Фермент единицы активности

Определение амилолитической активности АС. Определение АС основано на зависимости степени гидролиза крахмала от количества единиц активности фермента, взятого для проведения реакции. [c.298]

Так как в процессе выделения фермента необходимо знать лишь относительную активность на отдельных стадиях очистки, то выражать ее можно в условных единицах (например, в единицах оптической плотности). Их выбор определяется методом измерения активности. После получения гомогенного или высокоочищенного препарата фермента его активность и удельная активность должны быть определены с использованием наиболее точных методов их измерения и выражены в международных единицах. Результаты очистки фермента суммируют в таблице [c.198]

Определение количественного содержания ферментов в биологических объектах представляет известные трудности, поскольку, за редким исключением, ферменты в тканях присутствуют в ничтожно малых концентрациях. Поэтому о количестве ферментов судят по скорости катализируемой реакции в определенных, согласованных условиях измерения. При оптимальных условиях температуры, pH среды и полном насыщении фермента субстратом скорость катализируемой реакции пропорциональна концентрации фермента. О скорости ферментативной реакции судят или по скорости убыли субстрата, или по скорости образования продукта реакции. Для выражения концентрации фермента и количественной оценки его активности в условных единицах Комиссией по ферментам Международного биохимического союза была рекомендована стандартная международная единица (Е или Ц) за единицу активности любого фермента принимается то количество его, которое в оптимальных условиях катализирует превращение 1 микромоля субстрата или образование 1 микромоля продукта в минуту (мкмоль/мин) . [c.157]

Число оборотов можно измерить только для чистых ферментов. Отчасти по этой причине активность фермента чаще выражается в единицах активности на i мг белка (удельная активность). Одна международная единица представляет такое количество фермента, которое-катализирует образование I мкмоль продукта в 1 мин при стандартных (обычно оптимальных) условиях. В настоящее время Международный биохимический союз [7] рекомендует новую единицу — катал (кат), представляющую собой количество фермента, которое катализирует превращение 1 моль субстрата в продукт за 1 с. [c.8]

За единицу активности амилолитических ферментов принято такое их количество, которое в строго определенных условиях температуры, pH и времени действия катализирует превращение 1 г растворимого крахмала до декстринов различной молекулярной массы. [c.284]

За единицу активности а-амилазы принимается такое количество фермента, под действием которого в принятых условиях pH и температуры за 1 ч проходит гидролиз до декстринов 1 г крахмала (что составляет 30% от введенного в реакцию). [c.298]

Концентрацию киназы фосфорилазы следует подобрать так, чтобы не более 20% добавленной фосфорилазы Ь превращалось в фосфорилазу й за 5 мин. Одна единица активности — это количество фермента, катализирующего превращение 1 мкмоль фосфорилазы Ь в фосфорилазу а в 1 мин при 30° С, pH 8,2. Для расчета учитывают молекулярную массу субъединицы фосфорилазы, равную 97 400 Да удельную активность фосфорилазы а в отсутствие АМФ принимают за 70% от активности фосфорилазы Ь, измеренной в присутствии АМФ. [c.224]

За единицу активности принимается начальная скорость гидролиза КМЦ (концентрация 10 г/л), равная 1 мкмоль образующихся ВС в минуту в рН-оптимуме активности фермента при 40° С. Лля характеристики препарата используют удельную активность, т.е. активность, расчитанную на 1 г ферментного препарата. [c.147]

Для оценки активности фермента удобно пользоваться относительной единицей активности фермента (О.Е.А.) [c.382]

Поляриметрический метод определения ОСп основан на зависимости удельного вращения плоскости поляризации раствора субстрата от количества единиц активности фермента, взятых для проведения реакции. [c.300]

Единицей активности фермента назьшается такая активность, при которой 1 мкмоль субстрата превращается в продукт в единицу времени (в минуту или секунду). [c.32]

Путем такого расчета можно лишь судить, насколько предполагаемые метаболические процессы возможны термодинамически, однако это отнюдь не означает, что уравнение (2) адекватно описывает все реакции, участвующие в синтезе сахарозы. И действительно, реакции синтеза сахарозы отображены в этом уравнении неверно. Так, глюкоза реагирует сначала с АТФ с образованием глюкозо-6-фосфата, а это соединение превращается в глюкозо-1-фосфат, которое и вступает в реакцию с фруктозой. Более того, изменения стандартной свободной энергии, использованные в расчетах, относятся лишь к определенным условиям, а именно реакция протекает при pH 7,0, а расчет реагентов и продуктов реакции ведется на единицу активности фермента. Поскольку условия эти, вероятно, не соответствуют физиологическим, величины АС, использованные в этих расчетах, весьма отдаленно отражают действительные изменения свободной энергии в клетке. [c.13]

Единица активности U (1U) фермента-это такое его количество, которое при определенных условиях катализирует превращение 1 мкмоля субстрата в 1 мин, или, если атаке подвергается более, чем одна связь в молекуле субстрата, 1 мкэкв (группы) в 1 мин. [c.476]

За единицу активности принимают активность такого количества фермента, которое приводит к гидролизу 1 мкмоль целлобиозы или образованию 2 мкмоль глюкозы за 1 мин при инкубации с 2 мМ раствором целлобиозы при pH 4,5 и 40° С. [c.150]

Поэтому определение активности следует вести в стандартных условиях, т. е. при насыщающих концентрациях субстрата или субстратов, оптимуме pH среды и постоянной температуре, которые должны поддерживаться в течение всего периода наблюдения. Эти условия обеспечивают нулевой порядок реакции, при котором ее скорость лимитируется только концентрацией исследуемого фермента. Измерять активность фермента нужно только в начальный отрезок времени, когда реакция протекает линейно, т. е. за единицу времени превращается одно и то же количество субстрата (так называемая начальная скорость реакции). [c.323]

Термин активность достаточно условен и характеризует способность ферментов изменять скорости соответствующих реакций. Определяется активность по количеству продуктов реакции или модификации субстрата под действием фермента. За единицу активности фермента принимают такое его количество, которое катализирует превращение в 1 мин при 25 °С одного микромоля субстрата. Активность ферментов выражают также в каталах (кат), связанную с превращением одного моля субстрата в 1 с при 25 С. Удельной активностью называется скорость реакции, рассчитанная на 1 мг белка фермента. [c.62]

Фермент получают из сердечной мышцы по методике Ком-марата и Коэна [1] 1 мг фермента обладает активностью 5000 единиц [2]. [c.95]

За единицу активности (Е) фермента принимают такое его количество, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата за 1 мин. Например, если при инкубации 0,5 мл экстракта печени с раствором аргинина за 15 мин разложилось 120 М1<моль аргинина, это означает, что Б 0,5 мл экстракта содержится 120/15=8 Е аргиназы. [c.44]

Оформление работы. Результаты определения активности аргиназы, полученные на трех этапах очистки фермента, сводят в таблицу. Выход фермента рассчитывают, принимая его содержание (в единицах активности) в исходном экстракте или гомогенате печени за 100%. Степень очистки фермента во фракциях Б и В получают путем деления удельной активности фракций на удельную активность исходного препарата (фракция А). [c.51]

Обычно реакцию исследуют поляриметрическим методом, поскольку удельное вращение сахарозы положительно, а сумма удельных вращений глюкозы и фруктозы отрицательна. Поэтому в процессе гидролиза оптическое вращение любого данного раствора меняет знак, откуда и происходит термин инверсия . В ранних работах но химии ферментов за единицу активности фермента принимали время, необходимое для того, чтобы в известных условиях эксперимента (температура, pH) достигнуть нулевой оптической активности раствора. Позднее в результате более или менее сложного пересчета единиц активность стали измерять в числах молекул сахарозы, гидролизованных за единицу времени одной молекулой фермента. [c.349]

Активность фермента, единицы Б [c.241]

В случае ДНК, РНК и полипептидов только один активный центр фермента не в состоянии обеспечить специфическую последовательность кодирующих единиц. Активные центры ферментов сравнительно малы и могут связывать одно- [c.864]

Единица активности фермента. В настоящее время обычно определяется как количество субстрата, превращаемого в продукт реакции в единицу [c.168]

Основные определения и принятые символы. Международный биохимический союз рекомендует характеризовать каталитическую активность фермента единицей /сатал (символ —кат), равный в заданной системе измерения активности количеству превращаемого субстрата 1 моль за 1с. [c.240]

Культура Asp. awamori 466 имеет незначительное количество а-амилазы, поэтому ее необходимо применять в смеси с другими источниками а-амилазы. Например, при полной замене солода глюкаваморином Гх-466 и амиломезентерином Гх-467 расход ферментов рассчитывают, исходя из норм расхода ферментов в единицах активности на 1 г перерабатываемого крахмала сырья. Причем этот расход изменяется в зависимости от принятой продолжительности брожения. [c.170]

В. Р. Ламм и другие (1970) предложили международную глюкозоизомеризующую единицу активности Ш1у — количество фермента, которое может изомеризовать 1 микромоль глюкозы во фруктозу за 1 мин в растворе, содержащем 2 М глюкозы, 0,02 М MgS04 0,001 М СоС на 1 л при pH 6,84—6,85 (буфер — 0,2 М малеат натрия) при 60 °С. Фруктозу при этом определяют поляриметрическим или цистеинкарбазоловым методом. Основные технологические процессы производства глюкозно-фруктозных сиропов сводятся к следующему рис. 26). [c.136]

За единицу активности принимают количество фермента, вызывающее уменьшение оптической плотности АЛ300 на 1 ед. прй инкубации с 0,05%-ным раствором РНК при pH 5,0 и t =25° в течение 1 мин. [c.176]

Единицы активности. Согласно рекомендации комиссии по ферментам Международного биохимического союза за единицу активносги фермента (Е) принимают то его количество, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата в минуту при заданных условиях определения. Рекомендуемая температура 30° С (или указывают фактическую температуру, при которой проводилось определение). Остальные условия (pH, концентрация субстрата, кофакторов и др.) должны быть оптимальными. При бимолекулярной реакции Ач-Б = В + Г за единицу фермента принимают то его количество, которое катализирует превращение 1 мкмоль А или Б, или 2 мкмоль А, если Б = А, за 1 мин. Если фермент атакует более чем одну связь, например при действиц на полимерную молекулу, расчет ведется на 1 мк-экв затронутых реакцией групп. [c.206]

Активность ферментов характеризуют международными единицами активности. Е пдница активности фермента определяется как количество фермента, пршраи щего 1 мкмоль субстрата при 25 С за 1мии при оптимальных экспериментальных услс иях, включающих pH, ионную силу и концентрацию субстрата. [c.347]

Удельная активность выражается числом единиц активности фермента, приходящихся на 1 мг белка. Молекулярная активность характеризуется числом молекул субстрата, которое подвергается превращению одной молекулой фермента за 1 мин. Когда известно количество активных центров в молекуле фермента, вводится понятие активносги каталитического центра. Она характеризуется числом молекул субстрата, которое подвергается превращению за 1 мин при расчете на 1 каталитический центр. [c.206]

Удаление сульфата аммония. Супернатант, полученный на предыдущей стадии, пропускают через колонку (1x21,5 см), заполненную сефадексом (3-25, уравновешенную буфером 25 мМ трис-НС1 — 30 мМ КР, pH 7,2 (пропускают примерно 150 мл). На колонку можно нанести 700—2500 единиц активности. Сразу после выхода раствора, соответствующего свободному объему колонки, в первых 4—5 мл содержится основная часть ферментативной активности. Эту фракцию белка выдерживают при О—4° С в течение 2,5 ч (происходит агрегация фермента), после чего ценгрифугируют при 30 ООО в течение 30 мин. [c.243]

Хроматография на КМ-целлюлозе. К раствору белка добавляют раствор протаминсульфата (1 г/50 мл воды), доведенный трисом до pH 7,0. Полученный осадок удаляют центрифугированием. Затем к супернатанту добавляют 0,01 объема 1 М раствора триса и понижают pH до 6,0 с помощью 1 М какодиловой кислоты. Разводят рйствор до 800 мл добавлением 10 мМ триса, содержащего 1 мМ ЭДТА (pH 6,0, доведено какодиловой кислотой), и наносят его на колонку (4,5x30см) с КМ-целлюлозой, уравновешенную 10 мМ трисом, 1 мМ ЭДТА, доведенным до pH 6,0 какодиловой кислотой. После нанесения белка на колонку начинают элюцию линейным градиентом КС1. Для создания градиента используют два сосуда, один из которых содержит 1 л буфера, а другой — 1 л буфера, приготовленного на 0,2 М КС1. Скорость тока — 120 мл/ч. Фракции, содержащие более 300 единиц активности фермента в 1 мл, объединяют. [c.266]

За единицу активности фермента принята актипность пероксидазы, при которой в данной реакционной смеси ралвиЕяется окрашивание, равное но итенсивности окраске стандартного раствора. [c.127]

Международный биохимический союз рекомендует характеризовать каталитическую активность фермента единицей катал (символ - кат), соответствующей превращению одного моля субстрата в одну секунду. Удельная каталитическая активность фермента выражается в кат/кг или моль субстра-та/(с кг фермента). Молярная каталитическая активность выражается в кат/моль фермента. [c.550]

Как видно, в проточном режиме продуктивность культуры по биомассе в 17 раз и по продукту в 6 раз превышает продуктивность периодического процесса. Во время ферментации активность глюкоамилазы увеличивается до 50—80 ед/мл. При определении глюкоамилазной активности (ГА) глюкооксидазным методом за единицу активности принимают такое количество фермента, которое вы5ывает образование 1 мг глюкозы из растворимого крахмала за 1 ч при температуре 30°С. [c.198]

Мкмоль, КГ моль единицы активности фермента выражают также в наномолях (КГ моль) и пикомолях (КГ моль). [c.157]

Международный биохимический соки предложил использовать в качестве единицы активности катал (кат) активностью I кат обладает такпе количество фермента, к< торое катализирует превраи ние 1 моль субстрата в лродукт за 1 с. Следовательно, 1 квт 60.10 6 1П междунвродных единиц. Рекомендовано использовать также единицу значительно меньшего масштаба наноквтал (нкат), равную 11) кат. [c.181]

Активность биокатализаторов измеряют в международных единицах (МЕ) — 1 МЕ соответствует количеству фермента, превращающему 1 микромоль (мк/моль, 10 моль) субстрата в 1 мин в стандартных условиях Единицы активности могут быть выражены в мкЕ, нЕ и пЕ, то есть соответственно в микро-, нано- и пикоединицах с учетом превращения 10 , 10 или 10 моля субстрата в 1 мин Удельную активность выражают в с иницах на 1 мг белка С 1973 г введена единица ферментативной активности катал (кат), соответствующая количеству катализатора, способного превращать 1 моль субстрата в продукт за 1 секунду Тогда соотношения катал и МЕ будут следующими 1 кат= 1 моль субстрата С = 60 моль мин =60 10 мкмоль мин = 6 10 МЕ, 1 МЕ= 1 мкмоль мин = 1/60 мкмоль с = 1/60 мккат= 16,67 нкат= 16670 пкат Все это косвенно подтверждает факт трудности выделения ферментов в чистом виде и на практике приходится чаще иметь дело с группой белков в продукте — сырце или в исходном материале, или, наконец, в других партиях материала, подлежащих разделению [c.68]

Необходимо отметить, что единица активности фермента по методу Бессея и Лоури соответствует 16,7 мЕ (мЕ — международная миллиединица). [c.197]

Изменения аффинности и емкости Р -(6-аминогексил)-Р -(5 -аденозин) пирофосфат — сефарозы при разбавлении разными количествами немодифицированной сефарозы на примере взаимодействия с миокиназой хорошо видны в табл. 5.2 [8]. Разбавление аффинным сорбентом ведет к уменьшению связываемости р, выраженной через концсптрацпн хлорида калия, которые необходимы для элюирования фермента. Емкость сорбента, выраженная в единицах активности фермента, сорбированного па 1 мкмоль нуклеотида, возрастает при низких концентрациях нуклеотида, хотя абсолютная емкость на 1 г материала колонки с разбавлением уменьшается. [c.78]

Согласно международному боглаше-нию, за единицу активности фермента принимается такое количество фермента, которое катализирует превращение [c.240]

Конечные продукты действия Д. серина — пировиноградная к-та и аммиак, Д. треонина — а-котомасля-ная к-та и аммиак. Д., действующие на Б-амино-кислоты, не действуют на Б-формы, и наоборот. Ноэнзимом Д, серина и треонина является пирид-оксальфосфат (см. Пиридоксин). За единицу активности принимается такое количество фермента, к-рое иеоб- [c.518]