Метаболиты определение

В случае растений введение предшественников [5] обычно осуществляется подпиткой всего растения или его отдельных тканей раствором, а в случае микроорганизмов — добавлением раствора к культуральной жидкости во время фазы максимального продуцирования изучаемого метаболита. Предварительно определяют оптимальную эффективность включения это особенно важно при работе с теми стабильными изотопами, природное содержание которых достаточно велико (например, для С оно равно 1,1 %), т. е. когда необходимо добиться минимального разведения вводимой изотопной метки. При использовании меченых предшественников этот фактор не всегда является решающим, поскольку получающийся метаболит обычно достаточно активен, чтобы его можно было затем развести немеченым ( холодным ) соединением и далее подвергнуть последовательному химическому расщеплению с целью определения распределения метки в молекуле. В стандартных методиках количественного определения радиоактивных изотопов применяются чувствительные счетчики типа Гейгера — Мюллера или, чаще, сцинтилляционные счетчики. Эти приборы исполь- [c.346]

Ценность биогенетической информации для выяснения строения природных соединений заключается прежде всего в том, что идентификация в молекуле неизвестного вещества определенных звеньев его простейщих биогенетических предшественников (с помощью меченых соединений) позволяет соотнести данное вещество с той или иной биогенетически родственной ему группой соединений. Затем меченый метаболит подвергают селективному расщеплению до перекрывающихся фрагментов, корреляция специфических активностей которых резко ограничивает число возможных альтернативных комбинаций и может привести к однозначному определению углеродного скелета метаболита. Такой подход к определению строения дает особенно хорошие результаты в случае метаболитов, образовавшихся из нескольких предшественников. [c.369]

НЫ не ТОЛЬКО в период развития, но выполняют эти же функции п в зрелом организме. Биохимический термин трофический фактор недостаточно определен. Только в отдельных случаях трофические факторы были выделены и химически охарактеризованы, в большинстве случаев их существование просто предполагалось из наблюдений или постулировалось. Трофический фактор может быть белком, как в случае NGF (фактор роста нерва), низкомолекулярным соединением (медиатор, метаболит) или ионом ( a +, К "). Ионы выполняют роль трофического фак- [c.324]

Максимумы абсорбции неизмененного аминазина прн А, = 254— 255 нм (макс.) и А, = 300—305 нм (мин). Неизмененный аминазин обычно обнаруживается в желудке и желудочно-кишечном тракте и их содержимом. Основной метаболит — сульфоксид — имеет максимумы абсорбции при длинах волн 238—240, 273 298 и 340 нм. Химико-токсикологическим анализом по описанной методике обнаруживается 53—60% аминазина, добавленного к органам. Граница обнаружения 0,2 мг, граница определения 0,5 мг аминазину в 100 г органов. [c.240]

Катализируемая ферментом реакция начинается со связывания определенного метаболита (субстрата) с ферментным белком. Каждый фермент взаимодействует, как правило, лишь с одним метаболитом-своим субстратом-и катализирует его превращение в другой метаболит до установления равновесия. Таким образом, каждый фермент характери- [c.216]

Использование метаболитов, меченных дало возможность проследить их судьбу в интактных организмах и, следовательно, понять физиологическую роль тех биохимических последовательностей, в которых эти метаболиты участвуют. Однако, как будет видно из последующих рассуждений, интерпретация результатов, полученных при использовании радиоактивных изотопов, сопряжена с определенными трудностями. Во-первых, как мы видели, одно и то же соединение может принимать участие сразу в нескольких метаболических процессах, а во-вторых, благодаря аллостерическим свойствам ферментов метаболиты, участвующие в одном ка-ком-нибудь процессе, могут изменять скорости реакций другого процесса. Помимо активного центра, к которому присоединяется субстрат, Б молекуле фермента может иметься другой участок, способный присоединяться к другому метаболиту, не являющемуся субстратом. Дальнейшим превращениям присоединившийся метаболит подвергаться не будет, однако в результате его присоединения может измениться конфигурация молекулы фермента, что в свою очередь может изменить скорость катализируемой реакции. Это обстоятельство нельзя упускать из виду при изучении распределения радиоактивности после добавления меченого метаболита к сложной ферментной системе. Такие трудности, возникающие при использовании радиоактивных изотопов, рассмотрим на более подробном примере изучения некоторых систем, проведенного Г. Кребсом [29]. [c.21]

Совершенно очевидно, что при изучении метаболических путей с помощью радиоактивной метки необходимо соблюдать определенные условия опыта и учитывать возможные ограничения этого метода. В процессе равновесно и непрерывно действующих метаболических превращений концентрации и количества различных биохимических промежуточных соединений достигают постоянных величин. Пул определенного метаболита достигает постоянного размера, когда между скоростью образования и убыли этого метаболита устанавливается равновесие, т. е. когда в системе устанавливается стационарное состояние. Так осуществляется регуляция метаболических путей у микробов, когда деление клеток протекает с постоянной скоростью при неизменяющейся внешней среде. В этих условиях радиоактивность начнет включаться в первый метаболит, удельная радиоактивность этого метаболита будет повышаться, пока не сравняется с удельной радиоактивностью источника изотопа, вводимого в клетки. Тем временем изотоп начнет включаться в следующий метаболит, и там быстро установится та же удельная радиоактивность, хотя количество включенной радиоактивности, как и в первом случае, будет зависеть от величины пула этого метаболита. Таким образом, определяя радиоактивность, можно выяснить последовательность реакций, но только в том случае, если равновесные концентрации метаболитов остаются постоянными. Ясно также, что в ходе данной последовательности реакций может происходить образование какого-то промежуточного продукта, кинетика образования и распада которого будут таковыми, что его пул будет очень незначительным. Тогда радиоактивность пула может оказаться настолько незначительной, что это соединение будет невозможно идентифицировать на хроматограмме. С другой стороны, не исключено, что меченое соединение, не являющееся членом рассматриваемой последовательности реакций, будет быстро образовываться из какого-нибудь промежуточного соединения. Так, щавелевоуксусная кислота может быть настоящим промежуточным соединением, а при радиоавтографии все-таки будет обнаруживаться аспарагиновая кислота. Этот может произойти в результате быстрого обмена углеродными скелетами между щавелевоуксусной и аспарагиновой кислотами, если пул последней будет значительно выше. Данные о существовании определенного метаболического процесса, полученные с помощью изо- [c.37]

Метаболит служит субстратом для определенного специфи-, ческого белка, который обычно является ферментом. В ферментативных реакциях обмена веществ антиметаболит, сходный по структуре с соответствующим метаболитом, соединяется с активным центром этого белка. Однако, отличаясь несколько от метаболита, он не подвергается обычным химическим изменениям и не образует нормальных продуктов реакции. Обычная реакция либо тормозится, либо останавливается совсем, что приводит к недостатку специфических метаболитов. [c.206]

Метаболит дильдрина. Микрокулонометрический газовый хроматограф был использован для определения продукта метаболизма дильдрина в моче людей, по роду работы подверженных действию этого пестицида Продукт метаболизма не был идентифицирован он, по-видимому, должен представлять собой нейтральное, сильно полярное хлорсодержащее соединение. [c.58]

Биосинтез белка — процесс, который поддается регулированию. Принципы такой регуляции впервые были сформулированы в работах Жакоба и Моно Рассматривая хорошо изученные явления репрессии и индукции синтеза ферментов, они пришли к выводу, что эффект индукции, т. е. ускорение синтеза, вызывается специфическим химическим соединением, чаще всего субстратом или аналогом субстрата, а эффект репрессии, т. е. подавление синтеза фермента, — продуктом реакции, катализируемой этим ферментом или аналогом этого продукта. Один и тот же метаболит или субстрат могут вызвать или затормозить синтез сразу нескольких белков. В таком случае всегда оказывается, что белки-фермеиты действуют в метаболической цепи последовательно. Отмечено, что действие подобных факторов не зависит от структуры синтезируемых белков. Зато некоторые мутации, затрагивающие одиночный нуклеотид ДНК, полностью выключают способность клетки к репрессии синтеза определенных ферментов. С учетом этих данных Жакоб и Моно предложили схему регуляции биосинтеза белка (рис. 68). Согласно этой схеме, субстрат и продукт реакции, накапливаясь в клетке, действуют на особое вещество — репрессор в двух противоположных направлениях субстрат, соединяясь [c.490]

Биосинтез белков является объектом генетического контроля. В бактериях, во всяком случае, он проявляется на уровне синтеза информационной РНК посредством взаимодействия особого ( регуляторного ) белка со специфическим участком ДНК (см. часть 22 и разд. 24.2.3). В тканях животных на механизмы, контролирующие уровень ферментов, влияют также ингибиторы синтеза РНК [149]. Детали этих механизмов контроля не важны в контексте данного раздела. Важным моментом является факт, что существуют механизмы регуляции концентрации ферментов на определенном метаболитическом пути посредством конечного продукта этого пути. Так, в бактериальных системах хорошо изучены индуцируемые ферменты. Пока субстраты этих ферментов присутствуют в среде, биосинтеза ферментов не происходит. Часто синтез нескольких ферментов какого-либо одного метаболи-тического пути индуцируется присутствием субстрата первого фермента этого пути. Индукция субстратом, таким образом, представляет собой механизм повышения концентрации системы ферментов по мере появления рабочей необходимости . Соответствующий механизм, понижающий избыточную концентрацию фермента, если последний или система ферментов производит слишком большие количества определенного метаболита, получил название репрессии по принципу обратной связи. Классическим примером этого механизма является ингибирование биосинтеза гистидина в Salmonella typhimurium высокими концентрациями гистидина. Концентрации всех десяти ферментов биосинтетической цепи в ответ на изменение концентрации гистидина изменяются совершенно одинаково [150]. [c.535]

Для направленного изменения прокариот, синтезирующих определенные метаболиты, в принципе есть два пути. Во-первых, можно изменить активность или содержание одного или нескольких ферментов того или иного биосинтетического пути с тем, чтобы увеличить продукцию нужного метаболита. Во-вторых, в прокариотический геном можно ввести чужеродные гены, кодирующие ферменты, которые, используя эндогенный метаболит в качестве субстрата, обеспечат синтез метаболита, изнaчaJ Iьнo не продуцируемого хозяйской клеткой. Такого рода манипуляции представляются достаточно простыми, однако далеко не всегда [c.265]

Изучение метаболизма [236] гипотензивного ЛП — дебри-социнсульфата показало, что основным метаболитом является его 4 гидроксипроизводное Это соединение также обладает определенной активностью поэтому было необходимо совместно определять в плазме крови как ЛП, так и его метаболит Ана лиз проводили с помощью метода [237], основанного на экст ракции с последующим получением производных гексафтор ацетилацетона и исследованием этих производных с помощью ГХ—МС метода с ЭУ ионизацией в режиме МИД Ионы с мае сами 344, 347 и 356 детектировали четырехканальным автомати ческим селектором пиков (ширина каналов 0,5 а е м, время измерения 10 мс/канал) [c.184]

Использование в качестве внутреннего стандарта с ю дебрисокинсульфата позволило получить линейные калибровочные кривые Нижний предел количественного определения оказался равным для дебрисокина 1 нг/мл плазмы и его метаболи та — 5 нг/мл Возможно снижение уровня обнаружения, однако при этом точность определения меньше [c.184]

Необходимость количественного определения этилена (С2Н4) возникает у биологов при проведении многих исследований, особенно в связи с тем, что этилен известен как высокоактивный метаболит растений [1—6], эндогенный активатор созревания плодов [2, 4—7] и экзогенный стимулятор данного процесса [2, 4—7], ярко выраженный антагонист биогенных ауксинов и синтетических ростовых веществ [4, 7—10], природный регулятор образования отделительного слоя [4, 7—10] и высокоэффективный дефолиант [4, 6, И—12]. [c.74]

С помощью газовой хроматографии оказывается возможным сравнительно быстро определить количество и,и -ДДЭ (продукта обмена и,ге -ДДТ) в сыворотке крови животных и человека [156, 207, 208]. Для этого сыворотку центрифугируют 10 мин. при 2000 об мин. 1—3 мл надосадочной жидкости смешивают с 2 мл хексана, и метаболит экстрагируют в течение 4 мин. 1,6 мл гексанового экстракта концентрируют на водяной бане при 40° и соответствующий аликвот вводят в испаритель газового хроматографа с детектором по захвату электронов. Определение п,п -]ХЦЭ проводят с ЭЗД ( Н, 130 мкюри, 200°) на колонке 182 сж X 6 мм, заполненной анакромом ABS (80—90 жеш) с 6% 0F-1 и 4% SE-30 или хромосорбом Р с 3% стабилизированного ДЭГС. Число теоретических тарелок по ге,ге -ДДЭ состав.пяло 2500. Температура колонки — 190°, расход азота — 60 мл1мин. [c.118]

Эта сложная схема образования L-лизина расшифрована при использовании различных мутантов, дефицитных по определенным ферментам в цепи превращения аспарагиновой кислоты до L-лизина. Аспарагиновая кислота под действием фермента р-аспартаткиназы превращается в р-фосфоаспартат, а далее в аспартат-З-полу-альдегид. Этот промежуточный метаболит очень важен, так как из него могут синтезироваться пять аминокислот лизин, гомосерин, метионин, треонин и изолейцин. [c.371]

Первый фермент определенной феригентной системы, способный ингибироваться, называется регуляторным, или аллостерическим, ингибирующий метаболит — вффектором, или модулятором. Ингибирующий эффектор называют отрицательным эффектором, или отрицательным модулятором. Регуляторный фермент может находиться в точке разветвления мультиферментных систем. Простейшим типом регуляторной ферментной системы является мультиферментная система, катализирующая превращение 1-треонина в Ьизолейцин. [c.126]

Установлено, что между кишечником, печенью, почками и костной тканью существуют определенные взаимоотношения, способствующие нормальному отложению фо( рно-кальциевых солей в костной ткани. Из кишечника витамин Од поступает в печень н при участии специфических ферментов-гидроксилаз превращается в метаболит 25-ОНДз, переносящийся током крови в почки. Здесь происходит его дальнейшее превращение в метаболит 1,25-ОНД , который способствует усиленной реабсорбции фсюфатов. В почечных канальцах образуется фосфорно-кальциевая соль, которая током крови приносится в костную ткань, где используется для ее минерализации. [c.152]

Примечание. Оксисоединения IV, V и VI в моче частично связаны в виде глюкуро-нидов или эфиров серной кислоты. Знак + > означает, что данный метаболит обнаружен качественно, но количественно не определен. [c.241]

В 1954 г. Касида и др. [21 ] на основании исследования коэффициентов распределения и антихолинэстеразной активности пришли к выводу, что метаболит, образующийся в шпинате, идентичен тому, который возникает в срезах печени крыс. В 1955 г. Хит и др. [63] с помощью определения коэффициентов распределения и способности к гидролизу показали, что в клевере, в срезах печени и при окислении перекисью водорода образуется один и тот же продукт. На основании этих результатов, а также данных, приведенных на стр. 85—88, можно заключить, что растения окисляют шрадан до оксиметилшрадана [c.341]

При определении ДДТ в жировой ткани нужно учитывать, что последняя может содержать некоторое количество этого вещества, попадающего в организм с пищей. Одновременно с ДДТ в жнровой ткани накапливается его метаболит — ДДЕ. Так, у жителей США обнаружено в жире 0,4 мг% ДДТ и 0,78 мг% ДДЕ. Содержание ДДТ в жировой ткани населения Канады, Англии, Франции, ГДР несколько ниже (Wassermann и др., 1965 Quiby и др., 1965). [c.131]

Метаболит 2,4-дннптрофенола — 2-амино-4-нитрофенол определению не мешает. [c.260]

Диагностическое значение определения п-аминофенола в моче. Определение п-аминофенола в моче людей является общепринятым тестом для суждения о наличии воздействия анилина, хотя проба эта и неспецифична, так как, кроме анилина и из других амино- и нитросоединений, в процессе биотрансформаций образуется этот метаболит. В качестве экспозиционной пробы (указывающей на степень абсорбции анилина) рекомендовано принимать концентрацию п-аминофенола в моче, равную 10 мг/л. Piotrowski (1961) считает, что такое выделение п-ами-нофенола в моче происходит при вдыхании анилина в концентрации 0,005 мг/л. Однако практически по содержанию п-аминофенола в моче трудно судить о его концентрации в воздухе, так как анилин проникает в организм и через кожу. [c.271]

Биосинтез хлорамфепикола являлся предметом многочисленных экспериментальных и теоретических исследований, и они привели к осуществлению крупномасштабного производства антибиотика уже в тот период, когда еще не существовало эффективных химических методов синтеза. Поскольку 7 является продуктом микробиологического превращения, то, изменяя условия выращивания культуры и отбирая мутанты, можно максимально увеличить выход желаемого метаболита. Одно из важнейших условий выращивания культуры (которое можпо легко варьировать) — присутствие специфических субстратов, способных выступать в роли достаточно эффективных предшественников метаболита. Это условие положено в основу методики исследования путей биосинтеза, ибо меченые предшественники можно использовать для измерения суммарных скоростей включения метки и для определения происхождения отдельных атомов в конечном метаболите. [c.164]

Хотя ученые зналн об этих довольно простых фактах очень давно, они не предполагали, что влияние этилена на клетки растения н противоположное ему влияние двуокиси углерода — это компоненты нормальной физиологической регуляции в растении. Считалось, что этилен образуется в (результате заражения растения определенным патогеном или, возможно, вследствие физиологического разрушения растительных клеток, обусловленного их повреждением, неблагоприятной температурой хранения или просто старением. Однако недавние эксперименты показали, что этилен представляет собой вы рабатываемый здоровыми клетками растений обычный метаболит, осуществляющий нормальный регуляторный контроль таких морфогенетических явлений, ак созревание плодов и опадение листьев. [Гак как этилен образуется в незначительных количествах и может проявлять активность и в тех клетках, в которых он не производится, его по праву можно рассматривать как растительный гормон. [c.304]

Смотреть страницы где упоминается термин Метаболиты определение: [c.129] [c.203] [c.44] [c.642] [c.656] [c.55] [c.190] [c.441] [c.341] [c.549] [c.475] [c.394] [c.217] [c.164] [c.15] [c.164] [c.433] [c.497] [c.102] [c.115] [c.116] [c.121] [c.294] [c.502] [c.242]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология