Оксидаза определение

Эти факты определенно свидетельствуют об одинаковой конфигурации внутри каждого ряда субстратов. Для объяснения, их обычно предполагают, что происходит стереоспецифическая адсорбция субстрата на поверхности фермента, причем зоны адсорбции заместителей (например, СООН, ЫНз и Н) в одном случае расположены по часовой стрелке (оксидаза. -аминокислот), а в другом— против часовой стрелки (оксидаза О-аминокислот) [c.367]

Ферментативный метод определения оптической чистоты основан на использовании высокой стереоспецифичности ферментов. Так, например, фермент, окисляющий аминокислоты,— оксидаза аминокислот — обладает высокой стереоспецифичностью -аминокислоты окисляются этим ферментом в 1000 раз быстрее, чем О-аминокислоты. Таким образом, если взять О-аминокислоту, оптическую чистоту которой необходимо проверить, то отсутствие реакции с оксидазой аминокислот укажет на практически полную оптическую чистоту (не менее 99,9%). Если же ферментативное окисление якобы чистой О-аминокислоты идет с заметной скоростью, то это следует считать признаком того, что она содержит примесь -аминокислоты. [c.161]

Ферменты оксидазы, образующие пероксид водорода, можно использовать для амперометрического определения пероксида. [c.535]

Определение оксидазы. На крышку чашки Петри кладут фильтровальную бумагу (5 — 7 см в диаметре), наносят 2 — 3 капли 1%-го раствора тетраметилпарафенилендиамина, а затем петлей вносят культуру. При положительной реакции на месте нанесения культуры через 10—15 с появляется фиолетовое окрашивание. [c.178]

СО — NH —, глюкозидазы — глюкозидной связи в глюкозидах или полисахаридах, эстеразы — эфирную связь в эфирах карбоновой, фосфорной и серной кислот и т. д. Другую большую группу составляют ферменты-переносчики групп, катализирующие перенос от субстрата к акцептору определенной химической группы, такой, как атом водорода, фосфатная, глюкозильная или ацильная группы. Реакции с переносом атома водорода часто имеют отношение к образованию энергии в живой ткани, а ферменты называют оксидазами, если такой перенос осуществляется к молекулярному кислороду или от него, и дегидразами, если перенос осуществляется к другим молекулам или от них. Помимо этих двух больших групп, имеется множество более мелких групп, например для ферментов, катализирующих неокислительное декарбоксилирование, либо присоединение к двойной связи и противоположное ему разложение, либо изменения в пространственной конфигурации. [c.109]

Под действием инвертазы из сахарозы получают глюкозу. Для определения количества глюкозы в жидкостях тела в клиниках в последнее время стала широко использоваться глюкозо-оксидаза — как в свободной форме, так и иммобилизованная. [c.169]

Для определения оптической конфигурации аминокислот применяется микрометод, основанный на использовании D- и L-аминокислотных оксидаз (стр. 183) в сочетании с хроматографией на бумаге. При обработке гидролизатов казеина, ультрафильтратов нормальной плазмы, мочи и спинномозговой жидкости человека препаратами L-аминокислотной оксидазы наблюдается исчезновение аминокислот, чувствительных к действию указанного фермента. Этого не происходит при обработке тех [c.69]

Исследования оптической конфигурации аминокислот развиваются в различных направлениях некоторые из них рассмотрены в настоящей главе, другие будут обсуждены в дальнейших главах, посвященных вопросам обмена аминокислот и их роли в питании. Потребность в оптически чистых изомерах аминокислот для экспериментальных исследований очевидна. Определение удельного оптического вращения имеет значение для характеристики изомеров аминокислот, однако эта методика в большинстве случаев лишена той чувствительности, которая присуща ферментативным методам. Чистоту многих изомеров аминокислот можно проверить при помощи оптически специфических ферментов, таких, как оксидазы D-аминокислот (стр. 184) и L-аминокислот (стр. 187) или специфические к L-изомерам бактериальные декарбоксилазы (стр. 204). Эти методы позволяют обнаружить менее одной молекулы изомера аминокислоты в присутствии ГООО или даже 10 000 молекул ее антипода [544]. Вероятно, при усовершенствовании этих методов легко можно добиться еще более высокой чувствительности. [c.95]

Оксидаза D-аминокислот в организме млекопитающих находится только Б тканях печени и почек, причем активность ее в почках значительно выше, чем в печени. Этот фермент получен в высокоочищенном состоянии его число оборотов составляет от 1000 до 2000 в минуту [121, 122]. Фермент окисляет множество различных D-аминокислот и не проявляет поддающейся обнаружению активности по отношению к L-аминокисло-там. В связи с этим следует напомнить, что его используют для обнаружения ничтожных количеств D-аминокислот в присутствии высоких концентраций соответствуюших L-изомеров (стр. 95). Отмечены определенные видовые различия в субстратной специфичности фермента так, относительные скорости [c.184]

Рис. 50. Определение кинетических и равновесных параметров активации цианистым калием гидрирования оксидазы О-аминокислот в реакции с Р-хлораланином

О биостойкости материалов можно судить по действию на них ферментов тех микроорганизмов, которые идентифицированы в данных условиях эксплуатации. Коррозию металлов в этом случае называют микробиогенной (или ферментативной). Целесообразно проверять стабильность материалов относительно определенных классов ферментов (дегидрогеназы, оксидазы, гидролазы и др.). Эти испытания можно отнести к ускоренным или экспресс-методам. Так как ферменты действуют на материалы быстрее, чем микроорганизмы, возможно увеличение концентраций ферментов для интенсификации процесса возможно моделирование условий ферментативных реакций и выявления действительного характера процесса (при сравнении с протекающими в реальных условиях) возможна оценка ингибиторного действия биоцидных веществ [7, с. 68]. [c.76]

Такою же типа ячейки можно использовать для измерения спектральных характеристик веществ, у которых гетерогенный перенос электрона протекает настолько медленно, что прямое превращение на электроде затруднительно или невозможно. В таких случаях используют переносчик электрона, способный ЕС быстрому обме(1у электронами как с электродом, так и с исследуемым субстратом, т е. проводят непрямой электролиз. Зтот метод использовали при определении формальных потенциалов н чисст электронов при восстановлении цитохрома с и цитохром с—оксидазы [174] Изменения в спектрах, наблю-дави1иеся после последовательною кулонометрического генерирования всего Б-10- экв ( ) переносчика электронов, в данном случае катион-радикала 1,Г-диметил-4,4 -бнпирпдилия, представлены на рис 3 36 Другие примеры одновременного определения числа электронов п методами кулонометрин и спектроскопии содержатся в обзоре [162]. [c.141]

В других случаях ферменты проявляют специфичность к определенному классу соединений. Например, почечная оксидаза 0-аминок1гслот катализирует окисление целого ряда О-аминокислот, но не действует на 1,-аминокислоты. [c.41]

В патогенезе ищемического миокардита определенную роль играет энзимная система ксантин-оксидазы. При изучении более 103 различных флавоноидов наиболее активными в ингибировании этого энзима оказались 6- и 8-замещенные флавоны со свободными 5- и 7- гидроксилами из растений семейства губоцветных )180]. [c.137]

Описано определение серебра по ингибиторному действию в присутствии тиомочевины на каталитическое участие фермента р-фруктофураносидеазы (инвертазы) в реакции инверсии сахарозы [1206], а также микрокалориметрическое определение по ингибиторному действию серебра на катализируемую оксидазой реакцию между глюкозой и кислородом [1637]. [c.123]

На 3-й день исследования для идентификации чистой культуры у нее выявляют оксидазную активность и делают посев на среды с углеводами (табл. 2.4). Менингококки обладают оксидазой, ферментируют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты, лактозу, сахарозу и фруктозу не ферментируют, полисахарид из сахарозы не образуют, не растут в присутствии 0,2 % желчи. Для выявления оксидазной активности на кусочек фильтровальной бумаги, смоченной каплей свежеприготовленного 1%-го раствора солянокислого парадиэтилфенилендиамина, петлей наносят культуру менингококков. Культуры, обладающие оксидазной активностью, в течение 30 — 60 с вызывают вначале порозовение, а затем почернение бумаги с реактивом. Для определения способности образовывать полисахарид культуры нейссерий засевают на бескрахмальную среду с 1 % сахарозы и инкубируют при 37 °С в течение 24 — 48 ч, после чего на рост наносят каплю йодного раствора Люголя. В случае образования полисахарида сразу развивается буро-лиловое окрашивание. [c.118]

Способность иона меди активироваться оксидазно при взаимодействии с определенными компонентами протеиновых молекул и с некоторыми белками указывает на возможность вхождения меди в активн) ю группу оксидаз, что, как известно, действительно наблюдается. В адсорбционном слое наивысшей активностью обычно обладает единичный комплекс это показано автором для аммиакатов кобальта, адсорбированных на графите, а также для гемица на угле . Интересно, что такой сложный ком- [c.216]

Многие энзимы-оксидазы при выделении из инертного материала являются определенными кристаллизующимися соединениями. При фракционном гидролизе они часто отщепляют недиа-лизующиеся протеины-носители и характерные вещества с низким молекулярным весом, называемые простетическими группами . Специфичность действия энзимов, несомненно, связана с протеиновым компонентом, а каталитическое действие обусловлено, вероятно, простетической группой, хотя без специфического протеина она не является катализатором. Часто одна и та же простетическая группа выделяется из целого ряда биохимически связанных энзимов. [c.305]

Однако при выполнении оксидазного теста необходимо приготовление растворов реактивов перед определением. Горьковским научно-исследовательским институтом эпидемиологии и микробиологии разработана стандартная бумал<ная индикаторная система па оксидазу, которая представляет из себя фильтровальную бумажку, пропитанную соответствующими реактивами. В сухом виде бумажная система может сохраняться в темном месте длительное время. Для приготовления системы к ра- [c.155]

Еще не разрешен вопрос о том, всецело ли зависит поглощение кислорода растительными тканями от действия цитохромоксидазы. У растений, а также у животных часто наблюдается дыхание, устойчивое к действию ингибиторов цитохромоксидазы. Среди ученых, работающих в области биохимии животных, широко распространено мнение о преобладающей роли цитохромоксидазы. Эти ученые не могут принять отсутствие подавления окисью углерода или цианидом как доказательство того, что цитохромоксидаза не является конечной оксидазой [2,7]. В биохимии растений положение еще более туманно. Например, дифференциальные спектры определенно указывают, что в початках некоторых представителей семейства Агасеае цитохромоксидаза катализирует поглощение кислорода. Однако ингибиторы цитохромоксидазы не только не подавляют, но часто даже стимулируют поглощение кислорода. В присутствии этих ингибиторов цитохромы а и Из в значительной степени восстанавливаются, тогда как цитохром 67 остается в основном окисленным. Эти, а также и другие данные позволяют предпо- [c.239]

Бокучава М. А. Новый метод определения пероксидазы в присутствии полифенол-оксидазы и каталазы. Биохимия, 1948, [c.259]

N-ДИМЕТИЛ-п -ФЕНИЛЕНДИАМИН СОЛЯНОКИСЛЫЙ (и-диметиланилин хлоргидрат), мол. в. 209,12 [H3NG6HjN(GH3)al3 li — белый или сероватый кристаллич. порошок гигроскопичен, растворим в воде и спирте в кислых р-рах с окислителями дает красное окрашивание обладает сильным физиологич. действием (кровяной, сосудистый и нервный яд). Д. окисляется солями Fe " в нрисутствии HjS с образованием мети.леновой голубой. Получают восстановлением и-нитрозодиметиланилина или метило-Boj o ораняювого с помощью Sn la. Применяют для определения НзЗ и сульфидов V, lJ, Вг , озона в воздухе, в микроскопии для открытия оксидаз, а также как внешний индикатор при титриметрич. определении бария с помощью хромата. в. г. Типцова. [c.562]

Прежде чем перейти к классификации ферментов, посмотрим, из чего складывается название фермента. Большинство нз них оканчивается на -аза (например, мальтаза, оксидаза, зстераза пептидаза, трансфераза). Корень слов соответствует либо суб страту, на который действует данный фермент, либо реакции которую он катализирует. Например, мальтаза — фермент, дей ствующий на мальтозу. Оксидаза — фермент, катализирующий биологическое окисление. Эстеразы действуют на эфиры ester) пептидазы — на пептиды. Трансферазы — ферменты, осуществляющие перенос определенных групп или радикалов от одного субстрата к другому. Наименования некоторых пищеварительных ферментов (например, пепсин, трипсин, реннин) составляют исключение из этого правила. [c.355]

В настояще время изучаются модели следующих групп ферментов дегидрогеназ, оксидаз, некоторых гидролаз и, пожалуй, наиболее часто моделировавшегося фермента — каталазы. Все они (за исключением гидролаз) представляют собой комплексы (соединения) белка с определенной простетической группой изучение их шло по пути моделирования ее. Ряд ферментов содержит в своем активном центре атом металла, например каталаза — железо (в геме), полифенолоксидаза — медь. Естественно, что многие исследования были направлены на изучение каталитических свойств различных соединений металлов. Были получены модели каталазы — комплексные соединения кобальта, свинца, марганца, но наиболее эффективной при разрушении перекиси водорода оказалась медь. Известно, что некоторые комплексные соединения ее с азотистыми веществами, сравнительно простые по своему составу, типа, скажем, комплекса с диамином [c.329]

Одним из ответственных моментов количественного определения витамина С любым из перечисленных методов является приготовление вкстракта образца. Эта стадия анализа должна обеспечивать полное извлечение аскорбиновой кислоты при минимальном ее окислении. Известно, что наилучшим в этом отношении экстрагентом является 6%-ный раствор метафосфорной кислоты, обладающий способностью осаждать белки и инактивировать оксидазу аскорбиновой кислоты. При извлечении аскорбиновой кислоты из объектов, содержащих ионы металлов (кон-сергированные продукты, хранимые в нелакированной таре), хорошие результаты дает добавление в экстрагирующий раствор этилеидиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), которая образует комплексы с металлами [46]. [c.198]

Результаты определения глюкозы с помощью ферментного электрода в меньшей степени зависят от присутствия посторонних веществ, чем результаты анализа, проведенного каким-либо другим методом без использования ферментов. Гибсон и др. [507] и Кейлин и Хартри [508, 509] исследовали селективность реакции, катализируемой глюкозо-оксидазой. Если условно принять скорость окисления (З-о-глюкозы за 100, то 2-дезокси-о-глюкоза окисляется со скоростью 25, из восьми альдо-о-гексоз окисляются только о-манноза, о-альтроза и о-галактоза (с очень маленькой скоростью). Фермент ингибируется ионами Ag , Hg , u , н-хлормеркаптобензоата и фенилмеркуриацетата [510] эти ионы не должны присутствовать в определяемом растворе, если необходимо получить оптимальную функциональную зависимость тока электрода от концентрации глюкозы. Стабильность показаний электрода в течение всего срока службы исследовалась испытаниями в растворе глюкозы с концентрацией 5-10 моль/л (фосфатный буфер с pH 6,6). Испытания показали, что снижение тока по сравнению с максимумом составляет примерно 0,1%/сут за время хранения электрода при комнатной температуре в течение более 10 месяцев. [c.173]

Хорощо известно, что скорость ферментативных реакций зависит от pH. Гюильбо и Храбанкова [542 — 544] нащли, что оптимальное pH для реакций с оксидазой ь-аминокислот составляет 7 — 7,5, а для оксидазы о-аминокислоты 8 — 8,5. Поскольку такой электрод чувствителен к однозарядным катионам калия, натрия и аммония, их присутствие мещает определению аминокислот. Влияние этих катионов можно устранить, только удалив их из раствора ионным обменом. [c.187]

Смотреть страницы где упоминается термин Оксидаза определение: [c.191] [c.172] [c.80] [c.551] [c.345] [c.424] [c.139] [c.168] [c.172] [c.377] [c.390] [c.74] [c.347] [c.235] [c.164] [c.490] [c.191] [c.273] [c.437] [c.68] [c.240] [c.191] [c.186]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология