ДНФ-аминокислот методы

Разделение аминокислот методом радиальной (круговой) распределительной хроматографии на бумаге [c.235]

Методом тонкослойной хроматографии (ТХ) можно быстро разделить аминокислоты метод требует несложного оборудования и малых исходных количеств. Для изготовления слоев толщиной 0,1 — 0,3 мм применяют стандартные носители, такие, как сипикагепь, оксид алюминия, поро-щок целлюлозы, ионообменники на основе целлюлозы, попиамиды, а также полиакриламидный и декстрановый гепи. В зависимости от материала носителя ТХ бывает адсорбционной (например, разделение на силикагеле и оксиде алюминия) или распределительной (например, разделение на слоях целлюлозы). В качестве подвижной фазы применяют те же системы, что и для бумажной хроматографии. [c.58]

Качественное и количественное определение аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге [c.527]

Реакция с формальдегидом лежит в основе количественного еделения а-аминокислот методом формольного тит-вания (метод Серенсена). [c.333]

Количественное определение аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге. Цель работы — определить концентрацию аминокислоты в анализируемом растворе методом колориметрического анализа раствора, полученного при элюировании хроматографического пятна. [c.529]

Методическое руководство по биохимии и иммунохимии белка. Рассмотрены теоретические основы методов и современная аппаратура для гель-фильтрации, бумажной, ионнообменной н тонкослойной хроматографии, в том числе методы количественного аминокислотного анализа с помощью автоматических анализаторов. Подробно описан анализ производных аминокислот методом газовой хроматографии. Книга хорошо иллюстрирована и снабжена подробной библиографией. [c.4]

Количественное определение аминокислот методом элюции и последующим фотоколориметрированием [105, 106]. С помощью этого метода можно определять в растворе или гидролизате белка 0,05—0,15 мкг аминокислоты. Метод основан на реакции аминокислот с нингидрином в слабокислой среде с последующим превращением полученного в результате реакции синего производного — дикетогидринделидендикетогидриндиамина (ДИДА) в стабильное производное меди оранжево-красного цвета, имеющее максимум поглощения при 530 ммк. [c.117]

Качественное определение аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге. Цель работы — определить коэффициент движения лизина и метионина для индивидуальных веществ и для их смеси (с целью разделения их на хроматограмме). [c.528]

Анализ аминокислот методом реакционной газовой хроматографии [c.274]

Идентификация ДНС-аминокислот методом тонкослойной хроматографии на пластинках, покрытых силикагелем [c.151]

Идентификация Д[ С-аминокислот методом тонкослойной хроматографии на полиамидных пластинах [c.152]

Разделение рацематов а-аминокислот методом лигандообменной хроматографии показано на рис. 3.4. [c.84]

СОСТАВЛЕНИЕ КОНТРОЛЬНЫХ ЗАДАЧ ДЛЯ РАЗДЕЛЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ МЕТОДОМ РАДИАЛЬНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [c.242]

Термическая поликонденсация свободных аминокислот успешно проходит с некоторыми аминокислотами (Asp, Asn, Gly, Lys и др.). Более успешно использование активированных производных аминокислот. Метод N-карбоксиангидридов (разд. 2.2.5 2.3) дает возможность получать оптимальную степень поликонденсации (п = 10 ), а также регулировать ее в интервале п = 1(Я + 10 . [c.209]

Важное значение белков и составляющих их аминокислот обусловило большой интерес к определениям аминокислот методом ГХ. Существуют различные методы автоматического анализа с использованием хроматографии на колонке, однако ГХ обеспечивает более быстрый анализ и позволяет уменьшить величину анализируемой пробы, Было предложено большое число различных по типу производных, чтобы осуществить количественное определение двадцати аминокислот, обычно обнаруживаемых в белках. Выбор наилучшего производного осложняется большей частью тем, что эти аминокислоты содержат 12 различных функциональных групп, а желательно получить метод, применимый для анализа все>с [c.137]

Характеристика некоторых из недавно опубликованных методов получения производных для количественных определений аминокислот методом ГХ [c.138]

Количественный анализ аминокислот методом ГХ представляет несомненный интерес. Как правило, количественное определение аминокислотного состава пептида является одним из решающих моментов анализа последовательности. Поскольку при деградации крупного белка образуется большое число фрагментов, желательно затрачивать на анализ каждого из них минимальное количество времени и вещества. Привлечение в данном случае ГХ достаточно хорошо удовлетворяет этим условиям. Многочисленные исследования по ГХ аминокислот в конечном итоге направлены на решение этой задачи. Однако к действительно эффективному количественному методу предъявляются несоизмеримо более высокие требования, чем к качественному. Если учесть к тому же трудности получения и разделения производных аминокислот, станет ясно, почему до сих пор не разработан стандартный метод их количественного определения с помощью газового хроматографа. Основные трудности связаны, как подчеркивалось в разделе о получении производных, с полифункциональными аминокислотами. Метод, игнорирующий их идентификацию, может найти лишь ограниченное применение. Количественный анализ только простых аминокислот не может удовлетворять экспериментатора [40]. Вопрос о том, все ли аминокислоты, встречающиеся в белках, можно определять ГХ с достаточной точностью, все еще остается открытым. Здссь можно только вкратце рассмотреть имеющиеся условия и возможности. Проблемы, связанные с аппаратурой, необходимой для количественной ГХ, уже обсуждались ранее (см. стр. 302). [c.335]

Абсолютная инертность вещества-носителя не обязательна, если разделение ведут в капиллярах [19, 24, 44]. Хотя анализ полярных веществ в капиллярах также имеет свои недостатки, однако он все еще привлекает своей высокой разрешающей способностью при фракционировании аминокислот методом ГХ (разрешающая способность капилляра длиной 50 м с внутренним диаметром 0,25 мм достигает от 50 ООО до 100 ООО теоретических тарелок). По приготовлению материалов для набивки колонок в настоящее время существует обширная литература. [c.305]

Исследуя различные производные одного и того же соединения, можно убедительно идентифицировать аминокислоты методом ГХ. Если учесть большое влияние Ы-защитных групп на хроматографическое поведение аминокислот, из сравнения, например, ТФА-, ацетил- и ДНФ-соединений с различными эфирами Ы-ацил-про-изводных можно извлечь очень интересную информацию [64]. Следует отметить также, что после разделения компоненты можно собрать и подвергнуть анализу к помощью других методов. Складывается впечатление, что из-за необходимости полу- [c.334]

Синтез протекает в две стадии. Сначала проводят реакцию между карбобензоксиаминокислотой и л-нитрофениловым эфиром аминокислоты методом смешанных ангидридов или карбодиимидным методом. Затем к образовавшемуся л-нитрофениловому эфиру карбобензоксиди-пептида без его предварительного выделения прибавляют эфир аминокислоты. В результате получают эфир карбобензокситрипептида. [c.496]

Рис. 79. Разделение смеси 11 ФМОК-аминокислот методом КЗЭ. Капилляр 50мкм х 50/75 см, буфер бора г 50 мМ, pH 9.5 УФ-детектирование 200 нм поле 330 В/см.

Еще одной важной проблемой в стереохимии природных соединений является установление строения полипептидных антибиотиков, продуцируемых бактериями и грибами. Такие полипептиды часто содержат в своей структуре неприродные аминокислоты, т. е. имеющие в-конфигурацию или обладающие структурой, не обнаруженной в белках. Очистка и установление структуры таких сложных соединений, часто вьщеляемых в очень небольших количествах, требует квалифицированного разделения и точных аналитических методов. В этом отнощении исключительно важным является непосредственное определение конфигурации аминокислот методом хиральной хроматографии. Особенно большое значение имеет применение хиральной ГХ для хирального аминокислотного анализа и создания аминокислотных карт гидролизатов. Приведенный ниже пример [24] должен проиллюстрировать сказанное. [c.182]

Рис. 80. Разделение 16 ФМОК-аминокислот методом МЭКХ. Идентификация пиков - в буквенном коде для аминокислот. Буфер 50 мМ борат, 50мМДДСН, pH 9.5.

Сущность работы. Разделение смеси аминокислот методом ионообменной хроматографии основано на различии в их изоэлектриче-ских точках. Аминокислоты можно условно разделить на три группы основные, нейтральные и кислые. К первым относятся диаминомонокарбоновые кислоты с изоэлектрической точкой, лежащей при pH 7. Нейтральные аминокислоты представляют собой моноаминомонокарбоновые кислоты с изоэлектрической точкой, лежащей в пределах pH = 5,5—6,5. Наконец, кислые аминокислоты являются моноаминодикарбоновыми кислотами. Их изоэлектриче-ская точка находится при рН<5. [c.106]

Далглиш пришел к своей модели после изучения разделения ряда ароматических аминокислот методом бумажной хроматографии. Он предположил, что гидроксильные группы целлюлозы образуют водородные связи с амино- и карбоксильной группами аминокислоты. Третий контакт, согласно его взглядам, — это взаимодействие с заместителями в ароматическом ядре. [c.72]

СКОЛЬКИХ лет служила материалом для упаковки колонок, и на ней впервые удалось почти полностью разделить энантиомеры. (В 1944 г. было опубликовано сообщение о том, что основание Тре-гера разделено на колонке с лактозой длиной 0,9 м [2].) Разделяющая способность полисахаридов, в частности целлюлозы, была впервые обнаружена при попытке разделить рацемические аминокислоты методом бумажной хроматографии [3—5]. При этом выяснилось, что эти соединения в некоторых случаях дают два пятна на бумажной хроматограмме. Далглищ развил свою теорию трехточечного взаимодействия в 1952 г. на базе данных о бумажной хроматографии рацемических аминокислот [6]. Известны и другие ранние работы по непосредственному разделению энантиомеров аминокислот посредством бумажной хроматографии [7] и тонкослойной хроматографии на целлюлозе (ТСХ) [8]. Все это способствовало использованию целлюлозы и ее производных, а также крахмала и циклодекстринов в хиральной ЖХ. В настоящее время в качестве потенциальных хиральных сорбентов изучается ряд природных полисахаридов. [c.108]

При изучении разделения оптических изомеров серии рацемических N-ацилированных аминокислот методом ЖХ на колонках Resolvosil неожиданно выяснилось, что отношение площадей пиков сильно отличается от 1, если буферный раствор анализируемого соединения находился при комнатной температуре в течение 24 ч [104]. Проведенные более систематические исследования микробиологических процессов показали, что как в N-бензоилаланине [105], так и в Ы-( -нитробензоил)серине вследствие гидролиза амидной связи происходит предпочтительное разрушение ь-энантиомеров [105]. Аналогичным образом показано, что микроорганизмы вызывают энантиоселективный гидролиз эфирной связи. В этом случае энантиомерный состав эфирного субстрата и продукта гидролиза можно изучать одновременно [106]. Методика наблюдения за ходом реакции показана на рис. 8.16. [c.214]

Эта реакция положена в основу волюмометрического определения содержания азота и количества аминогрупп в аминокислотах метод Ван-Слайка). Каждый моль л/ / оаминокислоты выделяет один моль азота, который, как известно, занимает объём 22,4 л. Замерив объём выделившегося в реакции азота и сопоставив этот объём с навеской аминокислоты, высчитывают процентное содержание азота в веществе и через него -число аминогрупп. [c.48]

В изоэлектрической точке суммарный заряд молекулы а-аминокислоть равен 0. Диполярные ионы не перемещаются в электрическом поле. При зна чениях pH среды ниже значения р1 катион а-амннокислоты (аммониевая форма) движется к катоду при р) выщи, чем р1, ацилат-ион а-аминокислоты перемещается к аноду. На этом основано разделение а-аминокислот методом электрофореза (см. 15.1). [c.328]

В лабораторных условиях дезаминирование осуществляется зотистой кислотой (см. 6.4). При этом образуется соответствую-1ая а-гидроксикислота и выделяется газообразный азот, по бъему которого судят о количестве вступившей в реакцию -аминокислоты (метод Ван-Слайка). [c.343]