Хлорофиллы, хроматографическое разделение

Основоположником хроматографического анализа является русский ботаник Михаил Семенович Цвет, изучавший состав хлорофилла. Он настойчиво искал эффективный метод разделения сложных смесей органических соединений, которые извлекал неводными растворителями из свежих и сухих листьев растений. Анализируя причины неполной экстракции, М. С. Цвет высказал предположение, что полному извлечению пигментов препятствует их адсорбция тканью листа. Опыты с различными порошкообразными сорбентами подтвердили это—при пропускании растворов сложных смесей через заполненную мелом колонку они разделялись на отдельные окрашенные зоны. [c.5]

Хроматографический анализ. При химическом исследовании хлорофилла большие трудности встречаются при разделении и очистке близких по свойствам растительных пигментов. Они не перегоняются и не разделяются перекристаллизацией. Кроме того, они весьма легко изменяются при химической обработке. Поэтому очень большое значение приобрел особый метод разделения этих пигментов, изобретенный в 1906 г. русским ботаником М. С. Цветом (1872—1919) и названный им хроматографическим адсорбционным анализом. [c.590]

Хлорофилл — зеленый пигмент растений — состоит из смеси нескольких пигментов. При пропускании вытяжки из зеленого листа через сорбционную колонку происходит разделение пигментов в соответствии с избирательной адсорбируемостью, при этом химический состав пигментов не изменяется, что и позволяет использовать хроматографический метод для препаративного получения отдельных пигментов в чистом виде. [c.28]

Опыт 102. Хроматографическое разделение хлорофилла на составные части [c.217]

Эти закономерности адсорбции веществ из многокомпонентных растворов легли в основу хроматографии — метода разделения и анализа многокомпонентных смесей. Впервые этот метод был применен М. С. Цветом (1903 г.) для разделения на составные компоненты сложного растительного пигмента— хлорофилла. Пропуская раствор хлорофилла через слой оксида алюминия, помещенного в стеклянную трубку (колонку), М. С. Цвет обнаружил, что отдельные компоненты этого сложного вещества адсорбируются на разных уровнях по высоте колонки. В верхней части накапливается компонент, обладающий наибольшей адсорбционной способностью (рис. 68 а, компонент С), последующие зоны соответствуют компонентам со все более уменьшающейся адсорбционной способностью. Так как отдельные компоненты хлорофилла окрашены, то эти зоны легко различить по окраске. Такой окрашенный столбик адсорбента М. С. Цвет назвал хроматограммой, а сам метод анализа — хроматографическим, [c.176]

Хроматографическое разделение пигментов зеленых листьев растений состоит из следующих этапов 1) экстрагирование пигментов из растительного материала 2) образование хроматограмм 3) получение растворов хлорофилла-а, хлорофилла-р и каротиноидов. [c.296]

Большую роль в развитии учения об адсорбционных процессах сыграли работы М. С. Цвета [37 ] в области адсорбционного (хроматографического) разделения хлорофиллов. Им была показана возможность разделения слон нейших органических смесей на составные компоненты. [c.246]

В какой-то степени эти требования выполняются в методе разделения смеси веществ, получившем название хроматографического. Впервые хроматографическое разделение сложной смеси (хлорофилла) было осуществлено М. С. Цветом в 1903 г. [c.8]

Важнейшую роль в развитии учения об адсорбционных процессах имели работы М. С. Цвета [60] в области адсорбционного (хроматографического) разделения хлорофиллов. Он показал возможность разделения сложнейших органических смесей на составные компоненты и дал методику проведения анализа по разделению таких смесей. [c.183]

Используется для выделения и очистки хлорофилла и каротиноидов, хроматографического разделения порфириновых пигментов и других веще [c.190]

Мейер [49]). Мейер описывает некоторые флуоресцирующие растворы хлорофилла в этаноле как коллоидные, однако не приводит в пользу этого никаких доказательств (см. Смит [52]). Полученные Мейером водные коллоиды хлорофилла, в которых плотность частиц была такой же, как и в гранулах хлоропластов, не давали флуоресценции. Хлорофилл не флуоресцирует также и в адсорбированном состоянии, например, на колонке из крахмала при хроматографическом разделении [51]. [c.186]

Хроматография. Хроматографией называется разделение веществ в результате сорбционных процессов при направленном движении одной из фаз. Впервые этот метод был использован русским ботаником М. С. Цветом (1904 г.) для разделения хлорофиллов. В дальнейшем с помощью хроматографии были разделены каротины (Р. Кун), а в сороковых годах были разработаны методы хроматографического разделения веществ, находящихся в газовой фазе. [c.83]

Возникновение и дальнейшее развитие хроматографии связано с анализом нестабильных соединений. Когда М. С. Цвет [1 ] в своем первом опыте провел разделение хлорофилла — красящего вещества зеленого листа — на компоненты а и б, его оппоненты, в том числе и Р. Вильштеттер, подвергли результаты опыта сомнению, поскольку разделяемые соединения чрезвычайно реакционноспособны и нестабильны, и были основания считать, что они под действием сорбента превращаются в другие вещества. Однако М. С. Цвет доказал, что в данном случае происходит прямое хроматографическое разделение реакционноспособных веществ, ибо он применил сорбент с малой сорбционной емкостью, который не катализировал превращений этих соединений и слабо удерживал тяжелые компоненты, т. е. они сравнительно быстро продвигались по хроматографической колонке. [c.5]

Сернокислый кальций" , содержащий воду, употребляется для хроматографического разделения растительных красящих веществ из их водных растворов, а безводный сернокислый кальций — для разделения хлорофиллов из их растворов в петролейном эфире. [c.79]

Хроматографический метод впервые был применен для разделения смеси органических соединений. Классические работы М. С. Цвета, как известно, были проведены со смесью растительных пигментов—хлорофилла, ксантофилла и каротиноидов. В дальнейшем развитии хроматографического метода большое значение имели работы многих ученых, также изучавших хроматографическое разделение органических веществ. [c.131]

Открытие М. С. Цветом хроматографического разделения а-и -хлорофиллов стимулировало ряд работ по изучению их свойств. Оказалось, что наиболее удобно разделять хлорофиллы адсорбцией по Цвету на сахарной пудре. При этом р-хлорофилл образует темнозеленую полосу, а а-хлорофилл—синюю. Хорошие результаты дает также адсорбция на инулине из раствора хлорофилла в дихлорэтане. [c.178]

Работа №56 Хроматографическое разделение пигментов хлорофилла [c.244]

Работа № 53. Вытеснение адсорбированного вещества Работа № 54. Обратимость ионного обмена. ... Работа № 55. Количественное определение ионов натрия в растворено обменной адсорбции (на катионите) Работа № 56. Хроматографическое разделение пигментов хлорофилла............... [c.338]

Хроматографический анализ. М. С. Цвет установил (1903), что многие твердые материалы, весьма различные по химическому характеру, обнаруживают способность избирательного и последовательного поглощения из растворов тех или других растворенных веществ, что дает возможность достигать с их помощью разделения на составные части таких сложных естественных продуктов, как хлорофилл и др. Этот метод получил название хроматографического адсорбционного анализа, так как при разделении окрашенных веществ путем пропускания раствора их через колонку с адсорбентом различные зоны последнего приобретают разную окраску. Однако под тем же названием этот метод применяется для разделения и неокрашенных продуктов. В настоящее время выработаны новые приемы и методы хроматографического анализа. [c.373]

Создателем хроматографического метода анализа является русский ученый М. С. Цвет, который в 1903 г. разработал хроматографический метод разделения компонентов красящего вещества зеленых листьев растений — хлорофилла. В настоящее время хроматографический анализ получил широкое распространение и развитие и используется не только в аналитической химии, но и в других областях науки и техники. [c.319]

Основоположником хроматографического метода и самого термина хроматография является русский ботаник М. С. Цвет. В 1903 г. он опубликовал работу о разделении хлорофилла на компоненты путем пропускания его раствора через трубку, заполненную [c.346]

Ионообменная хроматография — один из видов хроматографического анализа, основы которого были созданы в 1903— 1906 гг. Цветом первоначально с целью разделения пигментов группы хлорофилла. Современная хроматография — это метод разделения веществ (молекул или ионов), основанный на различиях в скорости переноса растворенных веществ в системе двух фаз, одна из которых подвижна компоненты перемещаются через систему только находясь в подвижной фазе, в направлении ее движения. Компоненты, распределяющиеся предпочтительно в неподвижной фазе, двигаются медленнее компонентов, находящихся в основном в подвижной фазе. Таким образом, различия в равновесном распределении компонентов между двумя фазами и в кинетике обмена обуславливают различия в линейных скоростях движения компонентов и в конечном счете ведут к их разделению. [c.686]

Из сравнения А тл Б (фиг. 6) видно, что результаты, полученные этими двумя методами, достаточно хорошо согласуются. Две полосы хлорофуцина расположены в оранжевой и красной областях с максимумами у 575,5 и 627 м >. в метаноле и у 581 и 631 в 80-процентном ацетоне. На фиг. 6, В, видна также полоса в синей области спектра (у 446 м х), почти в 10 раз большей интенсивности, чем длинноволновые максимумы. Отношение интенсивностей этих полос, таким образом, гораздо больше, чем у хлорофилла Ь (для которого это отношение равно 3), не говоря уже о хлорофилле а, у которого обе полосы почти одинаковы по интенсивности (см. табл. 2 и 10). Однако общая картина спектра имеет один и тот же характер. Вассинк и Керстен [61] и Танада [71] дают аналогичные кривые поглощения для фракции хлорофилла с, полученной при хроматографическом разделении пигментов диатомовых водорослей. В метаноле они наблюдали три максимума поглощения, около 450, 590 и 635 причем первая полоса была почти в 10 раз интенсивнее двух других (см. стр. 30). [c.21]

В хроматографическую колонку вводят 5 мл экстракта. Образуется первичная хроматограмма, которую промывают смесью бензина и бензола (10 1). При промывании колонки происходит разделение зон вверху колонки образуется зеленая зона чистого хлорофилла р, далее — зона хлорофилла а и ниже располагается зона желтого цвета — каротиноиды. При дальнейшем промывании колонки растворителем в фильтрат переводятся сначала желтые пигменты (каротиноиды), затем хлорофилл а и последним хлорофилл р. Каждую фракцию собирают в отдельный приемник. [c.30]

В 1906 г. Цвет обнаружил, что если налить раствор хлорофилла, приготовленный из листьев, в верхнюю часть колонки с подходящим адсорбентом, образующаяся окрашенная полоса при последующем промывании колонки растворителем разделяется на ряд полос, движущихся с различными скоростями. Каждый компонент исходной смеси представлен отдельной полосой его можно получить в чистом виде, собирая разные растворы по мере того, как они выходят из колонки, или разрезая колонку по длине на части и вымывая пигмент из каждой такой части. Этот метод нашел широкое применение для разделения веществ, которые трудно разделить другими методами. Он оказался чрезвычайно ценным при обнаружении и разделении биологических веществ. Использование хроматографического метода для разделения радиоактивных веществ дает возможность обнаруживать и разделять очень малые количества этих веществ. [c.252]

В качестве одной из фаз можно использовать порошок или мелкие частицы ими заполняют вертикальную колонку или наносят их тонким слоем на стеклянную пластинку. Все эти методы называются хроматографическими— термин, предложенный М. Цветом, который впервые в 1903 г. описал разделение пигментов, присутствующих в листьях растений (хлорофилла и каротинов). Пропуская пигменты, растворенные [c.159]

Стандартным методом разделения широко исследуемых природных магниевых комплексов — хлорофилла а и Ь после нх выделения (обычно из листьев крапивы) и предварительной очистки является хроматографическое разделение в смеси петролейного и диметилового эфира на сахарной лудре. [c.417]

Разделение веществ, основанное на этом принципе, называют хроматографией (что нри буквальном переводе на русский означает цветописание ). Первое хроматографическое разделение провел русский ботаник Цвет (1903 г.), который разделил этим способом хлорофилл на отдельные окрашенные компоненты. [c.11]

Адсорбенты. Выбор адсорбента до настоящего времени частично производится опытным путем. В то же время накапливается все больше данных о пригодности тех или иных адсорбентов для разделения веществ с определенным химическим строением, приводится несколько примеров применения специфических адсорбентов. В каждом отдельном случае выбирают такой адсорбент, который обладает наибольшей избирательностью по отношению к отдельным компонентам смеси, подлежащей разделению. Выбор адсорбента частично зависит от характера применяемых растворителей. Для анализа веществ с полярными группами в молекуле могут применяться окись алюминия и окислы других металлов. Для разделения кароти-1ЮНД0В обычно используются окись алюминия, гидрат окиси кальция, углекислый цинк и углекислый кальций, адсорбирующая способность которых уменьшается в приведенной последовательности. Стрейн исследовал последовательность адсорбции некоторых каротиноидов на колонках из сахара, целита и окиси магния. Относительная способность к адсорбции в значительной мере определялась избирательным сродством адсорбентов к характерным группам или частям молекул пигментов. Сахар преимущественно притягивает полярные гидроксильные группы ксантофиллов, а окись магния — ненасыщенные части молекул каротинов и ксантофиллов, а также и гидроксильные группы ксантофиллов. Стрейн применил колонки пз окиси магния для исследования ксантофиллов и хлорофиллов и показал, что распределение растворенных веществ в зонах адсорбции зависит от многих условий. Например, пигменты, образующие обычно одну окрашенную зону, могут образовать две зоны, в присутствии некоторых бесцветных примесей. Для разделения карбонильных соединений в виде 2,4-динитрофенилгидразонов был применен порошкообразный сернокислый магний.Брокманн показал, что растворимые в воде соли, например сульфаты меди и цинка, могут служить хорошими адсорбентами для хроматографического разделения производных азобензола. Сернокислый алюминий можно применять для разделения оксиантрахинонов, причем очень прочно адсорбированные вещества удается выделить только после растворения адсорбента в воде. [c.1491]

Начало] работ М. С. Цвета но хроматографическому разделению хлорофилла относится не к 1903 г., как указывают авторы, а к 1897—1898 гг., так как в 1901 г. он уже защитил диссертацию на тему Физико-химическое строение хлорофипльного зерна . В 1903 г. была опубликована его работа на эту тему. Ред.) [c.117]

Хроматография как общий метод разделения была открыта М. С. Цветом в начале XX в. Он предложил хроматографический метод разделения в жидкой фазе и описал его применение для анализа хлорофилла растений. На основании всего предыдущего, — писал М. С. Цвет, — выясняется возможность выработать новый метод физического разделения веществ в органических жидкостях. В основе метода лежит свойство образовывать физическпе и адсорбционные соединения с различнейшими минеральными и органическими твердыми веществами . Подобно световым лучам в спектре, различные компоненты сложного пигмента закономерно распределяются друг за другом в столбе адсорбента и становятся доступными качественному и количественному определению. Такой расцвеченный препарат я назвал хроматограммой, а соответствующий метод анализа — хроматографическим методом (М. С. Цвет. Хроматографический адсорбционный анализ.—М. Изд-во АН СССР, 1945, 273 с.). — Прим. ред. [c.11]

Для выделения природных фенольных ингибиторов зеленые листья (или другие растительные органы), растертые в жидком азоте, заливали 96%-ным этанолом, подогретым до 70°, и оставляли настаиваться в течение 2—3 дней, экстракт сливали, экстракцию повторяли до полного извлечения хлорофилла. Затем этанол выпаривали, водную фазу декантировали (освобождали от пигментов), а затем последовательно трехкратно экстрагировали эфиром, эти-лацетатом и н-бутанолом. Извлеченные фракции выпаривали досуха и растворяли в 70%-ном этаноле. Первое хроматографическое разделение фракции проводили на бумаге Ватман 3 ММ в одной из селективных смесей растворителей и с помощью цветных реакций и биотеста контролировали, в каку.о фракцию ингибитор перешел в наибольшем количестве. Для этих целей удобно использовать сопутст-34 [c.34]

Цвет не только показал качественно сложность состава растительных пигментов, но и сумел, пользуясь своим хроматографическим методом, впервые выделить количественно в чистом виде зеленые пигменты хлорофилл а и флорофилл Ь. Цвет с большой точностью определил спектральные характеристики выделенных им пигментов. Разработанная им методика количественного хроматографического разделения пигментов, в частности хлорофиллов, и до настоящего времени осталась в основных чертах без изменений и широко применяется в физиологических и биохимических лабораториях. Различные вариации в методике касаются главным образом подготовки экстрактов пигментов. [c.102]

С другой стороны, при работе с металлосодержащими производными тетрапиррола необходимо избегать условий, благоприятствующих деметаллированию этих комплексов. Большинство металлопорфирииов с трудом подвергается деметаллированию, однако это правило имеет и некоторые исключения. Например, магнийсодержащие порфирины теряют ион металла в присутствии даже следовых количеств соляной кислоты, которые содержатся в хлороформе, а также под воздействием сульфата магния, иногда используемого в качестве осушителя. Легкость деметаллирования магнийсодержащих хлорофиллов и бактериохлорофиллов с образованием соответствующих феофи-тинов создает одну из основных проблем, с которой приходится сталкиваться в ходе выделения и хроматографического разделения пигментов фотосинтезирующих клеток. К тому же, будучи ди- и тетрагидропорфиринами, эти соединения весьма склонны к окислению до порфиринов, изомеризации и ряду других превращений с образованием модифицированных хлорофиллов. В сущности, именно чрезвычайная чувствительность производных тетрапиррола к внешним воздействиям и заставила разработать описанные ниже очень мягкие методы выделения и хроматографирования этих соединений. [c.204]

Пигменты извлекают из лпстовой ткани смесью ацетона и бензина с соотношением 4 1 и после фильтрации отделяют бензиновую фракцию, содержащую все пигменты, от ацетона. Полученную в конечном итоге бензиновую фракцию используют для хроматографического разделения пигментов. При хроматографировании получают пять полос пигментов, хорошо отделенных друг от друга, в такой последовательности (от стартовой линии) хлорофилл Ь, хлорофилл а, виолаксантин, лютеии и каротины. [c.99]

Открытие хроматографии как метода разделения веществ при надлежит русскому ботанику М. С. Цвету, который в 1903 г. опубликовал работу, посвященную хроматографическому анализу хлорофилла. Ему принадлежит и название метода разделения (хроматография в переводе — цветописание), хотя он уже тогда указывал на возможность разделения этим методом и бесцветных вс]цеств. [c.175]

Если петролейно-эфирный раствор хлорофилла, — указывает М. С. Цвет и другой работе , — профильтровать через столбик адсорбента (я применяю для этого главным образом углекислый кальции, плотно набитый в узкие стеклянные трубки), то пигменты по расположению их в адсорбционном ряду отлагаются отдельными окрашенными зонами по с гол-бику сверху вниз, благодаря тому, что пигменты с более сильно выраженной адсорбцией вытесняют книзу слабее удерживаемые. Это разделение становится практически совершенным, если после пропускания вытяжки пигментов сквозь столбик адсорбента его промывать струей чистого растворителя. Как лучи света в спектре, в столбике углекислого кальция закономерно располагаются различные компоненты смеси пигментов, давая возможность своего качественного и количественного определепня. Полученный таким образом препарат я называю хроматограммой, а предлагаемую методику — хроматографической . [c.139]

Хлорофилл представляет собой зеленое красящее вещество высших растений. Для очистки и разделения его на хлорофилл а и хлорофилл Ь лучше всего использовать хроматографические методы (Цвет, 1906 г.). Оба соединения обычно содержатся в соотношении 5 2. Хлорофилл а является зеленым воскоподобным веществом (т.пл. 117—120°С). Оба хлорофилла оптически деятельны. Установление их строения было предпринято в 1906 г. Вильштеттером. Он установил, что имеет дело с комплексами магния. При действии кислот магний удалялся и образовывались феофитин а и феофитин Ь. Эти соединения могут быть омылены с образованием соответственно феофорбида а и феофорбида Ь и спирта фитола (см. раздел 3.6.3.). Решающий вклад в дальнейшее установление структуры был сделан Г. Фишером (1929—1940 гг.). Превращение феофорбида в этиопорфирин позволило увидеть связь между красителем крови и красителем зеленых листьев. [c.613]