Липиды методы экстракции

Фосс-лет и др.). При исследовании указанных методов извлекаются главным образом свободные липиды. Прочносвязанные липиды не экстрагируются как из продуктов растительного, так и животного происхождения. В связи с этим, а также ввиду значительного окисления липидов во время выделения были предприняты поиски более эффективных способов экстракции. Установили, что достаточно полная экстракция липидов может быть осуществлена, если применять смесь полярного растворителя и неполярного или слабополярного. Обычно используемый в качестве полярного компонента спирт ослабляет прочность комплекса липиды — белки, что обеспечивает полноту экстракции неполярным растворителем. Эффективность экстракции в значительной мере зависит от степени разрушения клеточной структуры исследуемых объектов. Используют гидролиз, разрушение в кавитационной мельнице, измельчение продуктов, предварительно замороженных жидким азотом. [c.212]

Извлечение липидов из пищевых продуктов. Естественно, что все методы экстракции, в которых возможно изменение нативных свойств веществ, не могут быть применены. Например, использование метода Сокслета приводит к появлению значительного количества продуктов окисления, которые мешают дальнейшему проведению анализа фракционного состава и искажают его результаты. [c.211]

Проблема экстракции липидов сегодня снова является предметом подробных исследований. Приводимые ниже, проверенные в течение многих лет стандартные методы после создания ХТС были во многих лабораториях проверены методом Шталя. Теперь известно, что эти методы приводят к ошибочным результатам и имеют ряд других недостатков [103, 129]. До настоящего времени, однако, не опубликовано лучших прописей. [c.145]

Сущность метода. Многократной экстракцией петролейным эфиром извлекают из сточной воды все растворимые в этом экстрагенте вещества растительные и животные жиры и масла, другие липиды, а также нефтепродукты (в основном минеральные масла). Если экстракцию проводят при pH > 2, то соли жирных кислот (мыла) остаются в водном растворе. Экстракт разделяют на две части (или отбирают две аликвотные порции). Из одной части удаляют растворитель выпариванием и, взвешивая остаток, находят суммарное содержание всех жиров и нелетучих при температуре отгона петролейного эфира нефтепродуктов. Другую часть экстракта пропускают через оксид. алюминия (или другой подходящий сорбент) и в элюате определяют содержание нефтепродуктов гравиметрическим методом, описанным в разд. 9.17.2. По разности результатов этих определений находят содержание жиров и других извлекаемых петролейным эфиром липидов. ., [c.289]

Технологический процесс получения микробных липидов в отличие от получения белковых веществ обязательно включает стадию выделения липидов из клеточной биомассы методом экстракции в неполярном растворителе (обычно бензине или эфире). При этом одновременно получаются два готовых продукта микробный жир (биожир) и обезжиренный белковый препарат (биошрот). [c.100]

В тканях ганглиозиды ассоциированы с белками, поэтому во всех обычных методиках их выделения используются сильно полярные растворители чаще всего применяют смесь хлороформ — метанол [3]. В качестве растворителя был также предложен тетрагидрофуран [4], однако он не нашел широкого ирименения. Ранние методы выделения были основаны на фракционировании липидов при экстракции тканей растворителями с возрастающей полярностью. С появлением распределительного метода [5] старые методы были забыты. Первая стадия распределительного метода включает исчерпывающую экстракцию липидов из ткани смесью хлороформ — метанол. При диализе полученного экстракта против воды (процедура распределения) ганглиозиды переходят в верхний водный слой, в то время как основная масса других липидов остается в нижнем хлороформном слое. В модифицированном варианте распределения вместо воды используется слабый солевой раствор. [c.349]

Для изучения липид-белковых взаимодействий в таких реконструированных системах был применен метод спектроскопии ЭПР [35]. Цитохромоксидаза была очищена и отделена от ассоциированного с нею липида экстракцией растворителем. Путем обратного титрования липидом, содержащим спин-меченный зонд (см. разд. 25.3.5), показано существование слоя липида, прочно связанного с белком (рис. 25.3.9). Кроме того продемонстрировано, что для проявления ферментной активности необходимо существование такого пограничного слоя, состоящего из 50 липидных молекул на молекулу цитохромоксидазы. [c.124]

Наиболее распространенным методом экстракции липидов является метод Фолча. Экстракцию проводят смесью хлороформ—метанол (2 1) из расчета 20 частей экстрагирующей смеси на одну часть ткани. Метод позволяет выделить 90—95% всех клеточных липидов. Смеси растворителей, содержащие спирт, экстрагируют также нелипидные вещества (сахара, аминокислоты, соли и т. д.) Для удаления нели-пидных примесей экстракт липидов промывают водон или слабыми солевыми растворами. Однако это приводит к частичной потере кислых липидов. Очистку экстракта можно провести также гель-фильтрацией на сефадексе. [c.68]

Современные методы измельчения тканей обычно сочетают с одновременной экстракцией белков из гомогенатов тканей. Большинство белков тканей хорошо растворимо в 8—10% растворах солей. При экстракции белков широко применяют различные буферные смеси с определенными значениями pH среды, органические растворители, а также неионные детергенты — вещества, разрушающие гидрофобные взаимодействия между белками и липидами и между белковыми молекулами. [c.24]

Применение ионной масс хроматографии низкого разрешения для непосредственного анализа экстрактов из исходной плазмы крови осложняется в ряде случаев из за присутствия мешающих примесей (плазма, растворители, используемые pea генты и др ) Поэтому для определения нанограммовых коли честв сверхчувствительными методами требуется предваритель ная очистка образца Для большинства ЛП процедура очистки сырого экстракта обычно связана с экстракцией кислыми раст ворителями и последующим удалением липидов путем отмыва ния неполярными растворами Такая очистка как правило, весьма трудоемка и продолжительна, что затрудняет автомати зацию процесса подготовки образца и анализа, и в итоге не позволяет проводить массовые клинические анализы [c.180]

Возможность экстракции и последующего анализа методом ХТС липидов из органов описаны в гл. 10 и 12. [c.345]

Применение. В микроскопии в качестве осветляющего агента в качестве промежуточной среды для удаления следов воды и спирта из обезвоженных в этиловом спирте объектов перед их заливкой в парафин как растворитель, в частности для выявления липидов методом экстракции по Кейлинг fl и по Бэкеру [2] в качестве составной части жидкости Карнуа для фиксации гистологических препаратов и жидкостей Дженкинса и Лорха для декальцинации как добавка к хранящимсл инкубационным средам для предотвращения бак-, териального гидролиза. [c.433]

Используалые в гистохимии липидов методы экстракции основаны на законах растворимости, известных из аналитической органической химии. Трудности гистохимического выявления заключаются в том, что липиды в тканях находятся обычно в виде смесей и часто связаны с белками и углеводами. Это нередко сказывается на раст-= воримости. И наконец, не следует забывать, что экстрагнн руемость жиров может меняться в процессе предваритеяь [c.146]

Об этих трудностях надо помнить при использовании методов экстракции для гистохимического изучшия отдельных липидов. Методы экстракции липидов в сочетании с окрапшванием липидов преследуют две цели а) контроль специфичности окрашивания, б) изучение свойств жировых веществ на основании различий в их растворимости. В гистохимической практике выявление липидов проводится после обработки нативного материала (в лучшем случае это криостатные срезы) различными жировыми растворителями. Экстракцию следует проводить в горячем растворителе в колбе с обратным холодильником или в аппарате Сокслета. [c.147]

Д. л. выделяют методами хроматографии из смеси липидов, полученной экстракцией из исследуемых прир. объектов. Анализ Д. л. осуществляют хромато-масс-спектро-метрией интактных нейтральных липидов или моноациль-ных (алкильных, алкенильных) производных, образующихся после отщепления от молекулы сложных Д. л. остатка фосфорной к-ты или углевода. Синтетич. Д. л. (их получают теми же методами, что и глицеролипиды) м. б. использованы при исследовании св-в биол. и искусств, мембран. [c.75]

На первой стадии разрушают биологический материал. Обычно начинают с разрезания и затем механического размельчения в гомогенизаторе. Для разрыва клеточных стенок используются различные методы обработка ультразвуком, встряхивание со стеклянными шариками, растирание замороженного материала в ступке, осмотический шок, осмотический лизис дистиллированной водой, обработка поверхностно-активными веществами илн воздействие протеазами. Нежелательные составные части клеток могут быть отделены центрифугированием, нуклеиновые кислоты отделяют осаждением протаминсульфатом, углеводы — электрофорезом, липиды — низкотемпературной экстракцией органическими растворителями. [c.346]

Выделение животных липидов. Подробное описание методов экстракции липидов из человеческого и животного организмов дано Сперри [121] и Энтен-маном [19]. Следует рекомендовать изучение этих работ, в особенности критического исследования Энтенмана. [c.146]

Хроматографии алкалоиды наносят на колонку главным образом в виде оснований, растворенных в обычных органических растворителях полярного или менее полярного характера (ацетон и др.). За исключением анализа чистых веществ, алкалоиды обычно выделяют из растительных материалов, различных медицинских препаратов, реакционных смесей (при синтезе) или биологических материалов. Почти во всех случаях пытаются провести предварительное отделение основных анализируемых веществ от сопутствующих примесей методом экстракции. В качестве сопутствующих веществ могут быть неорганические соли и вещества липофилБного характера. При анализе растительного материала растение сушат, тонко измельчают и экстрагируют сначала петролейным эфиром для извлечения липидов. Затем материал подщелачивают и алкалоиды экстрагируют диэтиловым эфиром, хлорофор ом или другими растворителями в отличие от неорганических солей или веществ кислотного характера алкалоидные основания переходят в экстракт. Если анализируют растворы (например, растворы для инъекций, реакционные смеси или биологические жидкости), обычно достаточно подщелочить растворы и экстрагировать алкалоиды растворителями (хлороформом, диэтиловым эфиром и т. д.). В некоторых случаях предварительную очистку можно проводить ионным обменом. Для экстракции используют водные растворы минеральных кислот. Экстракты, содержащие соли алкалоидов наряду с сопутствующими примесями, пропускают через подходящий катионит алкалоиды сорбируются, и после удаления из колонки кислот их элюируют смесью низших алифатических спиртов с аммиаком. [c.101]

Разнообразная природа пищевых продуктов, обусловливающая различную прочность связи липидов с другими составными частями продукта, оказывает выраженное влияние на эффективность экстракции. Ранее предложенные методы экстракции основывались главным образом на использовании неполярных растворителей (диэтиловый эфир, тетрахлорэтилен, гексан и др.). Экстракция осуществляется в специальных приборах-экстракторах (Сокслета, Гольдфиша, Можоинье, [c.211]

Более ранние биохимические исследования мембран касались главным образом их липидиой часги. Поэтому методы экстракции н анализа мембранных липидов были хорошо разработаны и основывались большей частью на примеиеиии органических растворителей. Липнды, составляюш ие обычно почти половину массы плазматической мембраны, ие только служат каркасом Для прикрепления белков, но и могут быть ответственными за активность ферментов, связанных с мембранами. Они имеют амфипатические свойства и обладают гидрофильными и гидрофобными концевыми участками. Большая часть липидов относится к фосфолипидам, а остальные — это гликолипиды и нейтральные липиды (в основном холестерин). Гликолипиды, по ВИдимому, располагаются лишь в наружной части двойного липидного слоя, что указывает иа его асимметрию. [c.41]

Большинство данных, приведенных в настоящих таблицах, получено с использованием экстракции смесью хлороформ-метанол (по Фольчу или Блаю и Дайеру) или хлороформ-эталон (по Д. И. Кузнецову и Н. Л. Гришиной). Работы с использованием методов извлечения липидов путем экстракции только неполярными растворителями (Сокслета и др.) из-за неполноты извлечения липидных компонентов при составлении таблиц не учитывались. [c.212]

Необходимо сделать некоторые общие замечания, которые следует иметь в виду при определении фракционного состава липидов. Для анализа используют суммарный липидный экстракт, предварительно освобожденный от нелипидных компонентов. Такая очистка предусмотрена в УСМВОЛ и приведена в прописи метода [3]. При других методах экстракции, когда используют бинарные системы растворителей, экстракт, как правило, промывают слабыми водными растворами сильных электролитов (например, 0,87%-ным раствором КС1) с последующим удалением верхней водной фазы, содержащей нелипидные примеси [16]. Может быть использована очистка на сефадексе Q-25 [24]. Важно не допустить в процессе получения липидов их окисления, так как продукты окисления имеют иную хроматографическую подвижность, чем нативные липиды, и на хроматограммах будут присутствовать дополнительные пятна и хвосты . Во избежание окисления липиды защищают от действия прямого солнечного света и хранят в экстрактах в плотно закрытых колбах (флаконах) с притертыми пробками в холодильнике. Растворители отгоняют в токе азота или под вакуумом, допуская лишь слабое (до 40—50°С) нагревание. Выделенные для весового определения и подсушенные на воздухе липиды для фракционирования обычно не используют. [c.213]

Естественно, что не имеется какой-либо универсальной схемы извлечения пестицидов и очистки экстрактов, пригодной для всех ядохимикатов и объектов. Однако существуют методы экстракции оиределепных групп пестицидов. Папример, в США разработаны такие методы для двух больших групп этих веществ. Первая включает хлорсодержащие соединения, не образующие ионов, и фосфорорганические пестициды. Ко второй отнесены хлорорганические соединения, образующие ионы, хлорфеноксиуксусные кислоты и их эфиры [372 а]. Широко известны методы Миллса [352] и Джонсона [285] для извлечения углеводородов (ДДТ, ГХЦГ, метоксихлор, гентахлор и др.) из сливочного масла и объектов с высоким содержанием липидов при последующей очистке экстракта па колонке с флоризилом. Он был проверен различными лабораториями и хорошо зарекомендовал себя [181]. Аналогичные групповые методы колоночной очистки фосфорорганических пестицидов и продуктов их обмена разработаны и другими авторами [148, 403, 404]. [c.98]

Применимость методов экстракции липидов для газо-жидкостной хроматографии. (Анализ метиловых эфиров жирных к-т ткани печени НФ ПЭГС на газхроме Р т-ра 180°.) [c.186]

Получение масла из мякоти плодов. Процесс сводится к сушке жома (жмыха), измельчению и извлечению из него масла. Для этой цели жмых измельчают в дробилке и подвергают сушке на паровой конвейерной сушилке типа ПКС-10 при 75° в течение 1—1,5 ч до влажности 6—7%. Выход сухого жмыха составляет 7,5—9,0% к массе свежего сырья. Состав сухого жмыха (в %) масла е плодовой мякоти — 15—27, каротина — 12—16 мг%, семян — 45—55%, влажность 4,0—7,0. Процесс экстракции масла из жмыха осуществляют в настоящее время по методу В. Казанцева и А. Охина в батарее из 22 диффузоров подсолнечным или кунжутным маслом при 50— 65° С. Полный оборот батареи 24 ч. Отбор масла из головного диффузора происходит каждые 1,0—1,5 ч. Из хвостового диффузора соответственно выгружают жмых с масличностью 45—50%. В специальном шнековом прессе (экспеллере) отжимают масло из жмыха. Недостатками данного метода диффузии являются потери каротина достигают 20—22%, получаемое масло содержит 15—20% подсолнечного, высокое кислотное число масла, достигающее 10,0—15,0. В связи с этим возник вопрос о применении органического растворителя для экстракции липидов облепихи. В результате проведенных исследований процесса экстракций с различными растворителями (петролейный эфир, дихлорэтан, бензол и хлористый метилен) наиболее эффективным является хлористый метилен (дихлорметан, СН2С12). Последний имеет низкую температуру кипения (41—42°), плотность при 20° С 1336 кг/м , малотоксичен. При экстракции этим растворителем может быть получен высокий выход масла (95%) и каротина (97%) [21]. По-видимому, Экстракция масла из жмыха хлористым метиленом будет наиболее эффективна. Необходимо лишь отработать вопрос полного удаления растворителя из готового продукта. [c.376]

Хеден Г..Синяк К.,Ригаге Р..Синяк Л..Фри Г. - Изв.АН СССР. Сер.биол.,1971, 3,441-450. Простые методы экстракции клеточных липидов и их разделение с целью быстрого определения в газовом хроматографе. [c.173]

Разнообразная природа пищевых продуктов, обусловливающая различную прочность связи липидов с другими составными частями продукта, оказьшает выраженное влияние на эффективность экстрак- ции. Ранее предложенные методы экстракции основывались главным образом на использовании неполярных растворителей (диэтиловый эфир, тетрахлорэтилен, гексан и др.). Экстракция осуществляется в специальных приборах—экстракторах (Сокслета, Гольдфиша, Можон-нье, Фосс-лет, Сокстек и др.). При использовании указанных методов извлекаются главным образом свободные липиды. Прочно связанные липиды при этом не экстрагируются как из продуктов растительного, так и животного происхождения. В связи с этим, а также ввиду значительного окисления липидов в процессе вьщеления были предприняты поиски других, более эффективных способов экстракции. Установили, что достаточно полная экстракция липидов может быть осуществлена, если использовать смесь полярного растворителя и неполярного или слабополярного. Обычно используемый в качестве полярного компонента спирт ослабляет прочность комплекса липиды—белки, что обеспечивает полноту экстракции неполярным растворителем. Однако эффективность экстракции в значительной мере зависит от степени разрушения клеточной структуры исследуемых объектов. Для этого используют гидролиз, разрушение в кавитационной мельнице, измельчение продуктов, предварительно замороженных в жидком азоте. [c.317]

Необходимо сделать некоторые общие замечания, которые следует учитывать при определении фракционного состава липидов. Для анализа используют суммарный липидный экстракт, предварительно освобожденный от нелипидных компонентов. Такая очистка предусмотрена в УСМВОЛ и приведена в описании метода [3]. При других методах экстракции, когда используют бинарные системы растворителей, экстракт, как правило, промывают слабыми водными растворами сильных электролитов (например, 0,87 %-ным раствором КС1) с последующим удалением верхней водной фазы, содержащей нелипидные примеси [21]. Может быть использована очистка на сефадексе G—25 [28]. Важно не допустить в процессе получения липидов продуктов их окисления, так как последние имеют иную хроматографическую подвижность, чем нативные липиды, и на хроматограммах будут присутствовать [c.320]

Большинство методов экстракции липидов основано на процедуре (Fol h et al., 1957), позволяющей отделить полярные мембранные липиды от неполярных липидов — холестерола и [c.160]

Липиды (от греч. lipos — жир) — жиры и жироподобиые вещества. Нерастворимы в воде, хорошо растворимы в спиртах, эфире, хлороформе, бензоле. К Л. относят жиры, воски и группу липоидов фосфатиды, стеролы (напр., холестерин) и стероиды. Л. принадлежат к важным биологическим веществам, входящим в состав всех живых клеток. Выделяют Л. из биологических объектов экстракцией органическими растворителями. Индивидуальные Л. выделяют хроматографическими методами. Л. применяют как продукты питания, в медицине, в различных отраслях промышленности. [c.77]

В гистохимии обычно используют два метода экстракции а) пиридиновый метод по Бейкеру (Вакег) б) экстракция липидов по Кейлиг (K eiUg). [c.147]

И наконец, при исследовании липидов с помощью методов экстракции следует учитывать, что липиды в физиологическом состоянии обычно связаны с белками и поэтог му устойчивы по отношению к экстрагирующим агентам. [c.147]

Полезный метод отделения следовых количеств веществ представляет перегонка с паром (кодистилляхщя). Этот метод, главным образом перегонка с водяным паром, используется, в частности, для разделения соединений на фуппы, например для отделения летучих веществ ог нелетучих (белков, жиров и т.п.) и выделения следовых количеств ХОП из природных вод. Предварительно следует выяснить, не разрушается ли определяемое вещество при температуре отгонки. В противном случае следует применять отгонку с паром при пониженном давлении. Отогнанные соединения обычно извлекают из конденсата жидкостной экстракцией. Иногда применяют перегонку с другими растворителями (метанол, циклогексанон и т.п.) (123 . В другом варианте добавляют растворитель, кипящий при сравнительна низкой температуре, но с которым совместно отгоняются определяемые компоненты, например дихлорметан. Этот прием даст хорошие результаты при отделении суперэкотоксикантов от веществ, содержащих природные липиды, которые хорошо растворяются в дихлорметанс(5 [c.230]

Разные условия опытов приводят к более или менее полному экстрагированию различных белков и к получению в большей или меньшей степени чистых фракций глиадинов и глютенинов. Значительную роль могут играть такие факторы, как температура и число экстракций, интенсивность перемешивания. Сообщалось также, что присутствие липидов в муке или клейковине влияет на экстрагируемость белков. Удаление липидов может привести к нерастворимости глютениновой фракции, обычно растворимой в 55 %-ном этаноле [40]. Удаление липидов также снижает растворимость белков в 0,05 н. уксусной кислоте 48]. Однако некоторые авторы не обнаружили этого эффекта, который, видимо, зависит также от использования метода извлечения жиров и возможной денатурации белков в ходе этой операции [146]. [c.180]

В середине 60-к годов химия мембранных белков только зарождалась и делались первые попытки нейти подходы к разработке методов их выделения и характеристики. Выло известно, что мембраны различного происхождения содержат разное коли-че1Тво белка (от 20 до 75"/ от сухой массы). Многие мембрано-связаиные белки обладают ферментативной активностью. В ряде случаев экстракция липидов из мембраны приводила к полной утрате или к значительному снижению фермен тативнон активности. Иногда активность удавалось восстановить после обратного добавления липидов. Более детально изучать мембранные белки было затруднительно оин плохо растворялись как в воде, твк и в органических растворителях. [c.584]

Экстракция липидов по Фольху, Асколи, Леееу, Миту и ле Барону [21]. Этот метод дает особенно хорошие выходы в случае таких сложных липидов, как протеолипиды и ганглиозиды, которые не могут быть выделены полностью методом Блура. [c.147]

Механически и сорбционно удерживаемые липиды (свободные) могут быть выделены из жирсодержащих объектов прессованием (при достаточно высоком их содержании) или экстракцией растворителями (при любом содержании). Связанные липиды могут быть выделены из материала лишь специальными методами, выбираемыми в зависимости от прочности этих связей. Поэтому для извлечения растворимых комионентов из маслосодержащих материалов может быть применен в зависимости от назначения анализа и свойств материала отжим или извлечение растворителями [c.281]

Отсюда ясно, что при необходимости получить свободные липиды с целью определения их состава экстракцию следует вести до полного обезжиривания материала. Такое извлечение осуществляют методом исчерпывающей экстракции в аппаратах Соксле. [c.282]

Фольч с сотр. [16] предложил метод извлечения липидов из животных тканей смесью хлороформа и метанола в соотношении 2 1. Этим методом экстрагируют не только липиды, но и вешества нелипидной природы, растворимые в спирте. Липиды очишают от этих примесей с помощью фазового расслоения слабыми водными растворами сильных электролитов (например, 0,87%-ным раствором КС1). Метод получил широкое распространение. Блай и Дайер [12] внесли модификацию в метод, сократившую время экстракции и давшую возможность получать больший выход липидов. [c.212]