Кюветы для определений спектрофотометрических

ГФ X рекомендует спектрофотометрическое определение ретинола ацетата в спиртовом растворе В этом случае измеряют оптическую плотность спиртового раствора препарата (приготовленного из точной навески) на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 326 нм. Этой длине волны соответствует максимум поглощения Сопоставляя величину экстинкции 1см) для испытуемого раствора с величиной экстинкции стандартного раствора, рассчитывают содержание ретинола ацетата по соответствующей формуле. Вследствие легкой окисляемости ретинола ацетата, его хранят в запаянных в токе азота ампулах при температуре не выше -Н5°С [c.388]

Увеличение толщины слоя до предельного значения (/ = = 10 см) может позволить снизить С.,,,н на порядок. Однако иа практике работают с кюветами толщиной 1—2 см, молярные коэффициенты светопоглощения окрашенных соединений в большинстве случаев не превышают 5-10 кроме того, в ходе выполнения анализа добавляют реактивы, производят разбавление растворов, в результате чего минимальные определяемые концентрации следовых количеств элементов увеличиваются до значений примерно 5-10 моль/л при спектрофотометрических определениях и до (1—2,5)-10 моль/л при фотоколориметрических определениях. Для элемента с относительной атомной массой 100 минимальные концентрации составят соответственно 0,05 и 0,1—0,3 мкг/мл. Если принять, что оптические плотности исследуемых растворов указанных концентраций измеряют в кювете с /==2 см, объем которой равен примерно 10 мл, то общее содержание элемента в этом объеме составит соответственно 0,5 и 1—3 мкг. Отсюда следует, что при навеске анализируемой пробы в 1 г обычный спектрофотометрический анализ позволяет определять минимальную массовую долю следов элементов на уровне 5-10 %, а фотоколориметрический— на уровне (1—3) % [c.185]

Второе условие экстремума Гта = оо не имеет реального смысла. Пример 2. Известно, что путем выбора толщины кювет при фотоколориметрическом или спектрофотометрическом определении можно изменять значения оптических плотностей А. На каком участке шкалы оптических плотностей растворов следует проводить измерение, чтобы погрешность была минимальной [c.135]

Для определения концентрации полученного раствора л-ХМБ в две спектрофотометрические кюветы наливают по 2,8 мл раствора КС1. [c.158]

Количественное определение производят спектрофотометрически или поляриметрически. Последнее гарантирует содержание правовращающего биологически активного вещества (цис-изомера). Около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в 50 мл бутилацетата, 1 мл этого раствора разбавляют бутилацетатом до 10 мл и определяют оптическую плотность раствора на спектрофотометре СФ-4 при длине волны 289 ммк в кювете с толщиной слоя 0,1 см. Содержание гризеофульвина (X) в процентах вычисляют по уравнению [c.708]

Существуют быстро сканирующие спектрофотометрические детекторы, которые позволяют снять УФ-спектр вещества при его прохождении через кювету без остановки потока. Один из наиболее удачных детекторов такого типа используют в хроматографе Милихром , в котором с помощью зеркала, поворачивающегося по заданной программе на определенный угол с заданной частотой, кюветы с образцом и сравнительная кювета освещаются последовательно монохроматическими лучами с выбранными оператором различными длинами волн. Получаемая при этом хроматограмма, представляющая собой комбинацию из двух, трех или более хроматограмм, снятых при разных длинах волн, позволяет получить качественную информацию о возможных примесях, замаскированных в одном пике, о природе и структуре вещества, о длине волны, при которой поглощение данного вещества максимально и можно определить его минимальное количество. Эта информация часто позволяет по одной хроматограмме решить сразу несколько достаточно сложных задач обнаружить примеси, установить чистоту веществ, определить длину волны, при которой поглощение каждого вещества наибольшее, провести идентификацию. Работать с таким детектором, конечно, сложнее, чем с простым спектрофотометром. [c.152]

Зависимость величины относительной ошибки определения следов воды при оптимальных условиях для ряда растворителей показана на рис. 68. Интервал концентраций воды, допускающих определения по поглощению в области основных частот валентных колебаний ОН-групп при неизменной величине АО/О, ограничен, с одной стороны, точностью изготовления кювет (большие концентрации воды), с другой — собственным поглощением растворителя (малые концентрации воды). Наиболее благоприятным для большинства растворителей является интервал концентраций 0,1—1,0%. Градуировочные графики для этого интервала, построенные в координатах оптическая плотность — содержание воды в растворе, прямолинейны. Результаты определения спектрофотометрическими методами хорошо совпадают с данными дру- [c.156]

Если применяемые в процессе спектрофотометрического определения реагенты бесцветны и используются водные растворы, то в кювету сравнения наливают дистиллированную воду. Если же применяют окрашенные реактивы, то в кювету сравнения наливают те же реактивы в том же количестве, но без определяемого элемента. Такой раствор называется нулевым или раствором сравнения. [c.259]

Неводные растворители, например циклогексан, сероуглерод и другие, должны быть оптически чистыми, т. е. не содержать никаких примесей, которые могут поглощать лучи тон области спектра, в которой проводят спектрофотометрическое определение. Растворители, применяемые для спектрофотометрических измерений в инфракрасной области спектра, не должны содержать воды, потому что вода разрушает кюветы из каменной соли или сильвина. [c.259]

Высокочастотная полоса 3680 см лежит в области спектра, свободной от полос поглощения растворителя, и очень удобна для проведения определений. Метод спектрофотометрического определения следов воды с разведением проб имеет и ряд других существенных преимуществ. При использовании этого метода значительно уменьшается погрешность, связанная с неточностью изготовления кювет, так как для разбавленных растворов применяются кюветы с большой толщиной слоя 1—3 мм. Совершенно устраняются погрешности, связанные с изменением соотношения ассоциаций различного типа молекулами воды и органического растворителя все возможные типы ассоциаций заменены одним КВ...НОН...А. Для растворителей, энергии водородных связей которых с водой имеют сводные значения, интенсивность и положение указанной одиночной полосы совпадают, что позволяет анализировать смеси органических растворителей, не учитывая соотношение между концентрациями компонентов смеси. Положение и интенсивность рассматриваемой полосы значительно меньше зависят от температуры раствора, чем полос поглощения воды в неразбавленных растворах. Результаты определений малых содержаний воды этим методом приведены в табл. 27. [c.158]

Чаще всего для спектрофотометрического определения рКа снимаю спектры исследуемого вещества в ряде буферных растворов с разли ным значением pH при постоянной длине кюветы и постоянной сум- марной концентрации НА и А. (Последнее обеспечивается тем, чЩ к одинаковому объему буферных растворов с различным значением рЙ добавляют одинаковое исходное количество А или НА). Как следуе из формулы (3.10), при этих условиях [c.116]

Уравнение (3.30) дает связь между пропусканием Т и внутренним пропусканием Г . Для слоя стекла или пластика Г Г/О,92 это приближенное значение часто используется. Если кювета, наполненная раствором, сравнивается с кюветой, наполненной только растворителем, по спектрофотометрическим данным, то отношение двух значений пропусканий (часто называемое пропускающей способностью) весьма близко к Г раствора и этим часто пользуются для определения Г различных растворов. [c.486]

Количественное определение проводится спектрофотометрическим методом. Максимум светопоглощения наблюдается при длине волны 370 нм кювета 1 см. Подчинение закону Бера в пределах концентраций 0,5—30 мкг в 1 мл. [c.261]

Спектрофотометрические определения в очень малых объемах растворов возможны в капиллярных кюветах при достаточном освещении [202, 277]. Кювета (рис. 121) представляет собою эбонитовую или латунную трубку 1 шириной 16 мм с каналом диаметром около 2 мм. Длина трубки 50 мм, емкость около 150—160 мкл. Трубка с обеих сторон закрывается круглыми бесцветными стеклами 2, прижимаемыми винтами 3 с отверстиями, находящимися против канала кюветы. Исследуемую жидкость вводят через одно из боковых отверстий 4. В таких кюветах определяют, например, до 0,1 мкг Ре " в пробе по реакции с фенантролином. [c.155]

Спектрофотометрическое определение проводится в кювете с толщиной слоя в 1 см, при длине волны 243 ммк. Расчет (%) производится по формуле [c.84]

Точность определения рК может быть значительно повышена путем замены кювет, закрываемых крышками, более дорогими кюветами с завинчивающимися крышками. Используя такие кюветы, можно свести к минимуму испарение, а также доступ углекислого газа. Еще большей точности определения можно добиться, если тем или иным способом термостатировать кюветы. Эту меру предосторожности начали широко применять лишь в самое последнее время, поэтому точность опубликованных данных, полученных спектрофотометрическим методом, обычно меньше, чем можно было бы ожидать. Изменение величины рК с небольшими изменениями температуры является характерным для оснований, фенолов, иона гидроксила и многих буферных растворов таких, как, например, бораты (стр. 163). [c.76]

Количественное определение производят спектрофотометрически. Около 0,02 г препарата (точная навеска) растворяют в мерной колбе емкостью 500 мл, определяют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 361 ммк в кювете толщиной слоя 1 см с применением воды в качестве контрольного раствора. Содержание цианокобаламина в процентах (X) вычисляют по формуле [c.684]

Готовят 10 мл азотнокислого раствора с рН = Зн-4, содержащего 0,004 г-атом1л Ри (см. работу 15.1, В). Доводят кислотность раствора до 0,5 н. по НС и быстро определяют концентрацию Pu V в полученном исходном растворе. Затем также быстро порцию его (3—4 мл) переносят с помощью капиллярной пипетки в кварцевую или стеклянную кювету для спектрофотометрических измерений. Измеряют оптическую плотность раствора через определенные промежутки времени (0,5, 1, 2, 4 ч и т. д.) до достижения равновесия между валентными формами плутония при длинах волн 603, 470, 568—569 и 831 ммк, отвечающих максимумам поглощения для Ри , Pu v Pu V и PuVI соответственно. В промежутках между измерениями раствор выдерживают в термостате при 25 0,1°С. [c.473]

Форма молекулярных полос поглощения в ультрафиолетовой и видимой областях очень различна, и это следует учитывать при окончательном выборе длины волны для спектрофотометрического анализа. Допустим, например, что определяемое вещество имеет гипотетический спектр поглощения, показанный на рис. 19-17. Этот спектр поглощения состоит из интенсивного острого пика и менее интенсивной широкой полосы. Ясно, что выбор длины волны, соответствующей максимуму острого пика, даст большую чувствительность определения. Однако небольЕлие изменения в положении селектора частоты будут вызывать сдвиг длины волны излучения, падающего на кювету с пробой, и соот-ветственно большое изменение в отсчете поглощения. Между тем, если использовать для анализа центральный участок широкой полосы, любые сдвиги в длине волны падающего излучения будут оказывать гораздо меньшее влияние на поглощение. Поскольку небольшой сдвиг длины волны — явление довольно обычное в спектрофотометрах, лучше выбрать для анализа длину волны, которая соответствует центральной части 1]1ирокой полосы, чем ту, которая соответствует вершине острого пика, либо наклонной части пика или полосы. К тому же, использование широкой полосы поглощения будет сводить к минимуму отклонения от закона Бера, вызываемые изменениями мольных коэффициентов поглощения в участке длин волн излучения, падающего на раствор пробы. [c.649]

Определение спектрофотометрических характеристик I и П. Готовят 5-10- моль]л растворы I (с добавлением 4,5 мл 0,1 н. НС1) и II в этаноле. В мерные колбы вместимостью 25 мл отбирают 0,5 мл S-IO мольЦ раствора I или II, добавляют 1 мл 0,1 н. НС1 и доливают до метки этанол (ацетон). Перемешивают, измеряют оптическую рлотность растворов в зависимости от X через 20—30 л на спектрофотометре в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. Определяют X iai и [c.21]

К сухому остатку, находящемуся в колбе Эрленмейера емкостью 100 мл, добавляют 10 мл 1 н. Н2804 (точно отмеренные), закрывают колбу пробкой и ставят на кипящую водяную баню. Во время нагревания пробку время от времени приоткрывают колбу встряхивают, чтобы растворить все твердые частицы, приставите к стеклу, и продолжают нагревание в течение 3 ч. Затем охлаждают, перемешивают и переносят раствор в кварцевую кювету для спектрофотометрического определения. [c.192]

В настоящее время метод остановленной струи широко приме-ляется для решения многих задач химической кинетики установление механизмов химической реакции, определение стадий, лимитирующих протекание реакции обнаружение промежуточных комплексов, определение кинетики ферментативных реакций, установление числа и концентрации активных центров фермента, изучение быстрых конформационны5( переходов в белках и нуклеиновых кислотах. Метод требует быстрой регистрации это единственное существенное ограничение его применимости. Особое внимание при применении метода остановленной струи необходимо уделять тер-мостатированию, так как разница в температурах в кювете наблюдения и растворе смеси реагентов может привести к большим оптическим ошибкам, затрудняющим установление механизма наблюдаемой реакции. Точность определения констант скоростей данным методом примерно такая, как и при обычных спектрофотометрических измерениях кинетики химических реакций. [c.28]

В спектрофотометрическую кювету помещают 0,05 М пирофосфатный буфер pH 9,0 (2,5 мл), гидразин (конечная концентрация — 20 мМ), глицерол-З-фосфат (конечная концентрация — 1,8 мМ), НАД+ (конечная концентрация — 1,2 мМ), Объем пробы доводят до 3 мл. Реакцию начинают добавлением 30—50 мкл раствора фермента. Измеряют нарастание поглощения при 340 нм. Определение белка проводят спектрофотометрически, учитывая, что при 280 нм Лп м=7,4. [c.267]

Энзиматический контроль за процессом образования ксилулозо-3-фосфата. Из инкубационной смеси сразу же после погружения проби1 рок в термостат, а также через каждые 30 мин отбирают по 0,1 мл, выливают в мерные пробирки и нагревают на кипящей водяной бане в течение 5 мин. Добавляют воду до 1 мл, перемешивают и центрифугируют. Осадок отбрасывают, а центрифугат (или часть его) переносят в спектрофотометрическую кювету, содержащую все необходимые компоненты для определения транскетолазной активности (с. 279), кроме субстрата. Скорость транскетолазной реакции в данном случае должна лимитироваться количеством ксилулозо-5-фосфата, образовавшимся в инкубационной смеси и добавляемым в спектрофотометрическую кювету в составе центрифугата. [c.289]

Реакционную смесь для определения активности фермента готовят непосредственно в одно сантиметровой спектрофотометрической кювете. Для этого в кювету вводят необходимое (0,05-1,0 мл) количество запасного раствора MUF-целлобиозида (5 мМ), доводят объем до 3,0 мл буфером с нужным значением pH, термостатируют раствор в кюветном отделении спектрофотометра 5 мин при 40° С, добавляют 5-30 мкл раствора фермента и регистрируют кинетику накопления MUF при 350 нм. Активность фермента [c.151]

Для определения концентрации образовавшегося малата в спектрофотометрическую кювету вносят 3 мл среды для измерения концентрации малата, добавляют 50 мкМ дихлорфенолиндофенол, 1 мМ феназинметосульфат, малатдегидрогеназу — 50 мкг/мл и аспартатамино-трансферазу — 50 мкг/мл. Определяют значение оптической плотности раствора при длине волны 600 нм, соответствующей максимуму поглощения окисленной формы ДХФИФ (емм ° =20). В кювету добавляют 50—100 мкл раствора малата и фиксируют уменьшение оптической плотности, связанное с восстановлением дихлорфенолиндофенола. Рекомендуется определить указанным методом концентрацию приготовленного по навеске раствора L-малата. Рассчитывают концентрацию образующегося в результате реакции окисления янтарной кислоты малата и определяют стехиометрическое соотношение окисленного сукцината к образованному малату в отсутствие и в присутствии разобщителя. [c.462]

Возможность определения фурфурола в водных растворах спектрофотометрическим методом основана на интенсивном избирательном поглощении света в ультрафиолетовой области при характерной длине волны А,=278 ммк. Для определения фурфурола в дистилляте по этому методу пипеткой отмеряют 10 мл ранее отогнанного раствора фурфурола в мерную колбу на 500 мл и раствор разбавляют водой до метки. Раствор тщательно перемешивают и определяют оптическую плотность раствора при А,=278 ммк в сравнении с оптической плотностью воды при той же величине К. Содержание фурфурола находят по калибровочному графику. Для измерения оптической плотности применяют кювету с толщиной рабочего слоя 10 мм. Такая подготовка к анализу приемлема в том случае, если содержание пентоз в исследуемом материале находится в пределах 2—10%. При более высоком содержании пентоз уменьшают концентрацию фурфурола соответствующим разведением раствора. При этом, определив по калибровочной кривой содержание фурфурола, результат увеличивают во столько раз. во сколько раз была уменьшена концентрация фурфурола в растворе для анализа. Для построения калибровочной кривой приготовляют растворы фурфурола с концентрацией от 5 мг1л до 1 мг/л. Оптическую плотность растворов определяют аналогично вышеизложенному. По полученным данным строят график, откладывая на оси абсцисс концентрацию фурфурола, а на оси ординат оптическую плотность растворов. Содержание потенциального фурфурола вычисляют по формуле [c.61]

Первые существенные достижения в области автоматического анализа колориметрическим методом применительно к водным средам были описаны Ферманном еще в 1952 г. [53]. Использовавшееся вначале автоматическое оборудование описали Шин и Сер-фасс [54]. В их работе отражены история, развитие и применения автоматического анализа в химической промышленности до 1960 г., включая и применения к определению растворенного кислорода, а также формальдегида. В 1967 г. Ланг [55] описал спектрофотометрическую систему, собранную из стандартного оборудования, в которой использовались автоматическое устройство для смены образцов, плунжерный насос и капиллярные кюветы. [c.393]

Количественные определения обычно проводят при длинах волн выше 235 нм. Если измерения должны выполняться в области длин волн 190—210 нм, необходимо соблюдать специальные меры предосторожности, такие, как продувание кю-ветного отделения азотом, использование растворителей специального спектрофотометрического качества и применение прозрачных в этой области кювет. [c.44]

Недавно для определения активности фермента был предложен экспресс-метод [74], позволяющий непрерывно регистрировать образование глюкозы непосредственно в спектрофотометрической кювете. При избытке глюкозооксидазы и пероксидазы в системе лимитирующей стадией сопряженной реакции является гидролиз целлобиозы и скорость образования окраски прямо пропорциональна скорости образования целлобиозы. Определение активности проводится в рН-оптимуме целлобиазы (pH 4,5-5,0), занимает 2-10 мин Метод позволяет в 10-20 раз повысить чувствительность определения целлобиазной активности. Недостатком данного способа является, прежде всего, нестабильность реагента при хранении даже в течение дня. [c.140]

Разработан быстрый и точный спектрофотометрический метод определения 2—30 мкг мл Мо при помощи азокрасителя солохромового фиолетового R [951. Мешают шестивалентный вольфрам и трехвалентное железо. Не мешают небольшие количества двухвалентного железа, получаемого восстановлением при помощи аскорбиновой кислоты, Th, Al, Zn, d, щелочные и щелочноземельные металлы, F , небольшие количества ионов S04 . Мешают большие количества окрашенных ионов (Си, Сг , Ni и т. д.). Очень сильно мешают ионы Р04 . Оптическую плотность растворов измеряют при 565 ммк (максимум светопоглощения) в кюветах с толщиной слоя 1 см относительно раствора красителя и друпих реагентов одинаковой концентра- [c.229]

Спектрофотометрическое определение. При помощи небольшого сифона 2 (рис. 4) в прибор для заполнения переносят около /з содержимого мерной колбы и хорошо промывают им присоединенную проточную кювету. Толщина слоя 0,01 0,05 0,1 или 0,2 см. Только после повторной промывки заполняют кювету окончательно, отсоединяют ее и измеряют экстинкцию ири 500 Л1 1, сравнивая ее с экстинкцией чистого бензола. Было установлено, что реактив при 500 мц не обладает собственной экстинкцией. Однако через несколько недель экстинкция все же появляется и тогда проводят измерения, сравнивая с измерениями раствора реактива, разбавленного так же, как и первая проба. Это необходимо также тогда, когда измерение производят при. большой толщине слоя — около 0,2 см. Окраска подчиняется закону Ламберта—Беера до е = 1,0, что вообще должно быть верхней границей спектрофотометрического определения. 1де при 500 лф для всех исследованных до сего времени диалкилалю-минийгидридов одинаков (2,31). Это значит, что навеска 77,0 мг чистого диизобутилалюминийгидрида, растворенная в 25 мл при й = 0,05 см, дает экстинкцию 0,224. Отклонения отдельных измерений от теории колеблются в пределах 2%. Для измерения необходимо применять спектрофотометр с монохроматором, так как обычные светофильтры для 460 и даже 480 мр. не полностью защищают от желтого окрашивания, обусловленного наличием алюминийтриалкилов. [c.44]

Для определения концентрации озона используют иодометрический метод. Озон пропускают через нейтральный или щелочной раствор иодида калия или натрия. После поглощения озона раствор иодида подкисляют и оттитровывают выделившийся иод стандартным раствором тиосульфата натрия или определяют его спектрофотометрически в кюветах толщиной 1 см при длине волны 360 нм. [c.250]

Для определения Се в присутствии рзэ предложено множество методик, в которых используются в основном реакции окисления-восстановления при титровании или колориметрических измерениях (см. стр. 155, 192). Все они применимы для анализа смесей рзэ, однако нет надобности использовать, например, слишком чувствительные цветные реагенты для определения сравнительно больших количеств церия. Для этого удобно использовать реакцию образования пероксидного соединения в щелочной среде (карбонатный буфер, pH 10,5). При концентрации рзэ в растворе не более 2 мг1мл методика дает возможность с точностью до +2—3% определять от 0,01 до 0,6% Се в смеси по измерению поглощения при 304жл с с кюветой I 10 мм [142]. После окисления персульфатом в 0,Ш Н2504 подобная же спектрофотометрическая методика (Л, = [c.231]

Автоматическая клиническая спектрофотометрия. Спектрофотометрия является основой многих современных клинических анализаторов. Используя быстрое последовательное введение проб или специально сконструированную проточную кювету, один из таких приборов может анализировать спектрофотометрически пробы со скоростью, превышающей 60 проб в 1 ч. В этих приборах все операции, включая разбавление пробы, добавление реагентов и разложение пробы, проводятся автоматически перед выполнением спектрофотометрического определения. Часто несколько отдельных определений можно проводить в Jкaждoй пробе с правильностью и воспроизводимостью, равными илн превышающими таковые, достигаемые опытным лаборантом. Схему простого одноканального клинического анализатора можно видеть на рис. 19-18. [c.653]

Фотоэлектроколориметрическое определение производят на ФЭК-М, кювета 5—10 мм, светофильтр № 3, А, = 410—500 нм, эталон сравнения — контроль реактивов. По чувствительности этот метод не отличается от спектрофотометрического. [c.233]

Рассмотрим комплексометрическое определение кальция в сыворотке крови, моче или спинномозговой жидкости. Обычно при титровании кальция с ЭДТА в сильнощелочной среде используют мурексид в качестве металлохромного индикатора, конечная точка титрования соответствует первому заметному переходу красной окраски комплекса кальция с мурексидом в синюю окраску свободного индикатора (НгЫ ). Поскольку момент изменения окраски человеческий глаз не может воспринять отчетливо для нахождения конечной точки титрования, применяют спектрофотометрический метод. Если сосуд, где проводят титрование, поместить в кювету спектрофотометра и в процессе добавления ЭДТА следить за поглощением света при 480 нм (длина волны максимального светопоглощения комплекса кальция с мурексидом), то поглощение раствора будет оставаться постоянным вплоть до точки [c.202]

Спектрофотометрически была проанализирована смесь бихромата и перманганата в 1 Р растворе серной кислоты при 440 и 545 нм для одновременного определения этих двух иоиов. Полученные значения поглощения в кювете толщиной 1 см были равны 0,385 и 0,653 при каждой длине волны соответственно. Независимо было найдено, что поглощение в такой же кювете 8,33-10- М раствора бихромата, 1 Р по серной кислоте, равно 0,308 при 440 нм и только 0,009 при 545 нм. Подобным же образом было найдено, что 3,77-10 М раствор перманганата, помещенный в кювету толщиной 1 см, имеет поглощение, равное 0,035 при 440 нм и 0,886 при 545 нм. Рассчитайте мольные коэффициенты поглощения бихромата прн 440 нм и перманганата при 545 нм, а также концентрации бихромата и перманганата в неизвестной смеси. [c.672]