Цетавлон

Осадок комплекса "цетавлон—полисахарид" — ЦП [c.483]

Поскольку кислотность сульфатных и карбоксильных групп различна при помощи цетавлона или хлорида цетилпиридиния при различных pH можно фракционировать смеси кислых полисахаридов. [c.54]

Большой дискуссии подвергся вопрос о силах, удерживающих 7-частицы. Думали, что их связывают молекулы белка или водородные связи. Однако снижение содержания белка от 19 до 0,03%, а также действие различных реагентов, разрывающих водородные связи (8М мочевина, 8М гуанидин, 8М бромид лития, твин, додецилсульфат натрия, цетавлон и ряд других воздействий, как, например, протеазы), не вызывали изменения частиц. Оставалось предположить наличие каких-то ковалентных химических связей, необычных для полисахаридов или обычных, но ослабленных определенными воздействиями (см. ниже). [c.120]

Известно, что полианионные вещества образуют нерастворимые вводе соли с катионными детергентами, такими, как цетилтриметиламмоний бромид (цетавлон). Однако эти соли растворяются в растворах неорганических солей, например хлористого натрия, причем растворимость зависит от ионной силы (и pH) среды (см. обзор [35]). Используя осаждения цетавлоном, Джонс [36] очистил бактериальную нуклеиновую кислоту, а Скотт [37 ] фракционировал неочищенные препараты гепарина и других кислых полисахаридов (стр. 288). На основании этих результатов было найдено [17], что смесь бактериальных липополисахаридов и нуклеиновых кислот, полученную при экстракции смесью фенол — вода (методика I), можно разделить, так как нуклеиновые кислоты обладают более сильными кислотными свойствами по сравнению с липополисахаридами, которые имеют слабые анионные свойства, поскольку содержат небольшое количество фосфатных эфирных групп (см. [11, 12, 28]). [c.328]

Биостойкостью обладают консервационные масла К-17 и К-17н, защитное ингибированное покрытие (ЗИП), а также ряд известных ингибиторов коррозии из группы хроматов и нитритов аминов (ХЦА и НДА) и диамин концентрацией 0,02...0,1 %, цетавлон и ЦДБА в еще более низких концентрациях. [c.92]

Преобладающая часть полисахаридов гемицеллюлоз трудно или совсем нерастворима в воде, поэтому в исследованиях гемицеллюлоз чаще всего приходится иметь дело со щелочными растворителями. При взаимодействии кислых полисахаридов с четвертичными солями аммония образуются соли, в которых комплекс в значительной мере растворяется. Поэтому для полного осаждения полисахаридного комплекса концентрация применяемых растворов должна быть такой, чтобы содержание неорганических солей не превышало критической концентрации. Это условие достигается при концентрации гемицеллюлоз около 1% в 10%-ном растворе щелочи осаждением 0,1 — 1,5%-ным раствором цетавлона, который применяется в десятикратном объеме по отношению к объему щелочного раствора полисахаридов. Иногда применяют осаждение нейтральных полисахаридов в присутствии бромистого цетилтриметиламмония. [c.45]

Экстракцией водным раствором NaOH делигнифицированной коры была выделена фракция, содержавшая смесь полисахаридов. Последние были разделены осаждением раствором Фелинга. Нерастворившийся остаток содержал глюкоманнан, молекулы которого состоят из остатков D-маннозы и D-глюкозы в отношении 9 2, соединенных 1 4 гликозидными связями. Из оставшегося раствора после выделения части полисахаридов реактивом Фелинга, осаждением этанолом была получена фракция, из которой после обработки цетавлоном был выделен арабогалактан, состоящий из остатков D-галактозы и L-арабинозы в отношении 12 1, с а]п = -П [c.239]

Экстракцией корней женьшеня (Рапах Ginsen) [191] горячей водой выделена фракция гемицеллюлоз, составляющая 40% от веса сухого корня. После удаления крахмала она содержала 0,5% метоксильных групп, а при гидролизе дала D-галактозу, L-арабинозу и D-галактуроновую кислоту. Осаждением раствором цетавлона фракция была разделена на нейтральные и кислые полисахариды. В составе кислых полисахаридов обнаружены [c.249]

Кислые мукогюлисахариды в соединительной ткани связаны с белка- ми (см. стр. 602), поэтому для их выделения, как правило, проводят предварительное разрушение белков протеолитическими ферментами или расщепление углевод-белковых связей щелочами, после чего полисахариды экстрагируют растворами солей . Белки, также переходящие при этом в раствор, удаляют с помощью денатурирования. Смеси мукополисахаридов можно разделить на компоненты фракционированным осаждением спиртом в виде солей с различными катионами , но лучшие результаты дает фракционированное осаждение цетавлоном или ионообменная хроматография . Особенности химического поведения мукополисахаридов сделали чрезвычайно сложной задачу установления их строения. Даже идентификация моносахаридов после полного кислотного гидролиза (обычно одна из самых простых операций) является в мукополисахаридах трудной проблемой. Наличие в одной молекуле уроновых кислот и аминосахаров приводит к тому, что полисахариды гидролизуются лишь в жестких условиях, при которых освобождающиеся уроновые кислоты подвергаются интенсивному разрушению. Поэтому в последнее время работу по установлению строения этих веществ проводят на модифицированных полисахаридах, в которых сульфатные группы удалены, а все карбоксильные группы уроновых кислот восстановлены в первичноспиртовые. Ряд других классических методов установления строения полисахаридов применим к мукополисахаридам с трудом это относится к перйодат ному окислению, вызывающему разрушение остатков уроновых кислот вследствие сверхокисления, к метилированию, в применении которого успехи достигнуты сравнительно недавно. Основными методами, позволившими выяснить строение мукополисахаридов, послужили методы частичного гидролиза и частичного ферментативного расщепления. [c.541]

Соли четвертичных аммониевых оснований с длинноцепочечным радикалом весьма успешно используются для разделения и фракционирования кислых и нейтральных полисахаридов. Катионы этих солей, как, например, наиболее часто применяемых цетавлона (бромида цетилтриметиламмония) и хлорида це-тилпиридиния, образуют соли с анионными группировками (сульфатными и карбоксильными) кислых полисахаридов,а длинноцепочечный радикал катионов вследствие своей гидрофобности способствует выпадению осадков. [c.54]

Баркер [1] применил цетавлон и для разделения нейтральных полисахаридов. В боратном буфере полисахариды дают полисахаридборат-ные комплексы. Образующиеся кислые группировки реагируют с катионом цетавлона. Поскольку разные полисахариды реагируют с борной кислотой с различной легкостью, Баркеру удалось, например, отделить при помощи цетавлона дрожжевой маннан от гликогена. [c.54]

В последующие годы мы [2, 3] синтезировали свыше 20 солей четвертичных оснований (СЧО) с различными радикалами и испытали возможность их применения для разделения нейтральных полисахаридов. Оказалось, что из этих солей особенную ценность представляет ДМДБАХ — диметилдодецилбензиламмонийхлорид. Обладая высокой осаждающей способностью, он имеет перед цетавлоном то преимущество, что легче растворяется в спирте, а потому легче вымывается из осадка полисахарида. Более подробно проблема фракционирования нейтральных полисахаридов при помощи СЧО и некоторые найденные при этом закономерности будут рассмотрены в главе о фракционировании а-глюканов, поскольку она разрабатывалась главным образом на них (см. с. 128). [c.54]

Впервые разделение нескольких двухкомпоненткых смесей нейтральных полисахаридов произвел Баркер, который пользовался для этого одной СЧО— цетавлоном (цетилтриметиламмоний бромидом). [c.128]

Окисление рибо- и дезоксирибонуклеозидов до 5 -карбоновых кислот проводилось также с использованием системы хромовый ангидрид — пиридин при комнатной температуре. 3 -Гидроксильная группа довольно устойчива к окислению, поскольку 5 -0-три-тилтимидин не подвергается воздействию этого окислителя. При действии этого реагента на цетримидную (цетавлон) соль дезоксирибонуклеиновой кислоты не было обнаружено спектроскопических изменений в выделенной ДНК, что указывает на то, что гетероциклические основания не окисляются в применяемых условиях [159]. [c.51]

Аркел и др. [146] анализировали мукополисахариды микро-электрофоретическим методом Виеме [147, 148]. Поскольку поступающий в продажу агар загрязнен красителями, по модифицированной [149] методике Араки [150] получают агар, не содержащий сульфата (агарозу). Электрофорез проводят в 0,9 %-ной агарозе с использованием барбитуратного буферного раствора с pH 8,6 при напряженности 20 В/см. Электрофоретическое разделение завершается примерно через 7 мин. После этого тонкослойные пластинки погружают на час в 0,1 %-ный раствор цетавлона, чтобы осадить мукополисахариды. Чтобы условия осаждения были оптимальными, Аркел и сотрудники рекомендуют использовать цетавлон в физиологических солевых растворах. Зоны разделенных соединений обнаруживают, окрашивая пластинки толуидиновым синим. С этой целью 40 мг красителя растворяют в смеси 20 мл дистиллированной воды и 80 мл сухого ацетона. Пластинки выдерживают в этой смеси 15 мин, после чего ополаскивают 1 %-ным раствором уксусной кислоты до обесцвечивания фона. Эти же авторы описали другой метод окрашивания, а также метод окрашивания белков и мукополисахаридов. [c.574]

Объемные методы позволяют получить более точные результаты в более короткое время, однако чаще всего приходится вводить эмпирический фактор, так как молекулярный вес синтетического моющего вещества не всегда известен. Эти методы пригодны для серийных анализов и в общем основаны на образовании гидрофильной группой комплексных соединений с аминами или катионоактивными веществами. Для анализа сульфатов жирных спиртов применяется бензидиновый метод, разработанный Клингом и Пюшелем . Этот метод был впоследствии распространен на анализ продуктов конденсации жирных кислот . Метод метиленовой голубой или цетавлона применялся в различных вариантах - и основан на образовании анионоактивными веществами комплексных соединений с цетилпиридинийбромидом в присутствии различных индикаторов. п-Толуидиновый метод, разработанный Штюпелем и Зегессером , может применяться для анализа всех моющих веществ, исходных продуктов и моющих средств. Так, например, додецилбензолсульфонат реагирует с солянокислым п-толуидином по следующему уравнению [c.576]

При температурах выше 68° фенол и вода смешиваются в любых соотношениях [14 J. При охлаждении гомогенная смесь разделяется на два слоя верхнюю водную фазу, насыш енную фенолом, и нижнюю фенольную, насыщенную водой. Так, при 15° вода содержит 8,2% фенола, а в феноле растворено 37,4% воды. Если грамотрицателъные бактерии обрабатывают гомогенной смесью равных объемов фенола и воды при 65—68° [9], клетки быстрее разрушаются и значительная часть (до 40%) бактериальных веществ переходит в раствор. После охлаждения до 5—10° и центрифугирования получаются три фракции водный слой, фенольный слой и нерастворимый ни в воде, ни в феноле остаток (методика В в работе [9]). Водная фаза после диализа содержит бактериальный липополисахарид (О-антиген, эндотоксин [И, 12[), свободный от белка, и нуклеиновую кислоту. Липополисахарид и нуклеиновую кислоту можно разделить различными способами, например осаждением спиртом [9, 15, 16] (см. также стр. 285), ультрацентрифугированием [15], избирательным осаждением нуклеиновых кислот катионными детергентами, например цетилтриметиламмоний бромидом (цетавлон) [17, 17а], или комбинацией этих способов. [c.327]

Лиофилизированный неочищенный, состоящий из липополисахарида и нуклеиновой к11Слоты экстракт, полученный из водной фазы после экстракции смесью фенол — вода (методика I), растворяют в таком количестве 0,5 М раствора хлористого натрия, чтобы получить 0,5 — 1%-ный раствор. 2%-ный раствор цетавлона в 0,5 М хлористом натрии прибавляют при перемешивании, пока соотношение цетавлона и поочищенного экстракта не станет примерно равным 1,5 1. Затем раствор постепенно разбавляют водой и отделяют осадок центрифугированием по море того, как он образуется. Соль РНК и цетавлона осаждается приблизительно из 0,3 М раствора хлористого натрия. Разбавленный раствор лиофилизуют (стр. 302), полученный остаток растворяют в 0,5 М растворе хлористого натрия и выливают в десятикратный объем спирта. После центрифугирования осадок растворяют в воде, диализуют и лиофилизуют выход не содержащего РНК липополисахарида 30—А0% от неочищенного экстракта. [c.329]

Осаждение цетавлоном по методике III целесообразно применять в тех случаях, когда водная фаза после экстракции смесью фенол — вода содержит, кроме липополисахарида и нуклеиновой кислоты, кислый мукополисахарид [17а], как, например, у некоторых видов Salmonella и Es heri hia. [c.330]

Отделение липополисахарида от нуклеиновых кислот проводят с помощью ультрацентрифугирования первый компонент осаждается в виде геля, а второй остается в супернатанте. Неочищенный лиофили-зованный препарат липополисахарида растворяют в воде, доводя концентрацию до 2%, и раствор центрифугируют 4—6 ч при 105 000 g. Желеобразный осадок повторно суспендируют в воде и центрифугируют 4 ч прн 105 000 g. В результате лиофилизации геля липополисахарид получают в виде сухого порошка. Выход 1,0—2,0%, считая на вес сухих бактериальных клеток. Продукт содержит - 2—3% нуклеиновых кислот, которые далее осаждают катноноидным детергентом, например бромистым цетилтриметиламмонием (цетавлон). Нуклеиновая кислота обладает более сильными кислотными свойствами, чем липополисахарид, хотя он и содержит фосфатные группы, и поэтому нуклеиновая кислота осаждается цетавлоном в первую очередь. Липополисахарид остается в растворе. [c.128]

Осаждение проводят следующим образом. Неочищенный липополисахарид (1 г) растворяют в 100 мл воды и к перемешиваемому раствору прибавляют при 25°С 10—15 мл 2%-ного водного раствора цетавлона. Через 30 мин помутневший раствор центрифугируют при 5000 g в течение 30—40 мин. Осадок, содержащий нуклеиновую кислоту, отбрасывают, а супернатант, который трудно упарить из-за сильного вспенивания, лиофилизуют. В полученном сухом препарате имеется примесь цетавлона, которую можно удалить двумя способами. Первый заключается в том, что препарат растворяют в 25—30 мл 0,5 М раствора хлористого натрия и выливают в 10-кратный объем спирта. В то время как липополисахарид выпадает в осадок, цетавлон остается в растворе. Липополисахарид отделяют центрифугированием и после проведения диализа для удаления хлористого натрия раствор лиофилизуют. Другим способом очистки липополисахарида от цетавлона является осаждение липополисахарида, растворенного в 25—30 мл воды, 10-кратным объемом спирта, подкисленного до pH 4—5 соляной кислотой. Суспензию центрифугируют, осадок тщательно промывают 90%-ным спиртом, растворяют в воде и раствор лиофилизуют. Если лшюполисахарид заметно растворим в спирте, осаждение проводят ацетоном. Очищенный таким образом продукт не содержит нуклеино- [c.128]

Справочник биохимии (1991) -- [ c.235 ]

Синтетические моющие и очищающие средства (1960) -- [ c.510 , c.576 , c.579 ]

Физико-химические свойства органических ядохимикатов и регуляторов роста (1966) -- [ c.0 ]

Электрофорез и ультрацентрифугирование (1981) -- [ c.85 , c.154 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология