Сывороточный как антиген

В случае хранения в замороженном состоянии при —20 °С рекомендуется разделять антисыворотку на партии небольших объемов, чтобы не подвергать ее многократному замораживанию и размораживанию. При использовании некоторых методов необходимо, чтобы иммуноглобулины IgG были отделены от других сывороточных белков. Осаждение сульфатом аммония или комбинирование этой операции с ионообменной хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе [31, 36] или с аффинной хроматографией при использовании белка А, иммобилизованного на носителе [48], позволяет легко, но более или менее тщательно очистить эти иммуноглобулины. Иммуноаффинная хроматография, используя очищенный иммобилизованный антиген, дает возможность производить очистку специфических антител белка при разделении фракции IgG или даже антисыворотки. [c.97]

Радиоиммуноэлектрофорез можно осуществить также и с помощью антигенов, меченных радиоактивными изотопами. Методика постановки подобна только что описанной, но после иммуноэлектрофореза в канавку для антисыворотки заливают меченный изотопом антиген (в приведенном выше примере — сывороточный Ч-альбумин человека) и оставляют для диффузии. [c.149]

Этот метод весьма полезен, например, при диагностике недостаточности синтеза иммуноглобулинов какого-либо класса. В этом случае электрофоретическому разделению подвергают нормальную сыворотку человека, в зону абсорбирующих антигенов вносят сыворотку больного, а в зону иммунной сыворотки — антисыворотку к сывороточным белкам человека. В образовании полос преципитации с фракциями нормальной сыворотки человека принимают участие только те антиглобулиновые антитела, которые не встретили соответствующих им иммуноглобулинов в сыворотке больного, диффундируя из зоны антисыворотки в зону нормальной сыворотки. В результате появляются полосы преципитации, которые соответствуют отсутствующему классу иммуноглобулинов, например IgG, IgA или IgM. [c.152]

Иммунологи неточны и в другом они обозначают термином антиген очищенные, молекулярно гомогенные препараты (например, кристаллический бычий сывороточный альбумин), которые, будучи инъецированными, вызывают образование антител к этому веществу, и по традиции также препараты, которые представляют собой сложные смеси (например, суспензии убитых микробов) и применяются на практике для иммунизации. [c.47]

Важное направление в И.-изучение хим. строения рецепторов, посредством к-рых лимфоидные клетки специфически взаимод. с антигеном. Эта р-ция обусловливает синтез антител, специфичных для данного антигена, и появление особой категории лимфоцитов, ответственных за р-ции клеточного иммунитета (иммунитет, опосредованный клетками иммунной системы). Показано, что антигенные рецепторы лимфоцитов, происходящих из костного мозга (В-лимфо-циты), имеют иммуноглобулиновую природу и отличаются от сывороточных иммуноглобулинов лишь небольшим участком своих тяжелых полипептидных цепей, встраивающихся в цитоплазматич. мембрану этих клеток. После активации В-лимфоцитов антигеном при участии ряда медиаторов (напр., интерлейкинов, интерферонов) эти клетки приобретают способность продуцировать антитела. [c.218]

Фиг. 25. Влияние pH на равновесие антитело — антиген в системе бычьего сывороточного альбумина [12].

БСГ — бычий сывороточный глобулин. В опыте 1 использовались лошадиные антитела, в остальных — кроличьи. Ат — антитело Аг — антиген Г — гаптен. [c.170]

Необходимость наличия определенной, устойчивой структуры для сохранения антигенных свойств подтверждается тем фактом, что эти свойства теряются при действии на белки высокого давления. Так, например, сывороточные белки теряют свои антигенные свойства после выдерживания под давлением 6 000 атм [28]. [c.333]

Иммунологическая специфичность белков является весьма характерным их свойством, которое в нормальных условиях сохраняется без изменения. Однако присоединяя к белкам чужеродные соединения или создавая комплексы из двух и более белков, можно изменить их антигенные свойства. Так, например, если сывороточный глобулин осторожно нагревать в присутствии сывороточного альбумина, то образуется комплекс, обладающий новыми серологическими свойствами [23]. Подобным же образом при иодировании белков происходит изменение их серологической специфичности [24, 25]. Специфичность иодированных [c.333]

Нельзя, однако, считать, что специфическая активная группа антител очень лабильна [16] часто она даже более устойчива, чем детерминирующая группа антигена. В первую очередь это относится к антитоксинам. Обработка преципитата токсин—антитоксин денатурирующими агентами вызывает разрушение только токсина, в результате чего получается нетоксический препарат антитоксина. Различия между составом антител и нормальных сывороточных глобулинов не настолько велики, чтобы обусловить заметную разницу в их антигенных свойствах. Если кролику вводить антитела сыворотки лошади, то в его организме образуются преципитины, действующие не только против лошадиных антител, но и против нормального сывороточного глобулина лошади [86]. [c.341]

Комплексы сывороточных белков с другими веществами белковой природы могут быть также выделены с помощью гель-хроматографии, как это было уже показано на примере комплекса гемоглобин — гаптоглобин (фиг. 16) [49]. Еще проще количественно определить емкость гемоглобина (способность гемоглобина к комплексообразованию) на сефадексе G-100 [50]. Фракция макроглобулинов (выделение на сефадексе G-200), очевидно, содержит белок, связывающий трипсин [51, 52]. Активность при этом сохраняется лишь частично [51, 52]. Комплексы антиген — антитело часто выделяли на пористых гелях, а затем после разложения на составные части исследовали более подробно (см. литературу, приложение IX). В предыдущем разделе на примере инсулина были рассмотрены возможности изучения растворимых иммунокомплексов. Иммунологические методы в сочетании с гель-фильтрацией играют важную роль в исследовании строения Y-глобулинов. Среди работ на эту тему (см. литературу, приложение X) имеются блестящие исследования, посвященные восстановительному расщеплению и выделению L- и Н-цепей, их рекомбинации, ограниченному действию папаина и, наконец, иммунологическим свойствам интактного белка и его фрагментов. [c.218]

Иммунологические исследования тоже свидетельствуют о филогенетических связях между организмами. Если белки, содержащиеся в сыворотке крови, ввести в кровь животных, у которых этих глобинов нет, то они действуют как антигены, т. е. побуждают организм вырабатывать соответствующие антитела в результате возникает реакция антиген-антитело. Эта иммунная реакция обусловлена способностью жи-вотного-реципиента распознавать присутствие в сыворотке чужеродных белков. Человеческая сыворотка, введенная кроликам, сенсибилизирует их и вызывает у них образование антител к сывороточным белкам человека. Если спустя некоторое время к пробе сенсибилизированной сыворотки кролика добавить сыворотку человека, то произойдет образование комплексов антиген-антитело, выпадающих в осадок (преципитат), количество которого можно измерить. Если добавлять к пробам кроличьей сыворотки, содержащей антитела против сыворотки человека, сыворотки различных животных, то образуются разные количества преципитата. Предполагая, что количество преципитата находится в прямой зависимости от количеств чужеродного белка , этот метод можно использовать для оценки степени родства между разными группами животных (табл. 26.8). [c.304]

При наличии сывороточных антигенов дальнейшая диссеми-нинация возбудителя прекращается (абортивная инфекция), в противном случае развивается вторичная вирусемия и возбудитель попадает в ЦНС. Нейроны передних рогов спинного мозга, продолговатого мозга и варолиевого моста несут рецепторы для полиовирусов. [c.133]

В настоящее время наиболее совершенными считаются иммунологические методы исследования плазменных или сывороточных белков. Эти методы обладают высокой специфичностью и основаны нз иммунопреципитационных реакциях. Последние представ-ляют собой реакции между растворимыми белками —антигенами и растворимыми белками — антителами в результате их взаимо- [c.240]

В сыворотке иммунизированных животных всегда накапливаются продукты, секретируемые многими клонами В-лимфоцитов. Сывороточные антитела при любых схемах иммунизации представляют собой смесь молекул антител, гетерогенных по специфичности, аффинности и классовой принадлежности, вследствие чего имеется неизбежная перекрестная реактивность иммунных сывороток с разными антигенами. Перекрестная реактивность делает трудным или невозможным идентификацию уникальных антигенов. Моноклональные антитела, в отличие от поликлональных, являются продуктами потомков всего лишь одной В-клетки, и поэтому препараты моноклональных антител имеют особые свойства, вытекающие из небывалой степени биохимической гомогенности моноклональные антитела высокоспецифичны. Они направлены против одной и той же антигенной детерминанты моноклональные антитела стабильны как эталоны в отношении специфичности и аффинности (прочности связи с антигеном). Исследователь может целенаправленно подобрать моноклон, вырабатывающий антитела только нужного сорта , т. е. класса, подкласса, специфичности, аффинитета. [c.309]

Б случае иммуноэлектрофореза [49 — 51] принцип электрофореза сочетается с биоспецифической аффинностью белка (рис. 3-5). Белки-антигены сначала разделяются гель-электрофоретически. При встрече с диффундированными внутрь геля антителами происходит образование комплексов антиген — антитело, наблюдаемых в виде серповидных полос преципитации. Иммуноэлектрофорез имеет особое значение в медицинской диагностике (разделение и идентификация сывороточных белков и др.). Рис. 3-6 поясняет эффективность этого метода по сравнению с другими видами электрофореза. [c.352]

В иммунохимии используются особые свойства защитных систем вь[сших позвоночнь[х, которь[е проявляются преимущественно в выработке новых сывороточных белков (антител) в ответ на введение в организм посторонних для него веществ, называемых антигенами. Эти антитела могут специфически реагировать in vivo и in vitro с антигенами, которые вызвали их образование. [c.89]

Иммуноглобулинами называют группу сывороточных гликопротеинов, выполняющих функцию антител и продуцируемых в ответ на стимулирующее действие антигенов. В настоящее время известно пять классов иммуноглобулинов 1 0, 1 А, 1дМ, IgD и IgE. Основу структуры всех изученных иммуноглобулинов (в мономерной форме) составляют четыре полипептидные цепи, связанные дисульфидными мостиками. Обнаружены полипептидные цепи двух типов, так называемые легкие и тяжелые, причем каждый мономер содержит по две цепи каждого типа (рис. 26.3.6). Существуют два типа легких цепей — каппа (и) и лямбда (к), общие для всех классов иммуноглобулинов, причем индивидуальные иммуноглобулины в мономерном виде содержат 3 качестве легких цепей либо две х-, либо две > -цепи. Тяжелые цепи специфичны для иммуноглобулинов и определяют их класс. Каждый класс иммуноглобулинов содержит характерное для него количество углеводов, которое может колебаться от 22 моносаха-Ридных остатков в до 82 остатков в мономерном 1 М. Из полимерных форм иммуноглобулинов описаны димерный 1 А и пентамерный 1 М. Макромолекулярный 1 М, как полагают, со- бржит пять мономерных единиц, соединенных в виде кольца, из которого радиально выступают пять клешней . [c.269]

Серологическое исследование. Для дифференциации эндемического и эпидемического сыпного тифа проводят РСК и реакцию агглютинации параллельно с антигенами из риккетсий двух видов. В случае эндемического сыпного тифа титр сывороточных антител к риккетсиям вида R. typhi в 3 — 4 раза превосходит титр к риккет-сиям Провачека. [c.238]

Кроличью антисыворотку против БСА и человеческого сывороточного альбумина (ЧСА) вводили анестезированным собакам одновременно, при разбавлениях, при которых антисыворотка связывает 957о соответствующих ей антигенов. Для анти-БСА — это разбавление 1 520, а для анти-ЧСА— 1 270. После уравновешивания в течение 12 мин. микросферы БСА вводили в экстракорпоральное кровообращение. Специфическое уменьшение количества БСА-сзязываю-щих антител у четырех собак обнаружено в течение первых 15 мин после введения микрокапсул БСА, в последующие 60 мин содержание антител уменьшалось значительно меньше. За те же интервалы времени количество анти-ЧСА оставалось постоянным. Для доказательства того, что наблюдаемое снижение связывающей способности БСА не является следствием отщепления БСА от микрокапсул в ходе эксперимента, жизненно важные органы и сыворотку крови собак анализировали на присутствие g конце экспериментов. Никакой суше- [c.384]

Гуморальная форма иммунного ответа на аллерген может вызвать, согласно классификации Кумбса и Гелла [82], три типа аллергических реакций, которые в клинической аллергологии обычно объединяют под общим названием аллергические реакции быстрого (немедленного) типа . При тине I (анафилактическом, или реаги-новом) свободно циркулирующий антиген образует иммунный комплекс с тканями, пассивно сенсибилизированными атителами, а клиническая картина реализуется действием биогенных аминов. Типичным примером реакции типа I считают бронхиальную астму, при которой реагины фиксируются клетками слизистых оболочек органов дыхания и кожи. Тип И (цитотоксический), при котором гуморальные антитела при участии комплемента реагируют с аутоантигенами или гаптенами, фиксированными на тканях, имеет место при аллергодерматозах химической этиологии, а в аутоаллергическом варианте — при любой нозологической форме химического аллергоза. Тип П1 обусловлен токсическим действием иммунного комплекса, растворенного в избытке антител, что характерно для сывороточной болезни. [c.20]

Состояние толерантности к доминантному аллергену отменяет его подавляющее влияние на другие антигены. Еще в 1969 г. S hwartz и Leskowitz показали это на модели кожных реакций замедленного типа к детерминанте Арс. Доминантными антигенами в их опытах служили бычий сывороточный гамма-глобулин или альбумин, вводимый в смеси с конъюгатом тирозина с азобензол-мышьяковистым ацетилом. [c.54]

Вопрос о том, можно ли нарушить экспериментально созданную иммунологическую толерантность, представляет прежде всего чисто теоретический интерес. Это в самом деле возможно достаточно к толерогену (нанример, к самому обычному сывороточному белку) присоединить новую детерминантную группу. Из 20 аминокислот, входящих в состав белка, наиболее активен в качестве детерминантной группы тирозин. Он может в виде тирозильного остатка связаться своей кислотной группой со свободными амин ными группами толерогена. Такой тирозилирован-ный сывороточный альбумин, называемый также толероген-конъюгатом, не является более толерогеном, а превращается в антиген против него незамедлительно начинают образовываться антитела. Впрочем, именно этого и следовало ожидать исходя из того, что мы знаем о детерминантных группах. Зато оказалось совершенно неожиданным, что при этом антитела образуются не только против толероген-конъюгата, но и против самого толерогена, т. е. сывороточного альбумина. [c.361]

По-видимому, это явление должно было бы иметь большое значение. Стоит только вспомнить о многочисленных лекарственных препаратах,, которые мы так часто вводим себе в кровь. Что, если среди них окажется такое, которое присоединится в виде боковой цепи к естественному толерогену Тогда, скажем, собственный сывороточный альбумин мог бы превратиться из толерогена в антиген Разве не следовало бы в будущем предварительно испытывать все лекарственные препараты с целью выяснить, не могут ли они действовать как нарушители толерантности [c.361]

Предсказываемая соотношением (1) линейная зависимость была подтверждена достаточным числом опытов при разных значениях pH (фиг. 25). В опытах Сингера это соотношение оказалось верным для обеих изучавшихся им систем (альбумин куриного яйца — антиовальбумин, бычий сывороточный альбумин — антиальбумин). Константа Кн в обоих случаях имела величину порядка 10 , что согласуется с представлением о важной роли карбоксильной группы —СОО в осуществлении связи антиген — антитело в этих системах согласно этому представлению, сила связи максимальна, когда карбоксильная группа полностью ионизирована. [c.151]

При изучении мутантов бактерий мы сталкиваемся с мутированными белками, измененными в одном аминокислотном звене. Чаще всего подобные мутированные белки имеют одну и ту же антигенную специфичность и образуют одинаковые антитела. Гомологические белки разных видов животных также похожи по своему аминокнслотному составу, хотя и гораздо дальше отстоят друг от друга, чем мутанты в пределах вида. В этом случае антигенные свойства полностью различны. Например, сывороточный альбумин лошади и коровы не сильно отличаются по аминокислотному составу. Однако организм лошади не образует антител к своему белку, но легко образует к чун еродному альбумину коровы. Значит, в клетках лимфатической системы [c.501]

Любой из природных белков обладает антигенной специфичностью. Антитела, возникшие в ответ на введение определенного белка, образуют преципитаты только с этим белком, но не с другими белками. Перекрестная реакция наблюдается только в тех случаях, когда исследуемый антиген очень близок к антигену, применявшемуся для иммунизации. Так, например, антитела, образующиеся при инъекции сывороточных белков лошади, преци-питируют также и сывороточные белки осла яичный альбумин утиных яиц преципитируется антителами, образовавшимися при иммунизации яичным альбумином куриного яйца [4]. С другой стороны, серологические свойства миоглобина резко отличаются от свойств гемоглобина, хотя оба вещества содержат один и тот же гемин [5]. Очевидно, в данном случае специфичность обусловливается белковым компонентом, а не гемином. Гемоглобин человека серологически отличается от гемоглобина быка. Однако при помощи реакции задержки комплемента можно установить наличие некоторого родства между этими двумя веществами [6]. [c.330]

Для решения вопроса о том, являются ли антитела сывороточными глобулинами или же они только связаны с этой фракцией, можно использовать специфические методы очистки антител. Обычно эти методы включают два основных этапа 1) образование преципитата антиген—антитело и 2) диссоциацию преципитата и выделение чистого антитела. Первые успешные опыты этого рода были предприняты Фелтоном [42], который преципи-тировал антигенные полисахариды пневмококков соответствующей иммунной сывороткой, а затем разлагал преципитат, обрабатывая его гидроокисью бария. При такой обработке антитела переходят в раствор, нерастворимые же бариевые соли полисахаридов остаются в осадке. Гейдельбергер и его сотрудники успешно расщепляли подобные преципитаты, обрабатывая их концентрированными растворами хлористого натрия [43, 44]. В лаборатории автора для получения чистых антител преципитаты азобелков обрабатывались разведенными кислотами в присутствии нейтральных солей. При этом большая часть антител отщеплялась и переходила в раствор, а антиген и недиссоцииро-ванная часть антител оставались в осадке [45]. Растворы антител, полученные при помощи этих методов, содержат глобулины, не отличающиеся по свойствам от описанных выше нормальных глобулинов. Дальнейшие исследования показали, что больше 90% выделенных подобным образом глобулинов осаждается соответствующим антигеном. Это весьма убедительно подтверждает, что данные глобулины действительно идентичны с настоящими антителами. [c.336]

Антитела отличаются от нормальных сывороточных глобулинов, а также друг от друга своей специфичностью. Каждое антитело соединяется только с тем антигеном, при помощи которого производилась иммунизация, и не соединяется ни с каким другим антигеном. Для объяснения этой специфической способности антител соединяться с соответствующим антигеном Брейнл и автор настоящей книги выдвинули теорию, согласно которой антитела являются глобулинами, имеющими молекулы, конфигурация которых геометрически дополняет конфигурацию детерминирующих групп молекул антигена [46]. Авторы этой теории предполагают, что полярные группы антигена оказывают влияние на процесс образования глобулинов из аминокислот, в результате чего нормальный ход этого процесса изменяется и образуются молекулы глобулина, имеющие иную пространственную конфигурацию [46—48]. [c.336]

Некоторые исследователи пытались синтезировать антитела in vitro путем обработки нормальных сывороточных у-глобули-нов мягкими денатурирующими агентами в присутствии антигена [90]. Однако пока еще нельзя сделать никаких определенных выводов относительно результатов этих опытов, потому что денатурированные у-глобулины дают неспецифические преципитаты с используемыми антигенами [91, 92]. [c.342]

Поскольку и антигены, и антитела являются белками, реакция, происходящая между этими двумя соединениями, тормозится всеми теми факторами, которые действуют на белковые молекулы. Поэтому ошибочные результаты получаются, если реакция проводится не при нейтральном pH [92] или если в качестве антисептика используют мертиолат и другие подобные соединения [123], а также и в тех случаях, когда антиген маскируется другими коллоидами. Так, например, преципитация вируса антивирусом становится невозможной после нагревания вируса с сывороточным альбумином [124] если же затем разрушить пепсином слой сывороточного альбумина, защищающий частицы вируса, то вирус снова приобретает способность осаждаться соответствующей антисывороткой. [c.347]

ЛПТИГЕНЫ — вещества, в1.1зывающие при введении в организм обра ювание особых глобулинов — антител. А., как правило,— ч жеродные для данного организма белки, их комплексы с полисахаридами, липоидами, нуклеиновыми к-тами, а также нек-рые полисахариды преим. бактериального происхождения. У разных белков антигенная активность проявляется различно у нек-рых (гемоглобин, протамины и т. д.) она выражена дово.пьно слабо, а другие (сывороточные белки, экзотоксины и др.) обладают сильно выраженными антигенными свойствами. Одно из важнейших свойств А. проявляется в их способности реагировать только с теми антителами, к-рыо возникают [c.123]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология