, биуретовая реакция белков подтверждает наличие в их молекулах пептидных связей. Эту реакцию дают и полипептиды, образующиеся при гидролизе белков. При этом окраска, возникающая при взаимодействии с солями меди, для различных полипептидов не одинакова дипептиды дают синюю окраску, трипептиды — фиолетовую, а более сложные полипептиды — красную. [c.337]

Содержимое пробирок отфильтровывают через бумажные фильтры. В фильтратах—альбумины. Фильтраты подкисляют 17о-ным раствором уксусной кислоты — пояиляются осадки альбуминов. Их отфилмровыиают, а в фильтратах с помоп ыо биуретовой реакции доказывают отсутствие белка. Осаждение белков путем высаливания применяется в промышленности. [c.21]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА С ПОМОЩЬЮ БИУРЕТОВОЙ РЕАКЦИИ [4] [c.69]

Вслед за этим в 1902 г. Гофмейстер выдвинул гипотезу об амидообразной связи аминокислотных остатков в белке, которая и легла в основу полипептидной гипотезы. Она же послужила основанием Э. Фишеру н Т. Курциусу для разработки методов синтеза пептидов. Одновременно с синтезом многочисленных пептидов, завершившихся синтезом нонадека-пептида, проводились исследования то выделению пептидов из белков. Был выделен ряд пептидов, тождественных с синтетическими. Они давали биуретовую реакцию и расщеплялись протеолитическими ферментами высшие пептиды обладали коллоидны ми свойствами. Все эти факты в тот период были достаточным подтверждением выдвинутой полипептидной теории. Однако методы органической химии, применявшиеся для выделения пептидов из гидролизатов белков, а именно фракционированная кристаллизация, извлечение органическими растворителями, получение производных и т. д. оказались для этой цели мало пригодными. Число выделенных пептидов было настолько незначительным, что возникли сомнения в справедливости выдвинутой теории. [c.520]

Биуретовая реакция. К водному раствору белка приливают в избытке крепкой щелочи (10 — 25% ного раствора NaOH) и 2 — 3 капли слабого раствора (0,3%-ного) медного купороса. В результате [c.20]

При промывании подкисленной до pH = 4,8 водой комнатной температуры биуретовая реакция в промывных водах была отрицательной. Алкалоиды удалялись до полного отсутствия горького вкуса в муке. При этом если для удаления их дестиллированной водой требовалось двое суток, то при подкисленной до изоэлектрического пункта воде промывка длилась одни лишь сутки. При этом наблюдалась интересная картина выщелачивания белка из зерен муки и коагуляция его. В промывном сосуде образовалось два слоя нижний — мука и верхний—белковое вещество (рис. 25). [c.113]

Мешающие соединения. Пептиды, трис, сахароза и желчные пигменты дают окраску в биуретовой реакции соли аммония, трис, сахароза и глицерин оказывают влияние на окраску, даваемую белками. Липиды и детергенты могут вызывать помутнение. [c.466]

Необходимые для постановки этой реакции количества антигена и антисыворотки зависят от чувствительности выбранного метода определения белка. Так, например, при использовании микрометода Кьельдаля в модификации Маркхема вполне достаточно, чтобы иммунная сыворотка содержала 75—125 мкг азота антител. При использовании биуретовой реакции требуется вдвое [c.126]

Рис. 12. Прибор для диализа, фугат испытывают на присутствие белков с помощью биуретовой реакции отрицательная реакция показывает полноту осаждения белков.

В колбу Эрленмейера насыпают 20—25 г измельченного материала, заливают 100 мл дистиллированной воды, 1 ч взбалтывают в шуттель-аппарате, затем помещают в холодильник при 0° С на 15—18 ч. После этого раствор белка центрифугируют в течение 10 мин при 3000— 4000 об/мин. Центрифугат сливают в большой стакан. Осадок гомогенизируют с водой, наливают в колбу Эрленмейера, взбалтывают 30— 40 мин и центрифугируют. Второй центрифугат сливают в тот же стакан, что и первый. Такую экстракцию повторяют 4—5 раз до отрицательной реакции на белок (биуретовая реакция). [c.44]

Качественную биуретовую реакцию проводят обычно с< дующим образом. К 5 мл раствора белка прибавляют 1 мл 30%-ного раствора ЫаОН или КОН и 2—3 капли 1%-ного раствора USO4, при взбалтывании появляется фиолетовое окрашивание. Не следует прибавлять избыток USO4, так как фиолетовая окраска становится незаметной (она маскируется синей) в присутствии пептонов и полипептонов раствор приобретает красный оттенок. [c.55]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология