Олигосахариды модификация

Для повышения выхода олигосахаридов при частичном кислотном гидролизе предложено несколько специальных приемов, назначение которых — защитить образовавшиеся низкомолекулярные фрагменты от последующего расщепления. К ним относится гидролиз с одновременным диализом , при котором отщепившиеся олигосахариды удаляются из зоны реакции в качестве гидролизующего агента используется растворимая в воде, но не способная диализоваться полистиролсульфокислота. Применяется также гидролиз в виде нескольких последовательных обработок полисахарида кислотой, после каждой из которых проводится отделение низкомолекулярных фрагментов хроматографией на сефадексе . Наконец, предложена предварительная химическая модификация полисахаридов — получение диэтиламиноэтиловых эфиров той или иной степени замещения с последующим гидролизом полистиролсульфокислотой небольшой концентрации . Необходимость в диализе для защиты олигосахаридов от расщепления при этом очень интересном методе гидролиза отпадает мицеллы полианиона — полистиролсульфокислоты, находящиеся в растворе, создают на своей поверхности высокую концентрацию противоионов — ионов водорода там же адсорбированы и молекулы по- [c.506]

Для введения остатков 2-амино-2-дезоксигексоз применяют метод Кенигса — Кнорра и его модификации. Кроме того, соответствующие олигосахариды синтезируют и через оксазолиновые производные, например [c.469]

Для установления структуры полисахаридов ГМЦ применяются в комплексе химические, биохимические, хроматографические и спектроскопические методы. Исторически первыми среди них получили развитие химические методы деструкции (кислотный гидролиз, окисление моносахаридов с расщеплением гликольных группировок) или модификации полисахаридов с последующей деградацией (метилирование). Для определения продуктов деградации широко используются хроматографические методы (бумажная, тонкослойная, газожидкостная хроматография) большую роль в последние годы играет масс-спектроскопия, которая применяется не только для идентификации производных, полученных при анализе полисахаридов методом метилирования, но и для анализа олигосахаридов непосредственно после нх перевода в летучие производные. И, наконец, в арсенал современных методов прочно вошла спектроскопия С-ЯМР — недеструктивный метод анализа структуры, позволяющий решить задачу установления строения полисахарида с минимальным использованием традиционных химических методов либо без них. Рассмотрим кратко характеристику этих методов. [c.58]

Частичная устойчивость О-белка, у которого трансмембранный сегмент состоит из 12 аминокислот, к ферменту эндо-Н.свидетельствует о том, что некоторая фракция такого С-белка доходит до промежуточного компартмента аппарата Гольджи, где происходит модификация углеводов в составе белка, в результате которой олигосахарид становится устойчивым к ферменту эндо-Н. Остальные молекулы этого белка находятся в мембране ЭР либо в г/мс-компартменте аппарата Гольджи. Чувствительность к эндо-Н С-белка с сегментом из 8 аминокислотных остатков или без этого сегмента показывает, что такие белки не могут пройти через г/мс-компартмент аппарата Гольджи или вообще не могут выйти из ЭР. [c.378]

Олигосахариды могут быть получены из моносахаридов путем создания гликозидной связи или модификацией олигосахаридов. [c.50]

Методы химической модификации олигосахаридов [c.55]

Очень удобной модификацией периодатного окисления является метод Смита. Он заключается в восстановлении окисленного олиго- или полисахарида натрийборгидридом и гидролизе полученного полиола , В зависимости от типа связи (1—у2, 1—>-3, 1—у4 или 1—->6) получаются различные продукты распада. При этом гликозидные связи окисленных остатков становятся более лабильными (как ацетальные) -Это делает возможным ступенчатую деградацию исследуемого олигосахарида. I [c.83]

Как отмечалось выше, в ЭР к белкам присоединяется К-связанный олигосахарид. Этот олигосахарид претерпевает модификации уже в ЭР (см. разд. 8.6.12). Дальнейшие изменения происходят с ним в аппарате Гольджи. [c.59]

Все эти модификации происходят по мере того, как белки движутся от мембраны ЭР через аппарат Гольджи к плазматической мембране клетки [33, 67, 89]. Олигосахаридные модификации происходят в ЭР и аппарате Гольджи. Ацилирование жирными кислотами идет, вероятнее всего, в ЭР, а протеолитическое превращение р62 в Е2 и ЕЗ — в пузырьках Гольджи [6] и, возможно, также в плазматической мембране. Модификации катализируются клеточными ферментами аналогичные посттрансляционные изменения претерпевают невирусные клеточные гликопротеины и секретируемые белки. Как указывалось выше, олигосахариды влияют на конформацию белка. Не исключено, что ацилирование жирными кислотами повышает стабильность белка в мембране и существенно влияет на образование участков взаимодействия между гликопротеинами и нуклеокапсидом или на расположение соответствующих липидов вокруг этих белков [73]. Протеолитическое превраще- [c.356]

Целлюлоза Хч>, которая еще недостаточно изучена, получается при набухании целлюлозы в сильных кислотах, например, сверхконцеитрироваяной соляной (массовая доля НС1 41...42%). Элементарная ячейка этой модификации целлюлозы по параметрам совпадает с ячейкой целлюлозы IV, но цепи целлюлозы Х сдвинуты по отношению друг к другу. Целлюлоза А" - неустойчивая модификация, быстро переходящая в целлюлозу II. Возможно, что целлюлоза <сА" деструктирована и фактически представляет собой переходную ступень между природной целлюлозой и олигосахаридами - продуктами неполного гидролиза. [c.252]

Реверсия. При действии кислот на концентрированные растворы моносахаридов происходит образование смеси олигосахаридов (так называемая кислотная реверсия). Эта реакция, аналогичная синтезу гликозидов по Фишеру (см. стр. 213), приводит к сложной смеси всевозможных изомерных олигосахаридов . Выходы смеси олигосахаридов и тем более определенных изомеров низки. Поэтому синтез олигосахаридов таким путем почти не находит препаративного применения. Единственной препаративной методикой, основанной на реверсии, является одновременный синтез генциобиозы и изомальтозы из глюкозы , протекающий с весьма умеренным выходом и включающий сложную выделительную процедуру. В то же время специальные модификации кислотной реверсии используются при синтезе полисахаридов (см. стр. 555). [c.472]

Повсеместно распространенный углевод глюкоза, как уже отмечалось, может являться косвенным источником всех первичных и, следовательно, всех вторичных метаболитов. Глюкоза служит и прямым предшественником различных веществ, например многочисленных глюкозидов, а после некоторых модификаций и необычных гликозидов, которые часто встречаются в антибиотиках, продуцируемых стрептомицетами, например в эритромицине (40) [48[ (см. схему 15 поликетиды на основе пропионата). Установлено, что глюкоза выполняет функции прямого предшественника метаболита Aspergillus spp., койевой кислоты (30), образующейся, очевидно, без разрыва углерод-углеродных связей глюкозы. Глюкоза может также непосредственно использоваться в биосинтезе некоторых олигосахаридов, например антибиотиков стрептомицина (31) [48] и неомицина [35] в этих случаях для ее превращения в остаток стрептозы с разветвленной цепью необходима перегруппировка первоначального углеродного скелета. [c.358]

Эта модификация достаточно удобна, однако ее использованиг огра- ничивается доступностью тритиловых эфиров исхо.дных спиртов. Основная Область применения модификации Бредерека — синтез олигосахаридов с [c.218]

Все известные модификации метода Кенигса — Кнорра были использованы для синтеза олигосахаридов, причем некоторые из них были применены главным образом именно в этой области. Закономерности влияния структуры гликозилируемого производного на выходы олигосахаридов неясны, поскольку систематические исследования не проводились, а многочисленные синтезы выполнены в весьма различных условиях, что практически исключает возможность сопоставления экспериментальных данных. Тем не менее некоторые обобщения могут быть сделаны. [c.464]

С наибольшими трудностями таким путем получают производные трисахаридов и других более сложных олигосахаридов. Так, при конденсации ацетобромгенциобиозы с тетраацетатом глюкозы, содержащим экваториальный гидроксил, в наиболее совершенном варианте классической модификации реакции Кенигса — Кнорра выход производного трисахарида составил всего 2,2% [c.466]

Основным способом установления строения полисахаридов служит расщепление полимерной молекулы на фрагменты, установление строения этих фрагментов и последующее воссоздание структуры исходного соединения. При исследовании полисахаридов обычно применяют расщепление нескольких типов во-первых, полный гидролиз всех гликозидных связей, позволяющий определить, из каких моносахаридов состоит данный полимер во-вторых, частичное расщепление, дающее низшие олигосахариды, строение которых соответствует отдельным участкам полимерной молекулы. Весьма употребительным приемом является предварительная модификация полисахаридной молекулы. Она производится либо с целью зафиксировать свободные гидроксильные группы, как в методе метилирования, либо чтобы упростить на первых этапах изучения слишком сложную полисахаридную молекулу. Примерами использования предварительной модификации может служить дезацетилирование частично ацетилированных или десульфирование сульфированных полисахаридов, превращение полиуронидов в нейтральные полисахариды с помощью восстановления карбоксильных групп уроновых кислот, получение так называемых деградированных полисахаридов путем частичной деструкции (гидролизом или периодатным окислением), удаляющей главным образом концевые моносахариды, и т. д. И только для установления молекулярного веса и макромолекулярной структуры полисахаридов с помощью физико-химических методов исследования нет необходимости прибегать к расщеплению полимерной молекулы. [c.492]

Заслуживают особого упоминания хорошо известные модификации кислотного расщепления полисахаридов — ацетолиз и метанолиз, имеющие в ряде случаев существенные преимущества перед обычным гидролизом. Ацетолиз заключается в обработке полисахаридов смесью серной и уксусной кислот в уксусном ангидриде и приводит к ацетилированным фрагментам. Характерной чертой ацетолиза является повышенный выход олигосахаридов интересно отметить, что ацетолиз часто позволяет получать дисахариды с сохранением гликозидных связей 6-дезоксигексоз , в то время как при гидролизе эти связи разрушаются, как правило, раньше, чем соответствующие гликозидные связи обычных гексопираноз. Причины, вызывающие различную устойчивость гликозидных связей при ацетолизе и гидролизе, неизвестны, тем не менее ацетолиз весьма широко используется для частичного расщепления полисахаридов (см., например, [c.509]

Определение мест присоединения моносахаридных остатков друг к другу осуществляется исчерпывающим метилированием олигосахарида с последующим гидролизом и анализом образующихся продуктов. Метилирование а большинстве случаев проводится по методу С.-И. Хакомори (см. с, 468), при этом наряду с гидроксильными группами модификации подвергается также ацетамидная группа N-ацетилгексоэа-минов. Полнота реакции контролируется ИК-спектроскопией по отсутствию полосы поглощения гидроксильных групп. [c.463]

Метод метилирования. Основы метода и его различные модификации вкратце уже рассматривались в разделе Олигосахариды . Метилирование полисахаридов осуществляется гораздо труднее, чем оли- госахаридов. Это связано, по-видимому, во-первых, с меньшей доступностью гидроксилов, особенно в случае ветвистых полисахаридов, [c.67]

Синтез олигосахаридов новых типов возможен на основе доступных природных или синтетических олигосахаридов путем модификации восстанавливающего остатка моносахарида (эпимеризаадия, удлинение или укорочение углеродной цепи и другие превращения) или аноме-рнзацией гликозидной связи. Наиболее типичными являются следующие превращения олигосахаридов. [c.55]

Гидроксилирование остатков лизина играет решающую роль во второй посттрансляционной модификации проколлагена. Подобно большинству секретируемых белков, молекулы проколлагена гликозилируются в клетках, перед тем как путем экзоцитоза перейти во внеклеточное пространство. Однако гликозилирование проколлагена необычно в том отношении, что присоединяются короткие (всего два сахарных остатка) олигосахариды, не содержащие сиаловой кислоты, и что они ковалентно связываются с гидроксильной группой гидроксилизина (рис. 12-43). В коллагенах разного типа доля углеводной части весьма различна (табл. 12-2), и ее функция неясна. Дальше [c.224]

При другом посттрансляционном процессе изменяются сами аминокислоты. Несколько таких примеров показано на рис. 2.6. В ряде случаев функциональное и структурное значение этих процессов неизвестно. Однако такое изменение, как образование заряженной группы у серина в результате его фосфорилирования, может существенно повлиять на локальную структуру белка. Некоторые из этих модификаций представляют только первый этап в более сложных перестройках белковой молекулы. Например, многие белки содержат ковалентно связанные углеводные остатки, начиная от одной-двух молекул сахара, локализованных в одном месте, и кончая множеством крупных олигосахаридных включений. Некоторые из известных способов присоединения углеводов изображены на рис. 2.6. Наиболее предпочтительными местами таких присоединений являются оксиами-нокислоты. Структурные последствия присоединения углеводов и формирования таким образом гликопротеидов еще недостаточно ясны. Олигосахариды чрезвычайно гидрофильны, что может оказывать известное влияние на свойства комплекса. Многие мембранные белки содержат значительное количество связанных сахаров. Быть может, углеводы, имеющие сильное сродство к водной фазе, обеспечивают вытягивание углеводсодержащей части белка из липидного бислоя. [c.60]

Ig являются гликопротеинами, поэтому одной из постгрансляционных модификаций, которым подвергаются Н-цепи Ig, является синтез олигосахарида в С-области молекулы. [c.86]

B. Какие из мутантов вероятнее всего дефектны по ферменту процессинга, непосредственно отвечающему за модификацию N-связанных олигосахаридов Какие мутанты могут быть дефектными не по ферменту процессинга, а скорее по другому ферменту, затрагивающему процессиш олигосахаридов лишь косвенно [c.119]

Сборка оболочки вириона начинается с включения вирусного гликопротеина в плазматическую мембрану клетки. Гликопротеин VSV-Индиана претерпевает сложный путь созревания, включающий протеолитическое нарезание, присоединение и процессинг олигосахаридов, присоединение жирных кислот [51]. Эти модификации осуществляются одна за другой в ходе синтеза и последующего транспорта G-белка к поверхности клетки. Изучение кинетики этого процесса показало, что для достижения клеточной мембраны новосинтезированному G-белку требуется по меньшей мере 15 мин. В отличие от четырех других вирусных белков G-белок всегда связан с мембраной, а его мРНК обнаруживается в рибосомах, связанных с мембранами. N-конец G-белка содержит гидрофобную сигнальную последовательность, которая взаимодействует с мембраной эндоплазматического ретикулума (ЭР). Очевидно, именно эта область новосинтезированного полипептида инициирует связывание рибо- [c.436]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология