Буфер состав

Одним из наиболее популярных в аналитической химии является ацетатный буфер, в состав которого входят уксусная кислота и ацетат натрия. Равновесие в растворе ацетатного буфера можно представить схемой [c.53]

Зная сущность механизма действия буферных систем, нетрудно догадаться, что наибольшей буферной емкостью обладают растворы, содержащие большие концентрации входящих в состав буфера компонентов, и растворы, составленные из компонентов, взятых в равных количествах. Влияние величины соотношения компонентов буферных смесей на их емкость связано с тем, что при равных величинах числителя и знаменателя величина дроби наиболее устойчива к изменению своего числового значения. Поэтому и величина соотношения компонентов, входящих в состав буфера, будет меньше подвержена изменениям. [c.215]

Проведенные расчеты показали, что чем больше состав раствора отклоняется от рекомендуемого соотношением (3.65), тем меньше буферная емкость раствора. При соотношении компонентов 10 1 емкость ацетатного буфера составляет 0,19с, а при соотношении 20 1 —только 0,010 с. Таким образом, буферные свойства проявляются в сравнительно узкой области pH, центр которой близок к значению р/С. Обычно отношение концентраций компонентов буферного раствора ia/ s или с /с находится в пределах от 10 1 до 1 10, что соответствует двум единицам pH, т. е. область буферного действия охватывает [c.56]

Состав пробы существенно изменяет основные параметры плазмы и переноса. При анализе порошкообразных материалов в пробу вводят так называемые спектроскопические буферы и носители -добавки, которые изменяют температуру, электронную [c.43]

Буферная емкость. Способность буферных систем стойко удерживать на определенном уровне концентрацию ионов водорода является ограниченной. Смещение pH буферного раствора зависит от количеств добавляемых к нему кислот или оснований и, в связи с этим, от уменьшения концентрации одного из компонентов (слабой кислоты или ее соли), входящих в состав буфера. [c.78]

Объединяют первые 5—6 фракций с самым высоким содержанием белка. Концентрируют до 15—20 мг/мл. Определяют содержание белка. Методом электрофореза определяют состав полученного препарата IgG. Диализуют против боратного буфера pH 8,4 в течение ночи при 4°С и хранят при —20°С. Здоровый кролик дает 100—200 мг IgG. Таким же образом можно получить поликлональные антитела к другим белковым антигенам. [c.309]

Раствор р-нафтола используется свежеприготовленным Готовят его так 0,75 г р-нафтола прибавляют к 1 л боратного буфера (состав указан выше). Суспензию перемешивают в тече [c.94]

Ацетатный буфер имеет состав СНзСООН+ + СНзСООЫа. Будет ли смесь СНзСООН- -+СНзСООНН4 буферной [c.84]

Состав нефтяного газа (%) триаса Качановского месторождения, выделяемого из трапов при сепарации нефти и отбираемого нз буфера трубного пространства [c.268]

Ларсон и соавторы в аналитических опытах на микроколонке (0,15 X 10 см) исследовали оптимальные условия для фракционирования рестриктов ДНК в системе ХОФ-5 при среднем давлении ( 33 атм) и скорости элюции 13 мл/ч. Наилучшее разделение 17 фрагментов размерами от 43 до 850 пар оснований получалось у них при использовании очень пологого линейного градиента (0,55—0,75 М K I) объемом 40 мл (220 Fj) в нейтральном буфере при температуре 43°. Повышение температуры, по их данным, затрудняет элюцию ДНК и растягивает ее профиль. Удается разделить фрагменты длиной 98 и 102 пары оснований, чего далеко не всегда можно добиться с помощью электрофореза. Длина липких концов рестриктов и их состав влияют на разделение, равно как и нуклеотидный состав ДНК и даже последовательность оснований. Подчеркивается нео - [c.173]

В спектрофотометрическую кювету помещают реакционную смесь, содержащую (указаны конечные концентрации) 6 мМ буфер, 100 мМ этанол и 0,5 мМ НАД. Реакцию начинают добавлением 0,05 мл раствора алкогольдегидрогеназы. Общий объем пробы — 3 мл. Перемешивают и измеряют увеличение оптической плотности при 340 нм в течение 45 с. Состав контрольной кюветы тот же, только отсутствует субстрат. [c.277]

При получении бисульфитных ыроизводных ненасыщенных карбонильных соединений возникают осложнения, так как бисульфит мошет присоединяться и по двойным С—С-связям (стр. 555). В результате этой реакции образуются различные продукты присоединения, состав которых зависиг от относительной реакционной способности С=С- и соответственно С — О-ев язи. Одновременное присоединение по двойной С=С-связи можно предотвратить, если применять свежеприготовленный (из 1 моль чистого кристаллического NasSOo и 1 моль уксусной кислоты) бисульфит и проводить-реакцию в нейтральной среде (буфер), избегая длительного взаимодействия и повышения температуры. Таким образом, например, были получены нормальные бисульфнт-ныв производные коричного альдегида, цитронеллаля и цитраля [72]. [c.559]

Состав реакционной среды объемом 3 мл 100 мМ К-фосфатный буфер, pH 7,4 пируват натрия 1,5 мМ — для фермента скелетных мышц и 0,75 мМ — для фермента сердечной мышцы НАДН — 0,1 мМ. Контрольная проба не содержит пируват натрия. Реакцию начинают добавлением ферментного препарата (20—100 мкл препарата). [c.337]

Ю. А. Чернихов с сотрудниками 1140, 1141] предлагает определять индий методом внутреннего электролиза. Процесс заключается в том, что в раствор, содержащий индий, погружают два электрода, соединенных между собой медной проволокой платиновый катод и цинковый анод. Между электродами создается некоторая разность потенциалов, заставляющая ионы индия направляться к катоду, на котором они разряжаются и оседают количественно плотным слоем. Катод взвешивают до и после осаждения на нем индия. Процесс ведется при 70° С и pH = = 3,5- 3,8 в присутствии виннокислого буфера. Состав раствора следующий 0,1-н. раствор соляной или серной кислоты, 10%-ный раствор кислого виннокислого натрия и 10 г хлористого аммония. [c.422]

Нанесите гибридный белок, элюированный с колонки с JVl-сефарозой, на колонку с сефакрилом S-200 и элюируйте его уравновещивающим буфером, состав которого указан в п. 12, [c.111]

Объам растюра в рмктор 0 мл, скорость потока гама 4< я/час. Состав <, % Н, , 04% 0 7,44 Н,. ацетатный буфер [c.204]

На процесс коагуляции существенное влияние оказывает солевой состав воды. Анионы слабых кислот обусловливают емкоси, буфера, способствуя гидролизу коагулянта. Катионы могут изменять заряд коллоидных частиц. Например, в жестких водах отрицательно заряженные коллоиды за счет адсорбции ионов кальция и магния могут приобрести положительный заряд. При значениях рН>7 этот заряд может нейтрализоваться ионами 804 из сернокислого алюминия, а ион алюминия будет полностью гидролизоваться до Л (ОН)з. Доза коагулянта в этом случае будет меньше, чем при коагуляции глинистой взвеси с отрицательно заряженными частицами. Следовательно, ион-партнер 504 оказывает суще ственное влияние на процесс коагуляции в водах с повышенной жесткостью. С добавлением в воду коагулянта у частиц происходит сжатие двойного электрического слоя, способствующее сближению их на такое расстояние, где проявляются межмолекулярные силы притяжения, и частицы укрупняются. [c.143]

Введение буфера и носителя. Состав и структура пробы влияют на температуру источника света. Поэтому понятно стремле- [c.241]

Зависимость суммарного заряда на полипептиде или белке от изменения pH среды можно использовать для разделения этих молекул с помощью электрофореза. Если смесь полипептидов в водном буферном растворе с известным значением pH подвергнуть воздействии сильного электрического поля, то молекулы с общим положительным или отрицательным зарядом будут перемен аться в противоположных направлениях, в то время как молекулы с нулевым зарядом при выбранном pH останутся ненодвижными. Сложную смесь белков можно раз-де. шть на компоненты, осуществляя электрофорез па бумаге, пропитанной буфером, или в гель-нроводящей пленке. Подвижность состав[1ых частей смеси или паправлспие их перемещения П[)и э. ектрофорезе зависят от значения pH, при котором проводится процесс. [c.300]

Этими авторами показано, что ЛНЭ на основе асфальтено-смолистых нефтей и латексов СКС-30 ШХП или ДМВП-10Х с соотношением фаз от 70/30 до 50/50 соответственно при контакте с пластовыми водами превращается в объемный гелеобразный материал с высокими структурно-реологическими свойствами и адгезией к материалу горных пород. Однако время их гелеобразования при этом исчисляется часами. Дополнительное введение в состав таких ЛНЭ 1-3 % эмультала, обладающего высокими поверхностно-активными свойствами на жидкой границе раздела фаз, снижает их исходную вязкость и время объемного гелеобразования до нескольких минут. Температурный диапазон применения ЛНЭ такого состава не превышает 50 С. Оптимальной схемой закачки ЛНЭ в скважину является следующая буфер (нефть или пресная вода) - ЛНЭ - буфер - продавочная жидкость. [c.217]

Программное устройство фирмы Waters (модель 660) предусматривает возможность задания любого из 11 фиксированных профилей градиента (линейного, двух ступенчатых и по четыре — выпуклых и вогнутых). Экспериментатору достаточно задать начальный и конечный состав смеси буферов, сумлгарную скорость подачи элюента п время элюции. Существуют варианты п более сложных систем. Например, в хроматографе фирмы Руе Uni am (модель PU 4800) задание формы градиента с помощью микропроцессора можио осуществить путем разбиения всего времени элюции на девять произвольных интервалов, внутри каждого из которых любую кривую можно аппроксимировать экспоненциальной функцией. Однако необходимость столь сложных (и дорогостоящих) устройств представляется сомнительной, по крайней мере для решения тех задач, которым посвящена эта книга. [c.100]

Для очистки мембранной D-лактатдегидрогеназы Е. соИ хроматографией на оксиапатите [Pratt et al., 1979] был использован пологий линейный градиент концентрации (0—0,2 М) К-фосфатного буфера, pH 7,2 (500 мл для колонки размером 2,6 X 20 см). Растворимость белка обеспечивали включением в состав буфера детергентов (1% Тритона Х-100 и 0,1% ДДС-Na). Очистке на оксиапатите предшествовали освобождение фермента из ме.мбрин с помощью дезоксихолата натрия, хроматография на DE-52 и гель-фильтрация на сефадексе G-200. На всех хроматографических этапах очистки в составе элюентов тоже присутствовали детергенты. [c.234]

Разумеется, исследователь редко располагает кривыми титрования всех белко , входящих в состав смеси, и выбор ойтимального значения pH производится эмпирически (как описано ниже). Но здесь мы хотели проиллюстрировать то обстоятельство, что подбор оптимального для фракционирования белков значения pH буфера элюции является делом не только очень важным, но и весьма тонким. Отклонение на одну единицу pH в безобидной нейтральной области для приведенного выше (вполне реального) примера трех кислых белков могло привести к отсутствию разделения двух пз них. [c.265]

Если элюент должен составляться на основе буфера, то, помимо соответствия диапазона буферной емкости нужному значению pH, необходимо обдумать выбор химической природы буфера в связи с возможностью его взаимодействия с обменником. В состав любого буфера входит обеспечивающий само явление буферности неполностью диссоциированный остаток слабой кислоты или слабого основания. Если такой остаток (в диссоциированной форме) сорбируется на обменнике, то буферное равновесие нарушается и изменяется pH. Во избежание этого хроматографию на апионообменниках предпочтительно вести в таких буферах, у которых буферный компонент является катионом, т. е. в трисовом, пиридиновом или имидазоль-ном, а для катиоиообменников следует использовать такие буферы, как ацетатный, фосфатный, бикарбонатный и др., где буферным компонентом служит анион кислотного остатка. [c.290]

Разделение проводят методом нисходящей хроматографии (с. 126) путем последовательного пропускания двух различных растворителей. Состав первого растворителя этиловый спирт — к-бутанол — ацетатноаммонийный буфер в соотношении 4 1 2. Состав второго растворителя изомасляная кислота — аммиак — вода в соотношении 50 1 27 (pH [c.181]

Так как величины Кт я V могут по-разному зависеть от pH, исследование, проводимое при ненасыщающих концентрациях субстрата, дает информацию, которую трудно интерпретировать. Поэтому необходима постановка экспериментов по определению влияния pH на Кт. и V. Следует помнить, что концентрация субстрата, являющаяся насыщающей при одном значении pH, при другом может йе быть ею. Выбирая буфер, нужно учитывать, чтобы его рК был по возможности близок к оптимуму pH реакции, а также иметь в виду, что при одном и том же pH в разных буферах каталитическая активность может различаться. Отдельные ионы могут оказывать активирующее или ингибирующее влияние на фермент. Поливалентные анионы (фосфат, сульфат, цитрат) могут конкурировать с отрицательно заряженным субстратом, вызывая ингибирование реакции. Отдельные компоненты буфера, например ЭДТА, гистидин, цитрат, могут связывать ионы металлов, важные для активности некоторых ферментов. Следует иметь в виду, что ионная сила раствора оказывает влияние на активность фермента. Поэтому, изменяя состав реакционной среды, необходимо обеспечивать постоянство ионной силы. [c.211]

В состав реакционной смеси в расчете на 1 мл входят 50 мМ Na-p-глицерофосфатный буфер (pH 8,2), содержащий 50 мМ 2-меркаптоэтанол, 30—50 мг/мл фосфорилазы Ь, 0,1—0,2 мг киназы фосфорилазы. Реакцию начинают добавлением Mg + и АТФ до конечной концентрации 10 и 3 мМ соответственно. Инкубацию проводят 45 мин при 30° С, после чего смесь охлаждают на льду, доводят pH до 7,0 добавлением охлажденной 1 н. СНзСООН. При охлаждении фосфорилаза а кристаллизуется. Для перекристаллизации осадок отделяют [c.225]

К насыщенному раствору (NH4)2S04 добавляют 2 н. NaOH и доводят pH до 7,8. При постоянном перемешивании медленно, по каплям к 50 мл сыворотки кролика добавляют 80 мл насыщенного раствора сульфата аммония (pH 7,8) и перемешивают в течение 2—3 ч. Центрифугируют суспензию при комнатной температуре 30 мин при 1500 g. Первый осадок содержит все -у-глобулины, другие глобулины и следы альбумина. Растворяют осадок в дистиллированной воде до начального объема сыворотки (50 мл). Очищают фракцию у-глобули-нов вторым и третьим осаждениями. После третьего осаждения растворяют осадок в боратном буфере (pH 8,45) до конечного объема 20— 25 мл. Удаляют сульфат аммония диализом при 4°С против боратного буфера в течение 2—3 дней со сменой буфера утром и вечером. Полученный после диализа препарат иммуноглобулинов обычно содержит небольшой осадок денатурированного белка и слегка опалесцирует. Центрифугируют при 4° С в течение 30 мин при 1400 s. В полученном препарате проверяют содержание белка и титров антител. Определяют белковый состав методом электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии ДСН (с. 119). Если полученный препарат у-глобулинов не отвечает требованиям эксперимента по стоте, проводят дальнейшую очистку с применением ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе. [c.308]

Состав реакционной среды объемом 3 мл 100 мМ трис-НС1 буфер, pH 7,5 фосфоенолпируват 0,8 мМ АДФ 3 мМ Mg l2 6 мМ КС1 100 мМ НАДН 0,1 мМ лактатдегидрогеназа 1 инт. ед. растворимая клеточная фракция 0,02—0,1 мл. Контрольная проба не содержит Mg—АДФ. Реакцию начинают добавлением фосфоенолпирувата. [c.334]

Состав реакционной смеси для проявления активности лактатдегидрогеназы в полиакриламидном геле К-фосфатный буфер 100 мМ, pH 7,4 лактат натрия 100 мМ НАД 0,5 мМ феназинметосульфат 40 мкг/мл тетразолий нитросиний 400 мкг/мл. [c.339]

За ходом реакции следят на спектрофотометре по уменьшению оптической плотности при 340 нм в результате окисления НАДН. Состав реакционной среды объемом 3 мл 100 мМ К-фосфатный буфер, pH 7,5 -аспартат 30 мМ а-кетоглутарат 5 мМ НАДН 0,1 мМ малатдегидрогеназа 1 инт. ед. препарат аспартатаминотрансферазы 25— 100 мкл. Контрольная проба не содержит L-аспартат. [c.352]

Состав реакционной среды объемом 3 мл 100 мМ трис-НС1 буфер, pH 7,5, содержащий 0,02 мМ ЭДТА Mg 5 мМ фруктозо-1,6-дифосфат — 100 мкМ КС1—100 мМ НАДФ — 0,25 мМ глюкозо-6- [c.355]

Состав реакционной среды объемом 1,5 мл малеатный буфер — 100 мМ pH 6,5, глюкозо-6-фосфат — 20 мМ, ферментный препарат — [c.372]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология