Нейтрализация вируса антителами

Нейтрализация вируса антителами [c.25]

Идентификация по антигенной структуре. Реакция нейтрализации PH). Реакция нейтрализации инфекционного и цитопатического действия вирусов воспроизводится в чувствительных к вирусу живых системах. PH основана на нейтрализации инфекционной активности вирусов при связывании со специфическими противовирусными антителами. [c.270]

В то время как основными антителами, ответственными за нейтрализацию вирусов в сыворотке, являются IgG и IgM, антитела IgA — основной класс антител, нейтрализующих вирус на поверхности слизистой. Следовательно, секреторные IgA являются важным компонентом в системе, обеспечивающей устойчивость к вирусам, которые обычно проникают в организм через респираторные пути или через кишечник. Более того, чтобы индуцировать на участке слизистой хороший секреторный IgA-ответ, необходима местная иммунизация. Классическим примером может служить живая пероральная [c.25]

Защитная функция. Основную функцию защиты в организме выполняет иммунная система, которая обеспечивает синтез специфических защитных белков-антител в ответ на поступление в организм бактерий, токсинов, вирусов или чужеродных белков. Высокая специфичность взаимодействия антител с антигенами (чужеродными веществами) по типу белок-белковое взаимодействие способствует узнаванию и нейтрализации биологического действия антигенов. Защитная функция белков проявляется и в способности ряда белков плазмы крови, в частности фибриногена, к свертыванию. В результате свертывания фибриногена образуется сгусток крови, предохраняющий от потери крови при ранениях. [c.21]

В лабораторной диагностике ОРЗ наиболее широкое применение нашли экспресс-методы иммунофлюоресценция и рино-цитоскопия, позволяющие в течение 2—3 ч поставить ориентировочный диагноз. Вирусологические методы с выделением И идентификацией возбудителя используются преимущественно Цля эпидемиологического анализа вспышек заболеваний, вызываемых данными вирусами. Серологическая диагностика при гриппе и других ОРЗ носит ретроспективный характер, так как накопление антител происходит в период реконвалесценции (через 2—3 нед после начала заболевания). Несколько более раннее накопление антител характерно для детских инфекций. Для серодиагностики используют РТГА, РСК и реакцию нейтрализации вируса. [c.231]

К основным методам обнаружения реакций антиген — антитело относятся следующие а) реакции преципитации и агглютинации, в том числе образование линий преципитации, появляющихся на пластинках с агаровым гелем между лунками, содержащими антитела и антигены, которые движутся навстречу друг другу либо в результате простой диффузии, либо под действием электрического поля (при электрофорезе) б) реакция нейтрализации инфекционности вируса специфическим антителом [c.46]

Комплемент усиливает нейтрализацию вирусов антителами. Это достигается благодаря увеличению размеров комплекса вирус—антитело и включению СЗЬ в комплексы, которые затем способны связываться с находящимися на фагоцитарных клетках рецепторами к СЗЬ. Антитела и комплемент могут также непосредственно лизировать вирусы, имеющие липидную оболочку. [c.27]

Чужие белки часто включаются в тело как часть болезнетворных агентов -вирусов, бактерий, грибков, паразитов. Химия тела так сильно зависит от наличия нужных белков в определенном месте, в определенное время и в нужном количестве, что при появлении чужого белка сразу вырабатывается сигнал для нейтрализации возможной опасности. Стратегия защиты организма иммунной системой заключается в синтезе белков, окружающих часть молекулы чужого белка. Опять биохимическое взаимодействие становится возможным из-за соответствия формы молекул антител и антигенов (свойство комплементарности). Если молекула захватчика будет окружена, она не сможет причинить вреда. [c.486]

Иммунитет направлен на нейтрализацию и удаление из организма вируса, его антигенов и зараженных вирусом клеток. Антитела, образующиеся при вирусных инфекциях, действуют непосредственно на вирус или на клетки, инфицированные им. В этой связи выделяют две основные формы участия антител в развитии противовирусного иммунитета [c.29]

Если же предполагается использовать полученные антитела для парентерального введения, необходимо принять более серьезные меры для нейтрализации потенциально опасного действия ВЭБ (особенно если больной находится в состоянии иммуносупрессии). Чтобы инактивировать вирус, можно, например, подвергнуть культуральную среду или препарат антител интенсивному ультрафиолетовому облучению. [c.162]

Основная, первичная функция антител - связывание с антигеном. В некоторых случаях оно непосредственно ведет к достижению эффекта, например обеспечивая нейтрализацию бактериального токсина или предотвращая проникновение вируса в клетки. Однако чаще взаимодействие антител с антигеном остается безрезультатным, пока они не осуществят свои вторичные, эффекторные функции (см. рис. 6.17i 6.18). [c.106]

Реакция нейтрализации при исследованиях с вирусами полиомиелита применяется в двух основных модификациях. В одном случае с ее помощью производят идентификацию выделенных вирусов, в другом — ее используют для определения титров антител в сыворотках. [c.137]

Одним из вариантов PH является цветная проба (колориметрическая реакция нейтрализации). При положительном результате противовирусные антитела блокируют размножение вируса в культуре клеток, и под действием кислых метаболитов последних в среде меняется цвет индикатора. В пробирки вносят по 0,25 мл рабочего разведения вируса (100—1000 ЦПД50) и соответствующего разведения сыворотки. Смесь выдерживают при комнатной температуре 30 — 60 мин, добавляют в каждую пробирку по 0,25 мл клеточной суспензии и закрывают их резиновыми пробками или заливают стерильным вазелиновым маслом. Пробирки помещают в термостат на 6 —8 дней при 37 С. Результаты реакции учитывают колориметрически pH 7,4 и выше указывает на репродукцию вируса, 7,2 и ниже — на нейтрализацию вируса антителами. [c.271]

Нейтрализация вирусов антителами. Хотя фагоцитоз опсонизированных антителами вирусов служит, по-видимому, важнейшим механизмом клиренса находящегося [c.143]

Следует особо подчеркнуть, что защитное действие противовирусных антител будет зависеть в конечном счете от двух их качеств способности экранировать те участки вирусной частицы, которыми последняя фиксируется на чувствительных к данному вирусу клетках, и опсонизирующих свойств противовирусных антител. Поскольку нейтрализацию вируса антителами можно проверить in vitro, оценивая действие комплекса вирус-антитело на клеточные культуры, две отмеченные выше стороны действия антител можно разграничить [c.144]

Опыт показывает, что моновалентные Fab- или РаЬ -фрагменты противовирусных антител значительно уступают нерасщепленным антителам в нейтрализации вируса в культуре клеток. Такие данные в опытах с полио-вирусом получены, в частности, Ю. Первиковым с соавторами (1975, 1976). Добавление к комплексу вирус-РаЬ-фрагмент нерасщепленных противовирусных антител не обеспечивало полной нейтрализации вируса. Последнее связано, очевидно, с блокированием антигенных детерминант вируса РаЬ-фрагментами, которые сами по себе не обеспечивают эффективного экранирования вириона. Но почему Из-за того ли только, что молекула фрагмента меньше по размеру молекулы антитела [c.144]

Последнее, несомненно, существенно, что было показано Н. Гутман и А. Кульбергом (1973). К вирусу гриппа А прибавляли специфические противовирусные антитела в количестве, недостаточном для полной нейтрализации вируса. Если затем к комплексу добавляли антитела против иммуноглобулинов, эффективность блокирования вируса возрастала в 8—16 раз. Можно было предположить, что обнаруженный эффект связан с более плотным укутыванием поверхности индивидуальных вирусных частиц. Однако это неверно по следующим причинам. Так, оказалось, что при одной и той же дозе вирусспецифических и антиглобулиновых антител усиливающее действие последних в реакции нейтрализации не изменялось при увеличении заражающей дозы вируса в 100 и даже 1000 раз. Если бы результат действия антиглобулиновых антител был связан с более эффективным экранированием каждой индивидуальной вирусной частицы при отсутствии между ними мостиков из антител, для нейтрализации большего числа вирусных частиц потребовалось бы больше как противовирусных, так и антииммуноглобулиновых антител. И, наконец, ЕаЬ-фрагменты антииммуноглобулиновых антител значительно менее эффективно усиливают нейтрализующее действие противовирусных антител по сравнению с нерасщепленными антителами. И это несмотря на то, что на каждую молекулу противовирусного антитела как поливалентного антигена присоединяется несколько (не менее 3—5) молекул ЕаЬ-фрагментов антииммуноглобулиновых антител. [c.145]

Разработка новых методов профилактики и лечения многих заболеваний человека внесла огромный вклад в рост благосостояния людей в XX в. Однако этот процесс никогда нельзя считать завершенным. Так называемые старые заболевания (например, туберкулез) могут дать о себе знать вновь, как только будут ослаблены профи-лактичес1сие меры или появятся резистентные штаммы. Весьма привлекательной выглядит перспектива применения в качестве терапевтических средств специфических антител их можно будет использовать для нейтрализации токсинов, борьбы с бактериями,, вирусами, для лечения раковых заболеваний. Антитело можно уподобить самонаводящейся ракете, которая либо нейтрализует нарушителя - чужеродный агент, либо, если она оснащена боеголовкой , разрушает специфическую клетку-мишень. К сожалению, несмотря на многообещающие возможности, антитела довольно редко применялись для профилактики и лечения болезней и других патологий. И лишь в последнее время, с развитием технологии рекомбинантных ДНК и разработкой методов получения моноклональных антител и с расшифровкой молекулярной структуры и функции иммуноглобулинов, интерес к применению специфических антител для лечения различных заболеваний вновь пробудился. [c.204]

Таким образом, не за счет покрывания антителами индивидуальных вирионов, а благодаря образованию достаточно жесткой решетчатой структуры посредством сшивания антителами вирусных частиц (по типу решетчатой структуры преципитата, см. гл. 12) обеспечивается эффективная нейтрализация вируса разумеется, это происходит при наличии у антитела опсонизирующих свойств, т. е. принадлежности к иммуноглобулинам класса С и сохранения Рс-участка молекулы. [c.145]

Бакли разработала метод титрования антител к ряду трансмиссивных вирусов с помощью реакции задержки гемадсорбции. Первым очень важным моментом является удаление неспецифических ингибиторов гемагглютинации с помощью каолина. Затем сыворотку разводят 1 10 в боратном буфере (pH 9,0). Из данного разведения приготавливают последующие. Равный объем соответствующего разведения сыворотки смешивают с 100 тканевыми гемадсорбирующими дозами. Смесь после инкубации вносят в пробирки с культурой ткани. На 5-й день все культуры исследуют с помощью реакции гемадсорбции. При нейтрализации вируса исследуемой сывороткой гемагглютинины не образовывались и реакция гемадсорбции была отрицательной. [c.166]

Хотя селектированные в результате биопенинга антитела представляют несомненный интерес для научных исследований, их аффинность часто недостаточна для использования в иммунотерапии, нейтрализации вирусов или высокочувствительной иммунодиагностике. Для создания антител с более высоким сродством к целевому антигену на основе отобранных на первом этапе слитых фагов формируют вто- [c.202]

Выделение чистых И. проводится с помощью ионообменных смол с послед, гель-фильтрацией. Для мн. целей используют препараты миеломных И., особенно минорных классов. Антитела выделяют с помощью иммуносорбентов - фиксированных на нерастворимых носителях (напр, целлюлозе) антигенов. Обнаружение и количеств, определение И. разных классов проводят иммунологич. методами с помощью соответствующих антисывороток. Для определения кол-ва антител используют методы преципитации (иммунная р-ция осаждения антигена антителом), агглютинации (взаимод. антитела с двумя клетками), нейтрализации бактерий и вирусов и др. Широкое распространение получают радиоиммунные и ферментно-иммунные методы, обладающие исключительно высокой чувствительностью и позволяющие определять очень малые кол-ва антител (или антигенов) в смесях с др. в-вами. [c.217]

Реакция торможения гемагглютинации РТГА). Эта реакция основана на блокировании вирусных гемагглютининов специфическими антителами. Ее можно рассматривать как частный случай реакции нейтрализации. РТГА может быть использована как для серологической диагностики, так и для идентификации гемагглютинирующих вирусов. Феномен РТГА проявляется в образовании компактного осадка эритроцитов вместо зонтика гемагглютинации. Реакцию проводят на полистироловых пластинах и оценивают по отсутствию склеивания эритроцитов, добавленных к смеси вируса и специфической сыворотки. Для удаления или разрушения неспецифических ингибиторов гемагглютинации сыворотки, используемые для РТГА, предварительно обрабатывают перйодатом калия, каолином, бентонитом, ацетоном или другими веществами. Затем готовят двукратные разведения сыворотки в ИХН и к каждому разведению добавляют равное количество вирусосодержащей жидкости с активностью 4 ГЕ. Смесь инкубируют 30 — 60 мин при необходимой для данного типа вирусов температуре (0,4, 20, 37 °С), а затем добавляют равный объем 0,5 — [c.271]

АНТИТЕЛА — белки, образующиеся в организме при попадании в кровь нек-])ых чужеродных в-в — антигенов — и обладающие способностью избирательно соединяться с теми же антигенами и.ни (п. меньшей степени) со сходны,ми с ними но строению веществами. Действие А. вне организма (in vib o) может выражаться в осаждении растворенных белков и полисахаридов (преципитация), склеивании (агглютинация) или растворении (лизис) бактерий шш эритроцитов, нейтрализации токсинов, инактивации вирусов и блокировании действия др. антите . Действие А. в оргапизме (in vivo) выражается в невосприим- [c.128]

Вопрос о механизме реакции антител с антигенами еще не получил полного разрешения. Несомненна, однако, существенная роль в этом процессе ионных, водородных и ван-дер-ваальсовых связей. Реакция эта, по крайней мере, двухстадийна. Первая стадия протекает очень быстро и не сопровождается видимыми изменениями. Она характеризуется довольно существенным тепловым эффектом ДЯ от 2 до 40 ккал/моль. Вторая стадия взаимодействия антигена с антителом длится часами. В различных системах она может протекать по-разному, сопровождаясь преципитацией (выпадением образовавшегося комплекса в осадок), агглютинацией (слипанием антигенных частичек), лизисом (растворением клеток), нейтрализацией токсинов и вирусов и т. п. [c.112]

Однако при иммунизации животных участками, изолированными из консервативной зоны полипептида, в организме образуются антитела и против этих малоизменчивых участков белка. Этого не наблюдается при иммунизации цельным вирусом или изолированным белком, содержащим антигенные детерминанты. Механизм этого феномена остается пока неизвестным. Он может быть использован при создании вакцин широкого спектра действия. Антитела против консервативных участков белка оболочки вируса гриппа А и В вызывают нейтрализацию всех этих серотипов. Реализация такого подхода означала бы создание нового типа противовирусных вакцин широкого спектра действия. [c.253]

Электрофорез окажется, повидимому, наиболее полезным в области биохимии в качестве метода очистки белков, антител, ферментов, гормонов, вирусов и т. п. При изучении антител, концентрация которых допускает их наблюдение на диаграммах, можно установить расположение и концентрацию антител путем сравнения изображений, полученных до и после осаждения антител специфическими антигенами. Этот случай изучали ва гиперим-мунной лошадиной и кроличьей сыворотках [55—57]. Однако в большинстве случаев концентрация антител лежит ниже предела чувствительности прибора. В таких случаях необходимо прибегать к исследованию выделенных проб (см. стр. 360) при помощи методов дополнительной фиксации, агглютинации, нейтрализации и т. п. [58—60]. [c.377]

Хотя обычно считается, что вирусы гриппа С, подобно вирусу гриппа В, обнаруживаются только у человека, недавно появилось сообщение о выделении вируса гриппа С от свиней на скотобойне в Бейджинге (Китай) [40]. В тестах перекрестной нейтрализации и РТГА было выявлено, что вирусы, выделенные от свиней, являются вирусами гриппа С, отличающимися от референс-штамма С/1233/47. У 19 из 100 обследованных свиней имелись отчетливые титры антител в РТГА к вирусу гриппа С. Это сообщение свидетельствует, что свиньи могут служить природным резервуаром для вируса гриппа С человека. [c.292]

Метод флюоресцирующих антител дает возможность выявить респираторные вирусы в зараженных клеточных культурах в более ннш сроки, чем их индикация по ЦПД или по гемадсорбции, и при весьма малой инфицирующей дозе. С помощью иммунофлюоресцентного метода проводится не только индикация, но и идентификация вирусов парагриппа, РСВ, аденовирусов и микоплазм в зараженных клеточных культурах. Кроме того, после накопления в клеточных культурах можно идентифицировать аденовирусы—в РСК, вирусы парагриппа—в РТГА, РСК и в реакции нейтрализации со специфическими антисыворотками. [c.234]

Участие антител в иммунном ответе проявляется в трех формах нейтрализации, опсонизации, активации системы комплемента (рис. 9.15). Вирусы и внутриклеточные бактерии для своего воспроизведения должны первоначально проникнуть из жидкостей организма в клетку — место своей жизнедеятельности. Оказавшись даже на короткое время, во внеклеточном пространстве, патогены подвергаются нейтрализующему действию антител, что проявляется в блокаде рецепторного взаимодействия патогена и инфицируемой клетки. Иначе, антитела препятствуют предетерминиро-ванному взаимодействию клеточных рецепторов с лигандом на поверхности патогена. Процесс нейтрализации проявляется не только в случаях с корпускулярными антигенами, но и с бактериальными токсинами. [c.238]

Среди систем организма, предназначенных для инактивации и выведения чужеродных химических соединений (ксенобиотиков), иммунная система специализируется на полимерах и более крупных частицах — вирусах, микроорганизмах и т. д. Многие чужеродные полимеры при попадании внутрь организма вызывают иммунный ответ, направленный на нейтрализацию (в биологическом смысле) и выведение антигенов. В особенности это относится к биополимерам (например, экзогенным белкам) и полимерам, содержащим низкомолекулярные группы (гаптены), которые иммунологически не активны сами по себе, но приобретают способность индуцировать выработку антител (иммуногенность) при связывании с полимером-носи-телам, в первую очередь с белком. Если в качестве гаптенов (антигенных детерминант) использовать молекулы низкомолекулярных ФАВ, то образующиеся модифицированные ФАВ белки называются конъюгированными антигенами (КА) [208]. Они способны индуцировать выработку антител, специфичных к ФАВ, при введении в организм животных, в то время как [c.142]

Антитела, играющие важную роль в подавлении вирусных инфекций, используют для выявления иммунитета к вирусам. Согласно полученным in vitro достоверным доказательствам, антитела классов IgG и IgM эффективно нейтрализуют вирус в жидкой фазе [11, 12, 35]. Это может быть результатом предотвращения связывания вируса со. специфическими клеточными рецепторами или результатом агрегации вирусных частиц, вызванной антителами. Соединение вирусов с IgG-антителами способствует фагоцитозу мононуклеарными клетками и полиморфноядерными лейкоцитами, осуществляемому с помощью имеющихся на этих клетках F -рецепторов. Однако этот последний процесс может усиливать репликацию некоторых вирусов (см. выше). Дальнейшее понимание процессов, необходимых для нейтрализации, может прийти в результате исследований с моноклональными антителами. Например, моноклональные антитела к белку Е1 вируса Синдбис, которые in vitro не нейтрализуют вирус, тем не менее обеспечивают защиту при введении in vivo. Показано, что эти антитела распознают вирус-специфические участки на зараженных клетках, но не распознают их на вирионах и что для эффекта защиты необходима активация антителами комплемента [43]. [c.25]

Моноклональные антитела к поверхностному гликопротеину Е2 альфавируса Синдбис нейтрализуют инфекционность вируса [165]. Однако моноклональные антитела к гликопротеину EU также присутствующему на поверхности этого вируса, не способны к такой нейтрализации. Тем не менее как нейтрализующие, так и ненейтрализующие антитела предотвращают летальные энцефалиты у мышей [165]. Ненейтрализующие антитела к Е1 проявляют свой защитный эффект совместно с комплементом, лизируя зараженные клетки, имеющие на поверхности антиген Е1. Моноклональные антитела к единственному поверхностному гликопротеиновому антигену вируса желтой лихорадки (флавивируса) нейтрализуют инфекционность. Наконец, следует отметить, что иммунитет к вирусу гепатита В опосредуется его поверхностным гликопротеиновым антигеном [178]. [c.147]

События, происходящие на молекулярном уровне с момента присоедйнения вируса к клетке и до начала трансляции, пока не удается воспроизвести шаг за шагом, используя очищенный вирус и компоненты клетки. Поэтому мы вынуждены применять непрямые подходы, например электронно-микроскопические исследования [68] или анализ последовательных изменений физико-химических свойств вируса [65, 174]. Например, при инкубации комплекса вирус—клетка при 37 °С вирус становится все труднее извлечь из комплекса при помощи таких воздействий, как понижение pH, введение дезоксихолата натрия, додецил-сульфата натрия, 8М мочевины или 6М хлористого лития. С этим постепенным увеличением прочности связывания коррелирует уменьшение чувствительности комплекса вирус—клетка к нейтрализации специфическими антисыворотками [129, 188, 326] этот процесс, вероятно, связан с проникновением вируса через клеточную мембрану ( виропексис , или фагоцитоз), где он становится недоступным для антител. [c.220]

Результаты исследований in vivo и in vitro, описанные выше, ясно указывают на важнейшую роль сегмента S1 и белка al в связывании и проникновении реовируса в клетку. Получение моноклональных антител к этому белку [48] позволило определить функции отдельных доменов или эпитопов al. Выращивая реовирус типа 3 в присутствии моноклональных антител против главного нейтрализующего участка al, можно получить клоны вируса, устойчивые к нейтрализации. Несколько таких вариантов охарактеризовано. Варианты А, F и К оказались существенно менее вирулентны, чем исходный штамм (табл. 20.12) [292— [c.302]

Реовирусную инфекцию можно диагностировать не только в результате выделения вируса, но и с помощью серологических реакций [241]. При этом обычно предпочитают использовать реакцию торможения гемагглютинации, а не реакцию нейтрализации или связывания комплемента. Признаком острой реовирусной инфекции считают повышение титра подавляющих гемагглютинацию антител в четыре и более раза. Как мы говорили, при инфекции реовирусом типа 3 образуются обычно только гомотипические антитела, в то время как заражение реовирусами типов 1 и 2 часто вызывает как гомотипический, так и гетеротипический иммунный ответ. [c.319]

Титрование антител можно проводить как путем постановки реакции нейтрализации определенной дозы вируса восходящими разведениями сыворотки, так и путем постановки реакции нейтрализации последующих разведений вируса сывороткой, неразведен-ной или разведенной 1 2. [c.137]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология