Тень эритроцита

Эритроциты под микроскопом имеют вид желтых дисков при рассмотрении сбоку — вид бисквитов. В кислой концентрированной моче края эритроцитов неровные, зазубренные в щелочной моче, наоборот, они разбухают и становятся резко очерченными. Иногда эритроциты совсем теряют пигмент в результате гемолиза, и остаются так называемые тени эритроцитов . Так как гемолиз чаще имеет место в почечных канальцах, где моча менее концентрирована, то в большинстве случаев это является признаком почечного происхождения крови. [c.302]

Натриевым насосом служит а+К -АТФаза. В настоящее время окончательно установлено, что за передвижением Ыа+ ответственна АТФаза, стимулируемая ионами Ма+ и К и что этот фермент векториальный, т. е. он обладает пространственно направленным действием. Наиболее убедительные данные, полученные при изучении 1 а+К -АТФаз в эритроцитах млекопитающих, можно резюмировать следующим образом. Если эритроциты поместить при контролируемых условиях в дистиллированную воду, то они набухают и их мембраны становятся легко проницаемыми. В результате клетки теряют свой гемоглобин и другие белки цитоплазмы, а также внутренние электролиты. Такие тени эритроцитов можно теперь нагружать разнообразными веществами, так как после добавления к ним изотонической среды они снова сжимаются до своих нормальных размеров и их мембраны опять становятся, как обычно, относительно непроницаемыми. Таким способом можно получить тени эритроцитов, содержащие АТФ и ноны Ка+ и К в различных [c.143]

Рис. 46. Этапы приготовления нагруженных теней эритроцитов.

Тени эритроцитов Мышца эмбрионов [c.25]

В начале процедуры получают пузырьки, окруженные мембранами (липосомы). Затем липосомы загружают необходимым веществом, смешивая концентрированный раствор этого вешества и суспензию фосфолипидов. Другая модификация этого метода включает на первом этапе нарушение мембраны эритроцитов, приводящее к утрате ими клеточного содержимого, и последующее помещение полученных теней эритроцитов в раствор нужного вещества, где происходит их заполнение и затягивание плазматических мембран. Оба вида носителей (как липосомы, так и тени эритроцитов можно вводить в клетки-мишени за счет слияния мембран под действием определенных вирусных белков (синтезируемых вирусом [c.200]

Для этого подбирают основной состав частиц и жидкости с одинаковыми коэффициентами преломления и добавляют в него небольшое количество светонепроницаемых частиц. Для наблюдения за движением эритроцитов, необходимое их количество вводят в суспензию теней эритроцитов. [c.306]

На рис. 6.28 приведены профили скорости для суспензии теней эритроцитов и жестких дисков при близких размерах и концентрациях частиц. Значения локальных скоростей г г) отнесены к скорости в центре трубки Уо г — текущий радиус, К — радиус трубки, V — средняя скорость течения). [c.308]

При более высоких скоростях профиль скорости для теней эритроцитов близок к тромболитическому. [c.309]

Рис. 6.28. Профили скорости жестких дисков (I) и теней эритроцитов (2),

Важно отметить, что совпадение симметрии бислоя фосфолипидов в нашей модели и симметрии активных центров фосфолипазы Аг, расположенных по разные стороны эллипса вращения димера [35], может объяснить причину высокой активности этого фермента на тенях эритроцитов и отсутствие ее на целостных эритроцитах [13] v О том, что полярных групп фосфолипидов, по-видимому, нет на поверхности, свидетельствует тот факт, что обработка мембран фосфолипазой С и освобождение более 50% общего фосфора снижает степень реассоциации мембран с рибосомами лишь на 6% [33]. В пользу нашей модели, предсказывающей взаимодействие специфических реагентов с аминогруппами ФЭА лишь при повреждении мембраны, можно трактовать данные о том, что ФЭА целостных эритроцитов не взаимодействует с этими реагентами, в то время как ФЭА теней эритроцитов хорошо с ними реагирует [21]s. [c.164]

Эритроциты птиц имеют ядра, но вирус Сендай, помимо того, что он индуцирует агглютинацию, вызывает также гемолиз, так что в слиянии участвуют тени эритроцитов, имеющие ядра и при этом содержащие мало цитоплазмы. [c.192]

Для научных и практических целей очень часто приходится хранить в замороженном состоянии различные мембранные препараты (микросомальную фракцию, реконструированные мембраны клеток, например замкнутые и разомкнутые тени эритроцитов, мембраны саркоплазматического ретикулума и т. д.), субклеточные органеллы с выраженными мембранными функциями (митохондрии, лизосомы), щироко используемые в качестве модельных систем. [c.74]

Установлено, что мономерная глутатионпероксидаза ингибирует фотосенсибилизированное окисление липидов теней эритроцитов, полностью восстанавливая гидропероксиды фосфолипидов и холестерина без их предварительного гидролиза. Классическая глутатионпероксидаза ингибировала этот процесс только в присутствии фосфолипазы Аз, при этом гидропероксиды холестерина не восстанавливались [246]. [c.44]

При европейском возвратном тифе спирохет в препарате очень много (если кровь исследуют во время приступа). Располагаются они поодиночке и в виде клубков. При клещевом возвратном тифе встречаются единичные спирохеты, которые чаще всего можно обнаружить только в толстой капле. На препарат толстой капли, высохший, но не фиксированный, наносят несколько капель краски Романовского—Гимзы, приготовленной на дистиллированной воде, чтобы вызвать лизис эритроцитов. Окрашивание препарата длится 35—40 мин. При микроскопировании препарата толстой капли спирохеты возвратного тифа, окрашенные в фиолетовый цвет, находятся среди теней эритроцитов. При клещевом возвратном тифе обнаруживаются единичные спирохеты. При европейском возвратном тифе спирохеты содержатся в большом количестве, образуя клубки разной величины. [c.291]

Исключительно важны с практической точки зрения работы, посвященные направленному транспорту лекарственных веществ. В этом отношении особенно выгодны инкапсулированные ферменты типа искусственной клетки. Так, микрокапсулы, стенки которых представлены оболочкой эритроцита ( тень эритроцита ), а их содержимое заполнено ферментом аспарагиназой, переносятся кровотоком к зонам скопления аспарагина и поэтому применяются для лечения аспарагинзависимых опухолей, в частности саркомы. Колонки, заполненные микрокапсулами с ферментом, используют для диализа в аппарате искусственная почка , которая работает в 100 раз эффективнее обычного аппарата. [c.103]

Значительная часть наш их знаний о мембранах сложилась благодаря интенсивным многолетним исследованиям, проведенным на мембранах определенных типов. К их числу относятся следующие 1. Мие-линовая оболочка, состоящая из плазматических мембран, образуемых шванновскими клетками, которые прилежат ко многим нейронам. Шванновские клетки как бы наматываются на аксоны нейронов, причем цитоплазма из них выдавливается и образуются тонкие, но плотно упакованные мембранные слои, окружающие аксоны и служащие для них прекрасным изолятором . Из всех известных мембран миели-новые обладают наибольшей устойчивостью и содержат наибольшее количество липидов (80%). 2. Плазматические мембраны эритроцитов человека, которые могут быть получены путем осмотического шока этих клеток. Образующиеся при этом тени эритроцитов содержат около 1 % сухого вещества клетки по сравнению с другими мембранами они изучены, пожалуй, наиболее полно. 3. Мембраны б актерий, и в первую очередь Е. oli. 4. Наружный членик рецепторных клеток сет- [c.337]

Гортер и Грендел в 1926 г. рассчитали, что содержание липидов в-мембранах теней эритроцитов достаточно для образования вокруг клетки липидного слоя толщиной 3,0—4,0 нм . Результаты этих расчетов в совокупности с данными о том, что липиды способны агрегировать в водных растворах с образованием мицелл , в которых углеводородные хвосты липидных молекул собраны вместе, а полярные головы как бы выходят в окружающий раствор, позволили Дж. Да-ниэлли в 1930 г. предложить ставшую впоследствии широкоизвестной модель мембран в виде липидного бислоя [12а] Основные черты этой модели представлены на рис. 5-1. За счет гидрофобных взаимодействий углеводородные цепочки липидных молекул удерж иваются друг возле друга в вытянутом состоянии, тогда как полярные группы фосфолипид-ных молекул взаимодействуют с белковыми молекулами, расположенными по обе стороны от липидного бислоя. [c.338]

В настоящее время более общепринятой является не ионообменная гипотеза, а гипотеза существования в клетках ионного насоса, выкачивающего из клеток ионы На+ и накачивающего в них ионы К+. Для. изучения этого процесса были использованы различные методические подходы. Из гигантского аксона кальмара можно, например, удалять всю цитоплазму, а оста ВШуюся клеточную оболочку заполнять различными ионными растворами. Сходным образом можно заполнить и тени эритроцитов. Наличие переноса ионов внутрь клеток и из клеток в окружающую среду наблюдалось как на указанных выше объектах, так и на различных интактных клетках других типов. Оказалось, чтО перенос ионов блокируется ингибиторами, например цианидом, который, как известно, нарушает почти все процессы окислительного метаболизма в клетках. Однако блокирование цианидом сним-ается при добавлении к клеткам АТР или других фосфатных соединений, характеризующихся высоким значением потенциала переноса групп. [c.361]

В последнее время интенсивно разрабатываются методы направленного транспорта ферментов, заключенных в своеобразные микроконтейнеры (тени эритроцитов, липосомы и др.), к внешней поверхности которых могут быть прикреплены адресные (векторные) белковые молекулы (например, иммуноглобулины—антитела против специфических компонентов органа или ткани-мишени, в частности опухоли). Иммобилизованные ферменты в качестве лекарственных средств начали применять в специальных колонках для экстракорпоральной перфузии крови (типа искусственной почки). Такое лечение полностью исключает нежелательные воздействия на организм чужеродного белка и может проводиться длительное время. [c.168]

Если эритроциты вы.делить центрифугированием из крови и поместить в дистиллированную воду (то есть воду, лишенную всяких солей), то произойдет так называе.мое явление ге.молиза. Оно заключается в том, что дистиллированная вода проникает внутрь клеток клетки разбухают, их оболочки, наконец, не выдерживают и лопаются. Поскольку содержимое — гемоглобин — вытекает наружу, то остаются только одни оболочки, или, как говорят, тени эритроцитов. (Действительно, оболочка эритроцита под микроскопом выглядит как бледная тень прежней клетки.) [c.178]

Рис. 6-23. Получение теней эритроцитов с разрывами и без разрывов, а также замкнутых пузырьков с правильной ориентацией бислоя и вывернутых наизнанку. Показано, что эритроциты разрываются только в одном месте, давая тени с единственным отверстием. Маленькие пузырьки получаются при механическом разрущении теней Ориентация мембран в пузырьках определяется иоппыми условиями во время процедуры

Больщинство мембранных белков эритроцитов человека - это периферические мембранные белки, ассоциированные с бислоем на его плазматической стороне. Самый распрострапеппый из таких белков спектрин представляет собой длинную, тонкую, гибкую палочку длиной около 100 нм. Его масса составляет около 25% массы мембранных белков, что соответствует 2,5 х 10 копий на клетку. Спектрин является важным компонентом белковой сети (цитоскелета), поддерживающей структурную целостность и двояковогнутую форму эритроцитов (см. рис. 6-22). Если цитоскелет экстрагировать из теней эритроцитов растворами с низкой ионной силой, мембрана фрагментируется на мелкие пузырьки. [c.365]

Na" + к" )-насос в тенях эритроцитов можно заставить работать в противоположном направлении - для синтеза АТР. Если градиенты концентраций ионов натрия и калия в эксперименте увеличить до такой степени, что энергия их электрохимических градиентов будет выше химической энергии гидролиза АТР, то ионы будут проходить через мембрану по их электрохимическим градиентам, а АТР будет синтезироваться из ортофосфата и ADP с помощью натриево-калиевой АТРазы. Таким образом, фосфорилированная форма АТРазы (позиция 2 на рис. 6-49) может релаксироваться либо перенося фосфат на ADP (от позиции 2 к позиции I), либо изменяя свою конформацию (от позиции 2 к позиции 3). Будет ли общее изменение свободной энергии использоваться для синтеза АТР или же для выкачивания Na" из теней эритроцитов, зависит от относительных концентраций АТР, ADP и фосфата и от электрохимических градиентов ионов натрия и калия. [c.385]

Дальнейшая работа с мембранными белками - изучение их функций, механизмов действия и пространственных структур, однако, натолкнулась на большие трудности. Оказалось, что высвобождение белковых молекул из мембраны часто сопровождается необратимой денатурацией их нативных структур и, следовательно, потерей активности. В редких благоприятных случаях при солюбилизации белков в мягких условиях и при низких концентрациях функциональные свойства не пропадают, что указывает на сохранение, по крайней мере частичное, нативных конформаций. Наиболее детальная информация о белках и липидном бислое получена при изучении плазматической мембраны эритроцитов человека, содержащих гемоглобин -немембранный белок, представленный в этих клетках в наибольшем количестве [237]. Удобство данного объекта обусловлено тем, что мембраны эритроцитов, называемые "тенями", являются единственными в Клетке и их легко выделить в чистом виде с разрывом и без разрыва и даже получить вывернутыми наизнанку. При изучении теней эритроцитов впервые удалось установить, что некоторые мембранные белки пронизывают насквозь мембранный бислой, а внешняя и внутренняя стороны мембраны являются асимметричными [238]. Исследования белков плазматической мембраны эритроцитов человека [c.57]

ДНК липосомами, тенями эритроцитов или протопластами) г) физический (с помощью микроинъекций или электропорации). Метод слияния развит в настоящее время недостаточно хорошо. Микроинъекции ДНК использовали во многих экспериментах в биологии развития позвоночных [535], но при этом, как правило, нужно вводить очень большое и трудно контролируемое количество материала. В настоящее время наиболее перспективным представляется перенос, связанный с использованием ретровирусов единичные копии можно включить в один (хотя и случайный участок почти в 100% клеток-мишеней. Кроме того, в этом случае известна структура встраиваемой последовательности. На рис. 9.5 показана одна из используемых систем-вирус Молони (вирус лейкемии мышей). На рис. 9.6 представлена схема эксперимента. [c.169]

При взаимодействии ЛДГ с тенями эритроцитов, обработанными тритоном Х-100, наблюдалось снижение каталитической активности ЛДГ, однако степень инактивации фермента была выше, чем в случае его ассоциации с препаратами нативных мембран. Так, связывание ЛДГ с эритроцитарными мембранами и их три-тоновыми тенями при pH 7,4 приводило к снижению ее активности на 25 и 82 % соответственно (рис. 50). При pH 9,0 каталитическая активность ЛДГ в присутствии нативных и тритоновых теней статистически достоверно не отличалась от таковой для свободного фермента. Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что ЛДГ эффективнее взаимодействует со спектрин-актино- [c.177]

Рис. 50. Каталитическая активность лактатдегидрогеназы в комплексе с эритроцитарными мембранами и трито-новыми тенями эритроцитов (2-10 моль/л, 0,15 мг/мл белка мембран) — изолированные мембраны 3 — три-тоновые тени

Выделение липидов мембран осуществляют сразу после получения мембранной фракции, которую необходимо защищать от действия протео- и липолитрхческих ферментов, автоокисления. Обычно все процедуры проводят при низкой температуре, поддерживая определенные значения pH и ионной силы. Для экстракции липидов используют смесь хлороформ—метанол. Для одновременной экстракции белков и липидов из теней эритроцитов их экстрагируют смесью бут анол—вода. При этом большая часть белков переходит в водный, а липида в бутаноль-ный слой. [c.227]

Тени эритроцитов, полученные путем гипоосмотического гемолиза и отмытые от гемоглобина в изотоническом буфере, содержат около 50 % белков, 43 % липидов и 7 % углеводов. Белковые компоненты мембраны были идентифицированы методом электрофореза в ПААГ в присутствии додецилсульфата натрия. В соответствии с локализацией их подразделяют на периферические и интегральные (см. главу 1). Периферические белки расположены на поверхности мембраны и им соответствуют полипептидные полосы 1, 2, 4, 5 и 6. Интегральные белки погружены в липидный бислой и в некоторых случаях пронизывают его. Основным интегральным белком является белок полосы 3, осуществляющий транспорт анионов через мембрану. Его М-конец находится с цитоплазматической стороны, а С-конец погружен в бислой с наружной стороны мембраны. Периферические белки взаимодействуют друг с другом, образуя двумерный каркас, выстилающий внутреннюю поверхность эритроцитарной мембраны, который называют мембранным скелетом. Он содер- [c.230]

Каковы существующие представления о механизме гемолиза эритроцитов или лизиса липидных везикул в процессе растяжения их мембран (например, при оводнении клеток на стадии ЕР) В гипотонических средах или в результате постгипертонического гемолиза, как правило, не происходит разрыва мембран эритроцитов. При определенной степени набухания в их мембранах образуются мелкие поры, через которые гемоглобин может диффундировать из клеток наружу без разрыва клеточной мембраны (В. С. Маркин, 1985). В результате этого явления образуются тени эритроцитов — сферические мембраны, заполненные таким же раствором, как и внеклеточная среда. [c.39]

Рис. 97. Влияние формальдегида-на белки мембран эритроцитов человека [1228], Тени эритроцитов инкубировали с формальдегидом в течение 30 мин при комнатной температуре и затем анализировали с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН. Образцы 1—4 содержали соответственно О, 5, 10 и 15 мМ формальдегид. МК — маркерный краситель-(пиронин V) НЬ — диссоциированные полипептидные цепи гемоглобина.

Исследование аниончувствительной АТФазной активности в тенях эритроцитов, где исключено загрязнение митохондриями, показало, что эта активность сильно отличается от митохондриальной, не ингибируется тиоцианатом и почти нечувствительна к олигомицину. Однако оказалось также, что 81Т8-чувствительный перенос анионов , обнаруженный впервые в эритроцитах, а затем и в других объектах, не связан с АТФазной активностью и, по-видимому, является процессом вторично-активного транспорта, движимого градиентом Ыа+. Предполагают, что в плазматической мембране чувствительность к анионам проявляет Са-АТФаза. [c.11]

Таким образом, можно заключить, что молекулярный механизм регуляции Na, К-АТФазной активности ионами Na+ и К+ до конца не расшифрован. Для окончательного решения проблемы необходимо уточнение количества и функционального назначения различных участков связывания ионов Na+ н К ", а также возможности взапмопревраще[1ия этих участков. Видимо, с точки зрения получения новой информации, исследования ионных потоков в тенях эритроцитов и реконструированных везикулах, а также исследования прямого связывания катионов себя исчерпали, тогда как анализ зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации ионов Na+ и К+ может дать дополнительную информацию для окончательного решения вопроса. [c.86]

Использование различных методических подходов показывает, что одни из главных компонентов эритроцитов — гликопротеид и компонент А — имеют трансмембранное расположение. Действительно, белок чувствителен к про-назе в интактных эритроцитах. В результате гидролиза появляется новый компонент с молекулярной массой 70000Д, который является частью компонента А и обладает устойчивостью к дальнейшему действию фермента. Однако компонент А дает больше продуктов гидролиза и больше связывается с меткой в опытах с тенями эритроцитов. Все это приводит к выводу, что данный белок пронизывает мембрану в виде вилки или что молекула белка имеет вид глобулы, часть которой выше, а часть — ниже бимолекулярного липидного слоя. Аналогично была доказана и локализация в мембране главного гликопротеида с молекулярной массой ЗООООД, состоящего из 87 остатков аминокислот и 100 остатков сахара. Этот гликопротеид рассматривается как полипептид с углеводной головкой на ЫНг-конце, присоединенной к внешней поверхности мембраны. Центральная часть (а-спираль) гликопротеида проходит через мембрану и заканчивается на внутренней поверхности СООН-терминальной группой. [c.30]

На тенях эритроцитов установлено, что фосфолипаза С инактивирует Ыа+, К+ — АТФ-азу. Поскольку подобного действия на интактные клетки фосфолипаза не оказывала, а также учитывая локализацию фосфатидилсерина на внутренней поверхности эритроцитарной мембраны, можно сделать заключение, что фермент локализован на внутренней поверхности мембраны. Однако исходя из механизмов действия АТФ-азных систем такое предположение кажется преждевременным, тем более что из ряда работ следует, что только активный центр Ыа+, К+ — АТФ-азы локализован на внутренней поверхности мембраны, тогда как реактивные группы локализованы на поверхности эритроцита и занимают 10 —10 всей его поверхности. Таким образом, можно предполагать, что АТФ-азная система также имеет трансмембранную локализацию. [c.30]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология