Тирозин гидролиз

Определить кинетические параметры гидролиза этилового эфира Ы-транс-циннамоил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином, исходя из данных табл. 5. [c.87]

В таблице 13 приведена зависимость начальной скорости гидролиза и-нитроанилида Ы-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином, от концентрации фермента [16]. Определить значения кинетических параметров ферментативной реакции, если концентрация субстрата во всех случаях равна 1 10 М. [c.123]

В таблице 18 приведены кинетические данные по изучению ингибирования профлавином гидролиза этилового эфира Ы-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином. Исходя [c.125]

Влияние ионов Си++ на кинетические параметры гидролиза этилового эфира М-бензоил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином. Условия опыта pH 6,0 25° С ионная сила 0,1 М (K I) [c.148]

В таблице 5 приведены кинетические данные для гидролиза этилового эфира Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином в присутствии дополнительного нуклеофильного агента, 1,4-бутан-диола. Определить значения индивидуальных констант к , кз и /(з ферментативной реакции. [c.149]

Влияние 1,4-бутандиола (N) на кинетику гидролиза этилового эфира Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином. [c.149]

Влияние эриохрома черного Т на каталитическую константу гидролиза этилового эфира Ы-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином. [c.154]

Рис. 73. Обработка результатов эксперимента по ингибированию ионами меди гидролиза этилового эфира К-бензоил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином

Рис. 74. Определение константы ингибирования а-химотрипсина ионами меди в реакции гидролиза этилового эфира М-бензоил-Ь-тирозина

Рис. 76, Определение индивидуальных констант скоростей гидролиза этилового эфира Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином, в присутствии дополнительного нуклеофильного агента, 1,4-бутандиола. Концентрации 1,4-бутан-диола 2 — 0 б — 0,11 М 0 — 22 М

Рис. 81. Обработка кинетических данных по неполному неконкурентному ингибированию эриохромом черным Т гидролиза этилового эфира К-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином

Гидролиз этилового эфира К-ацетил-Ь-тирозина, катализируемый а-химотрипсином, изучали методом остановленной струи в условиях [8 о2>[Е]о ло вытеснению профлавина из комплекса его с ферментом [7] (константа диссоциации комплекса фермент-профлавин в условиях эксперимента равна 4,4-10-5 М). Уменьшение оптической плотности раствора (А,=465 нм) во времени подчинялось кинетике первого порядка (табл. И). Из кинетических [c.197]

Кинетику гидролиза этилового эфира N-фурил-акрилоил-L-тирозина, катализируемого а-химотрипсином, изучали методом остановленной струи в условиях [8]о [Е]о по вытеснению профлавина из комплекса его с ферментом (константа диссоциации [c.198]

Среди продуктов гидролиза белковых веществ встречаются более сложные аминокислоты, о которых сказано ниже аргинин (см. стр. 417), фенилаланин (см. стр. 503), тирозин (см. стр. 503), тироксин (см. стр. 503), пролин (см. стр. 587), триптофан (см. стр. 596) и некоторые другие. [c.383]

Белки свеклы имеют кислотные свойства (точка коагуляции при pH 3,5), содержат больше кислых аминокислот — глутаминовую, аспарагиновую и др. Они гидролизуют с образованием низкомолекулярных пептидов и аминокислот аланин- валин, гликокол, лейцин, изолейцин, фенилаланин, -аминомасляная, тирозин, серии, треонин, цистин, метионин, пролин, триптофан, аспарагиновая, глутаминовая, гистидин. [c.6]

Тирозин в качестве первичного продукта можно легко получить гидролизом, шелка соляной кислотой, нейтрализацией полученного раствора едким натром и последующим подкислением уксусной кислотой. [c.479]

Основываясь на своих собственных исследованиях модельных соединений, Бреслоу предложил второй механизм гидролиза пептидов карбоксипептидазой А, не включающий образования ацил-ферментного промежуточного соединения [221, 222]. По существу, в гидролизе пептидной связи участвуют ион цинка, карбоксильный ион и гидроксильная группа тирозина. 2п(П) ио-прежнему играет роль кислоты Льюиса, координируя карбонильный кислород, а карбоксильная группа действует скорее как общее основание. Это мож но утверждать, поскольку в присутствии СН3ОН (вместо воды) метанолиз пептидного субстрата не наблюдался из-за неблагоприятной константы равновесия. Таким образом, фермент не может включать метанол в переходное состояние (в реакции, катализируемой в обоих направлениях) ни в случае эфирных, ни в случае пептидных субстратов. Это означает, что для протекания гидролиза необходимо удаление в переходном состоянии обоих протонов молекулы воды. [c.348]

Рис. 87. Определение кинетических параметров гидролиза /г- ни-троанилида К-ацетил-1-тирозина, катализируемого а-химотрипсином в условиях избытка фермента [42]

В качестве иллюстрации приведем в координатах Лайнуивера — Бёрка данные для гидролиза п-нитроанцлида Л/-ацетил-1-тирозина, катализируемого а-химотрипсином (рис. 87). [c.235]

Рис. 98. Определение индивидуальных констант скоростей гидролиза этилового эфира -тирозина, катализируемого а-химотрипсинои , в присутствии дополнительного нуклеофильного агента (1,4-бутандиола) (по данным А. А. Клёсова), если концентрация 1,4-бутандиола, М

В таблице 19 приведены результаты кинетических исследований гидролиза л-хлораиилида Ы-ацетил-Ь-тирозина, катализи- [c.126]

Рис. 62. Определение кинетических параметров гидролиза п-нитроанилида М-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипси-ном при избытке фермента

Для реакций гидролиза ряда субстратов, производных N-бензоил-Ь-тирозина, катализируемых а-химотрипоином, были найдены значения Акат (табл. I). Вычислить значения индивидуальных [c.147]

В таблице 3 приведены кинетические данные для гидролиза этилового эфира К-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипоином в присутствии конкурентного ингибитора, метилового эфира М-ацетил-П-фенилаланил-Ь-аланина. Определить значение константы ингибирования фермента ОО-дипептидом, если начальная концентрация субстрата и начальное время реакции неизвестны. Определение концентрации непрореагировавшего субстрата в ходе ферментативной реакции проводилось в каждом случае через равные промежутки времени. [c.172]

В таблице 17 приведена рН-зависимость гидролиза амида К-ацетил-Ь-фенилаланил-1-тирозина, катализируемого пепсином [12]. Определить значения рК групп активного центра свободной формы фермента, принимающих участие в реакции. [c.234]

Соединение С12НиЫзОз при кислотном гидролизе дает ь-тирозин, ь-аланин и аммиак. Предложите возможные структуры этого соединения. Как можно их различить [c.303]

Левовращающие фенилаланин (темп. пл. 280 °С) и л-оксифе-нилаланин, или тирозин, НО—СвН4—СН —СН(ЫН2)—СООН (темп, плавл. 316—320 °С) образуются при гидролизе почти всех белковых веществ. Из производных тирозина очень большое значение имеет тироксин-. [c.503]

Анализ белков. — Белки обычно гидролизуют кипячением с 20,%-ной соляной кислотой или 35%-ной серной кислотой. Щелочной гидролиз сопровождается глубокой рацемизацией и применяется толыко лри определении триптофана и тирозина, чувствительных к минеральным кислотам. Ферментативный гидролиз протекает медленно и, вероятно, не полностью, однако он не осложняется деструкцией лабильных продуктов, образующихся ири гидролизе. Если аспарагиновая и глутаминовая кислоты присутствуют в белке в виде амидов,, то кислотный гидролиз превра1цает амидный азот в соответствующие аммонийные соли. Методом Кьельдаля определяют количество общего- [c.654]

N-Koнцe вoй лизин дает а,е- бис-динитрофенильиое производное лизин, расположенный в середине цепи или на С-конце, дает е-моноди-нитрофенильное производное. Фенольная группа тирозина и имино-группа гистидина также реагируют с динитрофторбензолом, но образующиеся производные расщепляются в условиях кислотного гидролиза пептидной связи. Для определения последовательности аминокислот белок подвергают частичному гидролизу и определяют строение образовавшихся ди- и трипептидов анализом концевых групп. Если в гидролизате охарактеризованы все возможные дипептиды, то последовательность аминокислот в белке может быть однозначно определена без дальнейшего анализа концевых групп. [c.690]

Протеолитическая активность (ПА) — способность "Р° тализировать расщепление белка. 1 м.е. ПА соответствует количеству фер. ента, катализирующему гидролиз 1 г казеина в принятых стандартных условиях с определением гидролизованного белка по образовавшемуся тирозину. [c.122]

Химический гидролиз по остаткам тирозина можно осущ,ествить действием на белок N-бромсукцинимида. Например, 3 мг белка растворяют в 3,3 мл 50%-ной СНдСООН и добавляют при комнатной температуре порциями по 10 мкл раствор N-бромсукцинимида в такой же кислоте (22 мг/мл) до прекращения увеличения оптической плотности раствора при 260 нм ( ово)- Затем его можно разбавить водой и лиофизировать [Van Helden et al., 1979]. [c.297]

Определение качественного и количественного аминокислотного состава белков и пептидов проводят после их гидролиза кислотой или щелочью. Оба вида гидролиза разрушают некоторые аминокислоты. При щелочном гидролизе частично разрушаются цистеин, серии, треонин и происходит частичная рацемизация некоторых аминокислот. При гидролизе соляной кислотой (5,7 н., 105—110° С), которая обычно используется при кислотном гидролизе пептидных связей, практически полностью разрушается триптофан. В связи с этим содержание триптофана в пробах обычно определяют после щелочного гидролиза или спектрофотометрическим методом Кроме того, наблюдаются значительные потери оксиаминокислот (серина, треонина, тирозина), се-русодержащих аминокислот (цистеина, метионина) и частично пролива. При этом степень разрушения аминокислот зависит от чистоты и концентрации НС1, используемой для гидролиза, а также длительности и температуры гидролиза. Следует отметить, что примеси альдегидов при кислотном гидролизе приводят к значительной потере тирозина, а также цистеина, гистидина, глутаминовой кислоты и лизина, а примеси углеводов в больших концентрациях — к разрушению аргинина. [c.123]

Снижению потерь большинства аминокислот при кислотном гидролизе способствует проведение его в стеклянных ампулах под вакуумом с большим избытком (200—5000-кратным) тщательно очищенной и перегнанной над Sn b соляной кислоты. Распад тирозина предупреждают добавлением в ампулу фенола. Чтобы избежать превращения серусодержащих аминокислот в продукты различной степени окисления при гидролизе и последующих процессах хроматографии и электрофореза, образцы белка, содержащие цистеин и цистин, до гидролиза обрабатывают надмуравьиной кислотой. При этом образуется стойкое производное — цистеиновая кислота. Гидролиз проводят в течение 24, 48, 72 и 120 ч. Если содержание какой-либо аминокислоты с увеличением времени гидролиза постепенно уменьшается, его находят на графике зависимости содержания этой аминокислоты от длительности гидролиза путем экстраполяции к нулевому времени гидролиза. Если же содержание аминокислоты в ходе гидролиза постепенно увеличивается, истинную величину также определяют графически, ограничивая время гидролиза 96 или 120 ч ". [c.123]

Среди методов расщепления полипептидных цепей химическим путем наибольшее распространение получили гидролиз белка по остаткам метионина (бромцианом), тирозина (М-бромсукцинимидом), триптофана (о-йодозобензойной кислотой и ВЫР5-скатолом) и по остаткам цистеина. [c.141]

Выход продуктов гидролиза колеблется от 70 (связи триптофана с валином и изолейцином) до 100% (связи со всеми остальными аминокислотами). При блокировании 5Н-групп в белках окислению при ее использовании подвергаются только остатки метионина. Селективность гидролиза зависит от качества используемого препарата примеси в виде о-йодоксибензойной кислоты приводят к разрыву связей по остаткам тирозина. Для разрушения о-йодоксибензойной кислоты применяют ге-крезол. [c.144]

Большинство перечисленных реагентов обладает недостатками в отношении разрыва белковой молекулы по остаткам триптофана. Эффективность гидролиза при использовании ВКРВ-скатола, например, составляет всего 60 /о увеличение его кон центрации приводит к дополнительному разрыву триптофановых связей, однако при этом начинают гидролизоваться пептидные связи, образованные гистидином и тирозином. [c.144]

Помимо а- и е-аминогрупп дансилхлорид вступает в реакцию с ОН-группами тирозина, 5Н-группами цистеина и имидазольными кольцами гистидина (два последних соединения неустойчивы при щелочных значениях pH), а также с аммиаком, растворенным в воде. При взаимодействии ДНС—С1 с аммиаком образуется дансилсульфо-намид (ДНС-ЫНг). При щелочных значениях pH, дансилхлорид подвергается гидролизу с образованием дансилсульфоновой кислоты (ДНС—ОН). После окончания реакции дансилирования модифицированный белок или пептид подвергают кислотному гидролизу. Боль- [c.148]

ТЕРМОЛИЗИН, фермент класса гидролаз, катализирующий гидролиз пептидных связей, образованных гл. обр. остатками гидрофобных аминокислот (изолейцином, лейцином, валииом, фенилаланином, метионином, аланином). Со значительно меньшими скоростями катализирует гидролиз связей, образованных остатками тирозина, глицина, треонина и серина. Не способен расщеплять пептидные связи, образованные с участием остатка пролина. Т. также катализирует р-цию транспептидирования (образование поперечных сшивок путем взаимод. концевой группы NHj пентаглицинового остатка молекулы с пептидной связью между концевыми остатками D-аланина др. фрагмента молекулы-гл. обр. в протеогликанах), не катализирует гидролиз амидов и эфиров карбоновых к-т. [c.542]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология