Белки экстракция

Процессы получения белков [21, изображенные на рис. 6.1, а и б, различаются стадиями выделения и очистки биомассы. При работе на дизельном топливе необходима дополнительная ступень процесса - экстракция для извлечения остаточных углеводородов (не окисленных дрожжами или адсорбированных на них). [c.266]

Существует несколько способов отделения цитохрома с от митохондрий. Принцип всех этих методов состоит в разрушении внешней мембраны митохондрий с помощью детергентов или гипотонической обработки и экстракции белка солевыми растворами. В настоящей задаче предлагается экстрагировать цитохром с из митохондрий, убедиться в снижении оксидазной активности экстрагированных препаратов и активировать дыхание добавлением цитохрома с. В качестве объекта исследования используются митохондрии печени крысы (получение см. выше). Схематически процесс отделения цитохрома с изображен на рис. 50. [c.419]

Применялось множество методов экстракции белков, но большинство из них основано на разной растворимости альбуминов, глобулинов, проламинов и глютелинов в солевых или спиртовых растворах, что в свое время установил Осборн [144]. Белки можно извлекать из раздробленных цельных зерен или из ядровой муки, а также из клейковины, предварительно отделенной от крахмала. [c.178]

Процессы разделения жидких систем играют важную роль во многих отраслях народного хозяйства. Для осуществления этих процессов уже давно применяют разнообразные способы перегонку и ректификацию, абсорбцию и адсорбцию, экстракцию и др. Однако природа за миллионы лет эволюции живых организмов выработала наиболее универсальный и совершенный метод разделения с использованием полупроницаемых мембран. Действительно, биологические мембраны обеспечивают направленный перенос необходимых организму веществ из внешней среды в клетку, и наоборот. Без мембран невозможны были бы дыхание, кроветворение, синтез белка, усвоение пищи, удаление отходов и другие процессы. [c.13]

Для количественного определения белков экстракцию необходимо повторить еще не менее трех раз, используя то же соотношение навески и раствора и тот же режим центрифугирования. Экстракция считается законченной, если в последнем растворе белок по Лоури не обнаруживается. [c.373]

При экстракции белков из муки, полученной из семян рапса, альбумины имеют тенденцию во время диализа осаждаться вместе с глобулинами [103]. Что касается подсолнечника, то избирательного осаждения глобулиновой фракции белков, растворимых в солевом растворе, достигают подкислением среды до pH 4,6 и диализом против раствора 20 мМ уксуснокислого натрия при pH 4,6. Глобулиновую фракцию, отделенную центрифугированием, затем суспендируют в воде и вновь растворяют, доводя pH до 7,5 добавлением 0,05 н. раствора едкого натра. [c.153]

Аналогичный результат получают при очистке нуклеиновых кислот (ДНК) от фенола, который обычно применяют для их отделения от белков. Раньше от фенола освобождались путем экстракции эфиром, однако при этом часто [c.79]

Иногда для улучшения растворения осажденного в геле белка экстракцию ведут в 1 %-ном ДДС-Na с б М мочевиной [Buisson et al., 1976]. Щелочные негистоновые белки хроматина можно экстрагировать 66%-ной уксусной кислотой на холоду [Rabbani et al., 1980]. Белки рибосом после двумерного электрофореза и окраски СВВ R-250 можно также элюировать бб%)-ной уксусной кислотой. Краситель легко затем удалить на микроколонке ДЭАЭ-целлюлозы прямо в той же кислоте. Анионный по своей природе краситель десорбируется с белка и полностью задерживается на анионообменнике, а ш елочные рибосомальные белки с ним не связываются [Bernabeu et al., 1980]. [c.105]

При переработке моркови целесообразно применять коагуляционный метод, заключающийся в получении сока и коагуляции содержащихся в нем белков (стр. 402). Выход каротина при этом методе составляет 66% к введенному с сырьем. Для увеличения выхода каротина можно жом после сушки подвергать экстракции органическими растворителями (дихлорэтан, дихлорметилен). При этом выход каротина повышается до 78%. [c.401]

Исходным сырьем для получения кристаллического -каротина является морковь, содержащая среди каротиноидов 85—90% -каротина. Наоборот, в тыкве содержание -каротина составляет лишь 60—70% [17]. Производство кристаллического каротина включает следующие стадии 1) экстракция каротина из сухого коагулята белков органическим растворителем [c.406]

Сначала разрушают стенки дрожжевых клеток путем механической, щелочной, кислотной или ферментативной обработки с последующей экстракцией гомогенной дрожжевой массы подходящим органическим растворителем. После такой очистки от органических и минеральных примесей дрожжевой продукт обрабатывают щелочным раствором для растворения белков. Далее белковый раствор, отделенный центрифугированием от оставшейся массы дрожжей, подвергают диализу. Очищенные от низкомолекулярных примесей белки осаждают, высушивают и используют в качестве белковых добавок в различные пищевые продукты сосиски, паштеты, мясные и кондитерские начинки. Белки дрожжей применяют также при получении искусственного мяса. Для этого их нагревают с последующим быстрым охлаждением или продавливанием белковой пасты через отверстия малого диаметра. В белковую пасту добавляют полисахариды и другие компоненты. [c.13]

Обычно хитин представлен в природе в смеси с белками, минеральными солями (в основном карбонатом кальция). В панцирях он связан с белками в единый хитин-белковый комплекс ацетальными, амидными, сложноэфирными связями. Выделение хитина обязательно включает деминерализацию (обработку минеральными кислотами, растворяющими соли) и депротеинизацию (экстракцию белков слабощелочным раствором или обработку ферментами). Его выделение из сырья, содержащего большое количество жиров, проводится после предварительного обезжиривания, например обработкой четыреххлористым углеродом с последующим гидролизом [96]. При выделении хитина из грибов используют менее концентрированные растворы кислот и щелочей, так как грибы содержат значительно меньше белков и минеральных солей, чем ракообразные. [c.386]

Зерновые культуры по-прежнему представляют важнейший ресурс растительных белков продовольственного назначения, и интерес к их изучению не снижается, но несомненно, что и другие виды растительного сырья можно успешно использовать для той же цели при условии некоторой технологической обработки. Это было показано американскими учеными на шротах, полученных методами экстракции и текстурирования сои, которые несколько лет применяются в промышленности. Благодаря возможностям, которые открываются в сфере питания, технологии и экономике, эти новые виды продукции очень перспективны текстурирование [c.8]

Наконец, процессы фракционирования позволяют разделять благоприятные и менее благоприятные компоненты (экстракция белков) они способны также повысить ценность исходного кормового сырья (разделение у конских бобов фракций, бога- [c.33]

Существует четыре метода определения N-концевых аминокислот. Первый из них основан на арилировании полипептида 1-фтор-2,4-динитробензолом (уравнение III.3) с образованием 2,4-динитрофенильного производного N-концевого остатка. Полный гидролиз белка, экстракция ДНФ-аминокис-лоты органическими растворителями и хроматографирование или какое-нибудь другое определение модифицированной аминокислоты позволяют затем установить природу N-концевого остатка. Очевидно, что некоторые другие группы белка, например е-аминогрунпа лизина, также будут реагировать с 1-фтор-2,4-динитробензолом, однако из а-аминогрупп будет моди- [c.86]

Неомыляемые липиды. — При омылении ткани мозга жиры, белки, фосфолипиды и сложные липиды в значительной степени превращаются в водорастворимые, но нерастворимые в эфире вещества. Экстракция эфиром щелочной смеси, образующейся в результате омыления, дает неомыляемую липидную фракцию, содержащую холестерин (строение и конформацию — см. том I 5.12) и небольшое количество сопутствующих стероидов. Холестерин образуется при омылении всех тканей тела, включая и кровь, в 100 которой обычно содержится около 200 м.г холестерина. Около 27% холестерина в крови находится в свободном состоянии, остальное количество этерифици-ровано жирными кислотами ie и ie. Общее количество холестерина, содержащегося в организме человека весом 65 кг, составляет около 250 г. Он образуется в организме в результате биосинтеза, а также (у плотоядных животных) постушает с пищей. [c.639]

ФОП и ХОП из образцов растительного происхождения извлекают ацетонитрилом [54 и ацетоном [55,56] Установлено, что для извлечения пестицидов из растений, содержащих большие количества восков и липидов, лучше применять ацетон, а для образцов с большим содержанием пигментов - смесь гексана с изопропиловым спиртом (1 1). При экстракции пестицидов из почв используют ацетон, метанол, этилацетат, ацетонитрил и хлороформ [54,57-60]. Присутствующая в почвах вода, как правило, ослабляет силы адсорбционного удерживания пестицидов из-за процессов гидратации. Поэтому перед их извлечением почву рекомендуется хорошо увлажнить водой или обработать растворами кислот (щелочей), Поскольку при извлечении пестицидов в органический растворитель обычно переходят их гидратированные формы, то используют хорошо растворимые в воде растворители (метанол, ацетон, ацетонитрил и др,) или смеси с неполярными жидкостями, тогда как при экстракции из воды в основном применяются последние. Важно подчеркнуть, что степень извлечения органических компонентов из твердых образцов сильно зависит от прочности их связей с белками и другими составляю 1цими исследуемых субстратов [c.212]

Полезный метод отделения следовых количеств веществ представляет перегонка с паром (кодистилляхщя). Этот метод, главным образом перегонка с водяным паром, используется, в частности, для разделения соединений на фуппы, например для отделения летучих веществ ог нелетучих (белков, жиров и т.п.) и выделения следовых количеств ХОП из природных вод. Предварительно следует выяснить, не разрушается ли определяемое вещество при температуре отгонки. В противном случае следует применять отгонку с паром при пониженном давлении. Отогнанные соединения обычно извлекают из конденсата жидкостной экстракцией. Иногда применяют перегонку с другими растворителями (метанол, циклогексанон и т.п.) (123 . В другом варианте добавляют растворитель, кипящий при сравнительна низкой температуре, но с которым совместно отгоняются определяемые компоненты, например дихлорметан. Этот прием даст хорошие результаты при отделении суперэкотоксикантов от веществ, содержащих природные липиды, которые хорошо растворяются в дихлорметанс(5 [c.230]

Для объяснения этих фактов активный центр химотрипсина представляют обычно (в развитие идей школы Нимэнна [55, 64]) состоящим из участков, комплементарных по отношению к отдельным фрагментам молекулы специфического субстрата [7, 59, 65]. Движущая сила сорбции фрагмента К на ферменте — это гидрофобное взаимодействие. Фактически образование комплекса фермент — субстрат обусловлено тем, что боковая гидрофобная субстратная группа подвергается термодинамически выгодной экстракции из воды в органическую среду белка (см. 4—6 этой главы). Молекулярная модель активного центра была предложена Блоу с сотр. [66] на основании результатов рентгеноструктурного анализа кристаллического химотрипсина (см. рис. 9). Размеры гидрофобной полости в районе активного центра составляют (10—12) х(5,5—6,5)Х(3,5—4) А. Эти размеры достаточны, чтобы вместить боковую цепь триптофана или тирозина, но вместе с тем форма полости делает возможной только лишь одну, строго определенную ориентацию плоскости ароматического кольца. [c.134]

В связи с этим интересно отметить, что эффективность адсорбции ароматических соединений на твердых поверхностях (угле) практически не зависит от наличия в ядре каких-либо заместителей [87, 88]. Поэтому в случае полуже-сткой модели гидрофобного кармана в белке, для того чтобы объяснить полную экстракцию глобулой различных гидрофобных заместителей в молекуле ингибитора, необходимо допустить, что аминокислотные остатки, расположенные вблизи щипцов , обладают все-таки некоторой подвижностью, которая обеспечивает обволакивание неароматических гидрофобных фрагментов псевдожидкой средой активного центра. [c.141]

При очистке мембранных белков детергенты бывают необходимы и для экстракции белка из липидного окружения мембраны, и для поддержания его ферментатинной активности в растворе (в какой-то мере имитируя это липидное окружение), и, наконец, в процессе самой гидрофобной хроматографии. Экспериментатору приходится гибко манипулировать последовательным выбором природы и концентрации различных детергентов для решения всех этих задач. [c.185]

Ко второму варианту отнесем те случ аи, когда очищаемый белок сильно отличается по своему заряду (т. е. по кислотности или основности) от всех остальных белков исходной смеси. В этом случае нередко удается так подобрать условия хроматографии, чтобы только нужный белок сорбировался на обменнике, а все примеси сравнительно легко вымывались исходным буфером. По существу это — процесс экстракции. Сорбированный белок затем выбивают пз колонки в минимальном объеме, как при концентрировании. Может быть и обратная ситуация очищаемый белок свободно проходит через колонку, на которой задерживаются примесные белки. Иногда такие резкие различия в хроматографическом поведении приводят еще и к освобон<дению нун<ных белков из их природных комплексов. [c.305]

Для солюбилизации мембранных белков часто используют неионные детергенты, такие как тритон Х-100, твин-80 и др. Эти детергенты влияют на развитие окраски при определении белка с биуретовым реактивом и методом Лоури. Практически полного удаления детергентов из пробы можно добиться экстракцией их изоамнловым спиртом. [c.82]

Колбочки помещают в термостат аппарата Варбурга при 28° С и выравнивают температуру в течение 15 мин. В каждую колбочку добавляют по 0,1 мл густой суспензии митохондрий (6—7 мг белка) и пробы инкубируют в течение 10 мин при перемешивании. По окончании инкубации их помещают в лед и после быстрого охлаждения их содержимое осторожно наслаивают на поверхность холодного 0,88 М раствора сахарозы. Предварительно охлажденную до 0°С сахарозу разливают по 5—7 мл в четыре центрифужных стаканчика от супернасадки центрифуги ЦЛР, стоящие во льду. Пробы центрифугируют при максимальной скорости вращения 10 мин. Верхний слой отсасывают пипеткой и отбрасывают, раствор сахарозы сливают и поверхность осадков осторожно споласкивают 0,3 М сахарозой, охлажденной до 0°С. В стаканчик добавляют по 1,5 мл 1 н. хлорной кислоты, осадки хорошо размешивают стеклянной палочкой и центрифугируют при 5000 в течение 15 мин. Супернатанты собирают в пробирки и экстракцию повторяют вновь в тех же условиях. Объединенные супернатанты нейтрализуют крепким раствором МН40Н. К нейтрализованным растворам добавляют по 2 мл метилового спирта, 2,5 мл 1 М аммиачного буфера, 0,2 мл раствора цианистого калия и 0,4 мл раствора эриохро-ма черного Т в метиловом спирте. Объем доводят до 10 мл аммиачным буфером. Определяют количество Mg + в пробах, измеряя оптическую плотность при 520 нм против раствора, не содержащего Mg +. Калибровочную кривую строят одновременно с обработкой опытных проб, используя в качестве стандарта титрованный раствор Mg l2. Область концентраций, в которой сохраняется линейная зависимость между количеством Mg + и оптической плотностью, — О—0,3 мкмоль Mg2+ на пробу. [c.457]

Вопросы усовершенствования технологии производства каротина из моркови. Интересные исследования в этой области были проведены Б. Савиновым и его учениками (ИОХ АН УССР). Исходя из факта локализации каротина на хромопластах, им было предложено заменить процесс прессования мезги моркови процессом вымывания пластид из клеток интенсивным перемешиванием мезги с водой в суспензионном экстракторе [19]. Им же был разработан метод получения масляных концентратов каротина из влажного белкового коагулята путем применения центробежного смесителя [20]. Разработан метод получения каротина из моркови и тыквы методом термической коагуляции белков в клетке [21, 22], изучены вопросы экстракции каротина в многочленной батарее [23]. К сожалению, эти методы пока не нашли применения. Важное значение в области усовершенствования химии и технологии каротина имела книга Б. Савинова Каротин (изд. АН СССР, 1948 г.). [c.408]

Каротиновый краситель из моркови получают путем отжатия сока моркови, коагуляции в нем белковых веш еств, адсорбируюш их весь каротин коагулят отфильтровывают, высушивают, измельчают и экстрагируют каротин растительным маслом [5]. Каротиновый краситель из тыквы получают путем силосования ее, протирки силосной массы, нейтрализации, коагуляции белков, высушивания, экстракции органическим растворителем, отгонки растворителя и растворения концентрата в растительном масле. Содержание каротина в масляном растворе 2 мг мл. [c.432]

Б. содержатся в дрожжах, молочной сыворотке, яичном белке, печени, рыбе, бобовых растениях. Из органов животных и разл. растений Б. вьщеляют адсорбцией с помощью фуллеровой земли и экстракцией пиридином. К группе Б. относятся рибофлавин и мн. флавиновые коферменты. [c.275]

Количественное определение сахаров с применением хроматографии на бумаге включает в себя следующие основные операции а) фиксацию растительного материала б) экстракцию сахяров и очистку вытяжки от белков и других примесей в) распределительную хроматографию сахаров на бумаге г) элюцию сахаров с бумаги д) определение их содержания в элюатах. [c.227]

Некоторые из видов эремуруса [186, 187] содержат в стадии цветения и плодоношения значительные количества глюкоманнана, 12,5—36% от веса воздушносухого сырья. Полисахарид извлекается и корней эремуруса экстракцией 10—30-кратным количеством холодной воды после предварительной очистки ткани от белков обработкой 5%-ным раствором трихлоруксусной кислоты. Из водного раствора глюкоманнан выделяется осаждением двойным объемом этанола [188]. Глюкоманнан корней эремуруса Регеля состоит из остатков D-маннозы и D-глюкозы в отношении 2,5 1, соединенных преимущественно , l-v4 гликозидными связями [189, 190]. Состав глюкоманнана и его содержание в ткани различно в зависимости от вида растения (табл. 46). [c.249]

Прн выделении желаемого белка обычно сначала экстракцией водой илн разбавленным солевым раствором получают обогащенную белковую фракцию. Собственно, процесс разделения может основываться на различной (в определенных условиях) растворимости, различном размере, различном электрическом заряде илн различных адсорбционных свойствах молекул белков, а также на различной биологической активности. К выделению индивидуального белка может привести также взаимодействие с комплексо-образующимн веществами, например альбуминами, альгинатами, пектинами [26]. [c.346]

Изменения называются конфигурационными, когда их вторичные и третичные структуры белков способны принимать различные геометрические очертания в зависимости от изменения клеточной среды (pH, температура, окислительно-восстановительный потенциал, ионная сила и т. п.) [151]. Это можно проиллюстрировать на примере катехолоксидазы винограда Vitis vi-nifera), которая представлена разными множественными формами в зависимости от условий экстракции фермента [85]. [c.45]

Эта фракция является предметом многочисленных разногласий, по существу, из-за различий в методах экстракции и разделения на гликопротеин II, вицилин и глобулин I. Фактически все они перекрываются общим названием фазеолин [24]. При электрофоретических исследованиях многочисленных сортов выявлены три типа этого белка, причем каждый из этих типов содержит несколько полипептидов. [c.58]

Разные условия опытов приводят к более или менее полному экстрагированию различных белков и к получению в большей или меньшей степени чистых фракций глиадинов и глютенинов. Значительную роль могут играть такие факторы, как температура и число экстракций, интенсивность перемешивания. Сообщалось также, что присутствие липидов в муке или клейковине влияет на экстрагируемость белков. Удаление липидов может привести к нерастворимости глютениновой фракции, обычно растворимой в 55 %-ном этаноле [40]. Удаление липидов также снижает растворимость белков в 0,05 н. уксусной кислоте 48]. Однако некоторые авторы не обнаружили этого эффекта, который, видимо, зависит также от использования метода извлечения жиров и возможной денатурации белков в ходе этой операции [146]. [c.180]

Недавно были исследованы [35] экстракция запасных белков из пшеницы различными растворителями, а также свойства экстрагируемых белков в зависимости от условий процесса. Сравнивали 70 %-ный этанол, 55 %-ный изопропанол, 50 %-ный н-пропанол в присутствии или в отсутствие уксусной кислоты, а также влияние восстановления дисульфидных связей, температуры (4, 20, 60 °С) и предварительного удаления липидов. Было показано, что экстрагирование оптимально, когда проводится неоднократно при повышенных температурах и в присутствии восстановителей. н-Пропанол представляется наилучшим растворителем, так как экстрагирует все полипептиды в любых условиях. В присутствии восстановителей извлекают большую часть полипептидов, которые, как считается, обычно входят в состав глютенинов. Но, основываясь на их аминокислотном составе и на результатах экспериментов по биосинтезу белков, их рассматривают здесь как проламины с высокой молекулярной массой, образованные из нескольких полипептидных цепей, которые связаны между собой дисульфидными мостиками [136, 137]. [c.180]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология