Хроматограмма перегрузка пика

Рис. 8. Хроматограммы, показывающие расширение пика вследствие перегрузки колонки.

Перегруженные пики появляются на хроматограмме при высокой концентрации определяемого вещества в пробе. Возникает перегрузка в узле ввода, колонке, детекторе и/или системе электронной обработки сигнала. Влияние перегрузки на форму пика зависит от того, в каком узле хроматографической системы она наблюдается. [c.101]

На реальной хроматограмме форма пиков всех компонентов редко бывает близкой к идеальной (гауссовой). Помимо асимметричных и частично неразделенных пиков, искаженные формы пиков могут быть следствием перегрузки колонки или детектора. Так как точность расчета площади пика по методу Нцо,5 зависит от формы пика, необходимо рассмотреть методы расчета неидеальных хроматографических пиков. [c.20]

При введении пробы необходимо обеспечить идентичность ее состава с анализируемой смесью. При кинетических исследованиях, где приходится проводить многократный анализ близких по со ставу смесей, особенно важна воспроизводимость величины пробы. Объем или масса вводимой пробы должны изменяться в пределах 1—3%. Для уменьшения размывания пиков на хроматограмме из-за перегрузки колонки необходимо работать с минимально возможными пробами и обеспечивать их наименьшее время ввода. Вводимая проба не должна также нарушать установленный режим хроматографа. [c.297]

Детектор Перегрузка детектора проявляется на хроматограмме наличием больших пиков с закругленной [c.103]

Линейная регрессия показывает, что величина Ь вещества 1 не коррелирует с другими величинами. Это связано с перегрузкой веществом 1 тонкого слоя сорбента, что подтверждает исследование хроматограммы. Следовательно, ширина пика на половине высоты определяется обменными процессами в ходе хроматографического разделения и не зависит от размеров стартового пятна или диффузии, [c.36]

Увеличение концентрации разделяемой смеси при сохранении прежних условий хроматографирования приводит к нарушению линейности сигнала детектора и перегрузке сорбента. В данном случае линейность сигнала большого значения не имеет. Разумеется, при интерпретации препаративных хроматограмм этот эффект следует иметь в виду. На рис. 5.20,в представлена хроматограмма, детектирование которой осуществлялось за пределами линейной области. Минимальная высота впадины между пиками составляет около половины высоты пиков. Однако истинное качество разделения выше, чем, это показывает хроматограмма в таком нелинейном режиме детектирования. Картина, подобная приведенной, не должна обескураживать оператора получение чистых фракций даже в этом случае вполне вероятно. В приведенном примере пики хотя и имеют плоские вершины, но еще симметричны следовательно, перегрузка касается пока только работы детектора. При дальнейшем увеличении концентрации образца возможна перегрузка сорбента, что приведет к образованию хвостов и снижению чистоты фракций (пунктирная линия на рис. 5.20,в). Перегрузку сорбента иногда удается уменьшить, взяв подвижную фазу лучшей растворяющей способности (рис. 5.20, г). [c.231]

Иллюстрацией возможности повышения чувствительности в условиях перегрузки колонки может послужить исследование разделения (при различных пробах) этилбензола и изопропил-бензола на двух колонках длиной 0,88 и 1,76 м с 20% дибутил-фталата на твердом носителе. Оказалось, что одинаковые степени разделения наблюдаются тогда, когда во вторую колонку вводят пробу большую, чем в первую, во столько раз, что высота пика на получаемой хроматограмме в 1,5 раза больше, чем высота соответствующего пика, получаемая на первой колонке. Таким образом, удлиняя колонку в два раза с соответствующим [c.130]

Одним из недостатков аргоновых ионизационных детекторов является перегрузка при сравнительно высоких концентрациях компонентов в элюате. Поскольку возбужденные атомы аргона не в состоянии ионизировать все молекулы компонента, происходит срыв ионизации и появление на хроматограмме двух или более пиков одного и того же вещества. При частичной перегрузке сигнал, соответствующий максимуму концентрации, не является линейной функцией последней, т. е. линейный динамический диапазон аргонового детектора не распространяется на область высоких концентраций. [c.161]

Емкость стационарной фазы колонки можно оценить по хроматограмме калибровочной смеси. Различные объемы калибровочной смеси можно впрыскивать, чтобы определить максимальное количество компонента, которое стационарная фаза может принять без перегрузки. Отмечают высоту пика для этого количества пробы. Максимальная интенсивность сигнала пробы не должна превышать эту высоту пика. [c.262]

Рассмотрение производительности колонки тесно связано с описанными выше эффектами перегрузки. Для смесей с малыми значениями параметра а необходимы высокоэффективные колонки и отсутствие перегрузки. С другой стороны, в большинстве случаев требуется разделить максимальное количество вещества за данный промежуток времени, и поэтому перегрузка колонки является правилом. В этом случае хроматографические пики двух наиболее трудноразделимых компонентов часто перекрываются, и для выделения этих компонентов используют метод, называемый методом вырезания середины [27, 28]. При этом фракции отбирают в трех участках хроматограммы, средний из которых приходится на область перекрытия пиков. Эту среднюю фракцию можно затем вновь подвергнуть разделению. Этот метод позволяет достичь большей производительности. [c.90]

Если в капиллярную колонку ввести вещество в количестве немного большем, чем предел детектирования и достаточном для регистрации, то на хроматограмме будут присутствовать пики, по форме близкие гауссовской. Эта же форма будет сохраняться при дальнейшем увеличении объема пробы. Однако, начиная с некоторого объема пробы, произойдет изменение формы пиков и колонка начнет терять разделительные свойства. В этом случае говорят о перегрузке колонки. То есть, если будет введено большое количество вещества, условия равновесия сорбата в системе газ-жидкость будут нарушены, вследствие чего произойдет ухудшение разделительных свойств колонки, и вещества анализируемой смеси не будут разделены. В самом плохом варианте все вещества смеси выйдут широким неразделенным пиком. Оказывается, чем меньше диаметр колонки, тем меньше вещества в нее можно загрузить, и тем быстрее она теряет свои разделительные свойства при увеличении объема пробы. [c.12]

НИИ любой из этих методик необходимо следить, чтобы разделение пиков не ухудшалось при перегрузке колонки, так как даже при отсутствии на конечной хроматограмме пика воды избыток ее в колонке вовремя анализа может повлиять на разделение других компонентов. [c.285]

Следует разработать определенную систему контроля за работой колонок, в которую обычно входят холостые опыты и разделение стандартных смесей. В первом случае в колонку вводят раствор без образца. Это нужно делать в начале рабочего дня и после каждого отклонения в процедуре (например, после перегрузки колонки или смены растворителя). В холостом опыте можио идентифицировать на хроматограмме инъекционные пики, пики растворителей, теневые пики и ход ба-301Б0Й линии прн соответствующих растворителях. Если при этом чувствительность детектора такая же, как и в основном опыте то хроматограмму холостого опыта можно сопоставить с хроматограммой образца и точно идентифицировать пики последнего. [c.107]

В основе количественного анализа газовой смеси по хроматографическим кривым, получаемым при помощи дифференциальных детекторов, лежит определение основных параметров хроматографического пика высоты пика Л, ширины пика М, площади пика Q времени удерживания удерживаемого объема Ууд или соответствующего ему на хроматограмме отрезка I. Однако точность анализа определяется точностью измерения определяющего параметра только в случае идеальной регистрации хроматограммы особенно это имеет место при использовании в качестве определяющего параметра площади пика Q. Для расчета реальных хроматограмм наиболее целесообразно использование произведения, высоты пика на удерживаемый объем (Л-Куд) или отрезок /(Л-/). Оирина пика при отсутствии перегрузки колонки постоянна, а высота пика пропорциональна количеству определяемого компонента. Существенное влияние - на точность проведения количественного хроматографического анализа газов оказывает перекрытие и размытие хроматографических пиков, а также скорость подачи газа-носителя и количество вводимой анализируемой пробы, перегрузка и температура хроматографической колонки, чувствительность детектора и регистрирующего устройства. В связи с этим при конструировании хроматографов предъявляются весьма жесткие требования к воспроизводимости работы всей хроматографической установки, а при проведении анализа строгое выполнение этих требований. [c.326]

При 1 пики двух в-в на хроматограмме разделяются практически полностью, с ростом увеличивается время разделения, при < 1 - разде тение неудовлетворительное В препаративной хроматографии в связи с введением сравнительно больших ко т-в разделяемых в-в колонка работает с перегрузкой При этом снижается коэф емкости, возрастает высота эхвнвалентная теоретич тарелке, что приводит к уменьшению разрешения [c.153]

Миниатюризация ввода пробы в коммерческих приборах, между тем, прогрессирует так сильно, что из общего объема пробы 3 мкл в автоматизированных приборах можно сделать множество вводов. При этом, однако, не исключено, что состав пробы во время ввода изменится. Причина заключается в занесении буфера в пробу или в селективном вводе определенных компонентов пробы при электрокинетическом вводе. Работа со столь малыми объемами затруднена, если объем пробы в автозагрузчике может изменяться за счет испарения. Эти эффекты можно уменьшить при помощи охлаждения пробы или использования герметичного затвора в сосуде для пробы. Если необработанные данные анализа представлены в форме хроматограмм или фореграмм, то количественные результаты анализа получают или определением высоты пиков, или после интегрирования в виде площади пиков. Только в области определения примесей количественное выражение их концентрации через высоту более надежно, чем через площадь пика. Этому есть две причины первая заключается в том, что при анализе примесей высота пика пропорциональна их концентрации, так как эффекты насыщения и перегрузки можно исключить, а вторая заключается в том, что ошибка автоматизированного определения высоты в этом случае меньше, чем при интегрировании пиков. Как только высота пиков возрастает, интегрирование становится рациональным и необходимым. [c.44]

Как зтсазывалось ранее, расщепленный пик, состоящий как бы из двух перекрывающихся пиков, может появиться на хроматограмме в том случае, когда вещество содержится в пробе в очень высокой концентрации как результат перегрузки детектора. Расщепление пика может быть также вызвано неправильным вводом пробы. [c.102]

Если предстоит измерение и обработка основных пиков на хроматограмме, количество соответствующих компонентов, вводимых в колонку, не должно выходить за пределы линейности детектора. Максимальное с этой точки зрения количество вещества при детектировании по УФ-поглощению зависит в первую очередь от коэффициента поглощения сорбента и его удерживания. В качестве ориентировочной для соединений с молярным коэффициентом поглощения порядка Ю можно назвать массу 10—50 мкг для колонок с внутренним диаметром 4,6 мм. Диапазон линейности малочувствительных детекторов, например рефрактометра, соответствует значительно большему количеству вещества. Поэтому при работе с ними (а также при препаративной хроматографии с УФ-детектором) приходится считаться уже не столь- ко с перегрузкой детектора, сколько с перегрузкой слоя сорбента. Она приводит к нарастанию асимметрии, в особенности сильно проявляющемуся для сорбатов с большими к. Предельная с этой точки зрения концентрация также сильно зависит от режима хроматографирования. Вероятность явлений подобного рода следует учитывать, если концентрация вещества в пробе превышает [c.323]

Хроматограммы разделения 2 мл (/), 13 мл (//) ибОлл 111) смеси пентана и изопентана в колонке диаметром 10 см, представленные на рис. 8, указывают на то, что из-за перегрузки при разделении 60 мл смеси происходит расширение пика примерно на 30%. Несмотря на такое расширение пика, мы предпочитаем вводить одновременно большие количества (60 мл) и удалять часть продукта из средней области. Это требует меньших затрат [c.317]

Существенным при калибровке является учет концентрационной зависимости У, особенно для высокомолекулярных стандартов. Необходимо помнить, что стандартные образцы узкодисперсные, выходят они в более узком интервале элюационных объемов, поэтому концентрационная зависимость V пика для них является более сильной, чем для полидисперсных образцов. При очень больших концентрациях происходит перегрузка колонок, что может привести даже к искажению формы хроматограмм. [c.212]

Ввод проб в хроматографическую колонну осуществлялся путем испарения конденсата в газовые бюретки емкостью 1 л, из которых газовая смесь с помощью трехходового крана вводилась в колонну под напором насыщенного рассола. Компоненты собирали вручную с помощью распределительной гребенки, состоящей из нескольких трехходовых кранов в ло-вушки-сборники, охлажденные до т-ры —80 . Хроматограмма разделяемой смеси приведена на рнс. 2. С целью получения максимальной производительности препаративной хроматографической установки колонны работали в режиме перегрузки. При этом в качестве целевого продукта отбиралась фракция в середине хроматографического пика. Остальная часть выделяющихся из колонны углеводородов собиралась [c.153]

Х2ДБС0. Эти хелаты испаряются без разложения, и их летучесть возрастает по мере увеличения атомного номера лантаноида. Хорошие хроматограммы хелатов получаются при загрузке 0,2—20 мкг по металлу. Перегрузка колонки приводит к сильному искажению формы пиков. Хотя градуировочные графики линейны, в области загрузок 0,2-15 мкг наблюдаются необратимые потери пробы в колонке в количестве около 0,2 мкг. В результате градуировочный график не проходит через начало координат, пересекая ось абсцисс. Индивидуальные лантаноиды определяются с 99%-ной полнотой при среднем отклонении 2%. При анализе Се, Ыс1, 8т, Ег наблюдается отчетливое разделение пиков отдельных РЗЭ и достигается полнота определения 101,2% при относительном среднем отклонении 2,2%. В этих условиях иттрий может быть легко отделен от всех РЗЭ цериевой группы. [c.165]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология