Гепарин получение

Кровь из локтевой вены в количестве 5 —10 мл переносят в пробирку с гепарином (из расчета 10 МЕ на 1 мл крови), для серологического исследования гепарин не добавляют. Первую сыворотку получают на 1 —3-й день болезни, вторую — спустя 2 — 3 нед после ее начала. Материал, полученный для вирусологического исследования, необходимо использовать в тот же день. Для кратковременного хранения материала (1—2 дня) достаточно +4 °С, а для длительного — необходимо замораживание при -80— 180°С (кусочки органов можно хранить в 50%-м глицерине при +4 °С). Допускается только однократное замораживание и оттаивание инфекционного материала. [c.291]

Полученные в последние годы некоторыми авторами кристаллические соли гепарина не содержали ацетильных групп, быть может отщепляющихся при обработке. [c.636]

Исходным сырьем для промышленного получения гепарина являются печень и легкие. Изолирование его представляет сложную, многостадийную процедуру (описанную в ря е патентов). В лабораторных условиях для очистки гепарина применяются фракционирование с использованием хлористого цетилпиридиния и колоночная хроматография на ионообменных смолах. [c.168]

Для приготовления меченых фосфолипидов собакам вводили внутривенно неорганический фосфат, меченный Через 26 час изолировали плазму крови, ингибируя ее от свертывания гепарином. Плазму, содержащую меченые фосфолипиды, вводили другим собакам. После этого в течение 5 час в различные моменты времени отбирали образцы крови. Плазму отделяли экстракцией смесью спирт — эфир, а фосфолипиды растворяли в петролейном эфире. Концентрацию этого раствора определяли фотометрически, а его удельную активность с помощью счетчика Гейгера — Мюл лера. Было показано, что начиная с 10-й минуты общая активность фосфо-липидной фракции одинакова с активностью осадка, полученного с три- [c.225]

Известно, что полианионные вещества образуют нерастворимые вводе соли с катионными детергентами, такими, как цетилтриметиламмоний бромид (цетавлон). Однако эти соли растворяются в растворах неорганических солей, например хлористого натрия, причем растворимость зависит от ионной силы (и pH) среды (см. обзор [35]). Используя осаждения цетавлоном, Джонс [36] очистил бактериальную нуклеиновую кислоту, а Скотт [37 ] фракционировал неочищенные препараты гепарина и других кислых полисахаридов (стр. 288). На основании этих результатов было найдено [17], что смесь бактериальных липополисахаридов и нуклеиновых кислот, полученную при экстракции смесью фенол — вода (методика I), можно разделить, так как нуклеиновые кислоты обладают более сильными кислотными свойствами по сравнению с липополисахаридами, которые имеют слабые анионные свойства, поскольку содержат небольшое количество фосфатных эфирных групп (см. [11, 12, 28]). [c.328]

Получение дерматансульфата в больших масштабах производится 113 легочной ткани крупного рогатого скота, причем исходным сырьем служат остаточные растворы, получаемые при промышленном производстве гепарина. Дерматансульфат получают через стадию фракционного осаждения бариевых и цинковых солей [4] и очищают фракционированием медных солей [7]. В меньшем масштабе дерматансульфат получают из кожи свиньи [3]. Обе методики приведены ниже. [c.350]

К раствору, оставшемуся после осаждения неочищенного гепарина, получаемого экстракцией из легочной ткани рогатого скота, прибавляют избыток 95%-ного этанола. Полученный осадок (1 пг) растворяют в 11 л 10 %-ного раствора хлористого цинка и к раствору прибавляют 9 л метанола. После центрифугирования осадок дважды промывают 5 %-ным раствором хлористого цинка в 45 %-ном метаноле, чистым метанолом и затем эфиром. Выход продукта 100 г, [а] —25° (в воде). [c.350]

После растворения продукта в 6,2 л 10%-ного раствора хлористого цинка к полученному раствору при энергичном перемешивании прибавляют 5 л метанола. Осадок отделяют центрифугированием и промывают 5%-ным раствором хлористого цинка в 45%-ном метаноле, пока при прибавлении к надосадочному раствору равного объема метанола перестанет выпадать осадок гепарина. Осадок затем промывают 95%-ным этанолом и эфиром. Выход 25 г, [а] ) —51° (в воде). [c.350]

Раствор 3 г полученного аморфного гепарина в 120 мл воды и 40 мл 5%-ного раствора ацетата бария оставляют стоять на несколько дней при 15—20°. Раствор центрифугируют, надосадочный раствор фильтруют через плотную фильтровальную бумагу и затем нагревают до 65°. К теплому раствору прибавляют 30 мл ледяной уксусной кислоты и раствор оставляют медленно охлаждаться при комнатной температуре. Кристаллический осадок отделяют центрифугированием и промывают последовательно 80%-иой уксусной кислотой, ледяной уксусной кислотой, 95%-ным спиртом и, наконец, эфиром. Выход гепарина 1,9—2,1 г с активностью 119 международных единиц на 1 мг [15], [а]в + 44° (в воде). [c.366]

Кровяная плазма, полученная по описанной выше методике, представляет собой жидкость, слегка окрашенную каротиноидамн, и содержит следующие белки альбумины (растворимы в 5%-ном солевом растворе), липопротеины, фибриноген и протромбин. Из цельной крови без защитных добавок при стоянии через несколько минут выделяются хлопья в результате превращения растворимого глобулярного фибриногена в н< растворимый нитевидный белок—фибрин, нити которого образуют ячеистую структуру сгустков. Это превращение происходит под влиянием протромбина и ионов кальция. Центрифугирование свернувшейся крови приводит к отделению смеси фибрина и красных кровяных тел. Надосадочная жидкость представляет собой кровяную сыворотку, которая отличается от плазмы тем, что не содержит фибриногена. Витамин К является антигеморрагическим агентом, так как он снижает концентрацию протромбина. Цитрат и гепарин предупреждают свертыванис крови, связывая ионы кальция. [c.670]

Глюкозу, аскорбиновую к-ту, углеводсодержащие антибиотики, гепарин широко применяют в медицине. Целлюлоза служит основой для получения вискозного волокна, бумаги, нек-рых пластмасс, ВВ и др. Сахарозу и растит, полисахариды рассматривают как перспективное возобновляемое сырье, способное в будущем заменеть нефть в пром. орг. синтезе. Моносахариды используют в качестве доступных хиральных исходных соед. для синтеза сложных прир. в-в неуглеводной природы. [c.24]

М-сульфат хитозана используется для получения препаратов коагулирующего действия, практически не уступающих гепарину. Использование производных хитина в качестве гемостатических препаратов связано с тем, что хитин образует коагулюм, предотвращающий кровотечение без образования кровяного сгустка. В целях быстрого кровоостановления и противотромботического ускоряющего заживления ран вещества применяют хитин, мономер хитина, хитозан и другие производные. Лекарственная форма препарата может быть различной присьшки, гели, мази, губки, повязки, аэрозоли. [c.392]

Сложные эфиры крахмала применяют в пищевой промышленности [224,225]. Для получения сложных эфиров полисахаридов, применяемых в качестве носителей для хроматографического разделения, используют ангидриды и хлорангидриды алифатических и ароматических карбоновых кислот [234—236]. Обработкой некоторых полисахаридов тетраполифосфорной кислотой [237] получают соответствующие фосфаты. Фосфоэфирные группировки можно использовать для сшивки полисахаридов так, крахмалы с фосфатными сшивками используют в пищевой промышленности. Получены сульфаты [238] многих полисахаридов некоторые из них, подобно гепарину, обладают антикоагулянтным и противовоспалительным действием (см. разд. 26.3.5.3). Получение эфиров сульфокислот, в частности эфиров п-толуолсульфокислоты, и их производных используют для защиты гидроксигрупп гликозидные связи таких эфиров обладают повышенной устойчивостью к действию кислот. [c.274]

Хондроитинсульфат В XI, называемый также дерматансульфатом и Р-гепарином, отличается от хондроитинсульфатов А и С моносахаридным составом вместо D-глюкуроновой кислоты он содержит ее эпимер по j — L-идуроновую кислоту в остальном строение хондроитинсульфата В сходно с хондроитинсульфатом А IX, что доказано получением из этих двух полисахаридов одной и той же 4,5-ненасыщенной альдобиоуроновой. кислоты XII при ферментативном расщеплении " [c.543]

Гепарин Гепарин находится во многих тканях организма, но в наибольшем количестве содержится в печени (отсюда его название), легких, кышцах. Этот полисахарид обладает высокой специфической биологической активностью, являясь антикоагулянтом крови. В настоящее время разработан ряд методов получения гепарина (см., налример, ). Его окончательная очистка достигается обычно фракционированием цетавлоновых солей или с помощью ионообменной хроматографии Невысокий молекулярный вес гепарина (около 20 ООО) позволяет получать ряд его солей (например, бариевую ) в кристаллическом состоянии. [c.544]

Несмотря на большое количество работ, посвященных выяснению структуры гепарина , основные сведения о его строении получены лишь в недавнее время, а ряд деталей строения еще предстоит выяснить. Успехи в изучении гепарина ХИ1 связаны в основном с получением модифицированного полисахарида XIV, не содержащего сульфатных групп, в котором аминогруппы ацетилированы, а карбоксильные группы восстановлены до первичноспиртовых - Только к такому модифицированному полисахариду оказалось возможным применить обычные в химии полисахаридов методы установления строения — метилирование и частичный гидролиз [c.544]

Наиболее хорошо изучены протеогликаны соединительной ткани гепарины, хондроитинсульфаты, дерматансульфат, кератвнсульфат. Эти соединения встречаютсй прежде всего в межклеточном пространстве соединительной ткани, однако нх обнаруживают н внутри клеток. Так, гепарин находится во внутриклеточных гранулах тучных клеток, при получении клеткой определенного сигнала содержимое гранул выбрасывается в межклеточное пространство. Углеводная составляющая протеогликанов соединительной ткани представляет собой гликозаминогликаи, построенный из повторяющихся блоков, чаще всего дисахаридных, в состав которых входят остатки уроновых кислот и аминосахаров (табл. 21). [c.510]

С помощью подобных селективных сорбентов возможно, например, успешное удаление фенола из крови применением высокосовместимого с кровью анионита АН-221, синтезированного на основе тромбогенного макропористого сополимера стирола с дивинилбензо-лом. При этом слабоосновные этилендиаминовые группы, обладая высокой гидратируемостью, повышают гидрофильность полимерной матрицы. Это в свою очередь позволяет избежать денатурации белковых факторов свертывания и адгезии тромбоцитов — явления, характерного для развитой полимерной поверхности. Практически важным является отсутствие влияния гемоперфузии на уровень свободного гепарина в крови животных, что позволяет свести к минимуму количество вводимого антикоагулянта. Необходимо отметить, что гемосорб А-12, полученный на базе слабоосновного анионита АН-221, не дает отрицательных физиологических реакций. [c.564]

Методика. Кровь из вены в количестве 3 — 5 мл переносят в пробирку с 1 мл гепарина, предварительно разведенного 1 100 средой Игла без антибиотиков. В пробирку добавляют 10%-й раствор желатина в количестве, равном / о объема взятой крови (0,3 —0,5 мл) и инкубируют 20 — 40 мин при 37 °С. Затем отсасывают надосадочную жидкость (плазму) и подсчитывают число югеток обычным способом в камере Горяева. Оптимальным для реакции является содержание в 1 мл 1-10 клеток. Если количество клеток окажется большим, взвесь разводят до необходимой концентрации средой Игла, если меньшим, то взвесь центрифугируют и осадок суспензируют в необходимом количестве среды. Затем в суспензию добавляют антибиотики (пенициллин и стрептомицин), разведенные в среде Игла в таком объеме, чтобы конечная концентрация антибиотиков составляла 10 000 ЕД на 100 мл среды. Полученную суспензию разливают в специальные флаконы или пробирки по 2 мл. Один из флаконов является контрольным, в другие добавляют специфические или неспецифические митогены. Пробирки выдерживают 48 —72 ч в термостате при 37 °С. Для учета результатов реакции переливают содержимое флаконов в центрифужные пробирки и центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, из осадка делают мазки, окрашивают одним из общепринятых способов и микроскопируют. Подсчитывают 200 лимфоцитов, в том числе количество неизменных клеток, клеток, перешедших в бластную форму, и переходных клеток. [c.86]

Схема получения фактора переноса заключается в следующем. От здоровых доноров с выраженной реакцией ГЗТ на соответствующий антиген отбирают кровь в асептических условиях. Кровь собирают в стерильные емкости, куда добавляют антикоагулянт гепарин и 6% раствор декстрана 250 в 0,15 М натрия хлорида (из расчета 500 МЕ гепарина и 10 мл декстрана на каждые 100 мл крови). Емкость закрывают, несколько раз встряхивают и термо- [c.593]

Высокомолекулярная природа, мембранотропные свойства и способность к рецепторному промежуточному эндоцитозу арабиногалактана вызвали интерес к нему как к носителю фармакологических молекул и ионов для получения биологически активных препаратов пролонгированного действия. Природные качества перспективно отличают полимерную матрицу арабиногалактана от других широко распространенных полисахаридов, таких как дек-стран, целлюлоза, гидроксиэтилкрахмал, гепарин, крахмал, декст-рансульфат, карбоксиметилцеллюлоза, используемых в качестве носителей. [c.340]

Интерес к сульфопроизводным полисахаридов в значительной степени связан с поиском природных лекарственных препаратов антикоагулянтного действия - аналогов мукополисахарида гепарина. Так синтезированы сульфопроизводиые ксилана, хитозана, ксилоглюкана, которые проявляют антикоагулянтные свойства [77]. Так как антикоагулянтные свойства связывают с присутствием и количеством сульфогрупп, то задача получения максимального гепариноподобного эффекта связана с максимальной этерификацией гидроксильных групп полисахарида. Сульфатированные производные полисахаридов можно получать разнообразными способами, при этом предпочитают использовать безводную среду в связи с тем, что полисахариды чувствительны к кислой среде. В качестве сульфатирующих агентов были использованы смеси серная кислота - н-пропанол [78], хлорсульфоновая кислота - пиридин [79], триоксид серы - пиридин [77, 80], триоксид серы - диметилформамид [81]. [c.341]

Получение й состав. Кислый мукрполисахарид, получаемый из легких и печени крупного рогатого скота в виде натриевой соли Строение точно не устнйовлено. В состав гепарина входят этерифицированные серной кислотой [c.97]

Иная картина поглощения макромолекул гетеросетчатыми анионитами наблюдается по отношению не к глобулярным, а клубневого типа макромолекулярным ионам. Так, сорбция гепарина протекает с большой емкостью только на анионитах неоднородной структуры, в то время как высокопроницаемые гелевые аниониты, полученные с малым количеством кроссагента, почти непроницаемы для гепарина (рис. 2.5). Степень набухания гетеросетчатых анионитов коррелирует с проницаемостью для глобулярных макромолекул белков (см. рис. 2.4). В отличие от этого жесткие полиэлектролитные клубки гепарина той же молеку- [c.44]

Продукт, полученный в результате этих реакций, обладает про-тивосвертывающим действием по отношению к крови, по активности сравнимым с гепарином. 1-Гексадеканол образует аналогичный продукт с хлорсульфоновой кислотой. Приписываемая этим соединениям структура кажется весьма сомнительной, так как маловероятно, что система с многочисленными двойными связями может быть стабильна в присутствии SO3 или H2SO4. [c.41]

Кальций можно удалить из крови с помощью ионного обмена [31]. причем полученный препарат равноценен крови, обработанной гепарином. Кровь, пропущенная через иониты, оказалась вполне удо-в.10творительной для гематологических, серологических и биохимических исследований. При обработке На-катионитом с целью замещения кальция натрием кровь теряет способность к свертыванию и имеет pH = 6,8—7,0 против нормальной величины pH крови 7,35 — 7,43. Было высказано предположение [32], что замещение кальция литием или другими щелочными металлами вместо натрия позволит, вероятно, получить кровь с нормальным значением pH. [c.381]

В некоторых олигосахаридах, полученных гидролизом гепарина, обнаружена идуроновая кислота. Ее присутствие в гепарине подтверждено ЯМР-спектрами и выделением 1,6-ангидро-1-идозы [69]. [c.87]

Выделенный продукт растворяют в 1,8 л воды и к раствору прибавляют 600 мл ледяной уксусной кислоты и раствор 240 г ацетата бария в 2,4 л 25%-ной уксусной кислоты, предварительно нагретый до 80°. Осадок отделяют центрифугированием и дважды промывают 5 %-пым раствором ацетата бария в 25 %-ной уксусной кислоте. Затем его диспергируют в 1 л воды, прибавляют 1 л 10%-ного раствора карбоната натрия, осадок карбоната бария отфильтровывают и промывают дважды небольшими количествами 5 %-ного раствора карбоната натрия. Фильтрат подкисляют до pH 6 уксусной кислотой и осанедают дерматансульфат 3 л метанола выход 30 г. Продукт отделяют центрифугированием и промывают 95%-ным этанолом и эфиром. Полученный дерматансульфат на этой стадии еще содержит небольшое количество гепарина а]о —32° (в воде). [c.350]

Полученное вещество (20 г) растворяют в 3 л воды и прибавляют 60 мл ледяной уксусиой кислоты и 30 г реагента Л.лойда — алюмосиликат-ного адсорбента. После стояния в течение ночи гепарин отделяют центрифугированием II два/Кды промывают спиртом. Затем его растворяют в 2 л [c.365]

ВОДЫ И опять обрабатывают 20 г реагента Ллойда, после того как pH доведено до 5 прибавлением уксусной кислоты. После фильтрования pH снижают до 4 и снова прибавляют 20 г реагента Ллойда. Затем прибавляют такие количества хлористого натрия и ацетона, чтобы концентрация первого составила 0,85, а второго 25%. Образовавшийся осадок отделяют центрифугированием и отбрасывают, а гепарин осанедают из прозрачного раствора, прибавляя ацетон, пока его концентрация не достигнет 66%). После стояния в течение ночи раствор центрифугируют, осадок промывают спиртом и сушат. Полученный материал (6 г) растворяют в 300 мл воды и прибавляют 10%-ный раствор хлористого кадмия, пока не прекратится осаждение. Через 4—5 час смесь центрифугируют. К прозрачному раствору добавляют хлористый натрий до концентрации 0,85% и гепарин осаждают 2 объемами ацетона, отделяют его центрифугированием и сушат, как описано выше. Активность 12—13 международных единиц на 1 мг [14]. [c.366]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология