Вирусы и другие нуклеопротеиды

С применением соответствующей ячейки мон но выполнить эксперименты в градиенте плотности в аналитической центрифуге, использовав таким образом преимущества в чувствительности ультрафиолетовой оптики [1845]. При этом образец небольшого объема (15 мкл) вводится в колонку жидкости с высокой плотностью. Во время седиментации образуется градиент, который стабилизирует зоны седиментирующих частиц. При такой процедуре удается обнаружить примерно до 0,2 мкг вируса или другого нуклеопротеида. Одиако при этом нельзя препаративно выделить фракции градиента, как это делается при применении бакет-ротора. [c.28]

Биологическая роль нуклеопротеидов тесно связана с процессами роста и морфогенеза. Особенно важной функцией нуклеопротеидов является, повидимому, синтез белка. Быстро растущие органы и ткани (эмбриональные ткани, опухоли), а также органы, в которых интенсивно происходят синтетические процессы (кроветворные органы, поджелудочная железа,. половые и другие железы), содержат особенно много нуклеопротеидов. Очень богаты нуклео-протеидами бактерии и другие микроорганизмы, а вирусы почти полностью построены из этих соединений. [c.42]

В пользу ДНК как генетического фактора свидетельствуют и данные по мутагенному действию горчичного газа и его азотных аналогов (производные иприта). Горчичный газ является, по-видимому, первым химическим фактором, у которого была обнару кена способность вызывать мутации. При изучении процессов инактивации (лишения активности) различных биологических материалов, начиная от чистых ферментных белков и кончая вирусами, бактериями и дрожжами, под действием горчичного газа было установлено, что ДНК гораздо более чувствительна к горчичному газу, чем белок, РНК или другие компоненты клетки. В ряде исследований показано, что горчичный газ вызывает потерю вязкости и отчетливую деполимеризацию ДНК. Была отмечена также способность горчичного газа и его аналогов осаждать протеид ДНК, и найдено, что они взаимодействуют с нуклеопротеидами ДНК в большей мере, чем с другими белками. [c.68]

Нуклеиновая кислота и белок нуклеопротеидов легко отделяются друг от друга и соединяются снова. Это подтверждает, что связи между ними слабы и не могут являться ковалентными. Тем не менее, по крайней мере в случае вирусов, эти компоненты, по-видимому, сосуществуют в определенных соотношениях друг с другом, что позволяет рассматривать нуклеопротеиды как реальные соединения. [c.22]

Изучение вирусов имеет большое значение для разрешения проблемы биосинтеза белка. На это указывает тог факт, что все, даже самые простые, вирусы содержат белок и нуклеиновые кислоты [113]. Низшие вирусы содержат только рибонуклеиновую кислоту, в состав же высших вирусов входит и дезоксирибонуклеиновая кислота. Высокое содержание нуклеиновых кислот в вирусах дает основание считать, что значительная часть их белков представляет собой кислые нуклеопротеиды. В области pH, лежащей между изоэлектрическими точками белков и нуклеиновых кислот, они могут соединяться с сывороточным альбумином и другими белками, образуя нерастворимые при низкой ионной силе мезоморфные волокна [114]. [c.398]

Некоторые вирусы содержат только РНК, другие—только ДНК, но клетки бактерий, всех одноклеточных и многоклеточных растений и животных содержат нуклеиновые кислоты обоих типов. ДНК и РНК имеют в клетке различную локализацию. ДНК находится преимущественно в ядре, входит в состав хроматина, сосредоточена в хромосомах. В ядре ДНК вступает в соединения с гистонами и протаминами, образуя нуклеопротеиды. Согласно последним данным, ДНК входит в состав органоидов цитоплазмы, например митохондрий. Основные хранители РНК — ядрышки, находящиеся в ядре, и рибосомы, расположенные в цитоплазме. Кроме того, РНК находится в цитоплазматическом матриксе. [c.45]

Вышеописанные методы выделения внутреннего нуклеопротеида, вероятно, подходят и для других сложноорганизованных вирусов. Но дая каждого вируса необходима подобрать соответствующие условия для выделения внутренних нуклеопротеидов и их фракционирования [c.176]

Вирусы и другие нуклеопротеиды. Приаеденные примеры далеко не исчерпывают список известных нуклеопротеидных структур. Существует целый мир бактериальных, растительных и животных вирусоа, а котором обнаружено поразительное многообразие вирусных частиц (вирионов) к к по строению и составу, так и по способам хранения и воспроизведения генетической информации. В отличие от клеток, где хранителем наследственности всегда является двуспиральная ДНК, а РНК служит только для переноса и реализации генетической информации, вирусы в качестве генетического материала используют как ДНК (ДНК-содержащие вирусы), так и РНК (РНК-содержащие вирусы). Геномная ДНК может быть одноцепочечной или двуспиральной, кольцевой или линейной. РНК-содержащие вирусы также чрезвычайно разнообразны они могут содержать одноцепочечную или дауспиральную РНК, их геном может быть представлен одной или сразу несколькими молекулами РНК, упакованными в одну капсиду. [c.404]

Наиболее интересной и важной группой из числа сложных белков являются нуклеопротеиды, в них белок соединен с нуклеиновой кислотой. В отличие от других сложных белков нуклеопротеиды состоят из сравнительно простого и низкомолекулярного белка основного характера — протамина или гистона, и высокомолекулярной простетической группы — нуклеиновой кислоты. Нуклеопротеиды входят в состав всех клеток живого организма, являются важной частью хромозом и т. д. К этому классу соединений относятся и молекулы ]-иганты — вирусы, инициаторы многих инфекционных заболеваний, например, полиомиелита. [c.533]

Вируси — это частицы, построенные из одной или нескольких молекул нуклеиновой кислоты и нескольких белков, иногда некоторых других дополнительных компонентов, например фосфолипидов. Вирусы представляют собой нуклеопротеиды, способные, попадг1Я внутрь соответствующих клеток, интенсивно воспроизводиться с образованием большого числа новых вирусных частиц. Вне клеток никаких признаков жизнедеятельности вирусы не проявляют. Однако, проникг1Я внутрь определенных клеток, которые выполняют по отношению к вирусу функции. хозяина, вирусные частицы с помощью своей нуклеиновой кислоты перепрограммируют работу клетки, и в ней начинается размножение вирусной нуклеиновой кислоты и производство вирусны.ч белков. Процесс, как правило, завершается формированием зрелых частиц вируса и разрушением [c.111]

Биологические функции белков исключительно разнооб разны. Некоторые из них обладают свойствами гормонов, ре гулирующих различные процессы обмена веществ (например инсулин поддерживает уровень сахара в крови) другие белкв действуют как катализаторы (ферменты) биологических про цессов, и, наконец, ряд белков является биологическим стро ительным материалом (например, коллаген соединительны тканей и кератин волос). Выше уже были упомянуты свойств гемоглобина млекопитающих как переносчика кислорода Функция некоторых белков крови заключается в обраЕэваниЕ антител, обусловливающих сопротивляемость к заболеваниям а так называемые нуклеопротеиды входят в качестве важной составной части в гены, которые несут наследственную инфор мадию и передают ее в процессе деления клетки. Вирусы, на пример вирус табачной мозаики, состоят из нуклеопротеидов заключенных в белковую оболочку. Структура многих вирусо настолько регулярна, что они могут быть получены в виде хо рошо образованных кристаллов. [c.512]

Агарозные гранулированные гели применяют для выделения и фракционирования очень крупных молекул, в том числе вирусов, бактериофагов, субклеточных частиц (например рибосом), белков, нуклеопротеидов, нуклеиновых кислот, полисахаридов, Ог других мягких гелей агарозы отличает болёе широкие интервалы фракционирования. Агарозы используют также в качестве носителей иоспецифических сррбентов для аффинной хроматографии (см. разд. 120), [c.62]

Вирусы животных содержат либо РНК, либо ДНК в первом случае они часто репродуцируются в цитоплазме, во втором — в ядре клетки хозяина. Небольшие РНК-содержащие вирусы, например вирус коксэкки или вирус полиомиелита, представляют собой простые полиэдрические нуклеопротеиды, сходные с описанными выше вирусами растений. Вирусы, вызывающие, нанример, энцефалит или грипп, также содержат сравнительно низкомолекулярную РНК, но имеют при этом гораздо более крупные размеры (оставаясь полиэдрическими), частью вследствие того, что в них присутствуют помимо белка и РНК еще и другие компоненты — липиды или полисахариды. Одна из наиболее интересных групп вирусов животных — это так называемые реовирусы. Они содержат высокомолекулярную двуспи-ральпую РНК, состоящую из двух комплементарных цепей по своим химическим, структурным и функциональным свойствам эта РНК весьма наноми-нает обычную ДНК. Сходная группа вирусов известна и у растений. Сход- [c.161]

Нуклеиновые кислоты обычно встречаются в природе в комплексе с белками, и наиболее вероятно, что почти всегда они существуют в виде определенных соединений, называемых нуклео-протеидами. Существуют как ДНК-, так и РНК-нуклеопротеиды. Из подробно охарактеризованных пуклеопротеидов, поскольку они способны к саморепродуцнрованию п тем самым к численному росту, известны вирусы. Многие вирусы выделены в чистом виде и некоторые из них закристаллизованы. Одним из наиболее изученных является вирус табачной мозаики. Он содержит 6% РНК и 94% белка его мол. вес 40 000 000. Молекулярные веса других вирусов колеблются от 2 миллионов до 1 миллиарда. [c.20]

В 1954 г. Петерсон и Собер [1] предложили ионообменники на основе целлюлозы, которые оказались очень эффективными при разделении белков, нуклеопротеидов, липоидов и других высокомолекулярных соединений, включая даже вирусы. Принципиальным преимуществом целлюлозных сорбентов по сравнению с ионообменными смолами является возможность фракционирования биологически активных объектов с сохранением их активности. Хроматография таких объектов на ионообменных смолах всегда сопровождается денатурационными явлениями, значительной необратимой сорбцией и в ряде случаев гидролитическими эффектами [2]. [c.181]

При другом подходе были изучены ультрафиолетовые спектры поглощения различных нуклеопротеидов до и после разделения их на белок и нуклеиновую кислоту обработкой додецилсульфатом натрия [367]. Были введены соответствующие поправки на светорассеяние, а экспериментальные условия были таковы, что нуклеиновая кислота при депротеинизации оставалась нативной, т. е. обладала гипохромизмом, а отсюда и любое уменьшение оптического поглощения могло бы показать, что нуклеиновая кислота в интактном нуклеопротеиде обладает меньшим гипохромным эффектом, что в свою очередь указывало бы на конформационные изменения, происходящие при освобождении нуклеиновой кислоты. При разрушении ДНК-содержащих вирусов типа бактериофага Тб и вируса папилломы Шоупа никаких изменений в оптическом поглощении не происходило (хотя ясно, что изолированная ДНК была определенным образом упакована внутри вируса), и в этом случае вторичная структура нуклеиновой кислоты внутри вируса и в изолированном виде, по-видимому, одна и та же. Аналогичным образом оптическое поглощение рибонуклеопротеидных частиц из дрожжей фактически то же самое, что у разрущенных частиц [367 . [c.630]

Вторым типом эксперимента является трансдукция, когда фрагменты генетического вещества и свойственные им маркеры переносятся из одной клетки в другую бактериофагом вместе с его собственной ДНК. Характерной особенностью трансдукции, так же как и трансформации, является перенос из клетки в клетку именно ДНК, а не нуклеопротеида. Мы знаем, что в хромосоме ДНК не существует в изолированном виде молекулы ДНК застроены в нуклеопротеидную структуру. То же можно утверждать и о вирусах, в частности фагах. Однако по опытам Херши, выполненным методом радиоактивной метки, при заражении клетки фагом последний как бы впрыскивает в клетку свою ДНК, белок же при этом не переходит (с точностью до долей процента). В последнее время удался также опыт заражения клеток выделенной и очищенной вирусной ДНК (подобно тому, как раньше удался опыт заражения растений вирусной РНК). [c.286]

Белки имеют особое значение в биологии, так как они представляют собой незаменимую основу живого вещества. Правда, живые организмы содержат, помимо белков, также углеводы и липиды, часто даже в больших количествах, чем белки. Так, зеленые растения богаче углеводами (целлюлозой), чем белками. Однако между белками и другими составными частями клетки имеются существенные различия. Всюду, где мы встречаемся с явлениями роста и размножения, мы находим, что в этих процессах первенствующую роль играют белки. В ядер-ных клетках деление связано с наличием в ядре белков, соединенных с нуклеиновыми кислотами, — нуклеопротеидов. У бактерий, которые не имеют видимого ядра, белки и нуклеопро-теиды образуют основную массу живого вещества. Если мы спустимся ниже по лестнице живых существ, то мы найдем, что вирусы состоят главным образом из белков и нуклеопротеидов, а самые простейшие из них совсем не содержат липидов и углеводов. [c.5]

ГО копированием 5 -геномного конца. У этих ДИ РНК отсутствует, таким образом, геномный сайт узнавания транскриптазы и лидер-последовательность на З -конце, а потому они неспособны действовать как матрицы для транскрипции поли (А) -содержащих кэппированных сигналов, хотя малый фрагмент РНК часто транскрибируется [30]. Новый сайт связывания полимеразы, генерированный на его З -конце, по всей вероятности, имеет более высокую аффинность к вирусной полимеразе (репликазе), чем З -геномный конец, и поэтому интерферирует с репликацией РНК стандартного вируса, конкурируя более эффективно за ограниченное число молекул полимеразы. Большая часть ДИ РНК из не сегментированных минус-цепочечных вирусов принадлежит к этому классу [30]. Хотя большая часть этих ДИ РНК имеет только одну точку делеции, возможность множественных делеций в некоторых ДИ РНК не должна быть исключена 2) 3 ДИ РНК эти ДИ РНК будут являться копией 5 ДИ РНК, т. е. будут содержать З -конец, но у них отсутствует 5 -конец геномной РНК. 5 -Конец этой ДИ РНК будет образован копированием З -конца ДИ РНК. Однако на сегодня ни одна из таких ДИ РНК неизвестна, а это предполагает, что 5 -конец геномной РНК не отвечает за репликацию вируса и морфогенез. В дополнение к активности связывания, полимеразы последовательность 5 -конца может иметь другие свойства, такие, как, например, сигнал нуклеации для сборки нуклеопротеида и образования вириона и т. д. Этот класс ДИ РНК, в случае его обнаружения, должен транскрибировать поли (А)-содержащие кэппированные сигналы таким же образом, что и геномная РНК 3) 5 —3 ДИ РНК эти ДИ РНК содержат внутреннюю делецию (делеции), но сохраняют оба 5 и 3 геномных конца и ожидается, что они будут транскрибироваться в молекулы РНК. Большая часть, если не все, ДИ РНК вируса гриппа [24, 51, 59] и некоторые ДИ РНК вирусов Сендай и УЗУ (вируса везикулярного стоматита) принадлежат к этому классу [4, 53] 4) сложные ДИ РНК любые ДИ РНК, которые не относятся ни к одному из этих упомянутых классов, будут входить в эту группу. Здесь происходят интенсивные изменения в ДИ РНК с образованием новых последовательностей и/или новых концов. УЗУ ДИ ЬТ2 [38], 18 3 ДИ РНК вируса леса Семлики [41] и мозаичная РНК вируса гриппа [43] являются примерами ДИ РНК этого класса. Транскрипционные свойства [c.259]

Обработка ферментами. Большинство вирусов, несмотря на их нукдеояротеидную природу, устойчиво к действию нротеолитических ферментов и нуклеаз, в то время как клеточные нуклеопротеиды и другие примеси значи тельно легче разрушаются этими ферментами 1115, 116, 117, 142, 379, 540, 715], Используя различную чувствительность вируса и клеточных высокомолекулярных нрнмесей к ферментам, можно произвести их частичную очистку Обработка ферментами позволяет гидролитически разрушать и переводить во фракцию низкомолекулярных соединений часть балластных белков и нуклеиновых кислот. Обработка нуклеазами особенно важна при исследовании свойств нуклеиновых кислот вирусов [48]. Обработка проте-азами необходима при изучении свойств белковых субъединиц вируса. [c.53]

Миксовирусы, вирусы лейкемии, осин и некоторые другие имеют довольно сложное строение. Нуклеиновая кислота у них образует с белками комплекс, так называемый внутренний нуклеонротеид. Для таких вирусов возможно выделение нуклеиновой кислоты или белка непосредствен-но из внутреннего нуклеопротеида. Такой подход к изучению комдонентов вирусной частицы имеет то преимущество, что дает возможность достичь более высокой степени очистки нуклеопротеида, чем цельной вирусной частицы. [c.173]

На основании сравнительного изучения физико-хид1ических свойств вирусного нуклеопротеида и пустой вирусной белковой оболочки, обнаруженной в препаратах вируса желтой мозаики турнепса (ВЖМТ), Маркхэм [1147] пришел к выводу, что РНК вируса долн на находиться внутри белковой ободочки. Эта точка зрения сейчас ун<е широко подтверждена в отношении этого и других вирусов данными рентгеноструктурного анализа. Крик и Уотсон [417] предположили, что белковые оболочки мелких вирусов построены из большого числа идентичных субъединиц, образуюпщх либо палочкообразные частицы со спиральной симметрией, либо сферические структуры с кубической симметрией. Последующие рентгенографические и химические-исследования подтвердили эту точку зрения. Каспар и Клуг [332] сформулировали общую теорию, ограничивающую возможное число и расположение белковых субъединиц, образующих ободочки мелких изометрических вирусов. Наши современные знания о крупных вирусах с более сложной симметрией и структурой основаны на данных электронной микроскопии с использованием методов негативного контрастирования и ультратонких срезов. [c.12]

Минорный нуклеопротеид В2 содеря ится в нрепаратах вируса в больших но сравнению с другими минорными компонентами количествах (обычно 3—4% количества BJ. Этот компонент идентичен Bi по содержанию РНК и по нуклеотидному составу. Фракция В2 имеет более высокую но сравпению с Bi эффективную плотность в концентрированных растворах хлористого цезия. Причина этого неизвестна, однако, возмоншо, она заключается в различной способности к связыванию ионов металлов, поскольку в присутствии Mg + в градиенте хлористого цезия изменяется плотность фракций Bi и Вг-Фракция 130 имеет коэффициент седиментации S20. равный около 117 S, тогда как для Bj коэффициент седиментации составляет 114 S. [c.186]

Количества компонентов, определяемых в препаратах ВМЛ, варьируют в зависимости от штамма вируса и условий выращивания растений. Пептидные карты, полученные после обработки трипсином белка, выделенного из верхнего и нижнего компонентов, оказались очень сходными [860]. Как показали Дяшлласии и Банкрофт [637], РНК, выделенная из очищенных нефракционированных препаратов ВМЛ, разделяется на три фракции с различными константами седиментации [637]. Джилласпи и Банкрофт выделили инфекционную РНК с константой седиментации 22 8 из наиболее быстро седиментирующей фракции нуклеопротеида (99 8). Они полагают, что РНК с меньшей молекулярной массой, выделяемые из других частиц, неинфек-ционны. [c.193]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология