Тест-антиген

Углевод в тест-антигене [c.61]

Любой эффективный диагностический тест должен быть 1) высокоспецифичным в отношении молекулы-мишени 2) достаточно чувствительным для выявления небольших количеств мишени 3) достаточно простым, позволяющим без труда получать однозначные результаты. Существуют два типа методов молекулярной диагностики один основан на сродстве антитела к конкретному антигену, другой - на идентификации специфических нуклеотидных последовательностей с помощью гибридизации или ПЦР. [c.201]

При отсутствии адсорбированных диагностических сывороток или тест-систем на основе моноклональных антител развернутую РА ставят с диагностической неадсорбированной сывороткой для определения вида, серогруппы и серовара неизвестных микроорганизмов (идентификация по антигенной структуре). Такую реакцию проводят по схеме, которая не отличается от схемы развернутой РА для серодиагностики инфекций. [c.61]

Важным аспектом в проведении иммунологических исследований является подбор источников антигенов для выявления противовирусных антител. В доступных коммерческих тест-системах для обнаружения антител IgM vi IgG к вирусу 5-19 используются рекомбинантные антигены — аналоги белков вируса VPX и VP2. Следует отметить, что использование синтетических пептидов снижает чувствительность метода. [c.309]

РИФ проводят со стандартным коммерческим антигеном из убитых токсоплазм. По специфичности эта реакция уступает РСФ, так как у больных с диффузными болезнями соединительной ткани она дает ложноположительные результаты. Диагностическое значение имеет РИФ в титре 1 16 и выше. Вариант этой реакции — PMO-/gM (тест Ремингтона) — позволяет выявить антитела класса IgM, свидетельствующие об остром процессе. Этот тест используется для подтверждения диагноза врожденного токсоплазмоза. [c.358]

Продукты, чья реакция антиген-антитело аналогична природной сыворотке и которая используется для диагностических и терапевтических целей и для иммунологических тестов, должны рассматриваться как продукты этого типа товаров. Они могут быть определены следующим образом [c.252]

Другой специфический полисахарид, так называемый деградированный полисахарид [9], меньшего молекулярного веса, но полностью активный в серологических тестах, можно легко получить из соматического 0-антигена (полисахарид и связанный с ним белок) гидролизом 1 н. уксусной кислотой при 100°. Полисахарид остается в растворе после гидролиза, тогда как другие компоненты антигенного комплекса осаждаются. [c.325]

Выражение достаточно сходными из приведенного выше определения бактериального вида является источником большинства затруднений в классификации бактерий, так как то, что один человек считает достаточно сходным, не обязательно представляется таковым для другого. Однако совершенно очевидно чем больше известно о какой-то группе бактерий, тем более вероятно, что различные исследователи смогут прийти к одной приемлемой схеме классификации. Исторически сложившийся способ характеристики бактерий заключается в качественном описании как можно большего числа фенотипических признаков, основанных на морфологии, структуре, культивировании, питании, биохимии, метаболизме, патогенных и антигенных свойствах и экологии. Рутинные и специальные тесты для выявления многих из этих признаков описаны в гл. 20. Методы нумерической таксономии, приведенные в гл. 21, полезны для количественного определения сходства на основе фенотипических признаков они могут помочь в достижении объективности, которая иногда отсутствует в тех случаях, когда бактерии классифицируют по интуиции. Фенотипическое сходство не обязательно означает филогенетическую связь или родственность (обш-ность происхождения), однако в последние годы появились методы, основанные на гомологии нуклеиновых кислот, позволяющие группировать бактерии по степени их родства. Эти методы, описанные в гл. 22, позволяют сравнивать бактерии по нуклеотидным последовательностям их ДНК или РНК. [c.6]

При иммунизации кроликов таким конъюгатом образуется несколько видов антител, реагирующих как с белком, так и с остатком сульфаниловой кислоты. Наличие антител к сульфанилату можно установить, синтезировав тест-антиген и аналог детерминантной группы — гаптен. [c.23]

Тест-антиген получают, конъюгировав с диазобензол-сульфоновой кислотой другой тирозинсодержащий белок последний не должен иметь сходства антигенной структуры с белком — носителем детерминантной группы, использованным для иммунизации. В избранном нами случае таким белком может быть яичный альбумин. Если при добавлении тест-антигена к исследуемой антисыворотке образуется преципитат, существование антител против сульфаниловой кислоты можно считать доказанным [c.23]

Для точной оценки структуры детерминантной группы синтезируют гаптены. В рассматриваемом примере гаптеном послужит конъюгат тирозина с сульфаниловой кислотой Такой гаптен не преципитирует антител, но, соединяясь с ними, блокирует активные центры. В результате антитела утратят способность взаимодействовать с тест-антигеном. Реакция ингибирования — эффективный метод тестирования антител против простых по химическому строению гаптенов. [c.24]

Вопрос о размере детерминантной группы конъюгированного антигена, вкладе в ее специфичность различных радикалов был изящно проанализирован И. Шехте-ром (I. сЬесЬ1ег, 1970). В качестве антигена использовали конъюгаты белка с олиго-О-аланином (пептиды присоединяли к белку через свободную карбоксильную группу). Реакцию между антителами к поли-О-аланину и тест-антигеном ингибировали с помощью различных по размеру олигопептидов из О- и Ь-аланина. Как оказалось, ингибирующий эффект гаптенов нарастал от ди- к тетра-О-аланнну. Дальнейшее увеличение длины пептида НС усиливало его ингибирующих свойств. Тетра-Ь-ала-нин был совершенно не активен как ингибитор. Эти данные означают, во-первых, что антитела четко различают олигопептиды из право- и левовращающих аминокислот, не имеющие регулярной вторичной структуры. Во-вторых, очевидно, что активный центр антитела соответствует по размеру тетрапептиду. [c.26]

Часто радиоиммунный анализ основан 11а принципе конкуренции меченого антигена с немеченым. Например, требуется установить, содержится ли в изучаемом препарате данный антиген Существует тест-система, состоящая из такого же антигена, меченного радиоактивным г одом, и антител к нему. Исследуемый препарат инкубируют первоначально с антителом, а затем добавляют меченый тест-антиген. Затем иммунный комплекс осаждают либо сульфатом аммония, либо антииммуноглобу-линовой сывороткой. Если радиоактивность в опытной пробе ниже, чем в контрольной (где содержатся только компоненты тест-системы), значит п изучаемом образце содержится антиген, сходный или идентичный радиоме-ченому антигену тест-системы. Тот же метод может быть построен на принципах иммуносорбции с использованием иммобилизованных антител. При этом отпадает необходимость осаждения иммунного комплекса. Методы, основанные на принципе конкуренции, нетрудно выполнить на количественной основе. Именно таким способом могут определяться различные гормоны, причем в количе- [c.261]

Иммуноанализ антител. 1. Антиген в солевом растворе инкубируют на пластиковой подложке или в пробирках, в результате чего небольшое его количество адсорбируется на поверхности пластика. 2. Свободный антиген удаляют путем отмывания. (Подложку затем можно обработать избытком постороннего белка, чтобы предотвратить последующее неспецифическое связывание белков.) 3. Добавляют исследуемые антитела, которые связываются с антигеном. 4. Несвя-завшиеся белки удаляют отмыванием. 5. Антитела определяют при помощи меченого лиганда. Лигандом может служить, например, стафилококковый белок А, который связывается с F -областью IgG чаще используют другие антитела, специфичные по отношению к исследуемым антителам. Применяя лиганд, который связывается с антителами определенного класса или подкласса, можно дифференцировать изотипы антител. 6. Несвязанные антитела удаляют отмыванием. 7. Определяют связавшуюся метку. Типичная кривая титрования представлена внизу. С повышением количества антител интенсивность сигнала возрастает линейно от фонового значения до уровня плато. Титр антител можно определить правильно лишь в линейной области. Уровень плато, как правило, в 20-100 раз выше фонового. Чувствительность метода обычно составляет приблизительно 1-50 нг специфических антител в 1 мл. Специфичность метода можно проверить, добавив свободный тест-антиген в повышающихся концентрациях к исследуемым антителам на зтапе (3). Антиген связывается с антителами и блокирует их соединение с антигеном, фиксированным на подложке. Добавление возрастающих количеств свободного антигена снижает интенсивность сигнала. [c.534]

Выполнение работы включало три основных этапа I) направленный синтез высокоспецифических реагентов, являющихся основой получения коньюгатов антигенов, и последующая наработка иммуноспецифических субстанций антител к наркотикам и монодисперсных полимерных суспензий с заданными свойствами реакционно-способных комплексов гаптенов либо их специфических антител с ферментом или их макромолекулярным носителем (белок, полимер) 2) разработка иммунохимического метода анализа для определения опиатов, каннабиноидов и гидазепама на основе полученных реагентов с использованием латексной агглютинации 3) разработка экспериментально-технологического регламента и пакета нормативно-технической документации для выпуска опытно-промышленной серии иммунодиагностикумов для быстрого определения наркотиков в биологической жидкости человека. Создание и испытание опытных серий наборов тест-систем для получения необходимых рекомендаций для внедрения в клиническую практику. [c.200]

Была предпринята попытка разработать тест-систему и при использовании двух других латексных антигенов - акролеинового и белкового. В случае применения латекса на основе БСА агглютинация происходила лишь при больших концентрациях морфина 500 мкг/мл и данный метод нельзя рекомендовать для практической диагностики. Использование морфина, меченого акролеиновым латексом, позволило разработать метод с высокой чувствительностью выявления опиатов 100 нг/мл. Однако, результаты плохо воспроизводились из-за происходящей в ряде случаев спонтанной агглютинации. [c.203]

Реакция встречного иммуноэлектрофореза (РВИЭФ). Эта реакция основана на встречной диффузии в электрическом поле антигенов и антител и появлении внутри прозрачного геля видимого преципитата. В агаровом или агарозном геле делают лунки диаметром 2 — 3 мм, причем расстояние между лунками для сыворотки и АГ должно составлять 5 — 6 мм. Лунки располагают попарно (одна — для АГ, вторая — для сыворотки) или по три (одна — для АГ, вторая — для испытуемой сыворотки, третья — для контрольной сыворотки). Лунки для сыворотки располагают ближе к аноду, а для АГ — к катоду. Реакцию проводят с несколькими разведениями АГ, продолжительность электрофореза — 90 мин. Результаты реакции учитывают сразу же после окончания электрофореза, отмечая количество и локализацию линий преципитации при сравнении их с контрольной тест-системой. [c.69]

Хотя S. pyogenes легко отличимы по антигенной структуре и положительному У/ -тесту, их можно спутать с энтерококками. [c.111]

При оценке полученных результатов следует учитьшать, что тесты с кардиолипиновыми антигенами могут быть положительными не только в результате накопления антилипоидных антител при сифилисе, но и при других трепонематозах, а также при аутоиммунных заболеваниях (например, системной красной волчанке), беременности, ряде острых и хронических состояний, сопровождающихся повреждением тканей (при вирусных, онкологических заболеваниях, лепре, у наркоманов). В этой связи для окончательного подтверждения диагноза ставят высокочувствительные специфические реакции. [c.228]

Серологическое исследование. Серодиагностика проводится со 2-й нед болезни используют ИФА, РА (с антигеном из культуры Proteus mirabilis ОХк), непрямую РИФ, РСК. Высокоспецифичные результаты получают при использовании в ИФА в качестве АГ рекомбинантного поверхностного белка возбудителя (56 кДа), но высокая стоимость тест-системы ограничивает ее практическое применение. [c.239]

Идентификацию штамма проводят с помощью перекрестной непрямой РИФ или ИФА с использованием диагностических тест-систем и специально приготовленных антигенов из референс-штам-мов хламидий. [c.246]

Для повышения чувствительности тестов антигены или антитела адсорбируют на эритроцитах (РНГА, РОНТА, РТОНГА, РГадсТО, РРГ), метят их ферментами (ИФА), радиоактивными изотопами (РИА, РПГ), флюорохромами (РИФ) или же используют принцип лизиса эритроцитов при взаимодействии антигенов и антител в присутствии комплемента (РСК, РРГ). [c.273]

При иммунизации термолабильной частью энтеротоксина Е. oli возникают антитела, обладающие антитоксическим действием и способностью реагировать с гомологичным антигеном в серологических тестах. Имеются сведения, что после инфекции, вызванной Е. ali, специфические антитела обнаруживаются в крови переболевших людей или животных. [c.366]

Лабораторная диагностика не имеет специфических диагностических тестов, кроме повышения уровня М. в волосах и крови. Измерение М. в моче имеет определенное значение для установления повышенной экспозщии, однако не дает хорошей корреляции с выраженностью клинических признаков. С аллергенным действием М. связано развитие профессиональных заболеваний бронхиальной астмы, аллергозов верхних дыхательных путей, экземы, дерматозов. Сенсибилизирующие свойства М., являющегося неполным антигеном, доказаны как клинически, так и эксперимеш-альными исследованиями. [c.466]

Всем Ф. присущи антигенные, иммуногенные и аллергенные свойства. Пороги аллергенного и токсического действия в хронических опытах для большинства Ф. практически совпадают. Ферментные препараты способны вызвать сенсибилизацию организма, приводящую к развитию аллергических заболеваний. Имеются указания на аллергические поражения кожных покровов при пользовании синтетическими моющими средствами, содержащими Ф. мезентерии, протомезентерин, протосубтилин. Уменьшение содержания энзимов в детергентах снижает заболеваемость дерматитами. Случаи дерматита и экзем описаны у рабочих мясокомбинатов, имеющих контакт с соками и промывными жидкостями ЖКТ, особенно при разделке и обработке поджелудочной железы. Дерматиты у этих лиц сопровождаются изъязвлениями ладоней и ногтевых фаланг, имеют тенденцию к рецидивам и переходу в экзему. Роль Ф. подтверждена резко положительными кожными тестами с 1% раствором пищеварительных энзимов. Специфическим фактором вредности в производстве Ф. помимо мелкодисперсной пыли готового продукта являются также микроорганизмы — продуценты энзимов, которые сами по себе и особенно в комбинации с Ф. обладают сильными аллергенными свойствами. У рабочих предприятий микробиологической промышленности, производящих Ф., во многих случаях встречаются аллергические риниты, дерматиты, астматические бронхиты. Изучение состояния здоровья рабочих основных профессий крупнотоннажного ферментного производства обнаружило у 70 % заболевания кожи, у 64,4 % — ЛОР-органов, у 59,4 % — нервной системы, у 50,5 % — внутренних органов, у 34,6 % — женских половых органов. Рентгенологические изменения легких выявлены у 63,5 % рабочих, нарушение функции внешнего дыхания с преимущественной обструкцией бронхов мелкого калибра — у 35 %. Среди патологии кожи наиболее часто наблюдались микозы (27,4 %), гнойничковые заболевания (14,3 %), аллергический дерматит (12 %) в структуре заболеваний ЛОР-органов — хронический субатрофический ринит (46,7 %), фарингит (41,3 %) и ларингит (26,2 %) хронический гастродуоденит отмечен у 35,4 %. Число хронических воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей нарастало с увеличением стажа работы. Хронический бронхит при стаже работы до 1 г. выявлен у 4,8 % рабочих, при стаже до 5 лет — у 15,8 %, до 10 лет — у 18 %. [c.762]

Помимо того что моноклональные антитела применяются как специфические реагенты в стандартных тестах, они могут использоваться и для идентификации новых, более специфических маркеров опухолей. Так, Ритсу и его сотр. (Ritz et al., il980) удалось получить моноклональные антитела к антигену клеток при остром лимфолейкозе человека. Были также выде- [c.332]

В книге обобщены материалы по изучению аллергии к промышленным химическим соединениям. На основании данных современной литературы и собственного многолетнего опыта авторы высказывают оригинальное суждение по ряду теоретических и прикладных аспектов проблемы. В книге дано представление оо иммунных механизмах различных типов аллергических реакций, о химической структуре и конкуренции гаптенов и полных комплексных антигенов, об иммунологической толерантности и гипосенсибилнзации к химическим аллергенам. Освещены приемы выявления сенсибилизирующего действия промышленных химических соединений, сложных и полимерных продуктов, методы определения опасности контакта с ними в условиях производства и в повседневной жизни, принципы установления их гигиенического норматива. Представлены методы специфической диагностики аллерго-зов химической этиологии и методы применення промышленных химических аллергенов при постановке кожных, провокационных, клеточных и серологических тестов. Рассмотрены возможные всходы сенсибилизации к промышленным химическим аллергенам. [c.2]

Для выявления экспериментальной аллергии к промышленным химическим веществам широко применяют кожные пробы. Если используют растворы самих веществ, то добровольцам ставят компрессные тесты, а лабораторным животным — капельные и только с летучими соединениями — внутрикожные. При использовании комплексных антигенов (конъюгатов) делают только внутрикожные пробы. Следует отметить, что экспериментальную аллергию выявляют кожными пробами при любых методах сенсибилизации— парентеральном, эпикутанном, ингаляционном, энтеральном. Долгие годы кожное тестирование было вообще единственным методом выявления и оценки тяжести экспериментальной аллергии к химическим аллергенам. Да и в настоящее время оно остается главным методом тестирования. [c.174]

Попытки обнаружить инфекционные вирусы в трансформированных клетках кончались, как правило, безуспешно. Иммунологические тесты на белки вирусного капсида также обычно дают отрицательный результат. Следовательно, синтеза этих белков в трансформированных клетках ие происходит. С другой стороны, в трансформированных клетках обнаруживаются некоторые связанные с вирусами антигены. Один из ютх, антиген Т (tumor), обычно продуцируется в нетрансформированных инфицированных клетках раньше, чем начинается образование белков капсида. Другой антиген, трансплантационный, при инфекции, ведущей к гибели клетки, не обнаруживается [1761. [c.269]

Благодаря сходству с анафилаксией этот синдром был классифицирован как анафилактоидный синдром [81] он значительно ослабляется синтетическими антигистаминовыми лекарственными препаратами [82]. Кортикостероиды не предохраняют здоровых животных и животных с удаленными надпочечниками от действия овомукоида, тогда как адреналин высокоэффективен в обоих случаях [77]. Действие овомукоида на крыс часто Н( иписы-вается его способности выделять гистамин [83, 78], но это действие не идентично с анафилактической реакцией, так как его можно отличить при проведении кожных тестов от результатов классической реакции антиген — антитело [84]. Кроме того, предварительное введение животным резерпина, который снижает содержание у животного 5-окситриптамина (серотонина), [c.37]

Таблица 6.6. Метод твердофазного иммуноферментного теста (ИФА, ELISA) на анализ к белковым антигенам

Постоянный контроль состояния клеточной культуры и статистическая оценка вероятности возникновения зеркального ЦПЭ исключают наличие артефакта. Описанное явление дистантной связи наблюдалось более чем в 12 ООО пар камер. Вероятность появления положительного зеркального эффекта 65—85% (для 95% доверительной вероятности). Закономерность проявления зеркального ЦПЭ и его универсальность подчеркиваются статистическим определением по критерию Пирсона эффективности действия трех вирусов, сулемы и УФ-радиации она оказалась одинакова, вероятность же проявления зеркального эффекта при управлении митотическим циклом ниже, чем при действии летальных экстремальных агентов (57 5,3%), а по критерию можно утверяедать, что суш ествуют различия в дистантной передаче цитопатического эффекта и управления митотическим циклом. При предварительном облучении клеток детектора малой дозой УФ-радиации (15 с) наблюдалось достоверное повышение эффективности дистантных межклеточных взаимодействий, в результате чего зеркальный ЦПЭ развивается в 99—100% камер-детекторов, облученных ультрафиолетом в течение 15 с перед стыковкой с камерой-индуктором, в которой развивается ЦПЭ при действии вируса или сулемы. В том случае, когда зеркальный ЦПЭ развивался в результате контакта с клетками ткани, пораженными одпим из вирусов, в культуральной лшдкости и в клетках зеркальных камер вирус не обнаруживался даже при трехкратном пассировании. Иммунологические тесты на выявление вирусных антигенов в зеркальной ткани были отрицательными. Таким образом, дистантные взаимодействия, выявленные нри использовании вирусов, обусловлены индуцированными особенностями метаболизма зеркальных клеток, приводящими их к гибели по законам, свойственным метаболическим нарушениям, сопровождающими, по всей видимости, вирусную инфекцию. При этом в зеркальной культуре вирус отсутствует. С одной стороны, это свидетельствует [c.100]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология