Подвижная в нормально-фазовой хроматографии

Поскольку неподвижная фаза более полярна, чем подвижная, которая состоит, к примеру, из дихлорметана н изооктана адсорбционная хроматография не вполне правильно считается нормально-фазовой хроматографией. [c.282]

В нормально-фазовой хроматографии на силикагеле используются подвижные фазы, обладающие значительно меньшей полярностью, чем поверхность адсорбента. Полярность сорбатов, анализируемых в этом режиме, является промежуточной между полярностью подвижной и неподвижной фаз. Удерживание определяется сложной гаммой взаимодействий между молекулами сорбатов, поверхности адсорбента и подвижной фазы. Поверхность адсорбента, находящегося в равновесии с подвижной фазой, всегда покрыта более или менее прочно связанным адсорбционным слоем. Если подвижная фаза содержит два или [c.126]

Лекарственные вещества, как правило, высокополярны, и при их хроматографии на силикагеле применяют элюенты, содержащие значительные количества полярных компонентов поэтому влиянием влажности подвижных фаз на удерживание можно пренебречь. Именно такой подход использован во множестве экспериментальных исследований, целью которых была систематизация величин удерживания и выбор оптимального состава подвижной фазы. Общим правилом в нормально-фазовой хроматографии является уменьшение удерживания прн увеличении концентрации полярного компонента подвижной фазы. Этот эффект описывается разными авторами с помощью уравнений (4.88) — (4.90). [c.133]

В нормально-фазовой хроматографии на силикагеле невозможно выделить какое-либо одно свойство сорбатов, которое бы определяло прочность их ассоциации с подвижной фазой и величины удерживания. В самом общем виде принцип, по ко-, торому можно оценить удерживание, гласит, что более поляр- ные соединения удерживаются сильнее, чем менее полярные. Однако и сам термин полярность в применении к хроматографическим процессам неоднозначен, так как охватывает разнообразные типы межмолекулярных взаимодействий, а способность конкретных сорбатов и компонентов системы к этим взаимодействиям может быть различной. В связи с этим в нор- [c.145]

Диметилформамид (0,1—0,5%), добавленный в подвижную фазу, благотворно влияет на форму пиков в нормально-фазовой хроматографии. [c.300]

Нормально-фазовая хроматография на силикагеле. Взаимосвязь между строением сорбатов и их величинами удерживания в этом режиме хроматографии весьма сложна, что не дает пока возможности создать универсальную, хотя бы и весьма приближенную, модель удерживания. Поэтому первоначальный выбор элюирующей силы подвижной фазы в значительной степени зависит от интуиции и опыта хроматографиста, от того, насколько хорошо изучен данный класс веществ. При наличии достаточной информации для прогнозирования состава подвижной фазы может быть использован метод сравнительных расчетов. Он позволяет оценить, медленнее или быстрее будет элюироваться данное вещество, чем соединение, принятое в качестве прототипа. Однако часто даже и столь ограниченная модель отсутствует, и в выборе элюирующей силы для первого, пробного разделения остается руководствоваться эмпирическими правилами. При этом целью такого пробного разделения является не столько получение хроматограммы, непосредственно пригодной для анализа, сколько общая оценка подвижности компонентов и получение исходной информации для оптимизации элюирующей силы. [c.308]

Обычно полярный растворитель (вода, спирт) фиксирован на твердом носителе — силикагеле, диатомите, целлюлозе, оксиде алюминия. Подвижной фазой в этом случае служат неполярные растворители — изооктан, бензол и др. Такие системы используют в нормально-фазовой распределительной хроматографии. [c.312]

Весьма распространена классификация, основанная на сравнительной полярности подвижной и неподвижной фаз. При этом различают нормально- и обращенно-фазовую хроматографию. В первом случае неподвижная фаза более полярна, чем подвижная, во втором — наоборот. Последние два термина лишены физического смысла и лишь связаны с тем обстоятельством, что исторически первым вариантом была именно хроматография на полярных сорбентах в относительно малополярных подвижных фазах. [c.15]

Разумеется, при хроматографии на силикагеле, как и при обращенно-фазовой хроматографии, не все задачи могут быть решены с помощью лишь одной пары растворителей. Выбор полярных растворителей, пригодных для нормально-фазовых разделений, вообще говоря, довольно широк, и комбинации двух или большего числа сильных компонентов подвижной фазы используются значительно чаще. Тактика оптимизации состава подвижной фазы с точки зрения селективности и в этом случае основывается на описании свойств растворителя с помощью треугольника селективности либо других систем, характеризующих способность к межмолекулярным взаимодействиям различных типов. [c.145]

СН2)зКН2 — (NH2, аминосиликагель) — используется для обращение- и нормально-фазовой хроматографии. В водных подвижных фазах сорбент может найти применение как слабый анионообменник для разделения кислот. Часто используется для хроматографии сахаров в водно-органических системах. Следует избегать использования сорбатов, содержащих альдегидные или кетогруппы, которые могут образовывать с аминогруппами сорбата шиффовы основания [c.32]

Динамическое модифицирование может служить не только средством радикального изменения механизма сорбции, но н средством регулирования селективности, подавления нежелательных процессов в колонке, приводящих к искажению формы пика. Так, в обычном обращенно-фазовом режиме добавка 0,005 моль/лС рниламина к подвижной фазе позволила существенно сократить время анализа и улучшить форму пиков трициклических антидепрессантов [98, 257]. Влияние добавок различных карбоновых кислот при нормально-фазовой хроматографии детально изучено в работе [162]. Эти добавки значительно улучшают форму хроматографических пиков (особенно добавки карбоновых кислот с более длинной углеводородной цепью). [c.179]

Как указывалось в разд. 7.2.4, многие диамидные ХНФ способны к энантиоселективному образованию водородных связей и, следовательно, могут быть полезны как добавки к элюенту в режиме нормально-фазовой хроматографии с неполярной подвижной фа- [c.160]

Еще труднее преодолеть проблемы при анализе оснований. Остаточные силанольные группы сорбента, обладающие кислотными свойствами, могут при определенных условиях взаимодействовать с сорбатами по ионообменному механизму, что отрицательно сказывается на форме пиков и устойчивости величин удерживания. При нормально-фазовой хроматографии оснований в органическую подвижную фазу можно добавить 0,5—1% основания, например диметилформамида. Однако в данном случае этот подход не столь эффективен, как добавление уксусной кислоты при хроматографии кислот. При обращенно-фазовой хроматографии оснований на алкилсиликагелях метод подавления ионизации неприменим, так как модифицированные силикагели неустойчивы при pH >7,5. При использовании кислых буферных растворов [c.305]

Выше рассмотрены основные закономерности хроматографии на силикагеле в нормально-фазовом режиме. Такой способ использования силикагеля — исторически первый, и с помощью его решено множество практически важных задач. Впоследствии силикагель в значительной степени был вытеснен обращенно-фазовыми сорбентами. Однако данные самого последнего периода свидетельствуют о том, что возможности силикагеля далеко не исчерпываются классической нормальнофазовой Хроматографией. Помимо относительно малополярных элюентов при хроматографии на силикагеле могут использоваться различные нетрадиционные подвижные фазы. При этом возможно получение хороших практических результатов даже для таких сорбатов, которые, как правило, рекомендуют разделять в обращенно-фазовом режиме. Механизм сорбции в таких случаях довольно сложен и изучен еще недостаточно. Обычно принято считать, что поверхность силикагеля слабокислая, и это иногда является причиной затруднений при нормальнофазовой хроматографии оснований. Установлено, однако, что современные марки силикагеля для ВЭЖХ, имеющие сферическую форму частиц, могут быть как кислыми, так и щелочными [128]. Это обстоятельство следует иметь в виду при разработке методик, так как высокое значение pH силикагеля может положительно сказаться на форме пиков оснований и селективности разделений. Аналогичен результат при применении буферированного силикагеля [343, 344]. Для получения этого материала силикагель пропитывали 0,1 М раствором соли или кислоты, после чего высушивали в вакууме и затем заполняли колонку суспензионным способом. В качестве подвижных фаз использовали обычные для нормально-фазовой хроматографии системы например, смеси гексана с диэтиловым эфиром в различных соотношениях. Пропитка силикагеля гидросульфатом натрия либо щавелевой, лимонной, винной кислотами способствовала существенному улучшению формы пиков изомеров гераниевой кислоты. Аналогичного эффекта для сорбатов основного характера — производных антраниловой кислоты — удалось добиться пропиткой фосфатно-цитратным буфером. Последний прием позволил также получить вполне симметричные пики ФТГ-производных аминокислот. [c.157]

Нормально-фазовая хроматография. При данном варианте ВЭЖХ подвижная фаза менее полярна, чем неподвижная, и основной фактор, определяющий удерживание, — это взаимодействие сорбатов непосредственно с поверхностью либо с внутренним объемом сорбента. [c.56]

На рис 5-2 показана хроматограмма смеси двух алкаиов, разделение которых проводилось методом нормально-фазовой хроматографии и контролировалось по поглощению на частоте деформационных колебаний связи С-Н Подвижной ( )азой служил перс()торуглеродный растворитель F -78 При использовании в качестве элюента обычных органических растворителей получить хроматограмму на той же частоте поглощения было Невозможно [c.125]

Как следует из этого уравнения, в идеале необходи.мо, чтобы неподвижная фаза максимально отличалась по полярности от образца. Рекомендации использовать нормально-фазовую хроматографию (высокие 6 ) для разделения неполярных образцов (низкие б/) и обращенно-фазовую (низкие 65) для разделения полярных соединений (высокие бг) не новы. Однако это эмпирическое правило чрезмерно упрощено, и при его применении могут возникать осложнения, обусловленные, в частности, недоступностью подходящих подвижных фаз. Например, для того чтобы элюирование неполярных соединений (бг 7) с силикагеля (65 16) удовлетворяло уравнению (3.30), необходима подвижная фаза с бт —2. Ясно, что это условие невыполнимо. На практике полярность подвижных фаз ограничивается пределами от бт 7 (для алканов) до бт = 25,5 (для воды). [c.66]

До некоторой степени противоположная цель преследовалась авторами работы [74], которые пытались снизить число неподвижных фаз до одной путем выбора связанной цианоироииль-ной фазы промежуточной полярности, которая может быть использована как в нормальном, так и в обращенно-фазовом режиме (см. рис. 3.8). Более того, благодаря разумному выбору модификаторов общее число необходимых растворителей было ограничено шестью н-гексаном, хлористым метиленом, ацетонитрилом, тетрагидрофураном для нормально-фазовой хроматографии и тетрагидрофураном плюс метанол и вода для ОФЖХ. Благодаря применению ограниченного числа двойных и тройных подвижных фаз оказалось возможным разделить ряд образцов различных фармацевтических препаратов. [c.271]

В ВЭЖХ могут быть реализованы почти все механизмы разделения, применяемые в хроматографии (адсорбция, распределение, ионный обмен и др.). Независимо от механизма разделения, подвижная фаза в ВЭЖХ — жидкость. Остановимся на жидкостно-адсорбционной хроматографии, которая широко представлена в двух вариантах нормально-фазовая (НФХ) и обращенно-фазовая (ОФХ) — в зависимости от полярности подвижной и неподвижной фаз. [c.203]

В заключение следует рассмотреть удерживание в нормально- и обращеинО-фазовой хроматографии. В нормально-фазовой ЖХ, где полярность неподвижной фазы больше полярности подвижной фазы, полярные соединения элюируются тюследними. Их время удерживания тем выше, чем более неполярная подвижная фаза используется. Напротив, в обращенно-фазовой хроматографии полярные соединения элюируются первыми, а чем более полярная подвижная фаза нспользуетси, тем сильнее удерживаются неполярные соединения. [c.279]

Важнейшую роль в понимании механизма удерживания з обращенно-фазовой хроматографии сыграли работы Хорвата и его школы [201—203]. Суть теории Хорвата заключается в следующем. Существует принципиальное различие между процессами сорбции на полярных поверхностях из относительно неполярных растворителей ( нормально-фазовый режим ) и сорбции из воды либо сильнополярных растворителей на поверхностях неполярных (обращенно-фазовый режим). В первом случае между молекулами сорбатов и неподвижных фаз образуются ассоциаты за счет кулоновских взаимодействий или водородных связей. Во втором случае причиной ассоциации на поверхности являются так называемые сольвофобные- взаимодействия в подвижной фазе. Для полярных подвижных фаз, в особенности содержащих воду, характерно сильное кулоновское взаимодействие и образование водородных связей между молекулами растворителей. Все молекулы в таких растворителях связаны довольно прочно межмолекулярными силами. Для того чтобы поместить в эту среду молекулу сорбата, необходимо образование полости м.ежду молекулами растворителя. Энергетические затраты на образованиё такой полости лишь частично покрываются за счет взаимодействия полярных групп в молекуле сорбата с полярными молекулами растворителя. В аналогичном положении по отношению к растворителю находятся и неполярные молекулы неподвижной фазы. С энергетической точки зрения более выгодно такое положение, когда поверхность раздела между полярной средой (растворителем) и неполярными фрагментами неподвижной фазы и молекул сорбата минимальна. Уменьшение этой поверхности и достигается при сорбции (рис. 4.1). [c.52]

Неводные ионогенные растворители также могут быть применены при хроматографии на силикагеле. В работе [134] изучено влияние ионной силы, pH элюента и основности сорбатов на величины удерживания. Роль этих факторов указывает на то, что основным процессом, определяющим сорбцию, является катионный обмен с силанольными группами поверхности. Подвижные фазы состояли из метанола с добавками хлорной кислоты, перхлората аммония, гидроксида калия. Сопоставление хроматограмм, полученных на различных силикагелях (Пар-тисил-5. Гиперсил, Силоид, Сферисорб), свидетельствует о том, что абсолютные величины удерживания на последних трех сорбентах воспроизводятся хорощо. Партисил удерживает изученные лекарственные соединения слабее, хотя селективность сорбента по отнощению к ним примерно такая же, как у других материалов. В отличие от нормально-фазовой и обращенно-фазовой хроматографии, селективность разделения несколько улучшается при малом удерживании. На рис. 4.35 представлена [c.159]