Глутаровый альдегид, использование

Наибольшее распространение получили методы введения ферментной метки, основанные на образовании ковалентной связи между молекулами антитела и фермента. Наибольшее практическое применение нашел метод получения иммунопероксидазных конъюгатов окислением углеводного компонента фермента перйодатом натрия. В случае использования щелочной фосфатазы в качестве фермента-маркера применяют глутаровый альдегид, взаимодействующий с е-аминогруп-пами белковых молекул. [c.317]

Первым реагентом, использованным для синтеза иммуноферментных конъюгатов, был глутаровый альдегид, реагирующий с е-аминогруппами лизина белковых молекул. С помощью глутарового альдегида получены конъюгаты антител и антигенов с пероксидазой, щелочной фосфатазой, глюкозооксидазой, глюкоамилазой. Состав полученных конъюгатов можно варьировать, изменяя концентрацию альдегида и белковых компонентов. [c.109]

Классический синтез тропинона по Робинсону служит примером того, как диальдегиды вступают в двойную конденсацию Манниха [схема (214)]. Использование глутарового альдегида вместо янтарного диальдегида дает в тех же условиях Ч -пельтьерин [267. [c.561]

Фирма Карбид путем конденсации и дегидратации формальдегида и ацетальдегида получает акролеин, являющийся сырьем для производства глицерина по новому методу, разработанному фирмой Шелл . Акролеин — весьма реакционноспособное вещество. Он применяется для получения многих производных, в том числе димера акролеина и глутарового альдегида. Большие возможности заключаются в использовании акролеина и его производных в производстве полиуретанов, полиэфирных смол, аминокислот, различных химикатов для текстильной промышленности и пластификаторов. [c.100]

ИММОБИЛИЗАЦИЯ БЕЛКОВ НА ПОЛИАКРИЛАМИДНЫХ ШАРИКАХ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГЛУТАРОВОГО АЛЬДЕГИДА [c.88]

Зараженные шприцы, инструменты, термометры, пипетки и стеклянная посуда перед новым использованием должны быть обеззаражены. Если возможно, конечную обработку следует проводить паром для жаропрочных предметов или окисью этилена для неустойчивых к нагреванию и чувствительных к влаге материалов. В тех случаях, когда перед употреблением необходимо обеззараживание, для дезинфекции используют раствор 2%-ного глутарового альдегида. Предметы полностью погружают в раствор на 20—30 мин. При этом полная безопасность не гарантируется, если предмет не был предварительно вымыт или если раствор уже использовали ранее. Перед повторным употреблением инструменты необходимо тщательно прополоскать в дистиллированной воде, а если они предназначены для работы в полости тела животного или на его поверхности, то в стерильной дистиллированной воде. [c.227]

Для использования в качестве носителей полиамиды активируют, частично гидролизуя, с последующей обработкой, например глутаровым альдегидом [c.25]

В последнее время получило достаточно широкое распространение применение иммобилизованных клеток микроорганизмов, содержащих естественный набор ферментов. Преимущества их по сравнению с иммобилизованными ферментами заключаются главным образом в том, что при использовании иммобилизованных клеток отпадают стадии выделения, очистки и иммобилизации ферментов, которые, как правило, являются наиболее дорогостоящими при осуществлении полного технологического процесса. Далее, ферменты в микроорганизме находятся в наиболее естественном окружении, что положительно сказывается на их термостабильности, а также так называемой операционной стабильности (продолжительности работы в условиях опыта). Известно много примеров, когда после выделения из организма ферменты быстро теряли активность, а иногда их вообще не удавалось выделить в активной форме, в составе же клеток микроорганизмов они сохраняли каталитические свойства достаточно долго. В этих случаях применение целых клеток, а не отдельных ферментов становится единственно приемлемым вариантом. Наконец, иммобилизованные клетки, как и иммобилизованные ферменты, представляют собой гетерогенные биокатализаторы со всеми преимуществами их использования в технологических целях. Иммобилизация клеток обычно проводится их адсорбцией на водонерастворимых носителях (часто на ионообменных смолах), ковалентной сшивкой с помощью бифункциональных реагентов (например, глутарового альдегида) или захвата их в полимер, как правило, с последующим формованием в виде частиц определенного размера и конфигурации. Иммобилизация целых клеток микроорганизмов предотвращает их размножение и обычно увеличивает сохранность и срок работы в качестве катализатора по сравнению с необработанными клетками. [c.12]

Другим доступным реагентом для активации полистирола и полипропилена является толуол-2,4-диизоцианат (ТЦ). При использовании для иммобилизации на полистирольных пробирках высоких концентраций IgG (1 мг/мл) в случае активации ТЦ связывается белка в 2,7 раза больше,.чем при активации глутаровым альдегидом, и в 1,7 раза больше, чем при простой адсорбции. Однако при концентрациях IgG 0,1 и 0,01 мг/мл количество белка, связавшегося через глутаровый альдегид, в 1,3 раза выше, чем через ТЦ. Аналогичные закономерности сохраняются при связывании IgG с полипропиленом. [c.207]

Иммуноферментный анализ. Метод широко внедрен в лабораторную практику в последнее время. В основе метода— использование антител, меченных ферментами (чаще всего пероксидазой). Конъюгацию осуществляют глутаровым альдегидом или другим бифункциональным реагентом. Реакцию проводят в условиях, исключающих инактивацию фермента. Техника постановки реакции состоит в следующем. Антиген адсорбируют на поверхности лунок в пластинах из полистирола. Если антитела, меченные ферментом, направлены к адсорбированному антигену, они окажутся фиксированными в лунках. Затем в лунки вносят раствор субстрата (если к антителам присоединена пероксидаза, то это перекись водорода и индикатор — диаминобензидин). В результате ферментативного превращения субстрата появится цветной продукт. Степень окраски пропорциональна количеству сорбированных антител с ферментом. [c.263]

I. Конъюгация уреазы с IgG овцы одноэтапным методом с использованием глутарового альдегида. [c.46]

П. Метод, основанный на использовании глутарового альдегида [49]. [c.100]

Введение молекулярных поперечных сшивок в белки широко применяется в настоящее время для их стабилизации. Для этих целей создают внутримолекулярные и межмолекулярные поперечные сшивки с использованием различных бифункциональных и полифункциональных реагентов. В частности, хорошие результаты были получены на основе глутарового альдегида, который вначале был применен для стабилизации кристаллов карбоксипептидазы с целью их дальнейшего исследования с помощью рентгеноструктурного анализа. [c.370]

Главной нежелательной реакцией во всех процессах нитрования является окисление парафинов азотной кислотой или двуокисью азота. Вследствие этого выход по азотной кислоте довольно низкий— большей частью 30—50%. В продуктах окисления обнаружены альдегиды и кетоны, карбоновые кислоты, окись и двуокись углерода и др. С другой стороны, за счет восстановления нитрующего агента получаются низшие окислы азота и даже свободный азот. При нитровании циклопарафинов, например циклогексана, среди продуктов окисления получены также дикарбоновые кислоты, а именно адипиновая, глутаровая и янтарная, образовавшиеся за счет окислительной деструкции цикла. Окислительные процессы усиливаются с повышением температуры. Поэтому для каждого углеводорода имеется оптимальная температура нитрования, дающая лучший выход нитросоединений. При нитровании двуокисью азота эта температура ниже, чем при использовании азотной кислоты. [c.475]

Здесь мы не будем рассматривать преднамеренную модификацию аминокислотных остатков в белках, которая, разумеется, щи-роко используется для изучения их структуры. Артефакты, образующиеся в результате нагревания белков или при обработке химическими препаратами для других целей, также не столь редки. Например, термическая обработка протеинов молока в результате взаимодействия глюкозы с е-аминогруппой лизина приводит к образованию кислотоустойчивых соединений пиридозина (1) и фу-ранозина (2) [7]. Использование глутарового альдегида для сщи-вания цепей белка также вовлекает в реакцию лизин, при этом образуется [8] пиридиниевое производное (3). [c.229]

Для этого К[РеН(С0)4], генерируемый in situ из Fe( 0)5 и КОН, смешивают с амином и глутаровым альдегидом при комнатной температуре в атмосфере монооксида углерода. При использовании различных ароматических и алифатических аминов выходы составляют 80%. [c.151]

Петтингер рассмотрел способность перхлоратов растворять целлюлозное волокно и изучил возможность использования этого свойства в текстильной промышленности. Шредер запатентовал процесс, позволяющий уменьшить сминаемость и усадку текстильных тканей. По этому способу волокно пропитывают соединением, способным полимеризоваться (например, глутаровым альдегидом), и солью кислоты, выбранной из группы, в состав которой входит хлорная кислота как агент, способствующий отверждению. Пропитанное волокно для отверждения в течение нескольких минут нагревают до 100—200 °С. [c.182]

Носители были химически модифицированы окислением концентрированной азотной кислотой (введение нитро- и гид-роксигрупп), обработкой гидразином, восстановлением с образованием аминогрупп. Иммобилизацию гидрогеназы проводили на окисленных образцах термически обработанного полиакри-лонитрила после гидрогеполиза и восстановления с использованием бифункционального реагента — глутарового альдегида.. В ряде экспериментов гидрогеназу иммобилизовали па окисленный полимер, обработанный гексаметилендиамином [74, 75]. [c.82]

Хорошими адгезионными свойствами обладают продукты сшивки желатина различными сшивающими агентами, например формальдегидом, глутаровым альдегидом, водорастворимым карбодиимидом, эпоксидсодержащими веществами. Исследование этих систем показало, что наиболее быстрое связывание наблюдается в случае альдегидсодержащих сшивающих агентов, а наименьший уровень токсичности — в случае использования водорастворимого карбодиимида [61]. [c.178]

Для полного или частичного восстановления поврежденных голосовых связок был предложен гидрогелевый мембранный материал на основе поливинилового спирта, сшитого глутаровым альдегидом. Материал обладал достаточной для имплантации механической прочностью, был устойчив к биодеградации и не оказывал вредного действия на окружающие ткани [43]. Описано использование в операциях на гортани полидиметилсилок-санов [44]. Сегментированные полиуретаны могут быть использованы для эндопротезирования эндотрахеальных труб [45]. [c.238]

Глутаровый альдегид можно использовать в качестве сшивающего реагента для полимеризации антигенов и антител. Сшитые белки становятся нерастворимыми вблизи своей изоэлектрической точки (pH 4,5—7,5). Нерастворимые перекрестно-сшитые белки стабильны в растворах мочевины и додецилсульфата натрия и могут быть использованы как иммуносорбенты для очистки соответствующих антигенов или антител с помощью колоночной или бесколоночной хроматографии. Метод не требует больших затрат времени, воспроизводим и может быть использован для всех белков, содержащих свободные а- или е-аминогруппы (Avrameas, Ternyn k, 1969). [c.73]

Однако в некоторых случаях нашли применение пространственные системы на основе этого полимера. Например, ПВС, сшитый глутаровым альдегидом, под маркой Гелевин самостоятельно и в композициях может быть использован как сорбционный материал для поглощения раневого эксудата (см. гл. 7). [c.254]

Для стерилизации биопротезов клапанов сердца используется водный раствор глутарового альдегида [40]. Рассмотрена возможность применения этого вещества для изделий из синтетических полимеров - полиэтилена, полипропилена, полистирола. В то же время отмечается, что глутаровый альдегид не может быть использован как стерилизант при обеззараживании изделий, контактирующих с кровью [41]. [c.312]

Необходимо отметить, что отсутствие углеводного компонента [а молекуле фермента-метки не является непреодолимым препятст- ием для применения этого фермента в анализе на основе лектина. ак, авторами метода была показана возможность использования -0-галактозидазы, у которой отсутствует углеводный компонент, [редварительно ковалентно связанной через глутаровый альдегид глюкозооксидазой, способной взаимодействовать с лектином. Та-сой подход, конечно, приводит к усложнению анализа, но вместе с ем позволяет использовать ферменты, обладающие высокой ката-[итической активностью, что повышает чувствительность опреде-1ения. [c.108]

К 1 г аминнрованного силохрома добавляют 10 мл 1%-иого раствора глутарового альдегида в холодной дистиллированной воде, инкубируют при медленном перемешивании 4 ч при 4 °С и отмывают носитель от избытка альдегида водой. В процессе активации носитель изменяет цвет с белого иа красноватый. Полноту отмывки альдегида контролируют спектрофотометрнчески при Л= ==280 им. Полученный сорбент может быть использован для иммобилизации немедлеиио или длительно храниться в высушенном состоянии. [c.204]

Отсюда определенный интерес представляет использование в анализе иммуносорбентов, полученных путем аффинного связывания специфических антител с иммобилизованным на носителе антигеном. Связь антиген — антитело обратима, поэтому для предотвращения смывания антител с сорбента разработаны пути последующего ковалентного закрепления молекул, образовавших специфический комплекс на носителе. Для стабилизации комплекса эффективно применяются обычные сшивающие агенты глутаровый альдегид, диазиды, изоцианаты. Процедура иммобилизации включает инкубацию связанного с носителем антигена с антисывороткой, отмывку носителя, проведение реакции с сшивающим антигеном и заключительную отмывку для удаления избытка (рис. 24). Процесс может проводиться как в реакторах перемешивания, так и в колоночном режиме. Данный подход детально изучен на примере иммобилизации антител против сывороточного альбумина человека на сефарозном сорбенте. В результате такого связывания по крайней мере половина активных центров иммобилизованных антител способна принимать- участие в последующих реакциях с антигеном, что является недостатком метода. Однако [c.210]

Фиксация. Микроорганизмы фиксируют раствором глутарово-го альдегида, раствором оксида осмия или последовательным использованием того и другого. Работу ведут в вытяжном шкафу. Клетки отделяют от среды центрифугированием при 6 ООО об/мин, промывают фосфатным буфером (0,1 н., pH 7,2) и вновь центрифугируют. 5—10 мг биомассы помещают в 1 мл 2,5%-ного охлажденного раствора глутарового альдегида в том же фосфатном буфере и оставляют на 1—2 ч в темноте при 4-4°. Глутаровый альдегид сливают, клетки промывают 2 раза фосфатным буфером и после центрифугирования заливают 1%-ным водным раствором [c.114]

Ковалентное связыванне. Поверхность носителя можно модифицировать и для ковалентного связывания. Описано несколько методов связывания реагентов с амино- или карбоксильными группами носителя с помощью глутарового альдегида, водорастворимых карбодиимидов, суберимидатов и других бифункциональных реагентов [1-19]. Однако эти методы дают несогласующи-еся результаты. Кроме того, для широкого использования в иммуноанализе необходимы дальнейшие поиски путей повышения их чувствительности и специфичности. [c.62]

При использовании в качестве естественных иммуносорбентов низкодисперсных антигенов велика опасность загрязнения антигеном элюированных антител даже при применении достаточно мягких способов элюции последних. Чтобы исключить или уменьшить элюцию антпгена, например, с поверхности бактериальной клетки, находящиеся на ее поверхности высокомолекулярные вещества фиксируют с помощью глутарового альдегида. [c.242]

Осадок отмытых клеток сус пендируют в PBS для получения 1%-ной (объем на объем) суспензии и инкубируют е 4% глутарового альдегида в течение часа при комнатной температуре при ротационном перемешивании. Непосредственно перед использованием клетки тщательно отмывают. [c.100]

При использовании концентрированных растворов солей для создания градиентов плотности необходимо учитывать их активность в качестве диссоциирующих агентов. Это весьма существенно при центрифугировании белков (которые могут денатурировать и выпадать в осадок), но особенно пагубно влияет на нуклеопротеиды (например, рибосомы), которые диссоциируют. То же самое относится к мультиферментам и другим белковым комплексам, состоящим из нековалентно связанных субъединиц. Нуклеопротеиды и белковые комплексы можно анализировать центрифугированием в солевых градиентах только после их предварительной сщивки формальдегидом или глутаровым альдегидом, однако это, естественно, несколько изменяет их седиментационные характеристики и лишает эти вещества биологической активности. [c.249]

Физическая иммобилизация означает удерживание в полиакриламидном геле химическая иммобилизация - химическое связывание фермента глутаровым альдегидом с альбумином, полиакриловой кислотой или акриламидом после его физического захвата. Соответствует области линейной функции ферментного электрода либо, если наблюдается отклонение от линейности, значительному изменегщю потенциала. " Электрод чувствителен к Ь-цистеину, Ь-лейцину, Ь-тирозину, Ь-триптофану, Ь-фенилаланину и Ь-метионину. Препарат недостаточно устойчив, о чем свидетельствует постоянное ежедневное уменьшение сигнала. Электрод чувствителен к О-фенилаланину, О-валину, О-метионину, О-лейцину, О-норлейцину и О-изолейцину. Время, необходимое для возвращения сигнала к базовой линии перед повторным использованием. [c.124]

Описаны [48] ферментные сенсоры мочевины, в которых уреаза с помощью глутарового альдегида фиксируется либо на газовом Oj-, либо на катионоселективном стеклянном электроде. При использовании в качестве базового аммонийного стеклянного электрода диапазон определяемых концентраций составляет 10 -10 моль/л. [c.126]

Смена колонок осуществляется очень легко колонку просто вставляют в нижний конец пластиковой трубки, служащей для установки колонки в прибор и содержащей выходной патрубок и термодатчик. Можно использовать колонки различного диаметра (максимальный внутренний диаметр 7 мм) и высоты ферментного слоя (максимум 30 мм). Носителем фермента может служить найлоновая трубка, намотанная на специальный адаптер, который вставляется в держатель колонки и связывает трубку с проточной системой. Найлоновая трубка удобна для анализа неочищенных проб, содержащих твердые частицы [27], но имеет низкую ферментную емкость. Обычно в качестве носителя используют пористое стекло с контролируемым размером пор, которое не только обладает высокой ферментной емкостью, хорошей механической прочностью, химической и микробной устойчивостью, но и позволяет применять сравнительно простые методики иммобилизации фермента. В ряде работ [7, 31] применяли и другие материалы. Разные носители существенно различаются по способности к адсорбции компонентов анализируемых растворов, что зависит, например, от реального распределения на их поверхностях ионных и гидрофобных групп. Поскольку такая адсорбция почти наверняка вызывает неспецифическое выделение тепла и даже может влиять на ферментативную реакцию, выбор материала носителя весьма существен. Хорошие результаты получаются при использовании пористого стекла с размерами пор от 500 до 2000 А и частиц-около 80 меш. Если используют необработанное или обработанное алкилпропиламином пористое стекло, полученное из разных источников, активация стекла глутаровым альдегидом с последующей иммобилизацией фермента почти всегда дает хорошие результаты. Следует отметить, что обычно в колонку термистора вводят довольно большой избыток фермента (нередко 100 ед. активности). Эта процедура обеспечивает стабильность работы и неизменность характеристик системы при большом числе проб и в случае длительных [c.460]

При окислении 3-гидроксивалерьянового альдегида азотной кис-хотой получают глутаровую кислоту с выходом 70-89%, Окисление ведут при температуре ниже 20° в присутствии 1% нитрата натрия. Полученная глутаровая кислота имеет температуру плавления 92-95 [38] 1ж8 окисления может быть использован раствор, содержащий -гвдро-теивалерьяновый альдегид, получающийся при гидратации дигидропи-рана. [c.94]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология