Методы спектрофотометрических измерений

Так как результаты спектрофотометрических измерений в данных системах являются крайне неточными вследствие наложения на процесс химического взаимодействия чисто коллоидных явлений, вызывающих быструю коагуляцию системы, мы не могли применить метод спектрофотометрического измерения. Для того чтобы установить воспроизводимость явлений, содержащих сернистую сурьму, нами были проведены измерения электропроводности и измерения концентраций ионов серебра подобно тому, как это уже было описано для систем, содержащих золи сернистого мышьяка. [c.146]

МЕТОДЫ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИХ ИЗМЕРЕНИЙ [c.143]

Техника титрования.. Метод спектрофотометрического титрования основан на измерении оптической плотности исследуемого раствора, изменяемой в процессе титрования. Для уменьшения влияния разбавления на светопоглощение применяют относительно концентрированные растворы титранта или вводят поправку на разбавление. Для работы готовят приблизительно 2,5 — 1 Ю- н. растворы анализируемого вещества (навеску 20—100 мг растворяют в 20—40 мл неводного растворителя, отбирают аликвотную часть исходного раствора и разбавляют в кювете до концентрации 2-10 3—1 10 н. Титрование проводят без кюветы сравнения. Кювету с исследуемым раствором помещают н кюветную камеру спектрофотометра. Техника работы со спектрофотометром описана в гл. VII. [c.437]

Метод спектрофотометрического титрования основан на последовательном измерении поглощения раствора, которое меняется в процессе титрования, и построении зависимости А = f [v] (кривой титрования). При спектрофотометрическом титровании необходимо, чтобы один из компонентов реакции -— определяемое вещество М, титрант R или продукт реакции MR — обладал характерным поглощением в доступной области спектра (безындикаторное титрование). Если ни один из компонентов реакции не поглощает, то можно использовать индикаторное титрование, для чего в титруемую систему вводят новое вещество, образующее окрашенное соединение с каким-либо из компонентов основной реакции. [c.56]

При контролировании хода реакции спектрофотометрическим методом по измерению концентрации N02 и обработке результатов по уравнению [c.37]

Определение белка. Для определения белка используют метод Лоури (с. 81). При спектрофотометрическом измерении определяют оптическую плотность при 280 нм и рассчитывают концентрацию с помощью коэффициента Л им =9,0. [c.217]

Механизм действия оксиэтилированных ПАВ связан с их адсорбцией на глинистых частицах [79, 49]. Рентгеновские, спектрофотометрические измерения, применение радиоактивных изотопов и другие методы показали, что адсорбция проходит с образованием монослоя, перекрывающего активную поверхность глинистых частиц. Такой сильно гидратированный защитный слой действует как барьер, ограничивающий физико-химические взаимодействия между частицами, и проявляется уменьшением пластической вязкости и предельного напряжения сдвига. Плотность укладки и интенсивность притяжения стабилизирующих слоев сохраняются на достаточно высоком уровне и при температурных воздействиях. Это позволяет поддерживать рабочую консистенцию буровых растворов при забойных температурах, доходящих до 200° С. [c.349]

Достоинствами методов, использующих отношения оптических плотностей, являются не только сравнительная простота и быстрота анализа. Метод отношения плотностей характеризуется меньшими погрешностями, так как в отношении оптических плотностей одного и того же раствора при двух длинах волн компенсируются некоторые погрешности спектрофотометрического измерения. [c.66]

Применение дифференциальной спектрофотометрии для снижения погрешностей и расширения пределов спектрофотометрического измерения описано в разделе 1.4. Для систем с примесями применение дифференциального метода преследует другие цели и сам метод выглядит несколько иначе. [c.113]

Для гидроксильных групп характерно сильное поглощение в инфракрасной области, однако при попытках разработать общие количественные методы определения этих групп по результатам прямых спектрофотометрических измерений в этой области спектра возникают определенные трудности. Эти трудности обусловлены тем, что гидроксильные группы могут образовывать между собой н с другими полярными группами водородные связи, влияющие на интенсивности полос поглощения. В отдельных случаях хорошие результаты дают методы, в которых степень ассоциации в системе контролируется путем выбора специальных условий. Выбранные условия обеспечивают либо полную ассоциацию, либо полную диссоциацию, либо определенное соотношение между ассоциированной и неассоциированной частями анализируемой и стандартной систем. Степень межмолекулярной ассоциации зависит от концентрации сильное разбавление образца неполяр-ными растворителями способствует диссоциации, а разбавление его полярными растворителями, например пиридином, вызывает практически полную ассоциацию. С другой стороны, неполярные растворители не влияют на степень внутримолекулярной ассоциации. [c.9]

Предназначено для химической обработки проб в дискретном анализе колориметрическими методами. Может быть использовано в комбинации с любым спектрофотометром, оборудованным проточными кюветами. Возможность проведения разделений не предусмотрена. В термостатируемой (воздухом, 20 — 60 0,5 °С) камере установлена замкнутая цепь, которая может двигаться в горизонтальной плоскости по направляющим. По всей длине цепи закреплены 120 ячеек, состоящие каждая из сосуда с образцом и реакционной пробирки объемом 5 мл. Объемы проб (10—300 мл) и реагента контролируются стеклянными прецизионными шприцами с пневматическим приводом. Реакционная смесь (4,0—4,5 мл) переносится с помощью зонда (пневматически) в кювету (5 мм) спектрофотометра с малым мертвым объемом и после спектрофотометрических измерений возвращается в исходный сосуд. [c.411]

Для количественных измерений пятно можно удалить с пластинки, вещество элюировать подходящим растворителем, а затем определить его достаточно чувствительным методом, таким, как спектрофотометрическое измерение, либо непосредственно, либо после какой-либо химической реакции. В некоторых случаях количественную оценку также можно провести путем измерения интенсивности пятна с помощью сканирующего денситометра и последующего сравнения этой интенсивности с интенсивностями пятен, полученных со стандартными количествами того же аналогично обработанного вещества. [c.94]

Многочисленные данные были получены по методу, основанному на спектрофотометрических измерениях равновесия реакций продуктов сгорания высокотемпературных пламен с металлами, вводимыми в пламя в виде небольших добавок. Применение этого метода позволило определить энергии диссоциации десятков двухатомных молекул, а также многоатомных молекул гидроокисей и галогенидов металлов [3]. [c.10]

При определении Do (ВаО) на основании данных по реакций образования ВаО получаемые значения существенно зависят от принятого в расчете типа основного состояния этой молекулы. Значение, приведенное по данным работ [72, 74, 75, 396], получено для основного состояния Х 2 оно подтверждено результатами измерений методом электронного удара [73]. Расчет по результатам измерения давления пара ВаО менее надежен из-за неточности данных по АЯ (ВаО, тв.) и АЯд (Ва, тв.). В обзоре [76] принимается основное состояние и рекомендуется Do = 131 6. См. также [4, стр. 236]. Спектрофотометрические измерения [118, 119], приведшие к значению —120, содержали ошибки, см. [396]. [c.49]

Некоторые аминокислоты можно анализировать, не подвергая белки гидролизу. Например, содержание триптофана можно определить с помощью метода магнитного кругового дихроизма [4], спектрофотометрическими измерениями восстановленного белка [c.259]

Очевидно, что исчезновение гипохромизма при переходе спираль — клубок, при денатурации, может дать количественную меру а-спиральности белка. Ввиду трудностей, с которыми сопряжены спектрофотометрические измерения в дальней ультрафиолетовой области вблизи 2000 А, этот метод в применении к белкам малоупотребителен. Напротив, он весьма прост и эффективен в случае нуклеиновых кислот при определениях степени спаривания цепей. Длинноволновые электронные полосы поглощения нуклеиновых кислот лежат вблизи 2600 А. Эти полосы, обусловливаемые лл -переходами, характеризуются дипольными моментами, лежащими в плоскостях азотистых оснований. В табл. 5.3 приведены характеристики полос поглощения в спектрах азотистых оснований 71]. [c.288]

Метод основан на реакции полимера с тетрахлоридом титана в метиленхлориде с последуюш,им спектрофотометрическим измерением интенсивности поглощения комплекса при 520 нм. [c.145]

Фотометрические методы нашли широкое применение для определения малых количеств брома в различных состояниях окисления, в особенности Вга, Br и ВгО . В отдельных методах оценивают поглош,ение белого света, но гораздо чаще применяют спектрофотометрические измерения интенсивности видимого или ультрафиолетового монохроматического излучения, прошедшего через анализируемый раствор, которые позволяют повысить чувствительность и специфичность анализа. [c.99]

Существенный недостаток количественных методов анализа тонкослойных хроматограмм, основанных на измерении пропускания света, был связан с нелинейной зависимостью сигнала оптического детектора от количества вещества в хроматографическом пятне. Эта нелинейность обусловлена специфическим законом прохождения света в рассеивающей среде, описываемым уравнением Кубелки — Мунка, и неоднородностью пластины по толщине слоя адсорбента. Последнюю можно учесть, измеряя оптические свойства подложки непосредственно в хроматографическом пятне. Использование двухволнового метода спектрофотометрического детектирования, когда излучение одной волны Л поглощается и веществом, и адсорбентом, а другой волны Лг — только адсорбентом, позволяет выделить сигнал, связанный с поглощением излучения только анализируемым веществом. Дальнейшая обработка сигнала детектора в соответствии с уравнением Кубелки — Мунка позволяет линеаризовать зависимость оптического сигнала от количества вещества в ТСХ. Поглощение света адсорбентом может быть учтено также при спектрофотометрическом сканировании пластины на просвет и отражение. Эти принципы реализованы в лучших современных зарубежных денситометрах — флуориметрах. Менее точным, но более простым решением является линеаризация зависимости сигнал — вещество с помощью двойного логарифмирования (с использованием ЭВМ). В результате этих усовершенствований воспроизводимость результатов в современной количественной ВЭТСХ приближается к 1%. Использование двухкоординатного сканирования в случае эллипсовидных пятен (двумерное размывание зон в ТСХ) и многошагового сканирования пятен неправильной формы (дву- [c.370]

Метод спектрофотометрического титрования основан на последовательном измерении оптической плотности раствора в процессе титрования ири заранее заданной длине волны. Если анализируемый раствор подчиняется основному закону светопоглощения и относительная устойчивость образующегося при титровании комплекса достаточно высокая [c.332]

Объем спектрофотометрических измерений существенно уменьшается, если вновь обратиться к методу, иллюстрированному на рис. 2.41. Однако применение этого метода приводит к необходимости использовать при измерении источник с относительным спектральным распределением энергии S (X), идентичным распре- [c.267]

Для определения содержания воды во многих органических растворителях пригоден метод, основанный на спектрофотометрическом измерении поглощения растворов хромовой кислоты, образующейся при взаимодействии воды с дихроматом калия [54] [c.362]

В упомянутой выше статье Рейлли и Кроуфорда впервые была сделана попытка классификации методов спектрофотометрических измерений с точки зрения приемов регулировки спектрофотометра и количества используемых для установки шкалы прибора растворов сравнения. Классификация Рейлли и Кроуфорда включала известные уже способы метод непосредственной фотометрии и метод отношения пропускания , а также два новых варианта — общий метод и метод анализа следов . Ниже приводится эта классификация, дополненная методом полной дифференциальной спектрофотометрии . [c.11]

Методы спектрофотометрического определения производных л-феннлендиамннов, основанные на измерении оптической плотности окрашенных продуктов их окисления — солей Вюрстера [172], обладая высокой чувствительностью, недостаточно точны и избирательны, так как при этом определяются и другие амины, которые. могут присутствовать в топливе. Более точным и объективным, по мнению некоторых исследователей [173], является метод неводного потенциометрического титрования, который был ранее предложен [174] для определения К,К -двухзамещенных-п-фе-нилендиам-инов в резине. Присадку экстрагируют хлорной кислотой в среде ледяной уксусной кислоты. В работе [173] этот метод был использован для определения чистоты /г-фенилендиами-нов. [c.198]

В настоящее время метод остановленной струи широко приме-ляется для решения многих задач химической кинетики установление механизмов химической реакции, определение стадий, лимитирующих протекание реакции обнаружение промежуточных комплексов, определение кинетики ферментативных реакций, установление числа и концентрации активных центров фермента, изучение быстрых конформационны5( переходов в белках и нуклеиновых кислотах. Метод требует быстрой регистрации это единственное существенное ограничение его применимости. Особое внимание при применении метода остановленной струи необходимо уделять тер-мостатированию, так как разница в температурах в кювете наблюдения и растворе смеси реагентов может привести к большим оптическим ошибкам, затрудняющим установление механизма наблюдаемой реакции. Точность определения констант скоростей данным методом примерно такая, как и при обычных спектрофотометрических измерениях кинетики химических реакций. [c.28]

Неизвестные молярные коэффициенты поглощения протони-рованной формы индикатора (енл), его аниона (ед) и раствора (е), содержащего обе формы, определяют из данных спектрофотометрических измерений. Значения pH растворов находят с помощью стеклянного электрода. Для повыщения точности определения /Сн1п значения pH растворов задают близкими к искомому значению кажущейся константы диссоциации индикатора. Эта величина может быть найдена методом сравнительной колориметрии, который дает ее приближенное значение. [c.662]

Структуру свеженапыленных пленок молибдена и ванадия, а также отожженных при температурах 600, 900, 1150° С исследовали методом поглощения света в области длин волн 350 —500 нм в случае молибденовых пленок, и 350—580 нм для пленок ванадиевых, а также методом электронной микроскопии. Спектрофотометрические измерения давали также информацию об образовании промежуточных фаз и установлении химических связей металлическая пленка — подложка. [c.16]

Определение белка. Для определения концентрации белка методом Лоури необходимо предварительно осадить его трихлоруксусной кислотой (с. 81). Спектрофотометрическое измерение можно проводить при условии, когда из раствора фосфорилазы удален АМФ, при этом отнощение Л260М280 равно 0,52—0,55 для расчета используют коэффициент А ° 1см= 13,2 при 280 нм. [c.221]

Определение белка. Для определения концентрации фосфоглюкомутазы используют метод Лоури (см. с. 81). При спектрофотометрическом измерении регистрируют оптическую плотность при 278 нм, учитывая, что Л °А1см=7,0. [c.228]

Принципы работы с этими оптическими метками во многом те же, что и с радиоактивными метками, за исключением того, что метод детектщ)Ования включает спектрофотометрическое измерение. Однако большинство прямых методов с колориметрической меткой, когда длины волн возбуждения и детектирования совпадают, редко достигают высокой чувствительшсти в иммунном анализе. Но можно получить улучшение на порядок величины, разделив эти длины волн. Существует дна основных класса меток, пригодных для этого флуорофоры и хемилюминесцеитиьш реагенты. [c.585]

Весьма интересен метод приготовления Pu(V), предложенный Маркиным и Мак-Кеем [536] и основанный на быстром установлении равновесия между ионами плутония по реакции (22) (стр. 55). Равные объемы растворов Pu(VI) и Pu(lII) в 0,2 М HNO3 с концентрацией каждого компонента 2 мг/мл смешивают в присутствии 0,1%-ного раствора дибутилфосфата в бензоле. Образующийся в процессе реакции между Pu(Vl) и Pu(lll) четырехвалентный плутоний экстрагируется в органическую фазу, а пятивалентный плутоний остается в водном слое. Pu(Vl) и Pu(lll) полностью превращаются в Pu(IV) и Pu(V) благодаря выводу Pu(lV) из системы. Как показали спектрофотометрические измерения, после 15-минутной экстракции в водной фазе оставался только Pu(V). [c.67]

Кроме того, воспроизводимость и правильность анализа зависят от содержания примеси и характера ее спектра поглощения, от правильного выбора аналитических длин волн и, наконец, от погрещностей спектрофотометрических измерений. Поэтому воспроизводимость и правильность анализа данной конкретной смеси каким-либо методом можно установить лищь специальным исследованием. [c.115]

После разделения составных частей положение бесцветных веществ может быть определено -путем обработки злек-трофореграмм. реактивом, который переводит их в окрашенные или флуоресцирующие производные. Для количественных целей пятно (зона) может быть тщательно выделено, вещество элюировано подходящим раствор.ителем и затем определено непосредственно или после химической реакции достаточно чувствительным методом, таким, как спектрофотометрическое измерение. По другой количественной методике после (превращения вещества в окрашенное производное интенсивность зоны можно измерить при помощи сканирующего денситометра. [c.115]

Очевидно, что йсчеяновение гипохромизма при переходе спираль — клубок может дать количественную меру а-спи-ральности белка. Ввиду трудностей, с которыми сопряжены спектрофотометрические измерения в далекой ультрафиолетовой области вблизи 200 нм, этот метод малоупотребителен при изучении белков. Напротив, он прост и эффективен для нуклеиновых кислот, длинноволновые полосы которых лежат вблизи 260 нм. [c.144]

Ацетонитрил очень удобен для обращенно-фазовой хроматографий, сочетает низкую вязкость и хорошую растворяющую способность. Продажный ацетонитрил, не предназначенный специально для жидкостной хроматографии, как правило, содержит примеси, затрудняющие работу с УФ-детектором при малых длинах ВОЛН Простой способ очистки, дающий растворитель, пригодный для большинства целей, заключается в следующем. Один объем ацетонитрила смешивают с одним объемом воды и трижды экстрагируют гексаном- порциями по.0,2 объема. Гек-сано вые экстракты отбрасывают, водно-ацетонитрильную фазу перегоняют с дефлегматором. При 75—77 °С отгоняется азеотроп-ная смесь ацетонитрил — вода, содержащая около 84% ацетонитрила. Концентрацию ацетонитрила можно уточнить (например, методом ГЖХ) после, чего полученную смесь используют для приготовления подвижных фаз. Спектрофотометрические измерения показывают, что основная часть УФ-поглощающих примесей отделяется на стадии экстракции. Додолнительные количества примесей отгоняются в виде азеотропных смесей с водой при 70—75 °С. - [c.296]

Механизм реакций [609], протекаюш их при определении фосфатов в виде восстановленной ФМК, изучен путем прецизионных спектрофотометрических измерений. Природа фосфорномолибденовой сини, полученной при восстановлении тиомочевиной [312], исследована экстракционно-фотометрическим методом. Состав восстановленной ФМК зависит от условий восстановления, а главным образом от природы восстановителя [80]. Авторы [80] для восстановления ФМК применяют смешанный реагент, содер-жаш ий Мо(У1) и Мо(У) или аскорбиновую кислоту с антимонил-тартратом калия. Лучшим из них является последний. Окраска развиЕР тся при комнатной температуре и устойчива во времени. [c.47]

Метод молекулярной абсорбщюнной спектроскопии в УФ- и видимой областях спектра обычно называют спектрофотометрией. Объектом спектрофотометрических измерений, как правило, являются растворы. Фотометрируемый раствор помещают в кювету — сосуд с плоскими параллельными прозрачными гранями. [c.267]

Дифференциальная сне1сгрофотометрия. Методы дифференциальной спектрофотометрии позволяют улучшить точность спектрофотометрических измерений. Поэтому данные методы называют также прецизионными. Они основаны на использовании растворов с известной концентрацией для установки нулевого и 100%-го пропускания регистрирующего прибора. [c.276]

Существенное практическое значение, по-видимому, принадлежит методу количественного определения колхицина и колхамина, сочетающему тонкослойную хроматографию на закрепленной (гипс) окиси алюминия со спектрофотометрическим измерением поглощения при 250 нм. Элуент для хроматографии - смесь хлороформ-метанол [c.106]

Спектрофотометрическое титрование. Метод спектрофотометрического титрования основан на измерении оптической плотности исследуемого раствора в процессе титрования, обусловленного ба-тохромным или гипсохромным сдвигом максимума поглощения в спектрах исследуемых веществ в процессе ионизации (рис. 19). Готовят раствор исследуемого вещества с концентрацией [c.68]

Принцип метода. Спектрофотометрическое определение Si02 в щелочнщ силикатных растворах основано на измерении интенсивности желтого комплекса -кремнемолибденовой гетерополикислоты, который образуется в результате взаимодействия мономерной кремневой кислоты Si (ОН) 4 с молибдатом аммония а кислой среде по реакции [c.148]