Двухсубстратные реакции

При этом для ряда ферментативных реакций последовательность присоединения субстратов к ферменту не имеет существенного значения (беспорядочные двухсубстратные реакции), в других случаях необходим строго определенный порядок присоединения субстратов к ферменту для того, чтобы реакция могла осуществиться (упорядоченные двухсубстратные реакции). [c.36]

Вычисление кинетических констант по этим уравнениям при исследовании зависимости стационарной скорости от концентраций [5(1)]о и [8(2)]о представляет серьезные технические трудности. Поэтому в практике исследований кинетики двухсубстратных реакций обычно принято измерять зависимость скорости от концентрации одного из субстратов, сохраняя концентрацию второго постоянной и значительно большей, чем первого. Тогда, если имеется значительный избыток субстрата 8(2), уравнение (VII.3), [c.67]

Это уравнение по форме аналогично уравнению Михаэлиса, при помощи которого может быть найдено отнощение к+ /к+х. Если известна концентрация фермента [Е]о, то также может быть найдена +3, а отсюда к+х. Видоизменяя условия опытов и исследуя кинетику реакции при постоянной [5(1)]о и меняющейся [5(з)]о, можно отыскать значение к+х. Следует, однако, сказать, что не все двухсубстратные реакции подчиняются приведенным закономерностям и в каждом отдельном случае необходима проверка применимости уравнений. [c.68]

Некоторые двухсубстратные реакции, как оказалось, подчиняются закономерностям, основанным на упрощении кинетической схемы. [c.68]

В случае кинетического исследования двухсубстратных реакций при выборе некоторых специальных условий экспериментов можно получить приближенное решение задачи определения кинетических констант. Во всех рассмотренных здесь случаях удается получить уравнения для начальной стационарной скорости реакции, аналогичные уравнению Михаэлиса [ср. уравнение (VII.5), (VII.6), (VII. 10)]. При этом, однако, необходимо иметь в виду, что физический смысл постоянных членов этих уравнений зависит от конкретной схемы реакции и выбранных условий эксперимента. [c.71]

Для определения скорости таких двухсубстратных реакций также можно использовать подход Михаэлиса-Ментен. Как мы уже видели, гексокиназа характеризуется разными значениями Км для каждого из ее двух субстратов (табл. 9-4) [c.238]

Уонг [11] недавно также рассмотрел вопросы, связанные с математическим описанием кинетики ферментативных реакций, обратив особое внимание на гипотезу стационарности. Он отмечает, что существенным условием применимости гипотезы стационарности является быстрое образование фермент-субстратного комплекса — условие, которое, несомненно, выполняется при достаточно большом избытке субстрата по отношению к ферменту. Практический вывод, к которому он приходит (распространяя его и на двухсубстратные реакции), состоит в том, что принцип стационарности может быть использован в условиях, обеспечивающих линейную зависимость U0 от Ео. [c.53]

АНАЛИЗ МЕХАНИЗМА ДВУХСУБСТРАТНЫХ РЕАКЦИЙ МЕТОДАМИ СТАЦИОНАРНОЙ КИНЕТИКИ [c.146]

Анализ механизма двухсубстратных реакций 147 [c.147]

Анализ механизма двухсубстратных реакций 149 [c.149]

Анализ механизма двухсубстратных реакций 151 [c.151]

Анализ механизма двухсубстратных реакций 153 [c.153]

Анализ механизма двухсубстратных реакций 55 [c.155]

В тех случаях, когда метод стационарной кинетики применим для исследования реакции в обоих направлениях в отсутствие и в присутствии одного из продуктов реакции, константы скорости можно рассчитать с помощью второго общего метода. Систематический анализ механизма двухсубстратных реакций, основанный на методе, изложенном в предыдущей главе, позволяет [c.161]

Как скажется на кинетических данных, характеризующих двухсубстратную реакцию, отсутствие в качестве промежуточного продукта какого-либо кинетически значимого фермент-субстратного комплекса [c.259]

Рассмотрим закономерности процессов для ферментативной реакции с участием набора промежуточных соединений в предположении, что реакции взаимодействия активного центра (или интермедиатов) с субстратами имеют бимолекулярный характер. Для простоты рассмотрим двухсубстратную реакцию [c.54]

Некоторые механизмы реакций, представленные в таблице, различаются по функциональной зависимости от концентраций субстратов и могут быть дискриминированы на основе анализа экспериментальных данных. Из табл 8 видно, что для двухсубстратных реакций существуют по крайней мере два рода зависимостей скорости реакций от концентраций субстратов. [c.58]

В ЭТОМ случае, определив А" фф для разных концентраций С, можно найти все константы, характеризующие двухсубстратную реакцию, протекающую по приведенной выще схеме. [c.510]

Интересно отметить, что уравнение (42) описывает кинетику многих двухсубстратных реакций. [c.513]

В] [НгО] то для двухсубстратной реакции общего основного катализа [c.21]

Для двухсубстратных реакций обычно изучают зависимость начальных скоростей от исходных концентраций каждого из компонентов,при постоянной концентрации другого участника реакции. В этом случае (1.30) приводится к уравнению типа Михаэлиса, в котором эффективные кинетические постоянные оказываются известными функциями концентрации второго компонента. Так, например, если изменяется величина [SJo, а постоянный поддерживается [S2]= 2, то уравнение (1.30), поделив на ki, легко привести к виду [c.41]

Используя уравнение (1.36), получаем следующее общее выражение для стационарной начальной скорости двухсубстратной реакции в предположении, что концентрации всех промежуточных продуктов имеют равновесные значения [c.44]

В книге Диксона и Уэбба [1] приводится упрощенная кинетическая схема двухсубстратной реакции. Принимается, что процесс состоит из четырех независимых равновесных реакций [c.69]

Дальнейшее развитие теория стационарной кинетики получила в недавнее время в работах Клеланда [4],. который систематизировал многочисленные механизмы ферментативных реакций, вывел уравнения для зависимости стационарной скорости реакции от концентраций реагирующих веществ и значений кинетических параметров. Исследование механизма двухсубстратных реакций кинетическим методом дано в работе Фромма [5]. Громоздкость расчетов кинетических параметров для сложных реакций и необходимость статистического их анализа привели к необходимости использования в ферментативной кинетике счетно-решающих машин. Первые опыты составления программ для этих машин и решения некоторых [c.76]

Ферментативные реакции с участием двух субстратов обычно включают перенос атома или функциональной группы от одного субстрата к другому. Такие реакции могут протекать по двум различным механизмам (рис. 9-5). В реакциях первого типа, называемьгх реакциями единичного замещения, два субстрата А и В связываются с ферментом Е либо специфическим, либо случайным образом с образованием комплекса ЕАВ, который затем распадается на продукты С и D. Второй класс двухсубстратных реакций составляют реакции, протекающие по механизму двойного замещения (механизм типа пинг-понг ). В этих реакциях [c.238]

Рис. 9-5. Схематическое изображение двухсубстратньи реакций, относящихся к двум разным классам. А. Реакция единичного замещения. В одних реакциях этого типа субстраты А и В могут св5иываться с ферментом в любой последовательности, в других -существует определенный порядок присоединения А н В. В. Реакция двойного замещения (механизм типа пинг-понг ). Первый субстрат АХ передает группу X ферменту. Затем, после того как А высвобождается, субстрат В (акцептор группы X) связывается с ферментом.

Установлено, что для некоторых ферментативных реакций, в которых участвуют два субстрата, вполне можно пользоваться моделью односубстратной реакции. Выведенные для этой модели уравнения можно применять и в более сложных случаях, если, скажем, поддерживать концентрацию одного из субстратов постоянной. Кинетика двухсубстратных реакций рассматривается в гл. IX. [c.43]

В гл. VIII будет показано, что кинетика двухсубстратных реакций, в которых в качестве промежуточных продуктов участвуют замещенные формы фермента, описывается такими же графиками, если Q реагирует с одним [c.77]

Наиболее распространенной причиной ингибирования продуктом, особенно для многоступенчатых механизмов, является уменьшение суммарной скорости реакции вследствие того, что продукт не отделяется от фермента, как при нормальном ходе реакции, а остается с ним связанным. Ясно, что если, скажем, последняя стадия каталитической реакции обратима, то последний продукт реакции, отделившийся от фермента, и первый субстрат должны конкурировать за свободный фермент независимо от положения равновесия суммарной реакции. Для реакций, в ходе которых образуется не один, а несколько продуктов, систематическое исследование начальных скоростей в присутствии одного из продуктов реакции позволяет получить важную информацию о формальном механизме процесса [9]. Этот способ будет более подробно рассмотрен в гл. VIII в связи с кинетическим анализом механизмов двухсубстратных реакций, [c.80]

В случае двухсубстратных реакций, которые требуют образования тройного комплекса, оба субстрата, естественно, должны быть так расположены в комплексах, чтобы реакция была возможна. Трудно представить себе, как мог бы происходить прямой перенос атома или группы от одного субстрата к другому, если бы субстраты не были связаны с теснб примыкающими или перекрывающимися центрами фермента. Следовательно, в этом случае, как и в рассмотренном выше, точное взаимное расположение группировок субстрата [c.93]

До 50-х годов нашего столетия в большинстве работ, рассматривавших двухсубстратные реакции, предполагалось, что важнейшей особенностью любого ферментативного механизма является образование промежуточного тройного комплекса, состоящего из фермента и обоих субстратов. Выдающимся исключением, однако, была работа Дудорова, Баркера и Хассида [1], в которой были представлены доказательства того, что в ходе реакции, катализируемой фосфорилазой сахарозы, образуется в качестве промежуточного вещества глюкозили-рованный фермент. [c.121]

В ранних работах при обсуждении критериев, позволяющих делать выводы о формальных механизмах ферментативных реакций, кинетический подход почти всегда игнорировался. Вместе с тем на основании кинетического анализа двухсубстратной реакции обычно можно с достоверностью установить, протекает ли она через образование третичного комплекса с интактными субстратами или через замещенную форму фермента. Основная заслуга в развитии теории стационарной кинетики, необходимом для этих целей, принадлежит Альберти [1, 2], Дальцилю [3, 4], Фридену [5], Клеланду [c.129]

Приведенный вывод, помимо того, что он подтверждает справедливость уравнения (34), показывает, что уравнение скорости двухсубстратной реакции можно получить совершенно таким же лутем, как и уравнение для односубстратной реакции. Лишь выкладки становятся значительно более громоздкими. [c.135]

Широкое распространение этих способов графического представления рН-функций и готовых правил их интерпретации привело к тому, что в ряде случаев исследования проводятся некорректно. Некоторые из них свидетельствуют просто о нерадивости их авторов,. которые поленились либо оценить истинные значения начальных стационарных скоростей, либо провести необходимые кинетические эксперименты при всех значениях pH. В большинстве случаев, однако, эти работы страдают более серьезным недостатком — в них для анализа двухсубстратных реакций некритически используются уравнения, выведенные для простой односубстратной [c.215]

Для изображения двухсубстратных реакций Клеланд предложил использовать схемы, в которых обозначены промежуточная стадия и стадии ввода субстратов и вывода продуктов. Для цяклооксидазной реакции в механизме простагландинсинтетазы [c.52]

Графическим путем, строя прямую эфф = согласно уравнению (18) по отрезку, отсекаемому на оси ординат, находят значение ks , а по тангенсу угла наклона прямой —к, зная которую можно найти Таким образом, кинетический анализ двухсубстратных реакций оказывается более полным, чем односубстратных, где определение 2 и к методом стационарного приближения невозможно. [c.515]

Поскольку при избытке второго компонента скорость распада промежуточного комплекса KSi увеличивается пропорционально [S2lo, стационарная концентрация комплекса [KS] уменьшается и при насыщающих концентрациях [Sgjo становится пренебрежимо малой. Лимитирующей стадией в этих условиях становится образование комплекса [KSJ, т. е. первая стадия реакции, что и определяет физический смысл эффективной максимальной скорости Уэфф как скорости образования комплекса [KSJ при заданных концентрациях катализатора и первого субстрата. В этом, как и в предыдущем случае, определение /Сл/эфф для разных концентраций i позволяет найти все кинетические параметры двухсубстратной реакции, если она протекает в соответствии со схемой (1.28)—(1.29). [c.42]

Из многих возможных схем двухсубстратных реакций для ферментативного катализа большое значение имеет тот случай, когда катализатор образует комплексы KSi и KS2 и комплекс KS1S2, причем каталитическое превращение осуществляется в комплексе KS1S2. Применение метода стационарных концентраций приводит к весьма громоздким соотношениям [49]. Достаточно простые кинетические уравнения получаются в том случае, когда течение реакции заметно не изменяет равновесные концентрации всех трех промежуточных соединений. Это отвечает следующей схеме равновесий [c.43]