Определение молекулярного веса при помощи ультрацентрифуги

В ряде случаев константа седиментации зависит от концентрации полимера. При этом установлена линейная зависимость между и с. Поэтому перед определением молекулярного веса вещества с помощью ультрацентрифуги находят несколько значений константы седиментации для различных концентраций, строят график в координатах [c.73]

Наиболее проверенным и теоретически обоснованным методом определения молекулярного веса ВМС, а также размеров частиц суспензий и золей является метод ультрацентрифугирования. Современная ультрацентрифуга — весьма сложный прибор, приводится во вращение с помощью масляных турбин или потоком воздуха. [c.386]

Среднечисловой молекулярный вес Мп может быть определен методом концевых групп, эбулиоскопией и криоскопией для УИ не более 1 10, осмометрией — в интервале 3 10 — 1 10 . Средневесовой молекулярный вес определяется по светорассеянию, применение которого дает точные результаты, начиная с М 1 10, причем точность увеличивается с увеличением молекулярного веса, -средний молекулярный вес получается из данных исследования седи-ментационного равновесия в ультрацентрифуге. Этим же методом можно получить и значение Ма,- Средневязкостный молекулярный вес может быть определен в очень широком интервале молекулярных весов при наличии калибровочных данных, полученных при помощи одного из абсолютных методов определения молекулярного веса. [c.344]

Получение функции распределения высокодисперсных систем при помощи ультрацентрифуги было реализовано Сведбергом и его сотрудниками и в особенности Ринде Такие определения, как и определения молекулярных весов (по седиментационному равновесию) коллоидов, основаны на измерении концентраций в центрифугируемой пробе на различном удалении от оси вращения. Такого рода измерения до сих пор осуществляются, например, посредством фотографирования вращающейся кюветы и последующего фотометрирования фотографий, полученных через различное время после начала центрифугирования. [c.22]

В случае неорганических веществ и простых органических соединений метод определения молекулярного веса по осмотическому давлению не обладает преимуществами по сравнению с другими методами, такими, как определение молекулярного веса по понижению температуры замерзания. Однако в случае веществ с очень высоким молекулярным весом этот метод оказался очень удобным именно при помощи этого метода был впервые достоверно определен в 1925 г. молекулярный вес гемоглобина. Значение молекулярного веса гемоглобина, найденное Адером и равное 68 ООО, было подтверждено данными измерений, произведенных с использованием ультрацентрифуги. [c.284]

Определение молекулярного веса производится методами, обычно применяемыми для высокополимеров, — путем измерения осмотического давления, с помощью ультрацентрифуги, вискозиметрическим методом и т. д. Применение этих методов в случае высших полиоз связано с рядом трудностей, обусловленных нестойкостью растворов (выпадение полиоз в осадок, ассоциация молекул). Для получения более надежных данных полярные группы молекул высокополимеров иногда предварительно защищают , переводя полиозы в алкильные (метильные) или ацильные (ацетильные) производные, что препятствует ассоциации определения проводят в неводных растворителях (хлороформ, дихлорэтан и т. д.). [c.699]

МНОГО полезного в технику ультрацентрифугирования. В этом обзоре описаны многие важные экспериментальные детали — конструкция кювет, оптические системы и пр., — а также теоретические основы метода.) Существует несколько методов определения молекулярного веса с помощью ультрацентрифуги. Ниже мы рассмотрим наиболее важные из них, начиная с классического метода, основанного на измерении скорости седиментации. [c.65]

Наиболее сложным, но зато и самым надежным представляется метод исследования высокополимерных соединений с помощью ультрацентрифуги (Свед-берг). Этот метод получил название седиментационного метода определения молекулярного веса. [c.367]

К концу классического периода и к началу атомного века были созданы и другие важные инструменты и методы исследования. В 1905 г. Р. Зигмонди и Г. Зидентопф с помощью ультрамикроскопа обнаружили броуновское движение коллоидных частиц. Благодаря этому же микроскопу Ж. Перрен смог наблюдать движение суспендированных в воде микроскопических частичек мастики и рассчитать числа Авогадро и Лошмидта. В 1925 г. Теодор Сведберг сконструировал ультрацентрифугу, вследствие чего стало возможным определение молекулярных весов (масс) макромолекул. [c.172]

Установлено, что белки могут иметь весьма различные размеры и форму. Определение молекулярных весов и размеров молекул белка выполняется с применением мощного арсенала физических методов исследований. Молекулярные веса можно определить с помощью измерения скоростей диффузии, скоростей седиментации в ультрацентрифуге, рассеяния света и даже путем измерения размеров индивидуальных очень больших по размеру молекул белка методом электронной микроскопии. [c.360]

Б. Определение молекулярного веса с помощью ультрацентрифуги может быть осуществлено двумя способами по скорости седиментации и по седиментационному равновесию. [c.63]

Первые приборы для определения молекулярного веса методом центрифугирования сконструировал Сведберг. На рис. 19 изображена схема такого прибора, называемого ультрацентрифугой. В ультрацентрифуге за оседанием макромолекул в центробежном поле наблюдают с помощью специальных оптических устройств. [c.47]

С помощью ультрацентрифуги был определен молекулярный вес белков. [c.51]

Определение молекулярного веса при помощи ультрацентрифуги [c.31]

Определение молекулярного веса при помощи ультрацентрифуги является наиболее всесторонним методом, так как при этом наряду с определением размера молекул можно определить степень полидисперсности исследуемого продукта и получить представление о форме молекул. Этот метод разработан Сведбергом, который сконструировал специальную ультра центрифугу с очень большим числом оборотов, благодаря чему возникает огромная центробежная сила, превышающая во много раз (в 10 — 10 раз) силу тяжести. Нри измерениях в ультрацентрифуге исследуемый раствор помещается в прозрачный сосуд, который закрепляется в дискообразном роторе, приводимом в быстрое вращение. Изменение концептрации раствора, происходящее под влиянием центробежной силы, регистрируется фотографически по абсорбции света исследуемым раствором или по изменению показателя преломления. [c.31]

Определение молекулярного веса при помощи ультрацентрифуги производится двумя способами 1) на основании исследования распределения концентраций раствора после установления седиментационного равновесия и 2) по исследованию скорости седиментации. [c.31]

Одной из особенностей коллоидных растворов поверхностноактивных веществ является их способность к образованию мицелл. Молекулярный вес образующихся мицелл, так называемы мицел-лярный вес, составляет обычно несколько десятков тысяч. Значение средневесового мицеллярного веса ПАВ можно определить различными методами, которыми пользуются и для нахождения молекулярного веса полимеров. Сюда относятся методы, основанные на измерении светорассеяния растворами ПАВ и на определении диффузионной способности мицелл, а также метод седиментационпого анализа с помощью ультрацентрифуги. Наиболее эффективным и вместе с тем относительно простым методом оценки размеров коллоидных частиц в растворах является метод светорассеяния. С помощью этого метода определяют значение мицеллярного веса ПАВ в данной работе. Вывод теории светорассеяния применительно к разбавленным растворам ПАВ, содержащим мицеллы, размер которых не превышает /20 длины волны видимого света, может быть записан в следующей форме [c.122]

Книга представляет собой второй том издания, посвященного физическим методам анализа, изучению строения и идентификации органических соединений (I том вышел в 1950 г.). Во втором томе изложены вопросы измерения и регулирования температур, калориметрии, микроскопии, определения давления пара и определения молекулярного веса с помощью ультрацентрифуги. Каждая глава содержит теоретический раздел, описание приборов и методов исследований. [c.4]

Определения молекулярных весов с помощью ультрацентрифуги Сведберга, проведенные пока еще в небольшом числе, дают частично значения, отличающиеся от полученных на основании закона вязкости на коэффициент 2 [94]. Определение состава полистиролов-смесей с определенным средним молекулярным весом при помощи ультра-центрифуги см. [95]. Молекулярный вес природной целлюлозы из скорости осаждения и диффузии в реактиве Швейцера не совпадает с выведенным из вязкости [96]. [c.330]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНОГО ВЕСА С ПОМОЩЬЮ УЛЬТРАЦЕНТРИФУГИ [c.15]

Этот молекулярный вес, как и высшие средние, может быть определен с помощью равновесной ультрацентрифуги. Формально он представляет собой отношение третьего момента ко второму. [c.104]

Молекулярный вес некоторых белков, определенный при помощи ультрацентрифуги [c.12]

МОЛЕКУЛЯРНЫЙ ВЕС НЕКОТОРЫХ БЕЛКОВ, ОПРЕДЕЛЕННЫЙ ПРИ ПОМОЩИ УЛЬТРАЦЕНТРИФУГИ [c.264]

Растворы белков обладают многими свойствами, которые характерны для лиофильных коллоидных растворов. Молекулы белков не проходят через полупроницаемые мембраны, и это используется для их очистки от низкомолекулярных примесей при помощи диализа. Представляет большой интерес определение размеров, формы белковых молекул и молекулярных весов белков. Для этой цели используется целый ряд физико-химических методов. Так, белки в растворах седиментируют в ультрацентрифугах при ускорениях до 200 ООО g , величины констант седиментации колеблются от 1 Ю до 90—100 сек. Коэффициенты диффузии — в пределах от 0,1 10 до 10- 10 средний удельный объем — около 0,75 см г. Размеры и форму (асимметрию) частиц белка определяют, кроме того, методами светорассеяния, двойного лучепреломления в потоке, измерениями вязкости, коэффициента вращательной диффузии, но, по-видимому, наиболее точно — прямым наблюдением в электронном микроскопе в тех случаях, когда молекулы белка достаточно велики и когда удается преодолеть технические затруднения. Молекулярные веса, кроме названных выше способов, определяют методами осмометрии, гель-фильтрации, исследованием монослоев белков на поверхности жидкой фазы, светорассеяния и др. [c.30]

Молекулярно-кинетические методы основаны на перемещении макромолекул относительно растворителя и сводятся, в конечном счете, к определению соответствующей силы грения К этой группе методов относятся определение молекулярного веса по скорости яиффузии, с помощью ультрацентрифуги и по вязкости растворов. [c.425]

Сведберг воспользовался центробежной силой в своем методе определения молекулярного веса коллоидных веществ с помопдью седиментации. Ультрацентрифуга состоит в основном из ротора М (рис. 2), приводимого в движение двумя одинаковыми масляными турбинами Т, несущими прозрачную ячейку С, в которую помещена изучаемая дисперсия. Степень седиментации может быть измерена как колориметрически, так и рефрактометрически или путем поглощения ультрафиолетовых лучей. В последнем случае пучок света Ь пропускается через ячейку в камеру Р необходимая экспозиция достигается с помощью электромагнетически регулируемых щитков и Е2, которые пропускают свет только в короткий промежуток времени, когда ячейка попадает в световой поток при каждом обороте турбинки. [c.117]

Из физических методов определения молекулярного веса применимы следующие осмотический с помощью ультрацентрифуги диффузионный диализ ультрафи тьтрация вискозиметрический. [c.69]

В интересах истины следует отметить, что точные определения молекулярного веса классическими методами призводились далеко не всегда, ибо это связано со слишком большими затратами времени. Размер частиц рибосом можно выразить гораздо проще — при помощи так называемой константы седиментации (5), характеризующей скорость осаждения частицы в ультрацентрифуге. Чем больше (тяжелее) частицы, тем быстрее они осаждаются. Константу седиментации выражают в единицах [c.61]

При помощи ультрацентрифуги возможно определение молекулярного веса и степени полидисперсности различных высокомолекулярных соединений. До сих пор при помощи ультрацентрифуги широко изучались протеины. При этом было найдено, что многие природные белки в основном являются полп-дисперсными, а величина частиц, выраженная в единицах молекулярного веса, составляет число, кратное 17 600. При исследовании. полистиролов было обнаружено, что молекулярные веса, найденные с помощью ульграцентрифуги, вполне совпадают с молекулярными весами, найденными осмотическим методом для тех же препаратов. [c.59]

В дальнейшем для определения молекулярного веса белков использовались физико-химические методы по осмотическому давлению, по скорости седиментации в ультрацентрифуге, рентгеновским анализом и др. В настоящее время определение молекулярного веса белков проводят почти исключительно путем измерения скорости оседания их в ультрацентрифуге, в которой при 80 ООО и более оборотов в минуту образуется огромная центробежная сила. Скорость оседания белков зависит от веса и формы частицы, а также от температуры результаты измерения обычно относят к 20°С и отмечают это следующим образом Боо- Такое определение молекулярного веса с помощью центрифуги было ВЕелеко Сведбергом. [c.13]

Определение с помощью ультрацентрифуги дает для различных белков сильно отличающиеся величины молекулярного веса 70 000 для сывороточного альбумина, 38 000—41 000 для лактальбумина, 41800 ДЛЯ лактоглобулина, 44 ООО для яичного альбумина, 167 ООО для глобулина сыворотки крови, 208 000 для легумина, 75 000—375 000 для казеина, 2 000 000 для гемоцианина из O topus vulgaris, 6 650 000 для гемоцианина улитки. Насколько эти данные соответствуют истинному молекулярному весу, а не весу мицеллы, судить трудно. [c.396]

Разработаны химические методы определения величины полинептидных цепей белковой молекулы. Эти методы основаны на использовании особого реагента (динитрофторбензола), который соединяется со свободной а-амино-грунной аминокислотного остатка, стоящего на конце нолипептидной цепи, с образованием окрашенного комплекса этот комплекс можно выделить и идентифицировать после того, как белок подвергнется гидролизу на составляющие его аминокислоты (в том числе и на конечную аминокислоту с присоединенной к ней окрашенной группой). Так, лизоцим, белок, содержащийся в слезах и яичном белке и обладающий свойством уничтожать бактерии, имеет, как было установлено ири помощи ультрацентрифуги, молекулярный вес около 14 ООО и состоит примерно из 125 аминокислотных остатков. Применение описанного метода позволило показать, что имеется лишь одна свободная а-аминогруппа, и на этом основании был сделан вывод, что данная молекула состоит из одной нолипептидной цепи. Если эта полипептид-ная цепь была бы растянута, то ее длина составляла бы около 450 А. Однако, как установлено при помощи ультрацентрифуги, дифракцией рентгеновских лучей и другими методами исследования, молекула лизоцима по форме близка к шару с диаметром около 25 А. Отсюда следует, что нолипептидная цепь не может быть вытянутой, а должна быть скрученной, ибо только тогда молекула приобретет сферическую форму. [c.487]

Фракционный состав. Фракционный состав полиамидов был определен Бреслером, Коршаком, Павловой и Финогеновым [2] при помощи ультрацентрифуги. Они показали, что действительное распределение по молекулярным весам резко отличается от того, которое предусматривает теория Флори, так как является более резким и с углублением реакции мало изменяется. [c.252]

Для полистирола характерна разветвленность цепи, что доказывается сравнительно большим расхождением между молекулярным весом, определенным вискозиметрическим методом и установленным при помощи ультрацентрифуги, или по осмотическому давлению растворов. При, этом чем выше температура полимеризации, тем больше расхождение (Шульц и Гуземан), г. е. тем больше разветвленность цепи полистирола. [c.418]