Детектирование, количественная оценка

Детектирование, количественная оценка [c.85]

В то время как в КЖХ хроматографическая система жестко связана с детектором, в ТСХ разделение проводят Б камере независимо от типа детектора. В связи с этим ТСХ является более гибким методом для решения разнообразных задач разделения и для разработки новых методик. Показания фотометрической детектирующей системы в ТСХ обычно не зависят от состава элюента. Жидкостную колоночную хроматографию целесообразно использовать в лаборатории для однотипных анализов, тогда как ТСХ с последующим фотометрическим детектированием — в лабораториях, где имеют дело с самыми различными задачами разделения. Для количественной оценки хроматограмм пригоден только фотометрический метод , поскольку даже опытный оператор при визуальном определении допускает ошибку не менее 10%. Дополнительным приемом при проведении количественного детектирования является удаление пятна вещества вместе с сорбентом с подложки. После этого проводят жидкостное извлечение вещества из сорбента. Количественное определение поглощения или флуоресценции раствора осуществляют с помощью фотометра [1]. Широкому распространению этого метода мешает ряд препятствий. [c.174]

Операция анализа методом ТСХ включает следующие стадии 1) подготовку пробы 2) подготовку пластины 3) нанесение образцов 4) подготовку хроматографической камеры 5) элюцию (проявление, развитие) хроматограммы 6) удаление элюента с пластины 7) детектирование (визуализация) 8) идентификацию 9) количественную оценку 10) документацию. [c.337]

Однако из-за несовершенного детектирования границ пятна эта зависимость не всегда выполняется. Поэтому количественная оценка может быть проведена только прямым сравнением с серией эталонных растворов, которые обычно наносят на одну пластину с исследуемыми образцами. Строят графическую зависимость в координатах л/ —Я по эталонным образцам и по ней определяют количество неизвестного образца. Было показано, что формула справедлива только при небольшой разнице в количестве вещества в исследуемых зонах (при значительном различии коэффициенты пир перестают быть постоянными). Для более точного определения границ зоны целесообразно использовать фотографии тонкослойных хроматограмм на сверхконтрастных фотоматериалах с последовательной многократной фотопечатью (поскольку при этом для фотографического процесса контрастность изображения резко увеличивается). [c.369]

В итоге можем сделать вывод, что детекторы с металлической нитью обеспечивают более широкий рабочий диапазон температуры, чем термисторы. Для тех и других элементов нижний предел детектирования с повышением температуры увеличивается и соответственно величина pQo уменьшается. Влияние высоких температур на предел линейности Ql, вероятно, колеблется в широких пределах для различных веществ и трудно поддается количественной оценке. [c.314]

В результате сравнения двух рассмотренных методов детектирования можно было сделать следующие заключения если фоновый ток, являющийся характеристикой детекторов, не изменяется, то основное преимущество дифференциального метода регистрации заключается в том, что при этом методе отсутствует влияние на результаты тех параметров, которые могут подвергаться изменениям во время анализа, а именно температуры, давления и, в частности, расхода газа-носителя. Кроме того, даже при неполном разделении компонентов на колонке можно сделать количественную оценку по высотам пиков. С другой стороны, интегральные методы регистрации позволяют провести более простые и точные количественные определения по хроматограммам, если компоненты хорошо разделены. Факторами, ограничивающими чувствительность и разрешающую способность дифференциального метода, являются уровень шумов и постоянная времени системы. В интегральном методе ограничивающим фактором является величина остаточного тока. [c.105]

Таким образом, 8 линейно зависит от lg q. Однако для тонкослойной хроматографии это правило, по-видимому из-за несовершенного детектирования границ пятна, не всегда выполняется. Поэтому количественная оценка может быть проведена только прямым сравнением с серией стандартных растворов. Для этого Зеер [18] предложил следующий метод стандартный объем определяемой смеси веществ наносится в виде точек через определенные интервалы на слой силикагеля. Между этими точками наносятся стандартные объемы ряда эталонных растворов различной концентрации. После развития и проявления хроматограмм приготовляют контактную фотографию пластинок. На ней измеряют площади соответствующих пятен и строят по эталонным растворам графическую зависимость измеренных площадей от количеств вещества. Из полученного графика находят содержание вещества в определяемой смеси. [c.303]

Развитие ТСХ, в том числе с использованием инструментальных методов, нашло отражение в значительном количестве публикаций. Известно несколько фундаментальных обзорных монографий [2—6], подробных библиографических указателей по ТСХ [7—10] и справочников [11—12]. К настоящему времени накопилось много экспериментальных и теоретических данных, касающихся всех областей применения и направлений развития ТСХ. Несмотря на это, в литературе нет полного обзора по инструментальным методам количественной оценки тонкослойных хроматограмм. Известны лишь обзоры по отдельным разделам количественного детектирования, носящие частный характер и не дающие общей картины современного состояния этой области науки. [c.6]

Количественный анализ в ТСХ складывается из нескольких этапов введения пробы в тонкослойную хроматографическую систему, разделения компонентов на тонком слое сорбента, качественной и количественной оценки результатов анализа. Количественное детектирование может быть одностадийным (например, с использованием оптических, ядерно-физических, электрохимических методов) и двухстадийным. В последнем случае анализируемые вещества либо переводят в газовую фазу и затем количественно оценивают образовавшиеся газообразные продукты газовыми детекторами, либо извлекают их из сорбента с помощью растворителей и затем определяют одним из инструментальных методов. При исследовании сложных смесей органических и неорганических веществ перспективно [c.6]

Метод детектирования в ТСХ в помощью газовых детекторов складывается из двух этапов перевода анализируемых веществ с тонкого слоя сорбента в газовую фазу и количественной оценки полученных смесей газовыми детекторами. Основные характеристики некоторых наиболее распространенных газовых детекторов приведены в табл. IV. . [c.57]

Электрохимические методы не применяются пока широко в лабораторной практике для количественной оценки тонкослойных хроматограмм, но со временем, по-видимому, они будут использоваться наравне с оптическими п ядерно-физическими методами детектирования. [c.116]

Ядерно-физические методы детектирования характеризуются высокой чувствительностью п хорошей воспроизводимостью. С помощью меченых соединений можно эффективно оценивать хроматографические методики. Ядерно-физические методы детектирования можно использовать применительно к радиоактивным веществам. Для количественной оценки нерадиоактивных веществ в их состав нужно вводить радиоактивные метки или превращать эти вещества в радиоактивные. Ряд разновидностей описываемого метода, например ауторадиография, требует значительных затрат времени в связи со статистическим характером радиоактивного распада. Сорбенты, растворители, материалы подложек и самих детекторов не должны содержать радиоактивных веществ. В ряде случаев возможно разложение самого анализируемого вещества (радиолиз) под воздействием элементарных частиц. [c.119]

Листовые варианты хроматографии — бумажная и тонкослойная хроматография — обладают общими преимуществами по сравнению с колоночным вариантом хроматографии [41, 55, 381] экспрессностью, простотой осуществления процесса и отсутствием необходимости дорогостоящего оборудования, возможностью разделения и идентификации субмикрограммовых количеств смесей веществ, универсальностью (вследствие возможности варьирования выбора сорбента, особенно в случае тонкослойной хроматографии, тех), простотой детектирования разделенных зон на хроматограмме, возможностью быстрой количественной оценки содержания элементов в зонах различными высокочувствительными методами и др. [c.165]

В этом разделе рассмотрены методы детектирования и количественной оценки ПАУ путем получения флуоресцентных и фосфоресцентных спектров поглощения в ультрафиолете. Спектрометрия до сих пор является единственным методом количественного определения, на практике доказавшим свои большие возможности для исследования простейших смесей ПАУ, получаемых в результате адсорбционной жидкостной хроматографии сложных смесей, содержащихся в экстрактах воздушных загрязнений. Попытки использовать такие классические методы анализа, как определение температур плавления или коэффициентов преломления, не увенчались успехом из-за невозможности, в большинстве случаев, получить после хроматографического разделения индивидуальные ПАУ. Определение Rf в жидкостной хроматографии также обычно недостаточно точно. Исключение, вероятно, составляет разделение, проведенное [c.155]

Качественный хроматографический анализ предназначен лишь для определения качественного состава более пли менее известной смеси веществ, которая может содержать самые разнообразные компоненты в самых различных соотношениях. При этом соответствие между сигналом детектора и процентным содержанием введенного вещества не имеет первостепенного значения. Однако в случае качественного анализа также должны быть указаны известные условия, которые со своей стороны оказывают решающее влияние и на количественный результат. Так, например, точность оценки хроматограммы зависит не только от постоянства рабочих условий во время анализа, но и в одинаковой степени от способа детектирования и применяемых регистрирующих приборов, от вида иодачи пробы и, наконец, от самого метода оценки. Поэтому важно остановиться на каждом из указанных факторов. [c.284]

Качество воды. Калибровка и оценка аналитических методов определения качества. Часть 4. Определение пределов обнаружения (детектирования) и пределов количественного определения основным аналитическим методом Качество воды. Определение перманганатного индекса [c.528]

При анализе реакционных веществ целесообразно после хроматографической колонки и перед детектором расположить реактор с целью проведения конверсии реакционноспособных соединений в стабильные простые продукты. Обычно возможно также использовать реакции, в которых на одну молекулу анализируемого соединения образуется несколько молекул стабильного продукта, которые с хорошей чувствительностью регистрируются детектором. Проведение таких химических превращений дает возможность использовать для детектирования стабильные соединения, не загрязняющие детектор, повысить чувствительность детектирования, используя для этой цели несколько последовательных превращений, упростить калибровку прибора и оценку количественных результатов. Например, анализируя летучие гидриды IV—VI групп периодической системы (гидриды кремния, германия, серы, фосфора, мышьяка и т. д.), разделенные соединения в потоке инертного газа-носителя направляют в трубчатый реактор (ЮХ1.5 см), нагретый до 1000 °С. В реакторе гидриды разлагаются до водорода, что позволяет повысить чувствительность и упростить калибровку, проведя ее по водороду. [c.237]

Необходимым условием выполнения измерений является техническое средство измерений, т. е. хроматограф. Особенность измерений, выполняемых при помощи хроматографа, заключается в том, что результаты измерений конкретной смеси зависят не столько от класса точности применяемого прибора, сколько от условий его применения режима хроматографирования и детектирования, предварительной подготовки пробы к измерению и т. д. Эта особенность газового хроматографа как универсального средства измерения состава приводит к практически важным последствиям. Метрологическая оценка прибора становится в известной мере абстрактной. В самом деле, вопрос о том, с какой точностью можно измерить состав при помощи данного хроматографа, не имеет смысла, поскольку границы изменения качественного и количественного составов измеряемых продуктов неизвестны изготовителю приборов. Поэтому метрологические качества газового хроматографа оценивают косвенно по результатам его испытания при измерении состава конкретной смеси и по метрологической оценке отдельных блоков, для которых существуют поверочные схемы и эталоны. Естественно, что при такой оценке средства измерений (сегодня она представляется единственно возможной) высокий класс прибора не гарантирует точности измерений состава конкретной смеси. [c.169]

В ТСХ, помимо детектирующих систем, предназначенных в основном для использования только в этом методе, используют детекторы ГХ, КЖХ и другие детектирующие системы [14—20]. В связи с этим, по-видимому, целесообразно привести универсальные характеристики детекторов, используемых в хроматографии. В связи со спецификой процесса детектирования для описания детектирующих систем в ТСХ практически не применяют характеристики хроматографических детекторов ГХ и КЖХ, хотя для осуществления системного подхода к оценке количественных инструментальных методов в ТСХ это представляется в ряде случаев необходимым. [c.15]

Упомянем также работу, где фракционирование большого числа минорных нуклеозидов с помощью распределительной ТСХ на целлюлозе осуществляли вообще без использования радиоактивных изотопов, проводя визуальное детектирование пятен под УФ-светом. Правда, при этом авторам приходилось наносить на пластинку (в пятне диаметром 1,5 сл1) 2—3 оптические единицы, т. е. около 0,1 мг гидролизата тРНК, а в качестве пластинки пспользовать лист покрытой целлюлозой алюминиевой фольги размером 20 X 50 см, зато приведенная ими картина разделения нуклеозидов содержит около 40 пятен. Количественную оценку (для расшифровки структуры тРНК) проводили по УФ-поглощению элюатов из пятен [Rogg et al., 1976]. [c.495]

В этой главе изложено современное состояние методов количественной оценки компонентов исследуемых веществ на масс-спектрометре с искровым ионным источником. Обсуждаются два способа детектирования ионных токов электрический и фотографический. Несмотря на большую перспективу электро-детекции, наибольшее внимание уделяется рассмотрению свойств и особенностей фотографических эмульсий. Определение аналитических характеристик фотопластинки и учет различных источников погрешностей устранили бытовавшее ранее представление о том, что в ряде случаев большие погрешности результатов относились за счет фотографического метода регистрации. В настоящее время установлено, что погрешности, вносимые непосредственно фотопластинкой, не превышают 3—4% и могут быть снижены в дальнейшем до 1,5—2% при использованги безжелатинных ионочувствительных проводящих [c.106]

Детектирование в ТСХ осуществляют или непосредственно на слое (после окончаиия или в ходе процесса разделения), илп после извлечения анализируемых веществ из сорбента в газообразную или жидкую фазу. В последнем случае количественную оценку производят детекторами, используемыми в ГХ или КЖХ, а также другими инструмента.чьпымп методами, применяемыми для количественного анализа жидких и газообразных смесей. В проточном варианте ТСХ, помимо специфических для ТСХ детекторов, можно использовать практически все детекторы КЖХ. [c.16]

Метод детектирования в ТСХ с исиользованием газовых детекторов для количественной оценки продуктов десорбции и термической деструкции, образовавшихся в результате переноса в зону нагрева анализируемых веществ с частью сорбента из тонкослойной хроматографической системы, во многом сходен с метододг жидкостного извлечения (охарактеризованным в главе III). Описываемый метод впервые был предложен Снайдером [27, 28] для анализа радиоактивных веществ. Преимуществом этого метода является возможность выборочнгого изъятия отдельных зон и исиользование двумерных хроматограмм. В этом способе можно достичь высокой разрешающей способности, так как хроматографическая система и источник пагрева [c.66]

Современные сканирующие оптические детектирующие системы снабжены совершенными интеграторами, самописцами, стабилизаторами и другими вторичными приборами, которые практически не искажают результатов измерений. Правильность результатов оптического детектирования веществ, разделенных на тонком слое сорбента, зависит от параметров детектора, от свойств хроматографической системы и в значительной степени от выбранного способа количественной оценки. Это требует учета большого числа факторов, без знания которых даже правильно силанироваиный и тщательно выполненный эксперимент может привести к значительным ошибкам измерений. [c.82]

Детектирование ТСХ-пластинок с разделенными на них радиоактивными веществами осуществляют различными способами последовательным сканированием хроматограммы по определенной траектории, оценкой радиоактивности отдельных зон непосредственно на слое, отбором части сорбента и перенесением его с пластинки к счетчику. Сканирование дает хорошие результаты при условии, что уровень радиоактивности определяемых веществ достаточно высок. Этот способ испо.льзуют обычно при количественной оценке двумерных хроматограмм. Основным недостатком непрерывного сканирования является потеря чувствительности для -изотопов с низкой энергией, присутствующих в малых количествах на хрома- [c.131]

Использованпе компьютеров стало составной частью создания ВЭТСХ — высокоточного и экспрессного метода аналпза. Для количественной оценки полученных этим методом результатов детектирования предложена специально составленная программа для компьютера [17]. Вычислительные машины позволяют полностью автоматизировать процесс детектирования [17, 18]. Применение ЭВМ в настоящее время стаповится оправданным при необходимости проведения массовых экспресс-анализов сложных хроматограмм с высокой точностью и достоверностью результатов. [c.179]

Кинг с сотр. [85] применяли аналогичную колонку для препаративного выделения остатков (следов) гептахлора и гептахлорэпоксида, экстрагированных ацетоном и затем выделенных петролейным эфиром. Инсектициды элюировали 200 мл 6 /о (объем/объем) раствором диэтилового эфира в петролейном эфире. В обоих описанных методах детектирование и количественную оценку результатов разделения проводили с помощью детектора электронного захвата. [c.290]

Если требуется определить содержание каждого компонента в смеси, то условия анализа должны обеспечивать линейное детектирование и по возможности полное отделение всех ее составляющих друг от друга, поскольку погрешность в измерении площади или другого количественного параметра хроматографического пика хотя бы одного компонента (или приписание ошибочного значения / хотя бы одному компоненту) приведет к неправильной оценке содержания в образце всех составляющих. [c.228]

Высокая чувствительность и четко выраженная специфичность к веществу позволяют с упехом применять метод селективного детектирования ионов для количественного определения примесей в многокомпонентных смесях. Прежде чем приступить к препаративной подготовке исследуемого материала, в него вносят точно известное количество вещества сравнения в качестве внутреннего стандарта, соотнося его концентрацию с ожидаемым содержанием анализируемого компонента. В качестве внутреннего стандарта используют, как правило, соединения высокой изотопной чистоты, многократно меченные стабильными изотопами с разностью по массам но крайней мере на 3 единицы по сравнению с определяемым немеченым соединением, чтобы исключить наложение попарных пиков выбранных изотопных аналогов в одном и том же спектре. Для анализируемого соединения выбирают два характеристических иона (по возможности с интенсивными пиками), которые вместе с соответствующими ионами внутреннего стандарта, меченного стабильными изотопами, образуют две изотопно-массовые пары. Одновременное ион-селективное детектирование изотопно-массовых пар дает четыре сигнала, которые ввиду равенства времен удерживания исследуемого соединения и стандарта проявляются одновременно. Концентрация исследуемого соединения может быть определена непосредственно интерполяцией в выбранной области концентраций из измерения высот или площадей сигналов с учетом линейности ранее построенных градуировочных кривых. При наложении пиков одной из двух выбранных масс в оценке концентраций обоих ионов сразу же отмечаются заметные, существенные отклонения. [c.301]

Оценка результатов хроматографического разделения путем анализа отдельных фракций — процедура относительно медленная, однако очень часто только таким методом можно получить важную специфическую информацию, а если анализируются радиоактивные материалы, то и повысить чувствительность обнаружения, Чаще всего используется автоматическая регистрация процесса разделения детектором, дающим на выходе электрический сигнал, интенсивность которого пропорциональна концентрации анализируемого соединения. Этим же методом можно провести количественное определение. Обнаружение соединений в жидкостной хроматографии проводится различными способами. Мнопие детекторы оценивают различие в характеристике анализируемого соединения и элюента. В частности, этот принцип положен в основу спектрофотометрического детектирования в ультрафиолетовой, видимой и инфракрасной областях. Детекторы неселективного действия измеряют показатели преломления, проводимость или диэлектрическую проницаемость при тщательной температурной компенсации рабочей ячейки и ячейки сравнения. В некоторых типах детекторов растворитель перед вводом соединения в регистрирующий блок удаляется (например, пламенно-ионизационный детектор с подвижной нагреваемой лентой). Конструкция спектрофотометрических детекторов для высокоэффективной жидкостной хроматографии (особенно ультрафиолетового абсорбционного и рефрактометрического детекторов) хорошо разработана. Если для работы с одной колонкой объединяют два детектора, то сначала устанавливают УФ-детектор, а затем рефрактометрический детектор. [c.67]

Параметры количествепной оценки результатов хроматографического разделения на топком слое сорбента тесно связаны с результатами детектирования, которое чаще всего осуществляют оптическими, ядерпо-физическими или электрохимическими методами. Многие параметры количественной ТСХ аналогичны параметрам КЖХ, поскольку в основе обоих процессов лежат одни и те же физико-хилш-ческие зависимости. [c.12]

Оперативная оценка данных детектирования становится возможной нри обработке результатов анализа по определенному многоступенчатому алгоритму с достигающим подчас значительного объема банком исходной информации. Хорошим примером этого может служить установка для ядерно-физического детектирования Кроме-лек фирмы Нумелек (Франция), включающая ЭВМ и позволяющая в тысячи раз быстрее получать точную количественную информацию о тонкослойных радиохроматограммах по сравнению, например, с методом ауторадиографии. Вся информация обрабатывается по специально разработанной программе, поступает в блок памяти и в любой момент может быть получена в цифровом или графическом виде. [c.177]

Результат количественного хроматографического анализа определяется главным образом условиями проведения двух процессов разделения и детектирования. Поэтому перед теорией хроматографии стоят задачи количественного описания обоих процесов, с учетом которого необходимо решать вопросы выбора оптимальных значений параметров опыта и метрологических оценок результатов хроматографических измерений. Однако в существующей литературе по газовой хроматографии основное внимание уделяется процессу, разделения. [c.3]