Хроматография при работе с мечеными соединениями

Чаще всего получение соединений, меченных С или тритием, производится в количестве от 1 до 10 ммоль. Имея дело с величинами такого порядка, можно рассчитывать па успешное применение газовой хроматографии для очистки меченых соединений и для их выделения из сложных реакционных смесей. В настоящей работе описаны некоторые примеры использования этой методики. Применявшиеся приборы были, конечно, весьма несовершенными, однако с их помощью удалось решить проблемы очистки, не поддававшиеся решению другими методами. [c.84]

По-видимому, нри изучении экстракции остаточных количеств пестицидов из биологических объектов полезно использовать меченые соединения, а также газо-жидкостную хроматографию с параллельной работой двух детекторов. Одним из них должен быть детектор, регистрирующий радиоактивность. [c.98]

При использовании метода, в котором весь поток элюата смешивается с жидким сцинтиллятором, из полученной смеси очень сложно выделить меченые соединения. В системах, работающих так же, как система Бертольда, где со сцинтиллятором смешивается лишь часть элюата, потери пробы составляют около 20%. Такие потери меченого вещества не существенны в том случае, если оно имеется в достаточном количестве. Наш опыт работы в области хроматографии метаболитов меченых пестицидов, выделенных из тканей животных или растений, показывает, что часто количество вещества очень ограничено и следует исключать любые потери. Поэтому мы предпочитаем пользоваться системой детектирования с проточной кюветой, заполненной твердым сцинтиллятором. В этом случае потери образца минимальны. [c.184]

Газожидкостная хроматография (ГЖХ) в качестве эффективного аналитического метода стала известна в 50-х годах, а в 60-е годы получила очень широкое распространение. В 1955 г. появились первые работы, в которых сообщалось о применении ГЖХ для разделения смесей меченых соединений. Методы, используемые для измерения радиоактивности в газожидкостной хроматографии, можно разделить на два основных класса, а именно непрерывные методы, когда концентрация радиоактивного вещества в газовом потоке контролируется постоянно, и методы, в которых разделенные вещества собирают после выхода из хроматографической колонки для последующего определения радиоактивности. В последнем случае, после того как вещества разделены, их радиоактивность может быть определена любым доступным способом. [c.201]

В работе [139] описано определение метанола и этанола в водных растворах с использованием модифицированного метода с радиореагентом и изотопным разбавлением, в котором радиореагентом является само определяемое соединение и не требуется количественного превращения в производное. В этом методе к анализируемой пробе добавляют определенные количества спиртов, меченных изотопом с известной удельной радиоактивностью и затем обрабатывают ее 3,5-динитробензоилхлоридом. Образующиеся эфиры выделяют с помощью жидкостной хроматографии в колонке. Вес каждого спирта в пробе находят по формуле (6), в которой вес выражен в грамм-молях, а удельные радиоактивности — в единицах радиоактивности на моль. При этом нет необходимости в избытке реагента, если достаточное количество производного образуется при добавлении менее 1 экв реагента. Если имеется метод разделения, который позволит получить каждое из производных в чистом виде в количестве, достаточном для определения удельной радиоактивности, то в принципе все компоненты с гидроксильными группами можно определить в анализе одной пробы. Описанный метод обладает потенциально высокой чувствительностью, поскольку веса разделенных 3,5-динитробензоатов можно определить с помощью абсорбционной спектрофотометрии. Однако применение этого метода ограничено лишь соединениями, для которых можно получить меченые аналоги с достаточно высокой удельной радиоактивностью. [c.82]

РАБОТА 3.5. РАЗДЕЛЕНИЕ И АНАЛИЗ СМЕСЕЙ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ, МЕЧЕННЫХ <С и Т, МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [1, 6] [c.160]

Ввиду того что тритий является радиоактивным изотопом, все операции следует проводить в вытяжном шкафу. При работе с высокоактивными веществами необходимо выполнять все предусмотренные меры безопасности, нельзя допускать загрязнения других опытов. Растворы сахаров в воде- Н, находящиеся в открытых сосудах, быстро обмениваются с атмосферной влагой. Упаривание, а также хроматография на бумаге, как правило, приводят к потере активности, если у соединения мечеными являются подвижные атомы водорода (связанные с кислородом, азотом и т. д.). [c.375]

В настоящей работе для исследования окисления пропилена использован радиоактивный изотоп углерода С в качестве меченого атома и применен, наряду с химическим, метод бумажной хроматографии д.пя разделения смеси карбонильных соединений, образующихся в процессе окисления. [c.78]

В табл. XVII1-8 приведено дополнительно несколько примеров нрименения газовой хроматографии, разнообразных по своему характеру. Уплзбэч [180] описал три метода введения трития в органические соединения. Шмидт-Блик и другие [149] применяли в хроматографических работах меченые атомы на газохроматографических колонках. Эти методы являются перспективными с точки зрения их использования в будущем для аналитических целей. [c.412]

Методы работы с мечеными атомами широко используют в химических и биохимических исследованиях уже в течение двух десятилетий. Несколько лет назад был описан /27 / и поступил в продажу детектор для индикации меченых соединений, разделенных методом газовой хроматографии. Недавно для использования в качестве детектора в жидкостной хроматографии была разработана жидкостная сцинтилляционная система отсчета соединений, меченных С и з (см. приложение . Хроматографический раствор проходит через стеклянную трубку, заполненную сцинтиллятором, налрим[ер порошком антрацена. Размешенный соответствующим образом фотоумножитель детектирует вспышки света, возникающие при попадания /3-частиц на сцинтиллятор, а результирующий сигнал на выходе фотоумножителя записывается в виде хроматограммы. [c.227]

В большинстве лабораторий, где анализируются меченые соединения, обычно используют различные методики колоночной хроматографии. Это может быть гель-фильтрация и ионный обмен, в которых используются водные элюенты, обычная адсорбционная и распределительная хроматография, где применяют органические растворители, и, наконец, высокоэффективная хроматография, в которой применяются водные и органические растворители. Поэтому желательно использовать универсальную методику, которая позволяла бы работать в различных условиях. Следует рассмотреть также и применение систем, способных работать под давлением и предназначенных для ВЭЖХ. [c.185]

Недавно Тыква и Шеда [25] описали экономичный и универсальный метод регистрации активности в ГЖРХ. Радиоактивность в газовом потоке непосредственно измеряется полупроводниковым детектором, который может регистрировать любой р-излучатель, например Н, С, 35S и з2р Полупроводниковый детектор обладает низким уровнем фона и стабилен в работе, однако его чувствительность невысока. Нижний предел детектирования составляет приблизительно 150 нКи. Ценность этого простого прибора заключается в том, что его можно подсоединить к большинству обычных газовых хроматографов. Его можно использовать при анализе проб, содержащих сравнительно высокие концентрации меченых соединений, кипящих в пределах от 30 до 200 °С. [c.217]

ТСХ обычно используют для полупрепаративного разделения смесей монотерпенов перед их газо-жидкостным хроматографическим анализом [120—122], для быстрого качественного анализа эфирных масел [44, 123—125], в качестве средства контроля за ходом реакций или разделения веществ методом жидкостной хроматографии [126, 127], а также в качестве метода анализа изотопно меченных соединений [128—130]. В последнем случае к смеси добавляют внутренние стандарты, чтобы свести к минимуму возможность потери меченых монотерпенов вследствие их испарения. Вопросы, касающиеся сочетания ТСХ с другими хроматографическими методами, подробно обсуждаются в работе [131]. [c.237]

Эти виды эксклюзии еще не получили объяснения. Возможно, они связаны с тем фактом, что упомянутые гели содержат небольшое количество карбоксильных групп (см. стр. 49). По-видимому, можно считать, что при малой нагрузке геля. и элюировании дистиллированной водой отрицательно заряженные карбоксильные группы слегка отталкивают анионы низкомолекулярных соединений от фазы геля [43]. В результате для этих соединений, так же как и для высокомолекулярных, объем выхода равен свободному объему Уо- Этот эффект может существенно исказить результаты при работе с радиоактивными анионами, например с иодидами [58]. При определенных обстоятельствах наличие радиоактивности в свободном объеме Уо может ввести в заблуждение, поскольку ее можно принять за меченые макромолекулы. Однако наличие в элюенте других электролитов полностью нормализует объемы выхода [43, 58]. Хотя гуминовые кислоты имеют ароматическую природу, они совершенно не проникают в гель декстрана при элюировании дистиллированной водой если же использовать солесодержащие элюенты, то с помощью гель-хроматографии удается определить молекулярный вес этих соединений [59]. [c.131]

Тот факт, что ароматические соединения задерживаются гелями декстрана (см. стр. 129), может быть использован для их выделения и идентификации. Фенольная группировка в нейтральной среде обладает особенно сильным сродством к сефадексу. На этом основано важное клинико-химическое приложение гель-хроматографии определение в сыворотке свободного Тироксийа, радиоактивного иода и связанного с белком гормона при анализе функции щитовидной келезы. В гл. V приводится большой список работ на эту тему, в основу которых положен тот факт, что меченый тироксин (вместе с трииодтиронином) сильно удерживается сефадексом Q-25, но может быть затем количественно элюирован. Два иодированных тирозина можно затем разделить, например с помощью хроматографии на бумаге. [c.191]

Этому в значительной степени способствовали работы Бейт-Смита по разработке методов бумажной хроматографии фенольных соединений, показавшие, что большое число простых фенолов широко распространено в растительном мире. Кроме того, было обнаружено, что микроколичества некоторых фенольных соединений содержатся в наиболее важных органах животных, таких, как нервные ткани и мозг. Метод меченых атомов с использованием изотопа С позволил изучить биосинтез фенолов и показать, что фенолы являются активными метаболитами, а не конечными продуктами клеточного обмена. Эти данные свидетельствуют об исключительно важной биологической роли фенольных соединений. В книге по возможности всесторонне излагаются основные биохимические аспекты изучения фенолов. Рассматриваются все природные соединения, имеюш,ие свободную или связанную гидроксильную группу в ароматическом кольце рассматриваются природные фенолы, содержащие флавопоидную группировку, а также ряд других фенолов, особенно таких, которые имеют азотсодержащие функциональные группы. Некоторые основы химии соединений фенольного ряда, методы их идентификации в биологических объектах приводятся в первых главах. Распределение, таксономическое значение, генетика, метаболизм, биосинтез, энзимология, а также функции фенолов в животном и растительном мире рассмотрены в последующих главах. В книге особенно акцентируется вопрос о необходимости дальнейшего изучения потенциально важной роли фенольных соединений в живых организмах. [c.8]

Метод меченых атомов позволил разрешить ряд теоретических вопросов аналитической химии, как то состояние вещества в растворах, определение констант нестойкости комплексных соединений, изучение процессов соосаждепия, старение и растворимость аналитических осадков и др. Радиоактивные изотопы дали возможность разработать новые более эффективные методы разделения элементов, особенно с близкими химическими свойствами, как например, редкоземельные элементы, ниобий, тантал, титан, цирконий, гафний, рубидий, цезий и др. Особенно много работ выполнено по разделению элементов методами соосаждения, экстрагирования органическими растворителями, ионообменной хроматографии, электрофореза. [c.3]

ГЖРХ и даются рекомендации по выбору конкретного метода при решении различных задач. Основное внимание уделяется анализу органических соединений, меченных слабыми р-излучателями. Применение реакционной газовой хроматографии в данной работе не рассматривается. [c.202]

В ряде работ изучался вопрос об общей детоксикации и экскреции с лш-триазинов. На примере лабораторных и домашних животных исследован метаболизм хлор- и метилтио-с жж-триази-нов. Исходные пропазин и прометрин выделяются с калом после перорального введения этих препаратов крысам лишь в небольших количествах, а в моче они содержатся в концентрациях, которые находятся за пределами чувствительности методов анализа. В моче обнаружено несколько метаболитов, меченных п отличающихся по строению от оксипропазина [135—137]. При введении крысам через желудочный зонд симазина, атразина, прометона и пропазина симазин выделялся с калом и мочой примерно в одинаковых количествах, а атразин, прометон и пропазин выделялись в основном с мочой. В обоих экскретах через 48 час после введения оказалось приблизительно от 70 до 90% введенной метки [138—141]. Анализ методом ионообменной хроматографии позволил установить в продуктах экскреции присутствие нескольких метаболитов [124, 140—142]. В других опытах молочным коровам скармливали в течение нескольких дней немеченые симазин и атразин, и в их моче были найдены лишь небольшие количества исходных соединений (1—2% введенной дозы). Поскольку примененный метод анализа основан на реакционной способности активного атома хлора, не представляется возможным отделить вклад исходных соединений от вклада продуктов разложения, еще удерживающих этот атом [131, 132]. [c.72]

Дальнейший гидролиз деметилированных мочевин до соответствующих анилинов, по-видимому, протекает в растениях с большим трудом, чем в почвах. Во всех последних работах с меченными в арильном остатке мочевинами (монуроном, диуроном, флу-ометуроном) соответствующие свободные анилины либо вообще отсутствовали, либо их концентрация была значительно ниже концентрации соответствующих деметилированных частично или полностью мочевин (см. табл. 2 и рис. 6 и 7). Очевидно, что такие результаты можно также объяснить большой скоростью дальнейших превращений анилинов в результате образования двойных соединений или окисления, из-за которого анилины не накапливаются в больших концентрациях в тканях растения. Пример возможного превращения анилинов привели Онлей и сотр, [84]. Они обрабатывали меченным в кольце диуроном сеянцы кукурузы, внося его в питательный раствор. Кроме небольших количеств 3,4-дихлоранилина, с помощью метода газовой хроматографии ими был [c.105]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология