Спектрофотометр для хроматограмм

Существуют быстро сканирующие спектрофотометрические детекторы, которые позволяют снять УФ-спектр вещества при его прохождении через кювету без остановки потока. Один из наиболее удачных детекторов такого типа используют в хроматографе Милихром , в котором с помощью зеркала, поворачивающегося по заданной программе на определенный угол с заданной частотой, кюветы с образцом и сравнительная кювета освещаются последовательно монохроматическими лучами с выбранными оператором различными длинами волн. Получаемая при этом хроматограмма, представляющая собой комбинацию из двух, трех или более хроматограмм, снятых при разных длинах волн, позволяет получить качественную информацию о возможных примесях, замаскированных в одном пике, о природе и структуре вещества, о длине волны, при которой поглощение данного вещества максимально и можно определить его минимальное количество. Эта информация часто позволяет по одной хроматограмме решить сразу несколько достаточно сложных задач обнаружить примеси, установить чистоту веществ, определить длину волны, при которой поглощение каждого вещества наибольшее, провести идентификацию. Работать с таким детектором, конечно, сложнее, чем с простым спектрофотометром. [c.152]

Прямая спектрофотометрия на хроматограммах в тонком слое [c.275]

Для целей прямой спектрофотометрии хроматограмм в тонком слое Цейсс совместно с Шталем и Джорком сконструировали спектрофотометр для хроматограмм (рис. 1). [c.117]

По методу Уайта [39] моносахариды, разделенные хроматографией на бумаге с растворителем н-бутанол—уксусная кислота—вода (5 2 1), идентифицировали спектроскопически. Для этой цели сахара элюировали с хроматограмм водой, к упаренным элюатам добавляли по 400 мг бромистого калия и полученные смеси выдерживали в течение 2,5—3 ч при частом перемешивании. Высушенные порошки гомогенизировали, прессовали в таблетки и анализировали в спектрофотометре системы Перкин — Эльмер. Для контроля использовали водные растворы чистых сахаров. [c.74]

Спектрофотометрия. Предварительно было изучено спектрофотометрическое поведение чистого серпентина. Измерение светопоглощения производили на спектрофотометре СФ-4 при длине волны 308 нм. Было установлено, что в пределах концентраций серпентина 4—14 мкг/мл наблюдается линейная зависимость поглощения от концентрации. Спектрофотометрическое определение серпентина в элюате из пятна хроматограммы мы проводили в тех же условиях, пользуясь калибровочным графиком. [c.239]

Зная концентрацию исходного вещества в объеме, нанесенном на хроматограмму (обычно 0,01 мл), нетрудно рассчитать процентное содержание исследуемых веществ в смеси. Широко распространен также анализ полученных растворов при помощи спектрофотометра, что значительно сокращает сроки проведения исследования и дает точные результаты, [c.25]

Бумажную хроматограмму можно преобразовать в график оптического поглощения, измеряя прохождение света определенных длин волн непосредственно через бумагу. Для этой цели было сконструировано несколько специальных фотометров, а также бумагодержателей к- обычным спектрофотометрам. [c.258]

Наибольшее распространение имеет метод фронтального анализа. Собирая последовательно в отдельные приемники одинаковые порции фильтрата, вытекающего из колонки, получают так называемую жидкостную хроматограмму. Собранные порции фильтрата подвергают количественному анализу обычными химическими или физико-химическими методами. Непрерывный анализ фильтрата в проточных кюветах методами рефрактометрии, спектрофотометрии, радиометрии и т. п. позволяет быстро получить данные о разделении смеси. [c.316]

Для анализа сложных смесей часто объединяют устройства сепаратора и анализатора. Например, составляющие раствора разделяют в хроматографической колонке и регистрируют отдельные пики хроматограммы с помощью регистрирующего ультрафиолетового спектрофотометра. Другим стандартным устройством является объединение газового хроматографа с масс-спектрометром. Эта комбинация была усовершенствована добавлением многоцелевой ЭВМ. Можно надеяться, что в ближайшее время можно будет программировать анализ так, чтобы ЭВМ выдавала в отпечатанном виде химическую структуру отдельных веществ, выделенных из исходного образца. К эмиссионным спектральным приборам с непосредственной выдачей результатов (в ультрафиолетовой и рентгеновской областях спектра), масс-спектрометрам и газовым хроматографам можно подсоединять ЭВМ небольших размеров, которые преобразуют сигнал прибора непосредственно в процентный состав пробы. В состав новых приборов для исследования структуры, таких, как инфракрасные спектрометры и приборы для измерения дисперсии оптической активности, входят небольшие ЭВМ, которые представляют сигнал детектора в виде графиков стандартного типа. [c.539]

Приготавливают полоски хроматографической бумаги с окрашенными зонами метилового тимолового синего с лантаном и на спектрофотометрах СФ-10 или СФ-14 снимают спектры отражения цветных зон относительно хроматографической бумаги с зоной чистого реактива той же концентрации. Для получения однородной окраски пятен хроматографическую бумагу погружают в раствор реактива в растворителе, не обладающем хроматографическим эффектом. Построив калибровочный график коэффициент отражения — концентрация по цветным зонам с известным содержанием лантана (рис. 73), определяют неизвестное количество лантана на исследуемой хроматограмме. [c.161]

Большую ценность представляет информация относительно современных технических средств и способов сканирования хроматограмм на бумаге и в тонком слое, в том числе и хроматограмм радиоактивных веществ. Описаны денситометры и сканирующие устройства, включающие спектрофотометр, для сканирования хроматограмм в видимой, ультрафиолетовой областях и для флуориметрических измерений. [c.6]

Хроматограмму после высушиванкя просматривают в УФ свете, отмечают на хроматограмме зону, соответствующую берберину, и соскабливают этот участок сорбента скальпелем а колбу вместимостью 25 мл, Берберин 4 раза элюируют 0,1 рь при нагревании в течение 1 мин на водяной бане. Кислоту отмеряют с помощью бюретки первый раз 4 мл, а затем три раза по 2 мл. Полноту элюирования определяют по отсутствию флюоресценции силикагеля в УФ свете. Элюат каждый раз сливают декантацией в другую колбу вместимостью 25 мл. Для удаления следов силикагеля обт единенный элюат центрифугируют в течение 5 мин (1000 об/мин). Оптическою плотность элюата измеряют на спектрофотометре СФ-4А на фоне контроля при длине волны 345 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Контролем служит элюат чистого силикагеля с той же пластинки, снятый с площади, равной площади пятна берберина. Процентное содержание берберина в образце х рассчитывают на абсолютно сухую массу сырья в пересчете на бисульфат берберина [c.161]

Рис. 8.12. Диаграмма интегратора и настольной ЭВМ для подсчета стандартного отклонения, а также хроматограмма повторного сканирования одного и того же пятна (80 нг вещества) (к = = 275 нм) по методу отражения для определения воспроизводимости работы спектрофотометра Opton КМ 3.

ИК-спектроскопию можно применять совместно с другими видами хроматографии. Из-за малого количества образца трудно использовать ИК-спектроскопию для идентификации веществ, разделенных методом тонкослойной хроматографии. В качестве такого приема предложено переносить адсорбент с пятном с хроматограммы и экстрагировать вещество, но толщина слоя адсорбента делает эту операцию сомнительной / [25]. Подход in situ описан Гриффитсом и сотр. [44, 94]. Они сообщили, что с помощью фурье-спектрометра обнаружено 1-10 мкг адсорбированных пестицидов. Адсорбент (силикагель или оксид алюминия) нанесли на подложку из Ag l толщиной 100 мкм. После хроматографирования образца пятна проявили в парах иода. Затем пластинку поместили в спектрофотометр и на область пятна направили свет от источника с помощью конденсора (4 X). Усреднение проводили по 400 сканированиям с раз- [c.115]

Предварительно снимают на спектрофотометре абсорбционные кривые для чистых многократно перекристал-лнзованных до получения постоянной температуры плавления веществ (стандарт), пользуясь этими кривыми при расчете содержания Р-витаминных веществ в хроматографированном материале (желательно иметь наряду с этим контрольную хроматограмму со стандартными веществами). [c.289]

Поглощение в УФ-свете. Пуриновые и пиримидиновые производные в УФ-свете проявляются в виде темных пятен на слегка флуоресцирующем фоне бумаги. Это наиболее чувствительный метод обнаружения (1 мкг), он позволяет локализовать вещество без химической модификации. Следует защищать глаза от действия УФ-света. Локализацию веществ на хроматограмме можно наблюдать визуально или фотографировать контактным методом. Если в качестве растворителей использовались фенол или коллидин, их следует сначала удалить многократным промыванием эфиром. В случае барбитуровых кислот используют предварительное опрыскивание 0,5 М NaOH. Чтобы увеличить фоновую флуоресценцию, а следовательно, и контрастность, можно использовать опрыскивание 0,005%-ным флуоресцеином в 0,5 М растворе NHj. Однако это не рекомендуется делать, если вещество предполагается элюировать с бумаги для последующей спектрофотометрии. [c.412]

Высокое качество разделения в КТСХ можно также объяснить большим градиентом концентрации вдоль пути разделения, т. е. наличием диффузии в направлении разделения. Это означает, что при хорошем качестве разделения локальная концентрация нанесенного веш ества не должна уменьшаться (см. разд. 3.4.2). В связи с этим облегчается количественная оценка, поскольку возрастает соотношение сигнал/шум, что подтверждается экспериментально. Для сканирования дуги зоны веш,е-ства в круговой ТС-хроматограмме был изготовлен диск, враш ающийся со скоростью 2 или 6 об/мин с помощью синхронного двигателя со встроенным редуктором. Сканирование проводили на спектрофотометре фирмы Ор1оп . Если узкий луч, сфокусированный входной апертурой, навести на область, отстоящую на определенное радиальное расстояние от центра пластинки, то за один оборот диска можно подсчитать все вещества с этилт значением Т / при нанесении нескольких веществ одновременно т. е. фотометрически определить их количество, произвести соответствующим образом необходимые операции суммирования и сравнения. [c.86]

Воспроизведены эскиз ТС-хроматограмыы, фрагмент диаграммной ленты интегратора и хроматограмма регистратора спектрофотометра. [c.207]

Все виды количественного детектирования ТС-хроматограмм можно выполнять на спектрофотометре фирмы Opton КМ З(ФРГ), конструкция которого удовлетворяет всем перечисленным требованиям (рис. 8.26). [c.209]

Количественное определение веществ после хроматографичес кого разделения проводится денситометрически непосредственн на хроматограмме либо после элюирования. В последнем случа пятна вырезают и после измельчения извлекают определяемо вещество из бумаги каким-либо подходящим растворителем. Сс держание анализируемого вещества в извлечении или сухом ос татке после отгонки растворителя находят любым методом, при годным для определения малых количеств (спектрофотометрия Полярография и т. д.) [c.212]

Для количественной оценки хроматограмм в тонких слоях использовался также так называемый метод фотопринта. После разделения пятна окрашивали и затем делали прозрачным сорбционный слой, обработав его соответствующим растворителем. После этого готовили светокопию, которую разрезали на соответствующие полоски и промеряли спектрофотометром. В этом методе, кроме наличия контрастных полос и постоянства в процессе анализа окраски пятен, предполагается также, что прозрачность сорбционных слоев может быть достигнута без повреждения пятен. Поэтому этот вид количественной оценки хроматограмм имеет ограниченное применение. Он был использован Хефенделем [12] для определения содержания ментофу-рана в масле перечной мяты. И в этом методе желательно для каждой хроматограммы строить отдельную калибровочную кривую. [c.57]

Кроме того, следует отобрать равномерно покрытые пластинки и выполнить все предварительные условия, обеспечивающие постоянную скорость движения фронта растворителя (см. стр. 35). Этот метод был использован для разделения и количественного определения эстрона, 17 -э тpaдиoлa и 16а, 17 -э тpиoлa [36] (ср. табл. 3 и стр. 258). Чтобы уменьшить попадание окрашивающего реактива (12%-ной треххлористой сурьмы) на закрытую хроматограмму, не проводят опрыскивание, а наносят раствор реактива на пресс-папье, покрытое фильтровальной бумагой, и накатывают его на направляющую хроматограмму. С анализируемой хроматограммы соскабливают зоны при соответствующих значениях Rf, экстрагируют и проводят количественное определение методом УФ-спектрофотометрии. [c.64]

Бертрам и Кобищ [71] проводили работу по качественному и количественному определению ароматических полициклических соединений методами спектрофлуорометрии или спектрофотометрии непосредственно пятен на бумажных хроматограммах без предварительного элюирования. [c.129]

Исследование вещества на слое может быть выполнено путем измерения только площади пятна или, лучше, интегрированной площади и плотности пятна на проявленной и обнаруженной хроматограмме или на ее фотокопии или фотографии. Эти величины затем связывают с количеством вещества в пятне, используя стандарты и калибровочные кривые. Для образцов и стандартов, хроматографированных одновременно, эти измерения можно сделать при визуальном сравнении, путем измерения площадей, с помощью денситометрии, флуори-метрии, спектрофотометрии и методом меченых атомов. [c.168]

В отличие от флуориметра Turner (см. гл. 5) спектрофотометр для хроматограмм подходит как для флуоресцентных, так и для абсорбционных измерений. Спектры возбуждения и флуоресценции могут быть получены раздельно, как уже указывалось. Подобные эксперименты выполнены Зайлером и др. [7]иСавицки и др. [8—10]. Такое применение эквивалентно качественному и количествепному определениям. Оценка поглощения флуоресценции слоями сорбента может быть выполнена на установке, сконструированной почти таким же образом. [c.120]

Характеристики хроматографически разделенных зон были получены путем регистрации кривых поглощения или флуоресценции непосредственно с тонкослойных пластинок на спектрофотометре для хроматограмм. [c.128]

Типичная хроматограмма смеси 2,4-динитрофенилгидразонов показана на рис. 28. После проявления пятна вырезают и элюируют 5%-ным раствором КОН в метиловом спирте. Оптическую плотность растворов измеряют на спектрофотометре СФ-4 при длине волны 480 ммк. [c.45]

Элюция и спектрофотометрия. Слегка подсушенные хроматограммы просматривают на ультрахемископе и отмечают простым карандашом пятна оснований. Элюцию пятен проводят [c.103]

Основное внимание было обращено на динамику состава флавонолов володушки золотистой, произрастающей на Алтае, в районе Курайского хребта. Содержание флавонолов определяли методом количественной хроматографии на бумаге. Калибровочные кривые составляли для гликозидов по рутину, для агликонов — по кверцетину. Измерения проводили для гликозидов при 420 для агликонов — при 375 ммк. Использовали систему уксусная кислота — муравьиная кислота — вода (10 Г2 3), проявляли 10%-ным раствором А1С1з. Участки проявленных хроматограмм элюировали этанолом и определяли количество флавонолов, пользуясь универсальным спектрофотометром 8X1-1 (ГДР). [c.182]

Спектрофотометр для хроматограмм в тонком слое сконструировал Цейс совместно с Шталем и Джорком. Детальное описание прибора читатель сможет найти в работах [60, 61 ]. Конструкцией прибора предусмотрено поглощение постоянно излучаелюй энергии либо фактического излучения от вещества. Так, оценка разделенных пятен или зон на тонкослойных пластинках южeт быть сделана измерением проходящего нли отраженного света, а в случае флуоресцирующих веществ— измерением флуоресценции, причем чем больше количество вещества в пятне, тем меньше степень отражения. С целью уменьшения помех со стороны внешних факторов на той же самой пластинке во время хроматографического опыта наряду с образцом испытывается стандартное вещество. По показаниям степени отражения строят соответствующие калибровочные кривые. [c.275]

Следовательно, этот метод можно с успехом использовать для санитарно-химического анализа — для определения количеств всех веществ, разделенных на тонкослойных пластинках, которые поглощают ультрафиолетовый свет, посл1е построения соответствующих калибровочных кривых. Чувствительность вышерассмотренного метода в 10 раз больше, чем чувствительность метода элюирования. Этот метод также намного быстрее. Качественные характеристики хроматографически разделенных зон могут быть получены путем регистрации кривых поглощения или флуоресценции непосредственно с тонкослойных пластин на спектрофотометре для хроматограмм. [c.276]

Особый интерес представляет способ количественного определения меди, кобальта и никеля непосредственно на хроматограмме в виде рубеанатов этих металлов с применением отражательной фотометрии на спектрофотометре СФ-10, предложенной для анализа воздушной среды [96]. [c.283]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология