Протеины обнаружение

Обнаружение по продуктам гидролитического или термического разложения протеинов [c.553]

Протеины гидролизуются сильными минеральными кислотами с образованием более простых продуктов распада, например полипептидов, аминокислот и пр. Триптофан, являющийся компонентом почти всех протеинов, разлагается и дает индол и его про-изводные. Эти амино- и иминосоединения можно обнаружить сплавлением с дихлорфлуоресцеином (стр. 348) или конденсацией с п-диметиламинобензальдегидом. В последнем случае аминогруппы могут образовать окрашенные основания Шиффа. Конденсация индольных оснований, образовавшихся в результате разложения протеинов кислотой, по-видимому, играет главную роль в предлагаемой реакции с п-диметиламинобензальдегидом (см. обнаружение пиррола, стр. 366). [c.553]

Описываемая ниже реакция обнаружения уреазы основана на таком демаскировании никеля. Рекомендуемый прием может выполняться в щелочных растворах. Большие количества аммонийных солей вызывают осаждение диметилглиоксимата никеля из равновесного раствора. Такое же действие оказывают протеины и, конечно, все кислотные вещества, связывающие ионы ОН-. [c.595]

Обнаружение клеев, содержащих протеины [c.677]

В последнее время разработаны очень точные методы хроматографического разделения, позволяющие получать все аминокислоты с выходом, составляющим 99% их общего содержания в белке. Кроме них в составе протеинов могут быть в определенных количествах другие вещества углеводы, липиды, металлы, фосфорная кислота и иные соединения. Целый ряд (еще не менее 20) редко встречающихся аминокислот был обнаружен в различных протеинах в разное время. [c.23]

Наблюдение фигур растекания в некоторых случаях даёт указания на присутствие протеина в растворе непосредственно под монослоем. Это понижает межфазное натяжение между водой и индикаторным маслом, допуская большее растекание масла, так что слой масла утоньшается в тех местах, где в растворе есть протеин. Это проявляется в изменении цвета слоя масла. Протеин может оказаться под монослоем благодаря своему неполному растеканию. В этом лучае он может быть обнаружен в особенности по утоньшению края растекающегося масла, оттесняющего слой протеина. Иногда присутствие протеина под плёнкой обусловливается его вытеснением при сжатии монослоя. Количество вытесненного протеина при различных поверхностных давлениях может служить мерой молекулярного веса. вытесненной части и, следовательно, мерой молекулярной гомогенности лли частичного гидролиза протеина в монослое. [c.509]

Гаммета, обычно невелико. Полный разброс констант скоростей или констант равновесия редко превышает два или три порядка. Такое отличие тривиально по сравнению с отличиями в реакционноспособности, наблюдаемыми в других случаях. Так, фторбензол не реагирует с аминами даже в очень жестких условиях, в то время как 2,4-динитрофторбензол реагирует настолько легко, что он используется для обнаружения свободных аминогрупп в протеинах и полипептидах в водных растворах на холоду. Отношение констант скоростей с данным амином может меняться на много порядков ). Во-вторых, использование соотношения Гаммета при исследовании механиз ов реакций не позволяет сделать определенных выводов, поскольку неизвестно, как связана постоянная р со строением, например, переходного состояния. Сведения о механизмах часто мо сно получить более прямым путем и в более однозначном виде, используя набор незамещенных арильных групп, а не замещенных фенилов, поскольку влияние незамещенных арильных групп легче поддается теоретической интерпретации. Отсюда возникает и третье обстоятельство. Заместители обычно включают гетероатомы в та- ком окружении, когда нельзя пренебречь ролью а-связей. Вместе с тем теоретические исследования систем с а-связями только сейчас начинают достигать того уровня точности, когда их результаты можно использовать для решения химических проблем (см. гл. 10). Когда будет возможно рассматривать молекулы (и переходные состояния) такого типа с той точностью, которая сейчас может быть обеспечена для сопряженных систем, паллиативы вроде уравнений Гаммета потеряют всякий смысл. [c.524]

Каталитический эффект ионов металлов при полярографическом восстановлении известен давно [163], однако лишь недавно он был использован при разработке метода определения таких металлов, как уран и платиновые в количестве нанограммов [163, 164]. Александер и Орт [164] показали, что предел обнаружения следов родия составляет 2-10 моль/л. В настоящее время эта работа распространена на анализ следов сывороточных протеинов с использованием каталитических полярографических волн КЬ (III), а также на определение следов [165, 166]. [c.633]

Для аналогичны - целей предлагается маркирование путем введения электрохимически активных фуппировок, которые легко могут быть определены электрохимическими методами 4]. Достаточно хорошо этот способ иллюстрируют примеры, описанные в работе [106]. При этом в качестве метки служат ионы металлов, образующие комплексные соединения с хелатообразующими реагентами, пришитыми к протеинам. В результате взаимодействия с определяемым компонентом ионы металлов высвобождаются и определяются методом инверсионной вольтамперометрии. Одновременно можно определять несколько компонентов, используя в качестве меток разные ионы. При проведении анализа в капиллярных трубках (объем 70 пл) предел обнаружения достигает 4,6 10 ° моль. Градуировочный фафик линеен в пределах четьфех порядков. [c.299]

M y применяют на кислых супесчаных дериово-подзо-листых, а также на красноземных и торфяно-болотных почвах для предпосевного внесения (или при обнаружении признаков магниевого голодания) под картофель, сахарную свеклу, рожь, овес, гречиху, бобовые, кукурузу, коноплю, просо, чай, цитрусовые и др Дозы внесения в СССР 30-60 кг/га (в пересчете на MgO) Использование М у можно совмещать с известкованием почвы или с внесением в нее др удобрений Применение М у обеспечивает увеличение урожайности с -х культур, а также способствует повышению содержания крахмала в картофеле, сахара в сахарной свекле, витаминов в овощах, протеина в зеленой массе кукурузы и др, а также всхожести семян итд [c.621]

Другая важная задача — выведение трансгенных животных, устойчивых к заболеваниям. Потери в животноводстве, вызванные различными болезнями, достаточно велики, поэтому все более важное значение приобретает селекция животных по резистентности к болезням, вызываемых микроорганизмами, вирусами, паразитами и токсинами. Пока результаты селекщш на устойчивость животных к различным заболеваниям невелики, но обнаде-живающи. В частности, созданы популяции крупного рогатого скота с примесью крови зебу, устойчивые к некоторым кровепаразитарным заболеваниям. Установлено, что защитные механизмы от инфекционных заболеваний обусловлены либо препятствием вторжению возбудителя, либо изменением рецепторов. Вторжению возбудителей, равно как и их размножению, препятствуют в основном иммунная система организма и экспрессия генов главного комплекса гистосовместимости. Одним из примеров гена резистентности у мышей служит ген Мх. Этот ген, обнаруженный в модифицированной форме у всех видов млекопитающих, вырабатывает у Мх -мышей иммунитет к вирусу гриппа А. Ген Мх был вьщелен, клонирован и использован для получения трансгенных свиней, экспрессирующих ген Мх на уровне РНК. Однако данные о трансляции Мх-протеина, обусловливающего устойчивость трансгенных свиней к вирусу гриппа А, пока не получены. Ведутся исследования в целях получения трансгенных животных, резистентных к маститу за счет повышения содержания белка лакто-ферина в тканях молочной железы. На культуре клеток из почек трансгенных кроликов было показано, что клеточные линии, содержащие трансгенную антисмысловую РНК, имели резистентность против аденовируса Н5 (Ads) более высокую на 90 — 98% по сравнению с контрольными линиями клеток. Л. К. Эрнст продемонстрировал также устойчивость трансгенных животных с геном антисмысловой РНК к лейкозу крупного рогатого скота, к заражению вирусом лейкоза. [c.130]

Белки—это высокомолекулярные азотсодержащие органические вещества, молекулы которых построены из остатков аминокислот. Название протеины (от греч. рго1о8—первый, важнейший), по-видимому, более точно отражает первостепенное биологическое значение этого класса веществ. Принятые в отечественной литературе термины белки и белковые вещества связаны с обнаружением в тканях животных и растений веществ, имеющих сходство с белком куриного яйца. В наше время, когда абсолютно достоверно установлено, что наследственная информация сосредоточена в молекуле ДНК клеток любых живых организмов, не вызывает сомнения, что только белки являются теми молекулярными инструментами, при помощи которых реализуется генетическая информация. Без белков, в частности ферментов, ДНК не может реплицироваться, не может самовоспро-изводиться, т.е. лишена способности передавать генетическую информацию. [c.19]

Для открытия кальция в присутствии больших количеств стронция рекомендуется [287] маточный раствор отделить от осадка и кристал.лизовать сульфат кальция на предметном стекле. Минеральные кислоты уменьшают чувствительность обнаружения кальция и способствуют образованию тонких острых игл, расположенных в виде пучков и веерообразно. Прибавление уксусной кислоты и ацетата натрня способствует нормальной кристаллизации. Хлориды алюминия, хрома, железа искажают форму кристаллов (образование мелких прямоугольных четырехугольников) и делают обнаружение кальция невозможным [287, 620). В этом случае исследуемый раствор нагревают с ацетатом аммония. Рекомендуется также для устранения влияния полуторршх окислов каплю исследуемого раствора выпарить и сухой остаток сильно прокалить с серной кислотой до перехода сульфатов в окислы. Из остатка кальций экстрагируют разбавленной соляной кислотой [362]. Мешают обнаружению кальция ионы РЬ +, ВО з [620] п особенно в присутствии формалина. Перед проведением микрокрис-таллоскопической реакции комплексные бораты разрушают кипячением с азотной кислотой или предварительно отделяют кальций с оксалатом, а затем осадок обрабатывают соляной кислотой, и нерастворившийся остаток прокаливают [362]. В присутствии органических веш еств реакцию проводят при pH 3. Протеины удаляют азотной, кислотой. [c.19]

Распространение в природе. В свободном виде азот является главной составной частью во.здуха (78,1 % по объему). В связанном состоянии встречается в форме неорганических соединений, например селитры — натронной NaNOs и калийной KNO3, а также аммиака (продукта гниения). В виде органических соединений азот содержится во всех организмах белковые вещества (протеины и протеиды), нуклеиновые кислоты, конечные продукты обмена веществ — карбамид и мочевая кислота. Обнаружен азот в природных углях. [c.339]

Таллий обнаруживали в образцах крови и мочи методом непосредственного атомно-абсорбционного анализа при концентрациях до 10 мкг/ЮО/мл [300]. Меньшие значения предела обнаружения были достигнуты при использовании экстракции. Берман [301] осаждала протеин в 15 мл крови с помощью 15%-ной ТХА. После этого значения pH оставшегося раствора доводили до величины между 6 и 7,5 и добавляли 1 мл 1%-ного диэтилдитиокарбамата натрия вместе с 2,5 мл МИБК. После перемешивания фазы разделяли, а таллий определяли в органической фазе по эталонным растворам, полученным аналогичным образом. Стандартное отклонение анализов крови составило 3 мкг/100 мл, причем эта величина может быть уменьшена при использовании современных ламп с полым катодом, обладающих лучшими рабочими характеристиками. Образцы мочи обрабатывали аналогичным образом, но для получения меньших значений предела, обнаружения объем образцов увеличивали и, кроме того, не было необходимости осаждать протеины перед экстракцией. Ткань и шерсть растворяли до экстракции в смеси хлорной и азотной кислот. [c.159]

Общий объем жидкости в организме также можно определить по разбавлению инъецированного вещества подобно определению объема плазмы или внеклеточного объема. Для этого используется антипирин или Ы-аце-тил4-аминоантипирин [18—20]. Точность этого метода, однако, также снижается из-за метаболического изменения строения, связывания антипирина протеинами плазмы и аналитического предела обнаружения антипирина. Идеальным средством определения жидкости в организме является вода, меченная тритием (Н 0) [21—23]. [c.320]

Время, предоставленное для растекания, играет существенную роль в обоих методах, причём растекание происходит быстрее при повышении температуры. Для некоторых протеинов и подкладок растекание происходит настолько медленно, что нет впз.можности дождаться предельного растекания. При пользовании методом Гортера имеется риск, что часть протеина, нанесённого в виде капель, проникнет внутрь раствора и не поаадёт на поверхность, а если и достигнет её, то не растечётся в плёнку. При другом методе не исключена возможность отрыва от волокна мелких твёрдых частиц, которые могут оказаться вкрапленными в плёнку и не растечься вследствие давления, оказываемого на них плёнкой. Вероятность такого отрыва частиц, однако, сильно уменьшается, если наносить а волокно не слишком много протеина. Опак-иллюминатор является хорошим средством обнаружения значительных количеств нерастекшегося протеина, но, благодаря малой разности показателей пре- [c.119]

Глэтт и Эллис [56] наблюдали у найлона полосу 4825 см , которую они интерпретировали как составную полосу, обусловленную валентными и деформационными колебаниями ЫН. Она заметно не смещается при переходе от а- к -форме (натуральный шелк поглощает при 4810 сл< ) [49], но она удобна при поляризационных исследованиях (см. ниже). Сходная полоса, обнаруженная при 4580 смг в спектрах найлона и других протеинов и полимеров [53], связана, по-видимому, с колебаниями карбонильной группы. Она не представляет поглощение ЫН, так как отсутствует у полисаркозша, а также и у политена, тогда как в спектре полиметилметакрилата эта полоса находится при 4638 см . Кроме того, ей соответствуют несколько более высокие частоты в спектрах сложных эфиров, и сдвиг полосы, происходящий при переходе от а- к, 3-форме, соответствует сдвигу основной карбонильной полосы. Неориентированная пленка поли-у-метил-/-глутамата, осажденного из муравьиной кислоты, поглощает при 4630 см , тогда как свернутая форма поглощает при 4600 см . [c.275]

Повышение содержания сырого протеина в зерне при удвоении числа хромосом, по-видимому, объясняется кумулятивным действием некоторых генов, участвующих в метаболизме белка [ 18 ]. Формы же кукурузы, у которых при переходе на новый уровень плоидности происходит незначительное увеличение протеина, содержат, по-видимому, меньшее количество подобных генов. В связи с этим представляет интерес обнаружение и изучение на новом уровне плоидности генов, действующих аддитивно и затрагивающих метаболизм тех или иных веществ эндосперма кукурузы. Подобным действием у кукурузы обладает ген yellow (у), I регулирующий содержание каротиноидных пигментов в эндосперме. При удвоении числа хромосом у чисто желтой кукурузы содержание каротина в зерне увеличилось на 40%, в то время как удвоение числа хромосом у белой кукурузы повлекло за собой уменьшение содержания каротина на 19% [24 ]. [c.29]

На рис. 3 изображена хроматограмма экстракта, полученная немедленно после его концентрирования. Полоса 4 является повторением полосы 1 на рис. 2 она приведена в целях сравнения. На полосе 2 для экстракта имеется только одно пятно, соответствующее тиосульфату. После добавления к экстракту смеси хроматографированных выше сенсибилизаторов (полоса 3) наряду с пятном тиосульфата появляются пятна двух других сенсибилизаторов, что указывает на возмол<ность их обнаружения в случае присутствия в экстракте. Это испытание было произведено для обнаружения двух возможных источников ошибок 1) присутствие минеральных солей и протеинов в экстракте могло бы помешать продвижению сенсибилизаторов 2) одновременно с сенсибилизатором могло происходить продвижение какого-либо замедлителя, который мог бы помешать образованию сульфида серебра. Как показывает испытание, эти опасения оказались напрасными. Полоса 1 относится к инертной желатине. Можно видеть, что она не дает пятен сенсибилизаторов. Две последние полосы отнсюятся к аллилизотиоцианату, добавленному к экстракту (полоса 6) или [c.124]

Обнаруженное вещество Мульдер принял за основную часть белковой молекулы. На основании своих опытов он постулировал предсуществование этой группировки в белковой молекуле в неизменном виде. Все многообразие белковых веществ и их производных Мульдер считал результатом соединения этого гипотетического радикала в различных пропорциях с серой или с серой и фосфором. Это основное вещество, входящее в состав белковых тел, ученый назвал протеином (от ядсо-геие — первый) [331] , так как принимал его за главнейшее соединение животных и растительных организмов. [c.31]

Одним из важнейших результатов применения меченых атомов к изучению живых организмов было, как уже указывалось, открытие высокой динамичности процессов распада и ресинтеза жиров, углеводов и белков, ведуш,их к быстрому их обновлению в тканях и органах. В работах Шенгеймера [1061 и других биохимиков это было наглядно показано для жиров и углеводов путем применения дейтерия и изотопов углерода, а для белков, главным образом, путем применения тяжелого азота, радиоактивных изотопов фосфора и серы. При введении в пищу жирных кислот, меченных дейтерием в радикале, этот дейтерий быстро появляется в жирах всех органов и, прежде всего, в жировых запасах, откуда он переходит в другие места. Средняя продолжительность пребывания каждого атома меченого водорода в теле позвоночных близка к двум неделям. При кормлении крыс гидролизатом казеина, содержавшим дейтерий, было установлено, что за три дня обновляется 10% протеинов печени и 25% протеинов мускулов. При кормлении казеином с цитратом аммония, меченным тяжелым азотом, последний через несколько дней был обнаружен почти во всех аминокислотах тела (но не в несинтезирующемся в нем лизине), в креатине мышц, гиппуровой кислоте мочи и проч. Если животное имело бедную белками пищу, то оно усваивало около половины вводимого азота. При нормальной диете, когда животное находилось в состоянии азотного равновесия, усвоение азота уменьшалось, но качественная картина оставалась той же. Столь же быстрое усвоение и распределение азота в организме наблюдается при кормлении глицином, лейцином, тирозином и другими аминокислотами, меченными тяжелым азотом. Азот из пищи особенно быстро усваивается в виде синтезируемых глютаминовой и аспарагиновой кислот. Это, очевидно, связано с быстрым течением открытых А. Е. Браунштейном и М. Г. Крицман реакций энзиматического переаминирования этих кислот с а-кетокислотами, а также с их исключительной ролью в общем обмене аминокислот и протеинов [11]. [c.496]

Термин протеин [рго1оз (греч.)—первый] впервые применен Мульдером в 1838 г. по предложению Берцелиуса. Это наименование было присвоено сложным азотсодержащим органическим веществам, обнаруженным в клетках животных и растений. Белки занимают центральное место в структуре живой материи и играют первостепенную роль в ее функционировании. Химические и физические процессы, составляющие основу жизнедеятельности клетки, катализируются ферментами, а все ферменты — белки. Некоторые белки служат структурными элементами, являются гормонами или переносчиками кислорода, участвуют в мышечном сокращении, другие связаны с генетическим материалом или вовлечены в иммунную систему организма в качестве антител. Кроме того, в количественном отношении белки представляют собой основной материал тканей животных они могут составлять до сухой массы клетки. [c.94]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология