Фосфорилаза свойства

Из ферментов, осуществляющих распад ДНК и РНК не по гидролитическому пути, следует назвать полинуклеотид-фосфорилазу и группу ДНК-гликозидаз. В настоящее время подробно изучены физико-химические свойства и биологическая роль микробной полинуклеотид-фосфорилазы [c.499]

Фермент фосфоролиза может существовать в двух формах (А и В), отличающихся друг от друга по ряду свойств, в частности по молекулярному весу. Активной формой фермента является фосфорилаза А. [c.266]

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ свойства и регуляция ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ КИНАЗЫ ФОСФОРИЛАЗЫ > [c.54]

Обычно активные центры ферментов включают части всех структурных доменов глобулярного белка. Активные центры всех известных мультидоменных белков (табл. 5.2) расположены между доменами (рис. 4.1). Эти домены определяются не только как глобулярные области, разделенные полостью активного центра, но имеют и другое характерное для доменов свойство — они связаны между собой только одной пептидной цепью (табл. 5.2). Субстраты и кофакторы обычно присоединяются к разным доменам. В случае NAD связывающий кофактор домен всегда имеет ту же самую с довольно развитой открытой поверхностью топологию н NAD присоединяется в эквивалентных положениях (рис. 5.17, б), что является результатом эволюции [254, 255]. Кроме того, этот домен обнаружен на N-конце трех дегидрогеназ и одной киназы [230— 233, 235], а также на С-концевой половине четвертой дегидрогеназы [234] и в средней части фосфорилазы [236], что указывает на возможность дупликации соответствующего гена и его переноса в другое место генома. Все эти факты, включение в активный центр частей различных доменов, наличие кофакторепецифичных доменов и возможность переноса домена дают основание предположить, что ферменты конструируются с использованием модульной системы кофактор и субстратспецифичные домены, необходимые для обеспечения заданной функции, отбираются и объединяются в одной цепи глобулярного белка [124, 256]. [c.117]

Д. получают а) термич. обработкой крахмала в течение 5—6 ч при 180—190° С (бескислотные Д.) б) частичным кислотным гидролизом крахмала при перелю-шивании его в течение 3—3,5 ч с соляной к-той при 125—155° С (кислотные Д.). При расщеплении гликогена в организме человека и животных или in vitro (вне организма) нек-рыми фермептами (а-, -, у-амила-зами и фосфорилазой) образуются еоответственпо а-, -, у- и Ф-Д. Конечные а-Д.— олигомеры, конечные -, у- и Ф-Д.— полимеры. При гидролизе крахмала а-амилазами животного или растительного происхождения образуется а-Д., основные типы и свойства к-рого приведены в таблице. Мол. массы - и Ф-Д. составляют ок. 30—50% от мол. массы исходного полисахарида. [c.341]

Подобно аффинной хроматографии, аффинный электрофорез в геле можно применять для определения констант диссоциации комплексов белок — лиганд. Принцип метода заключается в изучении зависимости подвижности данного белка от концентрации связанного лиганда в геле. Этот лиганд может быть либо ковалентно связан с гелем, либо только включен в гель (последнее обусловлено высокомолекулярными свойствами лиганда). Впервые такое использование электрофореза описано Такео и Накамурой [50], (хотя в этой работе еще не введен термин аффинный электрофорез ) константы диссоциации комплексов фосфорилаза— полисахарид определены с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, содержащем различные концентрации ковалентно связанного полисахарида. Бег-Хансен [9] применил электрофорез на сефарозе с ковалентно связанным конканавалином А для определения констант диссоциации комплексов конканавалина А с сывороточными гликоиротеинами. [c.168]

Фосфат глюкозы, или 1-глюкозофосфат (1-глюкозофосфорная кислота), иногда называемый эфиром Кори , образуется из полисахаридов — крахмала и гликогена — при их расщеплении ферментом фосфорилазой в присутствии неорганических фосфатов. Разрыв гликозидной связи при расщеплении полисахарида сопровождается присоединением к отщепляющемуся остатку глюкозы фосфорной кислоты (такой процесс называется фосфороли-зом). 1-Глюкозофосфат, в свою очередь, является исходным веществом при биосинтезе крахмала и гликогена (см. стр. 713 сл.) так как в 1-фосфате глюкозы этерифицирован полуацетальный гидроксил, этот эфир не обладает восстанавливающими свойствами. Характерна стойкость его к щелочному гидролизу и легкость гидролиза разбавленными минеральными кислотами. Удельное вращение 1-глюкозофосфорной кислоты [а] =-И20. [c.661]

В печени гликоген-фосфорилаза также присутствует в а- и fe-форме в принципе ф1ерменты печени функционируют подобно мышечньпл, от которых они, впрочем, несколько отличаются по своей структуре и регуляторным свойствам. Расщепление гликогена в печени имеет иное назначение, нежели в мышцах этот процесс служит источником свободной глюкозы крови. Под действием фосфорилазы печени образуется глюкозо-1-фосфат, который затем превращается в глюкозо-6-фосфат, являющийся уже непосредственным предшественником свободной глюкозы. Реакция, в ходе которой образуется D-глюкоза крови, катализируется ферментом глюкЬзо-6-фосфатазой [c.464]

Итак, отбор фармакологически активных веществ только по наличию в них фенольных гидроксильных групп является условным, так как фенольная группировка не определяет активность (за исключением эстрогенов). Действительно, для проявления фармакологической активности необходимо наличие в веществе азота, положительный заряд которого обусловливает высокое сродство к кислотным группам рецепторов. Так, атомы азота катехинаминов при физиологических значениях pH находятся в ионизированном состоянии, а фенольное кольцо может лишь слабо взаимодействовать с комплементарными рецепторными группами путем образования водородных связей. Даже в тех случаях, когда введение фенольной гидроксильной группы существенно не влияет на биологическую активность, может происходить образование эфиров (метиловых или глюкуроновых), что создает возможность быстрой инактивации. Однако пирокатехиновая группировка имеет большое значение в активации фосфорилазы. Наличие фенольных групп у лекарственных препаратов дает возможность изменять фармакологические и токсические свойства этих веществ путем конъюгации. Наконец, фенольная группировка влияет на растворимость, а следовательно, и на способность проникать через [c.389]

Для того чтобы выделить фермент и дать возможно более полную характеристику его физических, химических и каталитических свойств, прежде всего следует выбрать объект, отличающийся высоким содержанием исследуемого фермента. Сейчас известно, например, что бобы канавалии содержат много уреазы, что батат богат р-амилазой, ячменный солод — а-амилазой, млечный сок папайи — папаином, клубни картофеля — фосфорилазой, листья сахарной свеклы — инвертазой, в щитке семян кукурузы содержится много рибонуклеазы и т. д. Для экстрагирования фермента необходимо разрушить цитоплазматическую мембрану клетки, а возможно, и клеточную оболочку. С этой целью применяют обработку материала с помощью пресса или в гомогенизаторе, растирание в ступке с песком, встряхивание при высоких скоростях с песком или стеклянными шариками, замораживание и оттаивание, а также высушивание ацетоном. При выделении [c.98]

Баум и Джилберт [26], а также Фишер и Хил-перт [59 ] выделили из картофеля кристаллическую фосфорилазу были изучены ее химические и физические свойства [103]. Как показали исследования с помощью аналитического ультрацентрифугирования и электрофореза, этот фермент оказался гомогенным, его коэф- [c.148]

Второй проблемой, ждущей разрешения, является вопрос о ферментативном механизме, обусловливающем образование разветвленной структуры молекулы крахмала. Фермент, участвующий в образовании а-(1,6)-связей, впервые был обнаружен Кори и Кори [41 ] в мышцах. Этот фермент, первоначально названный группой Кори фактором ветвления , позднее получил название амило-(1,4,1,6)-трансглюко-зидазы. Он способен совместно с фосфорилазой синтезировать гликоген из глюкозо-1-фосфата. Сходный фермент был выделен Хэуортом и сотр. [83] из клубней картофеля он был назван Q-ферментом. Впоследствии Q-фермент был обнаружен и в других растениях. Его удалось выделить в кристаллическом состоянии [70]. Свойства очищенного Q-фермента были изучены Питом и сотр. [141 ]. При использовании очищенного Q-фермента и фосфорилазы из глюкозо-1-фосфата был получен разветвленный полисахарид, подобный амилопек- [c.153]

Было установлено, что многие ферменты обнаруживают свойства, согласующиеся с механизмом двухтактного замещения, в том числе высокий каталитический эффект в соответствующей реакции обмена и сохранение оптической конфигурации в продукте реакции. В то же время многие реакции переноса не обнаруживают таких свойств в продукте реакции происходит обращение конфигурации и не наблюдается обмена в отсутствие одного из субстратов. Так, например, реакция фосфорилазы мальтозы [6] являет собой полный контраст реакции фосфорилазы сахарозы. Для этого фермента в отсутствие акцептора сахара не наблюдается обмена фосфата ни с а-, ни с р-глюкозо-1-фосфатами, а при фосфоролизе мальтозы (а-глюкозилглюкозид) образуется р-глюкозо-1-фосфат, т. е. происходит полное обращение конфигурации. Эти наблюдения свидетельствуют в пользу механизма однотактного замещения [6]. [c.123]

Как трактовать эти различия Тенденция объяснить их несовершенством методов изучения неверна (хотя некоторые авторы и допускают методические ошибки в определениях). Их следует понимать, прежде всего, как выражение динамики, с одной стороны, распределения различных ферментов (уридиндифосфатглюкозотранс-феразы, фосфорилазы, амилазы и т. п.),-с другой — степени их местной активации (или торможения), и с этих позиций нужно стремиться к экспериментальному раскрытию существа дела. Опыт гистохимического изучения последних лет показывает, что механизмы синтеза гликогена представлены в нервной системе и у млекопитающих универсально, но степень их активности очень различна в конкретных условиях существования. В периоды относительного покоя синтез во многих разделах системы заторможен (например, в кор.е мозга), что отражается на многих функциональных свойствах. Обогащение гликогеном возникает при гипергликемии, что неоднократно было воспроизведено нами даже простейшими средствами (например, введением глюкозы), при толерантных дозах аминазина [19], причем начальные этапы реакции характеризуются обогащением олигодендроцитов полисахаридом,. .ферментируемым амилазой и фосфорилазой при этом аминазин не только повышает количество гликогена в нейронах коры мозга и мозжечка, но и в синапсах спинного мозга. [c.160]

ДЕКСТРИНЫ ( eHioOs) — продукты частичного расщепления крахмала и гликогена Д. легко растворимы в поде. Д. образуются из полисахаридов при их термич. обработке, кислотном гидролизе, а также под действием различных ферментов, расщепляющих полисахариды типа крахмала и гликогена (а- и -амилазы и фосфорилазы). При этом образуются соответственно a-, - и Ф-Д. Свойства Д. в значительной степени обусловливаются их мол. весом, зависящим от глубины распада исходного полисахарида. По мере убывания величины молекул Д., образующихся при а-амило-лизе крахмала, увеличиваются их восстанавлпшаю-щая способность, растворимость в спирте, уменьшается уд. вращение окраска Д. иодом меняется от синефиолетовой до красно-бурой, оранжевой и желтой. В зависимости от окраски иодом и растворимости в спирте различают а м и л о д е к с т р и н ы, э р и-т р о д е к с т р II н ы, а X р о д е к с т р и п ы и м а-л ь т о д е к с т р и н ы. Конечные а-Д. — олигосахариды, состоящие из небольшого числа глюк озных остатков. Конечные - и Ф-Д. характеризуются высокой степенью полимеризации. [c.529]

В корнях некоторых древесных растений (яблонь, груш, вишен и др.) содержится глюкозид флоридзин. При введении фло-ридзина в организм животных он делает ткань почек более проницаемой для глюкозы, вследствие чего происходит снижение содержания глюкозы в крови (гипогликемия) и выведение ее с мочой (глюкозурия). Флоридзин тормозит также действие фермента фосфорилазы, это свойство используется при изучении углеводного обмена. Молекула флоридзина построена из остатков глюкозы и аглюкона флоретина, который состоит из флор-глюцика и оксифеннлпропионовой кислоты. [c.92]

Появление вторичных изоферментов (группы 4—6 в табл. 12.4) может быть обусловлено рядом причин. Они образуются в результате модификации одиночной полипептидной цепи, причем эта модификация может иметь, а может и не иметь биологическое значение. Например, свойства нескольких ферментов, участвующих в обмене гликогена, зависят от того, в каком состоянии они находятся, фосфорилированном или де-фосфорилированном [818]. В результате гликоген-фосфорилаза,, киназа фосфорилазы и гликоген-синтаза существуют по крайней мере в двух формах — фосфорилированной и дефосфорили-рованной — и различаются по каталитической активности и свойствам эти группы ферментов должны быть включены в группу 4а. Ферменты, которые могут находиться в разных конформациях, например в результате аллостерических превращений, должны быть отнесены к группе 6, хотя специфика этих взаимопревращений и легкость, с какой они происходят, крайне затрудняет разделение таких форм. Конформационные изменения, по-видимому, совершенно необходимы для функционирования большинства ферментов они участвуют в осуществлении каталитического и регуляторного действия, но предположение о том, что ферменты могут находиться в более чем одной стабильной конформации, не связанной с катализом, не получило особого признания. Изоферменты этого типа, так называемые конформеры , пытались обнаружить с помощью метода обратимой денатурации [1273], и обычно эти попытки оказывались безуспешными. Тем не менее можно привести пример фермента такого рода — это кислая фосфатаза эритроцитов [1790]. [c.113]

Кальций — единственный универсальный вторичный мессенджер клеток животных и растений. Другие вторичные мессенджеры— цАМФ, инозиттрисфосфат и диацилглицерин — функционируют, по всей видимости, преимущественно в клетках животных. Наиболее распространенным рецептором для Са + в большинстве клеток является низкомолекулярный белок кальмодулин Км). Этот белок не претерпел существенных изменений в ходе эволюции, поэтому физико-химические свойства Км, выделенного из разных источников, практически идентичны. Кальмодулин содержит четыре Са-связывающих участка с константами диссоциации Кс1) от 4 до 20 мкМ. В результате связывания Са + происходит изменение конформации белка (см. разд. 2.2) и его активация. После этого комплекс Км— Са + связывается с белками-мишенями, в том числе мембранными, стимулируя (аденилатциклаза, (2а-АТФазы плазматической мембраны, киназа фосфорилазы, фосфолипаза Аг, цАМФ-фосфодиэстераза) или ингибируя (15-оксипростагландиндегнд-рогеназа, гликогенсинтетаза) их активность. [c.10]

Эта последовательность аминокислот повторяется у фосфорилаз различных животных и человека [23, 66—68], и, по всей вероятности, поэтому КФ из мышц кролика способна катализировать фосфорилирование всех до сих пор известных фосфорилаз животного происхождения [68], в то время как дрожжевую ФБ, имеющую в этом участке иную последовательностц КФ не фосфорилирует [69]. Специфичность действия КФ исследовали с помощью синтетических пептидов. Кинетические свойства неактивированной и активированной КФ, изученные в модельной системе, содержащей вместо ФБ синтетический тетрадекапептид, указывали на сходство величин константы Михаэлиса Кт для ФБ и пептида и на различие величин Ут [70, 71]. Определив, что первые шесть аминокислот не имеют существенного значения для активности КФ, авторы использовали в дальнейшем октапептид, соответствующий центру фосфорилирования, и его аналоги [72]. Оказалось, что для узнавания центра фосфорилирования важными являются шесть аминокислот, среди которых особое значение имеют гидрофобные аминокислотные остатки — Вал-15 и Иле-13, а также Арг-16. [c.58]

Ливанова Н. Б. Особенности четвертичной структуры и регуляторных свойств изозимов киназы фосфорилазы//Успехи биологической химии, 1988. Т. XXVIII. С. 44—65. [c.490]

Рассмотрим эту модель примен1лтельно к транспорту Ма и К (рис. 36.8). Две конформации белка - это формы Е, и уже описаннью ранее. Постулировано, что 1) связывающая ионы полость на Е, обращена внутрь клетки, а на Е - наружу и 2) Е, обладает высоким сродством к Ма" , а Ед - к К . Модель исходит также из двух установленных фактов, а именно 1) Ма" запускает фосфорилирование, а К" - дефосфорилирование, 2) фосфорилирование стабилизирует форму Ед, а дефосфорилирование - форму Е . На рис. 36.8 Е, и изображены совершенно разными по конформации. Нужно, однако, подчеркнуть, что структурнью различия между этими двумя формами вовсе необязательно должны быть большими. Сдвига нескольких атомов на расстояние 2 А может оказаться достаточно, чтобы изменить ориентацию полости и сродство к Ма или К" . Существует множество прецедентов, позволяющих считать, что фосфорилирование способно вызвать изменения такого масштаба. Вспомним влияние фосфорилирования на свойства гликоген-фосфорилазы и гликоген-синтазы или на изменение сродства гемоглобина к кислороду при нековалентном связывании бисфосфоглицерата. [c.309]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология