Белки алкилирование

Специфичной для разрыва пептидных связей является реакция взаимодействия алкилированного белка с бромцианом [c.369]

Таким образом, алкилирование может проходить в условиях, типичных для органических реакций с использованием таких алкилирующих агентов, как метилиодид, диметилсульфат или метилфторсульфонат, либо протекать в физиологических условиях с помощью 5-аденозилметионина и соответствующего фермента. Однако, используя сильные алкилирующие агенты в избытке, удается провести алкилирование аминокислот и белков и при физиологических условиях (в отсутствие фермента). На этом основаны некоторые важные биохимические тесты, а также применение ряда лекарственных препаратов, [c.47]

В радикалах аминокислотных остатков белки содержат различные функциональные группы, которые способны вступать во многие реакции. Белки вступают в реакции окисления-восстановления, этерификации, алкилирования, нитрования, могут образовывать соли как с кислотами, так и с основаниями (белки амфотерны). [c.652]

Как и при разделении на ранее описанных полимерных ХНФ, механизм хирального распознавания в данной системе является сложным и до конца не выяснен. Однако основные причины удерживания сорбата были выявлены в ходе систематических исследований влияния его структуры и состава подвижной фазы на коэффициент емкости. Во многих отношениях альбумин-силикагелевый сорбент ведет себя подобно обращенно-фазовым материалам на основе алкилированного силикагеля. Спирты, преимущественно пропанол-1, помогают регулировать время удерживания, поскольку вызывают его быстрое уменьшение вследствие ослабления гидрофобных взаимодействий с сорбентом. Оптимизировать состав подвижной фазы можно, варьируя тремя основными параметрами, а именно pH, ионной силой и органическим растворителем-модификатором [90]. Вероятно, в любой хроматографической системе одновременно наблюдается влияние диполь-ионных и гидрофобных взаимодействий. Кроме того, возможно образование водородных связей и комплексов с переносом заряда. Большое влияние свойств подвижной фазы на значения к разделяемых энантиомеров можно объяснить зависимостью свойств белков от распределения заряда и его конформации. БСА состоит как минимум из 581 остатка аминокислот, связанных в единую цепь (мол. масса 6,6-10 ), и его надмолекулярная структура в значительной мере определяется присутствием в молекуле 17 дисульфидных мостиков. При рН7,0 полный заряд молекулы равен - 18, а изоэлектрическая точка равна 4,7. Как это хорошо известно из химии ферментов, смена растворителя способна вызывать изменения в структуре связывающего центра белка в результате изменения его заряда и конформации. [c.133]

Химические реакции для открытия и определения аминокислот в гидролизатах белков. В курсе органической химии подробно рассмотрено множество химических реакций, характерных для а-амино- и а-карбоксильных групп аминокислот (ацилирование, алкилирование, нитрование, этерификация [c.40]

В состав белков входят различные функциональные группы, которые способны участвовать во многих органических процессах — реакциях окисления-восстановления, алкилирования, арилирования, ацилирования, этерификации, галогенирования, нитрования, диазотирования, азосочетания и др. Характерные цветные реакции, которые используют для обнаружения белков [c.547]

Но реакции гидратации и дегидратации представляют не только исторический интерес. Они открывают широкие возможности дальнейшего глубокого изучения катализа. Во-первых, эти реакции, как было показано в предыдущей главе, протекают параллельно реакциям дегидрогенизации, что Баландин, Рогинский, Рубинштейн и другие химики использовали для выяснения вопроса о характере контакта органических реагентов с катализаторами. Во-вторых, реакции гидратации и дегидратации, протекая одинаково легко в присутствии кислот в растворах и солей и окислов в жидкой и паровой фазах, указывают на какую-то общность между процессами гомогенного и гетерогенного катализа. Реакции гидратации и дегидратации интересны еще тем, что они, подобно реакциям гидро- и дегидрогенизации, тесно связаны со многими другими реакциями, в процессе которых создаются или разрываются углерод-углеродные связи. Это обстоятельство должно способствовать решению вопроса о механизме реакций полимеризации,, алкилирования и крекинга. Наконец, реакции гидратации и дегидратации играют, вероятно, решающую роль в биологических процессах синтеза и распада белков, жиров, углеводов и высокомолекулярных веществ ферментативного. назначения. [c.262]

Применение. В производстве красителей — для получения анилина, в производстве фенола — при взаимодействии Б. с серной кислотой при синтезе стирола посредством алкилирования Б. этиленом и синтезе изопропилбензола в производстве капролак-тама в лакокрасочной промышленности, при производстве пласт-масс, фармакологических препаратов, моющих средств. В лазерной промышленности. В качестве разбавителя, растворителя для экстрагирования белка, обезжиривания костей, жиросодержащих отходов. [c.116]

Многие реакции, типичные для аминогруппы и карбоксильной группы (алкилирование, ацилирование, образование амидов и сложных эфиров), хорошо известны из обш его курса органической химии и здесь обсуждаться не будут. Вместо них мы рассмотрим несколько специфических реакций, широко используемых в химии аминокислот и белков. [c.48]

Киндлер [1] высказал мнение, что раздражающее действие многих галоидных соединений, применяемых в качестве отравляющих веществ, является результатом их реакции с тканями тела, состоящей, например, в алкилировании или ацилировании аминогруппы белков. Образующиеся при этом чуждые для организма вещества вызывают раздражение, пропорциональное степени трудности, с которой эти вещества подвергаются окислению или гидролизу. Например, продолжительное действие иприта может быть приписано вероятному образованию цикла. [c.449]

Иод-, бром- и хлорацетаты натрия легко взаимодействуют с сульфгидрильными, аминными, имидазольными группами полимерного субстрата с образованием соответствующих карбок-симетильных производных. Так, S-карбоксиметилирование белков в растворе иодуксусной кислоты происходит очень быстро и специфично. Реакции алкилирования иодистым метилом или дибромэтиленом протекают медленнее, нежели с иодуксусной кислотой, и реализуются преимущественно на -SH- и NH2-группах белка. В некоторых случаях возможен также деструктивный распад полимерной цепи. [c.369]

Злокачественные опухоли представляют сейчас вторую (после сердечных заболеваний) из причин смертности людей. И хотя современные способы их лечения, прежде всего хирургические методы и облучение, в ряде случаев оказываются очень удачными, получение эффективного химиотерапевтического средства для лечения этих заболеваний остается мечтой каждого химика-органика. Однако проблема злокачественных образований чрезвычайно сложна и, по-видимо.му, так и не удастся получить химиотерапевтическое средство, которое было бы эффективным против всех опухолей. Но и частичный успех в этом направлении был и будет очень ценным. Приведем несколько. типов веществ, которые с большим или меньшим успехом применялись для лечения определенных форм злокачественных образований. Одну группу образуют вещества, которые можно назвать алкилирующими реактивами. Эти очень реакционноопособные соединения способны ал-килировать такие биологически важные соединения, как белки или нуклеотиды. Алкилирование понижает скорость роста опухолевых [c.318]

Важная роль SH-rpynn белков в различных биохимических и физиологических процессах обусловлена их высокой реакционной способностью и многообразием химических превращений, в которые они вступают (ацилирование, окисление, алкилирование, образование меркап-тидов, полумеркапталей, водородных связей и т. д.). [c.157]

Ряд методов определения Ы-концевых аминокислот основан на алкилировании или ацилировании пептида и последующем гидролизе. В гидролизате концевая аминокислота обнаруживается в виде алкильного или ацильного производного. Наиболее важным и детально разработанным методом является метод динитрофенилирования белка, предложенный в 1945 г. Зангером и использованный им при установлении строения инсулина. [c.510]

Установление первичной структуры начинается с определения аминокислотного состава и молекулярной массы выделенного и очищенного белка. Белки, состоящие из нескольких полнпептидных цепей, разделяются с помощью денатурирующих реагентов (концентрированный раствор мочевины или ДСН) на мономеры. Дисульфидные мостики расщепляют восстановлением меркаптоэтанолом. Для предотвращения дисульфидного обмена и окисления образующихся свободных меркаптогрупп их блокируют каким-либо методом, например алкилированием иодуксусной кислотой с образованием 8-карбоксиметильного производного или цианэтилированием акрилонитрилом. После определения Ы- и С-концевых аминокислот полипептидная цепь расщепляется химически или ферментативно (в нескольких вариантах) на меньшие перекрывающиеся фрагменты. Для каждого фрагмента устанавливается аминокислотная последовательность. И наконец, комбинируя отдельные последователькости, приходят к полной последовательности исходной полипептидной цепи. [c.364]

Методом гель-фильтрации в 6М гуанидинхлориде после восстановления дисульфидных связей и алкилирования белков [91] для фракции глиадина III (а- и р-глиадины) установлена молекулярная масса 37 000 Да, а для фракции глиадина IV (а-глиа-дин) — молекулярная масса 30 000 Да. В каждой из этих фракций эти же авторы с помощью ДДС-Na-ПААГ выявили по 3 полипептида с молекулярной массой 33 000, 35 000 и 41 000 во фракции глиадина III и 29000, 31 000 и 34 000 во фракции глиадина IV [89]. [c.188]

Между тем все выделенные фракции невосстановленных белков имеют сложный состав. Фракционирование единиц глютенинов после восстановления дисульфидных связей алкилирования позволяет отделить более простые фракции. Для этого в основном применяют методы электрофореза ДДС-Na-nAAF, электрофокусирование, ДДС-Na-nAAr совместно с электрофокусировкой [20, 92, 108], но с определенным успехом использовали также гель-фильтрацию и ионообменную хроматографию. [c.200]

Помимо хроматографии нативных белков, для решения ряда задач необходимо проводить хроматографическое разделение модифицированных (восстановленных, окисленных, карбоксимети-лированных, алкилированных и т. д.) белковых производных. Прежде всего это необходимо при определении аминокислотной последовательности тех белков, которые состоят из нескольких полипептидных цепей различной структуры. В этих случаях, прежде чем приступить к анализу последовательности аминокислот в полипептидных цепях, необходимо разделить последние. [c.207]

Цистеин. Сульфгидрильная группа остатка цистеина является одной из наиболее реакционноспособных в белках, и она особенно часто подвергается химической модификации. Для этой цели применяются а) алкилирование иодуксусной кислотой или иодацета- [c.163]

Токсическое действие. Для проявления токсических и канцерогенных свойств нитрозоамины требуют активации в организме до электрофильных соединений под действием ферментов. Предполагается, что активными метаболитами Л -нитрозоаминов с короткой углеводородной цепочкой являются диазоалканы. Молекулой-мишенью при действии веществ этой группы является ДНК. 10 % общего количества вещества, связывающегося с ДНК, приходится на алкилирование атома кислорода в положении 6 гуанина, что, по-видимому, определяет канцерогенное действие. Л -Нитрозоамины, вызывая повреждение эндоплазматического ретикулума, резко угнетают синтез белка в печени. Их взаимодействие с ДНК, РНК и белками клеток вызывает разного рода дистрофии и гибель большей части клеточных популяций. Установлено иммунодепрессивное действие Л -нитрозоаминов на специфические и неспецифические иммунные системы организма. [c.709]

Начиная со 2-й пол. 20 в. бурно развиваются кинетич. методы исследования, происходит становление теории цепных реакций (Н. Н. Семенов), основ теории кислотно-основного (Бренстед — Лоури) и гетерог. катализа, на базе к-рых разрабатываются пром. методы дегидрирования углеводородов, в т. ч. нефтяных, с получением олефинов, бензола и его гомологов, алкилирования парафивов олефинами и др. Большое значение приобрели синтез Фишера — Тропша (восстановление окиси углерода водородом) с получением метанола и тедельных углеводородов, р-ция Дильса — Альдера, карбодиимидный синтез пептидов, методы определения последовательности аминокислот в белках. В связи с возникшей проблемой дефицита жидкого топлива огромное значение приобрела р-ция Бергиуса (гидрирование угля в жидкие углеводороды, 1912—13). [c.413]

А от гема, и эти различия не меняют существенно конформацию полипептидной цепи вблизи гема или в любой другой области молекулы. Кроме того, было обнаружено, что алкилирование бром-ацетатом остатков гистидина, способных вступать в эту реакцию (7 из 12 в миоглобине кашалота), оказывает очень малое влияние на спектр. Следовательно, все эти остатки также удалены от гема более чем на 10 А. Остатки гистидина (Гис-64, Гис-93 и Гис-97), связанные с гемом ван-дер-ваальсовым взаимодействием, не алки-лируется. Все это показывает, что изменения в участках молекулы белка, удаленных от порфиринового кольца на расстояния, на которых уже не проявляются ван-дер-ваальсовы взаимодействия, не оказывают влияния на распределение спиновой плотности в гем-группе. В процессе эволюции структурные изменения не затрагивали ту часть молекулы, где расположен гем, так что оставалась неизменной и биологическая функция молекулы. [c.374]

Алкилированные полимеры и соли третичных аминов — сильно-основные катионные флокулянты рК, рассчитанная по точке полу-зквивалентности, составляет 12—12,4. Они флокулируют отрицательно заряженные коллоидные частицы, образуют комплексы с гуминовыми веществами и белками, используются при флотации. [c.38]

Ягендорф и др. [31] разработали метод связывания белков, основанный на ацилпровании гидроксильных групп в целлюлозе бромацетилбромидом с последующим алкилированием аминогрупп белка [c.179]

Все эти методики использовались для оценки реакционной способности SH-групп в разных структурах. Это особенно важно при исследовании белков в тех случаях, когда изменение рК ЗН Групп рассматривают как функцию структуры ближайшего окружения. Эти изменения в действительности могут быть очень значительными так, скорости алкилирования SH-rpynn в тиолсо-держащих ферментах могут различаться на пять порядков, [c.149]

Следует привести еще несколько примеров успешного применения гель-фильтрации в тонком слое. Линк [36] показал, что фракционирование в тонком слое можно проводить в присутствии 8М мочевины или 6,5 М хлоргидрата гуанидина. В этих условиях он сопоставил скорости миграции нативного и модифицированного (восстановленного и алкилированного) р-белка из спинномозговой жидкости. Совпадение скорост-ей миграции обоих образцов указывало на отсутствие в белке субъединиц с различным молекулярным весом. В сочетании с электрофорезом тонкослойную гель-фильтрацию применяли как удоб1у>1й метод контроля при выделении аминоацил-т-РНК-синтетаз [37]. При сопоставлении результатов анализа путем тонкослойной гель-фильтрации на G-200 двух фракций с валил-т-РНК-синтетазной активностью, но несколько различавшихся в функциональном отношении, оказалось, что обе фракции довольно близки по размерам молекул [38]. Радола [67] использовал тонкослойную гель-фильтрацию для решения ряда задач к ним относится анализ сывороточных белков животных и человека, растворимых белков культуры клеток млекопитающих in vitro, растворимых белков из листьев шпината. [c.266]

При алкилировании белка 2-бром ацетамидо-4-нитрофенолом или 4-бромацетамидо-З-нитрофенолом получают окращенное в желтый цвет производное с так называемой репортерной группой, спектр которой зависит от ее непосредственного окружения [272, 273]. В случае триозофосфатдегидрогеназы — белка, состоящего из 4 субъединиц, каждая из которых имеет НАД-свя-зывающий участок и активную 5Н-группу — 1 моль фермента связывает 3,7 моля 2-бромацетамидо-4-нитрофенола. В районе pH 7,0—7,6 е соответствующей группировки в белке составляет 7100М- см- (при Хтах = 390 нм). Алкилирование ведет к потере 3,8 моля ЗН-групп и полной инактивации фермента. [c.376]

Если из раствора модифицированного белка сорбцией на угле удалить НАД, а затем прибавить вновь, то полоса поглощения репортерной группы (390 нм) смещается в длинноволновую область. В дифференциальном спектре при таком смещении обнаруживается максимум при 420 нм и минимум при 370 нм. Алкилирование дегидрогеназы 4-бромацетамидо-З-нитрофенолом протекает примерно с таким же выходом (4,1 моля), а полоса репортерной группы 426 нм смещается в область 436 нм (при 435 нм и pH 6,9 е = 3000 М см ) [274]. Однако при добавлении НАД эта полоса смещается в коротковолновую область спектра. Эти же реагенты способны алкилировать остаток метионина в химотрипсине при добавлении бензоилфенилаланина к модифицированному ферменту полосы этих двух группировок также смещаются в противоположных направлениях. Репортерная группа ТНМ обладает аналогичными свойствами [49]. [c.376]

ИОДУКСУСНАЯ КИСЛОТА J H2 OOH, мол. в. 185,96 — бесцветные ромбич. формы кристаллы (из воды или петролейного эфира), т. пл. 83°, 2,2694, 2,1893 константа диссоциации в воде К = = 7,0 10 (18°) и 7,4 10 (26°) поверхностное натяжение 38,63 дин1см (85°), 33,41 дип/см (130°) растворима в воде и спирте, слабо растворима в эфире. И. к. сильно раздражает слизистые оболочки, на коже вызывает сильные ожоги. И. к. легко реагирует с 8Н-гр нпами тиогликолевой к-ты, цистеина, глутатиона и белков, образуя алкилированные производные этих веществ [c.147]

Алкилирование 5Н-групп. Для определения содержания сульфгидрильных групп в белках или для ингибирования ряда 8Н-содержащих ферментов ранее довольно широко применялись такие алкилирующие агенты, как йодацетат, йодацетамид, йодэтанол и другие. Однако в настоящее время известно, что все они могут необратимо соединяться с 8Н-группами только в мягких условиях (pH 7—8). Реакция протекает согласно уравнению [c.66]

Алкилирование. Для алкилирования белков используются такие реагенты, как диметилсульфат, йодистый и бромистый метил и диазометан (СНгМг). Реакция идет в слабощелочной среде при температуре 20—25°, и ее механизм аналогичен таковому реакции аминогрупп свободных аминокислот. Помимо аминогрупп в эту реакцию могут вступать сульфгидрильные группы и гидроксильные группы тирозина. [c.67]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология