Фолина метод

ФОЛИНА МЕТОД—ФОРМАЛЬДЕГИД [c.232]

Концентрацию белка определяют по градуировочному графику (обычно с небольшими отклонениями от линейной зависимости), построенному с помощью подходящего стандартного белка. Разные белки дают заметно различающиеся величины поглощения в методе Лоури - Фолина, отчасти это зависит от содержания тирозина и триптофана. [c.466]

Е. Метод Фолина—Лоури [c.395]

Отделение ионов от неэлектролитов в ряде случаев представляет определенный интерес. Одним из примеров может служить упоминавшийся ранее метод определения аммиака в моче по Фолину я Беллу. Другой пример — катионообменное выделение тиамина (витамина В а) из растворов, содержащих мешающие вещества в дрожжах и других аналогичных продуктах. [c.22]

Кроме того, для определения аминокислот предложены следующие методы метод, основанный на бромировании (Уоркеней) колориметрический метод (Фолин) метод сочетания с диазораствором (Ганке и Косслер [244]) и определение с реактивом Милона (Вейс и Томас). Тирозин удается отделить от гистидина, осаждая последний фосфорновольфрамовой кислотой. [c.284]

Диморфолиноацетил)флуореион (V). К 2,4 л мор-фолина прибавляют порциями 805 г IV при перемешивании в течение 1 ч с такой скоростью, чтобы температура не поднималась выше 50 °С (при более высокой температуре возможно осмоление). Дают выдержку З /з ч при 50 °С, контролируя методом ТСХ содержание IV (должно остаться не более 0,5%), затем 1 ч при 5°С, Реакционную массу разбавляют 1,6 л охлажденного до 5°С метанола, перемешивают 15 мин и осадок отфильтровывают. Продукт для отделения от смолистых примесей промывают путем перемешивания с 900 мл метанола в течение 30 мин, отфильтровывают и для отделения гидробромида морфолина промывают перемешиванием 30 мин с 4 л воды при 20 °С. Вновь отфильтровывают, промывают на фильтре 2 раза по 0,5 л воды и без высушивания (вещество лабильно) используют на следующей стадии. [c.66]

Метод основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот с реактивом Фолина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные связи. Метод характеризуется высокой чувствительностью (10—100 мкг белка в пробе). На развитие окраски влияет большое количество веществ компоненты буферных систем (трис-буфер в концентрации 0,2 мМ, глицилглицин), восстановители (цистеин, дити-отреитол в концентрации 0,01—0,4 мМ, аскорбиновая кислота), комп-лексоны (ЭДТА в концентрации 0,5 мМ), детергенты (тритон Х-100 в концентрации 0,1—0,2% вызывает выпадение осадка), сернокислый аммоний в концентрации 0,15%, сахароза в концентрации 10% и др. [c.81]

Метод основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот и цистеина с реактивом Фолина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные связи. [c.31]

Энквист с сотрудниками [28, 31] также применяли метод Кухаренко, модифицированный метод с хлористым барием, модифицированный метод Фолин-Дениса и метод с потенциометрическим титрованием в этилендиамине и диметилформамиде (ДМФ) различных препаратов лигнина и модельных веществ для лигнина. [c.292]

Методы с титрованием и колиметрический метод с реактивом Фолин-Дениса дали отношение фенольных гидроксильных групп к метоксильным 0,94—0,78. Спектроскопический же метод Гольдшмида [48] дал только 0,24. [c.473]

Видоизмененный метод Фолина — Дениса по Энквисту [14]. Около 0,01 — [c.850]

Колориметрический метод Тейтельбаума [1293] основан на осаждении висмута 8-оксихинолином, растворении промытого осадка в соляной кислоте и восстановлении фосфорномолибденововольфрамовой кислоты (реактив Фолина п Дениса) в щелочном растворе 8-оксихинолином. Интенсивность появившегося голубого окрашивания пропорциональна количеству д-оксихинолина, а следовательно, и висмута. [c.171]

Принцип метода. Фенольный реактив Фолина—Чиокальтеу дает синее окрашивание с щелочными растворами белков. Интенсивность окрашивания в основном зависит от содержания в исследуемом белке тирозина и триптофана. [c.67]

Ранее широко применялся метод, основанный на осаждении фосфата магния и аммония, растворении осадка в кислоте и фо-тометрировании синего фосфорномолибденового комплекса [330, 332, 333, 339, 558, 693, 868, 938, 1147, 1243, 1244]. Применялось также много фотометрических методов с использованием 8-оксихинолина измерением поглощения 8-оксихинолина, связанного в осадок оксихинолината магния, в кислом растворе при 358 нм [649], превращением связанного с магнием 8-оксихинолина в азокраситель [500, 950], по образованию молибденовой сини с реагентом Фолина — Дениса [676, 1289], по образованию зеленого комплекса с Fe Ig в кислой среде [730, 798, 1259] метод, основанный на осаждении оксихинолината магния, добавлении раствора (NH4)2 e(NO3)e к фильтрату и фотометрировании избытка церия при 315 нм [1003]. Предлагались методы определения по уменьшению поглощения комплексона III при 225 нм в присутствии магния [671], а также определения с дипикриламином [1107], окситриазеном [322, 323], гипоиодидом [26], с дилитуро-вой кислотой [931], нефелометрическое определение с нафтол-гидроксаматом натрия [535]. [c.159]

Для количественного определения суммы биологически активных веществ ротокана нами предложен спектрофотометрический метод, который основан на реакции окисления фосфорно - молибденовой кислотой (реактив Фолина) в слабощелочной среде. Предлагаемая методика заключается в проведении цветной реакции комнлексообразова-ния с суммой фенольных соединений агликонов, полученных после гидролиза соединений препарата. Полученные соединения имеют характеристический максимум поглощения в длинноволновой области спектра. [c.45]

Синохара [25] разработал колориметрический метод определения тиолов, основанный на применении фосфорно-вольфрамо-вого реактива Фолина — Луни [26]. При его восстановлении образуется голубой комплекс. Этот метод, развитый далее Данехи и Крейцом, обсуждается ниже. [c.564]

Фенольный метод (модификация метода Фолина — Чиокалтеу) 8 [c.574]

Существующий метод определения креатинина в крови по Фолину — By (А. М. Петрунькина. Практическая биохимия. М., 1961) использовался нами в модификации Н. М. Карамзиной применительно к мелким лабораторным животным. [c.204]

Обзор методов определения меркаптанов был опубликован Уайлдом [128]. Их можно определять при помощи 18-фосфорновольфрамовой кислоты, которая восстанавливается до синих продуктов тиосоединениями, а также рядом других соединений. Путем снижения pH раствора до 5 и тщательного контроля времени можно устранить мешающее влияние многих менее энергичных восстановителей. Реагент Фолина [24], содержащий 18-фосфорноволь-фрамовую кислоту, применяли для фотометрического определения цистеина, цистина и аналогичных веществ [661, в том числе других сульфгидрильных и дисульфидных соединений [97, 102[. Метод неселективен. Обзор других реагентов для определения сульфгидрильных групп, включая феррицианид двухвалентного железа, феррицианид двухвалентной меди, 2,3,5-трифенилтетразолийхлорид и бруцин и персульфат калия, был выполнен Фрейтагом [26]. [c.329]

Концентрацию пептидов можно определять методом Фолина—Лоури, в основе которого лежит реакция пептида с тарт-ратом меди в щелочной среде. Образующийся комплекс восстанавливает фосфовольфрамат с образованием синего соединения с Атах при 750 нм (гл. 35). Метод в основном применяют для определения белков в растворе. [c.395]

В основе метода лежит реакция цистина с сульфитом, в результате которой образуются цистеин и цистеин-5-сульфонат. В присутствии реактива Фолина цистеин вновь окисляется в цистин, а восстановление реактива приводит к развитию синей окраски [13—16]. Далее приведена модифицированная методика Спекмена и Стайна [17]. Для проведения реакции необходимо подготовить четыре реагента [c.395]

В основе чувствительного колориметрического метода определения белков в элюатах лежит биуретовая реакция, а также реакция с фенольным реактивом Фолина—Чокальто [77] в модификации Лоури [78]. Таким путем определяют белок в кон- [c.454]

Колориметрия растворимых белков по методу Лоури проводится следующим образом. 1 мл раствора белка смешивают с 5 мл реактива В и оставляют стоять при комнатной температуре в течение 10 мин. Затем быстро прибавляют 0,5 мл раствора Г и интенсивно перемешивают (в течение 1—2 с). Спустя 30 мин измеряют величину экстинкции при 500 нм (если концентрация белка достаточно высока) или при 750 нм (в случае низкой концентрации белка). В качестве стандарта используют растворы сывороточного альбумина быка или человека в концентрации 0,02—0,5 мг/мл. Реактив В готовят, смешивая 50 мл раствора А (2%-ный раствор углекислого натрия в 0,1 н. гидроокиси натрия) и 1 мл раствора Б (0,5%-ный раствор Си504Х Х5НгО в 1%-ном цитрате натрия или 1%-ном тартрате калия). Реактив Г представляет собой разведенный до конечной концентрации кислоты реактив Фолина—Чокальто. [c.455]

Сошедший с колонки элюат можно анализировать любым подходящим методом. Вещества, содержащие ароматические кольца (полистиролы, белки, нуклеиновые кислоты), можно оценить количественно не только с помощью уже описанных автоматических регистрирующих устройств, но также и путем прямого измерения отдельных фракций на спектрофотометре. Для всех твердых веществ вполне приемлем разработанный Крэйгом [63] метод анализа по сухому остатку, который заключается в том, что аликвотную часть элюата упаривают в полусферических чашечках и затем взвешивают остаток. Многие соединения удается анализировать с помощью специфических цветных реакций. Для белков, например, цветная реакция Фолина — Лоури оказывается более чувствительной, чем прямое измерение поглощения в ультрафиолете. Эту реакцию можно проводить непрерывно на автоматическом анализаторе [45]. Еще более чувствительный метод основан на образовании биурето-вого комплекса с избытком радиоактивной меди. (Этот метод позволяет обнаружить белок [c.79]

Для определения содержания белка в растворах широко используются фотометрические методы анализа [1, 2]. В ряде случаев возможно определение белка по собственному поглощению при длинах волн 220 и 280 нм [1]. Более селективным является фотометриро вание окрашенных комплексов белка, полученных по различным реакциям ксантопротеиновой, биуретовой и реакции Лоури [2, 3]. Среди них наиболее специфичной и чувствительной является реакция Лоури, в которой белок вступает во взаимодействие с реактивом Фолина [4] в сочетании с биуретовой реакцией. Именно сочетание этих двух фотометрических реа1кций (реакция на пептидные связи и на обязательные ароматические аминокислоты белка) делает метод высокочувствительным и избирательным, т. е. позволяет его использовать для определения белка в сложных смесях. По данным [5], метод Лоури чувствительнее метода, основанного на биуретовой реакции, в 100 раз, а в сравнении с методом определения по собственному поглощению — в 10—20 раз. [c.37]

Тирозин. Проведенное Джорпсом [344] тщательное исследование метода Миллон-Фолина [233] показало, что после нагре- [c.107]

Боллинг и Блок [112] нашли, что при добавлении к лактоглобулину разных количеств триптофана последний определяется полностью после гидролиза с 5 и. NaOH на масляной бане при температуре 115—125°. Триптофан определяется фенольным методом Фолина [233] и методом Миллон-Лагга [429]. Аналитические результаты были подвергнуты статистическому анализу. Однако полученные результаты нельзя распространить на другие белки, так как лактоглобулин совсем или почти совсем не содержит углеводов. [c.109]

Примечание. Было предложено очень большое число незначительных видопзменений к методу Миллон-Фолина. Все они дают удовлетворительные результаты, а некоторые значительна улучшают основной метод Фолина. В отличие от очень чувствительных альдегидных методов определения триптофана в методе Миллон-Нассе для тирозина и в методе Фолина со смесью фосфорномолибденовой и фосфорновольфрамовой кислот для триптофана можно без заметного ущерба изменять условия проведения реакции. [c.126]