Глиадин молекулярный вес

Молекулярную массу глиадинов определяли разными методами [c.187]

Большинство авторов определило молекулярные массы а-глиадинов (табл. 6Б.4) в пределах от 27 000 до 38 000 Да [72, 73]. Этот диапазон может отражать определенную изменчивость молекулярной массы поскольку при использовании этого же метода в отношении нескольких а-глиадинов установлены [116, 114] разные молекулярные массы для каждого из них. Завышенные величины молекулярных масс для аг и аг-глиадинов, полученные гель-фильтрацией [147], объясняются тем, что исследования проводились в 0,1 М уксусной кислоте без предварительного восстановления дисульфидных связей и в отсутствие денатурирующего агента (мочевины или гуанидинхлорида), а также тем, что в этих условиях а-глиадины находятся не в форме статистического клубка. Ввиду этого результаты оказываются искаженными за счет конформации, которую принимают в этой среде а-глиадины и стандарты белков. Все а-глиадины образованы одной полипептидной цепью. [c.188]

Б.4. Молекулярные массы а-глиадинов [c.189]

Б.5. Молекулярные массы р-глиадинов [c.189]

Б.6. Молекулярные массы 7-глиадинов [c.190]

Б.7. Молекулярные массы ш-глиадинов [c.190]

Кроме того, выделен в чистом виде [94] 7-глиадин (глиадин 50), который по молекулярной массе явно превосходит все другие, обнаруженные ранее 7-глиадины. Таким образом, еще остается определенная неясность в отношении истинных молекулярных масс у разных 7-глиадинов, которая может очень отчетливо отражать гетерогенность 7-глиадинов, намного более сильную, чем та, что выявляет анализ с помощью электрофореза в кислой среде. Впрочем, выявлено существование, по крайней мере, 9 7-глиадинов [134], а некоторые исследователи на основе анализа N-концевых последовательностей полагают, что фракция, обозначаемая 72 в действительности, включает не менее двух главных и трех минорных белков и что фракция 73 также гете-рогенна [19]. По молекулярной массе ш-глиадины превосходят а-, Р- и 7-глиадины, но они также образованы одной — единственной полипептидной цепью. Совокупность результатов, полученных разными авторами, указывает на существование двух групп ш-глиадинов — с молекулярными массами соответственно около 65 000 и 75 000—80 000 (табл. 6Б.7). [c.191]

Глиадины с высокой молекулярной массой (221 [c.204]

Вторичные и третичные структуры субъединиц, слабо изучены, но представляется, что степень их спирализации в растворе невелика, а их конформация менее компактна, чем у глиадинов. Кроме того, субъединицы с высокой молекулярной массой могут быть достаточно гибкими вследствие высокого содержания в них глицина. Они состоят из последовательности складчатых слабо-оформившихся структур и коротких спиральных последовательностей [52]. [c.213]

Гель-фильтрация позволяет грубо разделить глиадины на 2 группы с одной стороны, ш-глиадины и глиадины с высокой молекулярной массой (или растворимые глютенины) и, с другой стороны, а-, р- и 7-глиадины [40, 149]. [c.183]

Глиадины относятся к белкам с наименьшими зарядами в самом деле, они содержат только от 6 до 11 основных остатков на молекулу (лизин, гистидин, аргинин). С другой стороны, приблизительно от 85 до 95 % остатков глутаминовой и аспарагиновой кислот находятся в форме амидов (глутамин, аспарагин) (например, [73]). На молекулу приходится только 8—9 свободных карбоксильных групп. Для сравнения, сывороточный бычий альбумин с молекулярной массой, близкой к молекулярной массе ы-глиадинов, содержит 95 основных групп и 92 свободные карбоксильные группы на молекулу [116]. [c.186]

Методом ДДС-Na-nAAr установлены [21] молекулярные массы 44 200 и 36 500 Да для субъединиц высокомолекулярных белков, присутствующих в спиртовых экстрактах белков, и молекулярные массы около 36 000 Да для а-, р- и 7-глиадинов. Используя гель-фильтрацию в диссоциирующей среде, Престон и Вудбери [161] в суммарном экстракте глиадинов обнаружили три фракции, которые по аминокислотному составу соответствуют глиадинам. Первая из них имеет молекулярную массу более 100 000 Да, а две другие — соответственно около 44 000 и 27 000 Да. [c.187]

Анализ этого экстракта с помощью ДДС-Na-nAAF после восстановления дисульфидных связей выявил только три главные полосы — 36 000, 40 000 и 50 000 Да и минорные полосы в пределах от 53 000 до 130 000 Да. В отсутствие восстановителей электрофореграмма почти не изменяется, но появляются дополнительные полосы, соответствующие молекулярным массам более 150 000 Да. Авторы делают вывод о существовании высокомолекулярных глиадинов, которые образованы несколькими полипептидными цепями, связанными между собой дисульфидными мостиками, и о наличии глиадинов с низкой молекулярной массой (а-, р- и 7-глиадины), образованных единственной полипептидной цепью. Указанные высокомолекулярные глиадины состоят преимущественно из субъединиц, молекулярная масса которых находится в пределах от 40 000 до 53 000 Да. Молеку- [c.187]

Методом гель-фильтрации в 6М гуанидинхлориде после восстановления дисульфидных связей и алкилирования белков [91] для фракции глиадина III (а- и р-глиадины) установлена молекулярная масса 37 000 Да, а для фракции глиадина IV (а-глиа-дин) — молекулярная масса 30 000 Да. В каждой из этих фракций эти же авторы с помощью ДДС-Na-ПААГ выявили по 3 полипептида с молекулярной массой 33 000, 35 000 и 41 000 во фракции глиадина III и 29000, 31 000 и 34 000 во фракции глиадина IV [89]. [c.188]

Молекулярные массы р-глиадинов находятся в пределах от 27 000 до 41 000 Да [72, 73], хотя, по другим данным [171], большинство р-глиадинов имеют молекулярные массы между 30 000 и 35 000 Да (табл. 6Б.5). Результаты, полученные с помощью ДДС-Na-riAAr и гель-фильтрации, согласуются между собой, поскольку объемы элюции измеряли в среде ДДС-Na после восстановления дисульфидных связей и алкилирования р-глиадинов и стандартов. Выделенный Эвартом [72[ МТ р-глиа-дин четко отличается от других глиадинов более низкой молекулярной массой. [c.188]

Хюбнер и др. [97] выделили три 7-глиадина, различающихся содержанием тирозина (71 богат, а 72 и 73 бедны тирозином, табл. 6Б.6). Их минимальные молекулярные массы, рассчитанные на основании аминокислотного состава, составляют соответственно 16 000 (71), 17 000 (72) и 18 000 (73). Более поздние исследования с помощью ДДС-ГЧа-ПААГ [66, 67] и ультрацент- [c.188]

Структура некоторых а-глиадинов, называемых А-глиадина-ми, изучена наиболее полно, поскольку их можно выделить в чистом виде в достаточных количествах простым способом, основанным на их агрегации при pH 5 и малой ионной силе [16]. Четвертичная структура А-глиадинов очень широко изменяется в зависимости от условий pH и ионной силы (рис. 6.4). Их агрегация происходит при pH 5 и ионной силе >0,005. Агрегация обратимая и поэтому обусловлена нековалентными связями [117], вероятно водородными [53]. В агрегированном состоянии они находятся в виде фибрилл диаметром 60 А. Этот диаметр больше того, который имела бы линейная ассоциация жестких клубков с такими же молекулярными массами, как и у а-глиадинов (40 А), и меньше диаметра ассоциаций статистических клубков (70 А). Организация таких фибрилл, следовательно, может быть относительно сложной. Эти микрофибриллы в концентрированном растворе могут образовывать устойчивую трехмерную сеть [12]. Однообразие структуры фибрилл позволяет предположить, что структура самих основных единиц (молекулы а-глиади- [c.197]

В 1972 г. при электрофорезе глютенинов в полиакриламидном геле в присутствии ДДС-Na после восстановления дисульфидных мостиков удалось определить молекулярные массы составляющих их субъединиц [21]. Таким способом были идентифицированы 15 субъединиц с молекулярными массами от 116 000 до 133 000 Да (табл. 6Б.10). Высокомолекулярные (или агрегированные) глиадины состоят из субъединиц с массой 44 000 и 36 000 Да, причем доля первых больше [24, 167]. Впоследствии эти значения были подтверждены всеми исследованиями, в которых использовался данный метод определения молекулярных масс. Удалось выявить генетическую изменчивость состава субъединиц глютенинов [20, 33, 108, 150[. Способ выделения фракций глютенинов может изменить состав их субъединиц [20, 110[ так же, как это происходит при удалении жиров из муки [169]. [c.201]

Как и в случае с глиадинами, имеется расхождение между значениями молекулярных масс, установленными разными методами. Это расхождение было выявлено в первую очередь для изолированных субъединиц. Их молекулярная масса равна 100 000 Да при определении ДДС-Na-nAAr и лишь 69 600 Да [c.201]

Анализы высокоочищенных субъединиц [79, 111] подтверждают, что субъединицы с высокими молекулярными массами (90 000, 132 000, 144 000 Да) имеют повышенное содержание глицина, но количество его у разных белков может варьировать. Кроме того, содержание лизина у них выше, чем у других глютенинов или глиадинов, но общее содержание основных аминокислот изменчиво. Имеются также многочисленные мелкие различия между этими тремя субъединицами. Кроме этого, их состав не-идентичен тому, который установили Данно и др. [57] для субъединиц эквивалентной молекулярной массы. Но эти авторы разделяли фракции по их молекулярной массе таким образом, была выявлена гетерогенность этих фракций [57, 98, 111], особенно субъединиц с высокой молекулярной массой [92]. [c.206]

Аминокислотный состав субъединиц 44 000 и 36 000 агрегированных глиадинов [167] аналогичен таковому а-, 5- и 7-глиа-динов и субъединиц с молекулярной массой 43 000 и 37 000 Да глютенинов, которые были выделены Данно и др. [57]. [c.206]

Проведены [24] очистка и сравнение у N-конца последовательностей высокомолекулярных субъединиц глиадинов и восстановленных спирторастворимых глютенинов (предполагаемые молекулярные массы 44 000 и 36 000 Да). [c.209]

Эти N-концевые последовательности были определены в смеси почти 20 полипептидов, различимых после электрофореза при кислом pH, до достаточно гомогенных по молекулярной массе. Именно этим объясняется тот факт, что в одном и том же положении N-концевой последовательности иногда обнаруживается до 6 аминокислот. Эта вариабельность значительна для первых 10 кислот далее в каждом положении находят не более одной или двух кислот и обнаруживают почти идентичные последовательности для глиадинов с высокой молекулярной массой и спирторастворимых глютенинов. На основании этих результатов была выведена последовательность общего типа. [c.209]

Начиная с 9-й или 10-й аминокислоты, эта обобщенная последовательность напоминает о повторах, которые встречаются в блоках у а-, у- и uJ-глиадинов, где связаны 3 или 4 глутамина и один пролин. Однако рассматриваемая в совокупности, N-koh-цевая последовательность субъединиц глиадинов с высокой молекулярной массой не идентична ни одной из N-концевых последовательностей известных глиадинов. Глиадины с высокой молеку- [c.209]

После очистки субъединиц с молекулярной массой 44 ООО Да были обнаружены последовательности трех типов а-последова-тельность, 7-последовательность, произошедшая от агрегированных глиадинов с низкой молекулярной массой, и специфическая последовательность, очень сходная с той, которую можно предполагать по результатам исследований Хюбнера и Уолла [100] (табл. 6Б.15). Было подтверждено также, что агрегированные глиадины состоят из специфических субъединиц, отличающихся от других глиадинов, как это следует из анализа методом двумерного электрофореза [101]. [c.210]

Больше всего известно об аминокислотной последовательности субъединиц с высокой молекулярной массой, изолированных Филдом и др. [79] (молекулярная масса, определенная с помощью ДДС-Ыа-ПААГ, — 144 ООО, ультрацентрифугированием — 69 600 Да). Действительно, установлена последовательность из 16 аминокислот N-концевой половины цепи она была определена при секвенировании изолированного белка [79]. Кроме того, благодаря клонированию ДНК, кодирующей эту субъединицу, и определению ее нуклеотидной последовательности стало возможным установить последовательность из 101 аминокислоты у СООН-концевой половины цепи [81] (см. табл. 6Б.15). Анализ последовательности N-концевой половины цепи подтверждает предыдущие результаты она не соответствует ни одной из тех последовательностей, которые были предварительно идентифицированы для а-, Р-, 7- и й)-глиадинов или агрегированных глиадинов. Эта аминокислотная последовательность N-концевой половины цепи по составу очень отличается от аминокислотного состава полного белка меньше неполярных аминокислот, глицина, а также глутаминовой кислоты и глутамина. Отмечается также отсутствие серина, тогда как все основные аминокислоты присутствуют. Поэтому такая последовательность не является представительной для первичной структуры всей полипептидной цепи, которая должна содержать зоны, более богатые глицином и бедные глутамином. Наконец, примечательно наличие 2 цистеинов из 5 или 6, которые входят в состав целой молекулы, так как оно с большой вероятностью предопределяет конформацию молекулы, как и возможности образования внутрицепочных дисульфидных мостиков. Опыты с разрывом полипептидной цепи на уровне цистеинов подтвердили, что большинство из них должно располагаться у концов цепи [79]. В самом деле, обнаруживается третий цистеин в положении 13 у С-конца [81]. Эта С-кон- [c.210]

Объединить эти разные гипотезы предложил Мифлин [137] по его представлениям совокупность физико-химических свойств клейковины согласуется с моделью, в которой упругость обусловлена наличием длинных линейных полимеров, образованных из гибких субъединиц с высокой молекулярной массой эти субъединицы связаны между собой межмолекулярными дисульфидными мостиками (глютенины). Переплетение этих полимеров, перекомбинирование и перемещения одних по отношению к другим, как и наличие мелких молекул, соединенных гидрофобными взаимодействиями (глиадины), обеспечивающие вязкую текучесть. [c.221]

В организме различные белковые, липопротеидные, нуклеопротеидные и другие молекулярные слои играют большую роль в жизнедеятельности клеток. Взаимодействие поверхностноактивных веществ с белками, проникновение гемолизирующих веществ (9-аминоакридина, фенотиа-зона и др.) в белковые пленки, соединения холестерола с глиадином и другими белками, реакция аденозинтрифос-форной кислоты с миозином в монослое и др. — неоднократно исследовались методами двухмерного давления и поверхностных потенциалов (причем были разработаны также специальные методы подобных измерений для межфазной границы двух жидкостей). [c.92]

В зерне различных видов пшеницы содержание глиадина достигает 20—40% общего количества белков, т. е. в среднем 4 8% веса семян, а в зерне ржи 25%. Количество авенина в зерне овса в среднем составляет 15% общего количества белков, зеина в кукурузе около 50%, гордеина в ячмене 35% и т. д. Проламины зерна — наиболее хорошо изученные белки злаков. В настоящее время установлен их молекулярный вес, изоэлектрические точки, элементарный состав, аминокислотный состав и т. д. [c.354]

Значения скачка потенциала и х, приведённые на рис. 24, показывают, что ни число, ни ориентация диполей в плёнке, по крайней мере на кислых и щелочных растворах, не изменяются при сжатии плёнки до 2 duHj M. Это может означать, что в ранних стадиях сжатие плёнки глиадина лишь сводит концы цепей R, не удаляя групп СООН или NHg, расположенных на их концах, с поверхности воды. Дальнейшее сжатие, однако, быстро понижает i, что означает либо удаление многих диполей с поверхности, либо радикальную переориентацию диполей. Не подлежит сомнению, что весьма высокие значения j. на молекулу с молекулярным весом 34 500 объясняются больщим числом групп СО, NH, СООН и NHg. Скачок потенциала весьма сильно понижается на щелочных растворах. Этого и можно было ожидать, поскольку в 21 было показано, что участие вполне ионизованной группы OONa в создании скачка потенциала либо весьма мало, либо отрицательно, а на щелочных растворах группы СОО должны быть в виде солей металлов. Амины не дают большого понижения скачка потенциала при образовании солей, вследствие чего скачок потенциала протеинов на кислых растворах с группой NHg в виде соли высок. [c.123]

Поскольку белки легче растворяются в концентрированных растворах мочевины, чем в воде, 6,66 М раствор мочевины часто используется как растворитель при определении молекулярного веса белков [5]. Оказалось, однако, что молекулярные веса амандина и эксцельсина в растворе мочевины равны 30 300 и 35 700, тогда как в нативных водных растворах они составляют соответственно 206 000 и 214 000 [18]. Правда, молекулярные веса яичного альбумина, сывороточного альбумина, глиадина и некоторых других белков в воде и в растворе мочевины одинаковы [19]. Многие другие белки после денатурации мочевиной и подобными агентами подвергаются агрегации [19]. [c.51]

Кристаллический папаин—белок с молекулярным весом 27 ООО. Он растворяется 70%-ном этиловом и метиловом спиртах и сходен с глиадинами. Кристаллический папаин расщепляет белки до полипептидов при pH = 5,0—6,0 и свертывает молоко. Для активности папаина существенное значение имеет присутствие в нем свободных групп SH. Удаление из них водорода ведет к возникнэвенню групп S- S и инактивированию папаина. Естественно, что папаин активируется восстановителями (сероводород, цианистые соединения, цистеин и др.) и угнетается окислителями (перекись водорода, иодук-сусная кислота и др.). [c.347]

В организме различные белковые, липопротеидные, нуклеоиротеидные и другие молекулярные слои играют большую роль в жизнедеятельности клеток. Взаимодействие новерхностно активных веществ с белками, проникновение гемолизирующих веществ (9-аминоакридина, фенотиазина и др.) в белковые пленки, соединения холестерола с глиадином и другими белками, реакция аденозинтрифосфорной кислоты с миозином в монослое л др. неоднократно исследовались методами двухмерного давления. [c.223]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология