Молекулярные сита целлюлоза

Электрофорез, процесс разделения молекул, основанный на разной скорости перемещения их в электрическом поле, проводят самыми разными способами. Очень небольшое количество раствора, содержащего смесь белков (например, белков сыворотки крови), наносят в виде тонкой полоски на лист фильтровальной бумаги или ацетата целлюлозы. Лист насыщают буфером и пропускают через него электрический ток. Напряжения в несколько сот вольт достаточно для разделения белков сыворотки в течение 1 ч. Для ускорения процесса и снижения диффузии низкомолекулярных веществ широко используют высоковольтный электрофорез. Прикладываемое напряжение составляет в этом случае 2—3 тыс. вольт. Образец постоянно охлаждают с помощью термостатируемых пластин иногда для той же цели всю систему погружают в сосуд с керосином. Электрофоретическое разделение больших количеств материала проводится в плоских лотках, заполненных крахмальным или каким-либо другим гелем. Одним из наиболее распространенных и чувствительных методов разделения белков является электрофорез в колонке, заполненной полиакриламидным гелем. Этот метод, в настоящее время сильно усовершенствованный, позволяет проводить разделение молекул одновременно и по размеру, и по электрическому заряду его называют методом электрофоретического молекулярного сита 127, 128]. [c.164]

Справочник содержит сведения о различных сорбентах и хроматографических носителях, таких как ионообменные смолы, силикагель, окись алюминия, молекулярные сита, активные угли, целлюлозы, сефадексы и другие гранулированные гели, твердые носители для газо-жидкостной хроматографии. В книге обобщены данные о промышленных образцах материалов, выпускаемых в СССР, США, Англии, Франции, Швейцарии Японии, ФРГ, ГДР, Венгрии, Чехословакии и других странах (отражена продукция примерно 200 фирм). Вместе с перечнем марок сорбентов и носителей приведены основные сведения, необходимые для наиболее рационального использования. [c.2]

Поскольку увеличение массы гигроскопичного поглотителя является функцией парциального давления паров воды,, детекторный сигнал сорбции АР также является функцией парциального давления паров воды. Изотермы поглощения для некоторых материалов, используемых в качестве покрытия, представлены на рис. 11-18 [99]. В качестве детекторов воды при низких парциальных давлениях паров воды особенно чувствительны молекулярные сита. Быстрыми детекторами с линейной зависимостью являются полярные жидкости, такие как полиэтиленгликоль. Для покрытия пьезокристаллов употребляют также разнообразные гигроскопичные полимеры, животный клей, целлюлозу, загустители и глицерин. Чаще всего в качестве покрытий используют твердые вещества. В усовершенствованных детекторах применяют пьезоэлектрические кристаллы, покрытые расплывающейся солью, например хлористым литием [101]. Широкие пределы влажности охватывают некоторые гигроскопичные полимеры. Кинг использовал единственный детектор для определения влажности воздуха в интервале от 0,1 млн до 3%, детектор дает результирующий сигнал от 0,5 до 3900 Гц. [c.585]

Для разделения ди-, три- и тетра-О-метилпроизводных альдоз, кетоз и их гликозидов применяют силикагель, окись алюминия, целлюлозу и целит соответственно (табл. 22.13). Большое число примеров применения этих методов для анализа природных соединений приведено в книге [2]. В последнее время для аналитических целей наиболее широко стал применяться метод, предусматривающий сочетание газожидкостной хроматографии с разделением на молекулярных ситах. Этот метод используют для анализа этих соединений после восстановления их [c.108]

В качестве сорбента в ТСХ применяют силикагели, оксид алюминия, крахмал, целлюлозу и некоторые другие вещества с высокой адсорбционной способностью. Для характеристики сорбционной активности оксида алюминия часто используется шкала Брокмана, составленная по Rj стандартного набора красителей. Эффективно применяются в ТСХ в качестве сорбентов жидкие иониты и другие вещества, обладающие ионообменными свойствами и свойствами молекулярных сит (например, сефадексы). [c.344]

Стабилизирующая среда при электрофорезе либо проявляет едва заметные свойства молекулярного сита (например, среда, применяемая для создания градиента плотности [68], ацетат целлюлозы [69] и агароза [51]), либо значительно тормозит [c.112]

Несмотря на высокую разрешающую способность, электро форез в гелях со свойствами молекулярного сита не нашел ши рокого применения в повседневной клинической практике. Он более трудоемок, чем электрофорез на ацетате целлюлозы или в агарозном геле. К тому же электрофорез в крахмальном или полиакриламидном геле труднее проводить в стандартных условиях. Проблемы стандартизации условий электрофореза в полиакриламидном геле подробно обсуждаются Маурером и Алленом [841]. Разумеется, необходимо сопоставлять стоимость метода с ценностью получаемой с его помощью информации. Основная причина того, что в повседневной практике до сих пор широко используются электрофоретические методы, обладающие ограниченной разрешающей способностью, заключается в следующем пока известна физиологическая роль лишь небольшого числа белков плазмы и те фракции, которые нельзя обнаружить простыми методами, дают мало полезной информации для диагноза. Методы электрофореза с высокой разрешающей способностью имеют исключительно важное значение в исследованиях белков плазмы, и после установления природы и физиологической роли остальных белковых компонентов эти методы, несомненно, займут свое место в клинической практике. [c.333]

Ионообменники типа сефадекса и биогеля очень хороши для макромолекул, нестабильных при низкой ионной силе. Так как поперечные связи в этих материалах увеличивают нерастворимость матрицы даже при ее высокой полярности, можно добиться в несколько раз большей плотности ионизующихся групп, чем это достижимо в ионообменниках на основе целлюлозы. Увеличение плотности заряда означает увеличение сродства, т, е. связывание может осуществляться при более высокой ионной силе. С другой стороны, эти ионообменники обладают некоторыми свойствами молекулярных сит, поэтому иногда различия в молекулярных массах могут аннулировать распределение, вызванное различием в зарядах. [c.210]

Ультрафильтрация через пористые мембраны представляет собой метод диффузии молекул через ряд мембран различной пористости. Скорость диффузии зависит от молекулярного размера и степени проницаемости мембран. Высокопористые мембраны готовят из чистых биологически инертных нитрата целлюлозы, ацетата целлюлозы, регенерированной целлюлозы и других полимеров. Эти мембраны называются поверхностными фильтрами. В противоположность глубинным фильтрам, полученным из волокнистых материалов, они отличаются исключительно высокой эффективностью удерживания, что обусловлено их весьма однородной пористой структурой и одинаковым размером пор. Большая часть вещества при фильтрации раствора задерживается на поверхности эффект сита). [c.86]

Особый тип комплексов включения обнаружен в хиральных матрицах, образуемых набухщими производными микрокристаллической целлюлозы. Разделение на триацетилцеллюлозе, получаемой гетерогенным ацилированием с целью сохранения микрокристаллической структуры, как выяснилось, отчасти протекает по механизму стерического исключения. Так, в серии ароматических углеводородов (не обладающих в заметной степени способностью к образованию связей) бензол удерживается достаточно сильно, мезитилен (2,3,5-триметилбензол) — значительно слабее, а 1,3,5-тpи-/и/7e/ -бyтилбeнзoл не удерживается (полностью исключается). Объяснить это можно тем, что полисахаридные цепи имеют сильно переплетенную структуру и образуют своего рода двумерное молекулярное сито, допускающее включение определенных плоских ароматических структур и исключающее, по стерическим причинам, более объемные структуры. Кроме того, более сильное удерживание бензола (по сравнению с толуолом) заставляет предположить, например, наличие карманов в структуре каналов и возможность вторичных эффектов. [c.79]

Лецитины яйца были достаточно хорошо отделены от нейтральных липидов. Киселев [86] фракционировал липиды, содержащиеся в тканях мозга, на сефадексе LH-20. В смеси хлороформ—метанол (2 1) сефадекс вел себя как слабоосновный анионит, так что фосфолипиды разделялись в соответствии с их основными свойствами. Однако в смеси хлороформ—метанол— вода (65 35 8) сефадекс выступает в роли молекулярного сита, и поэтому вещества разделялись согласно их молекулярным массам. Использование метилированного сефадекса рассмотрено в обзоре [87] сефадекс G-25 был метилирован так, чтобы содержать 40% метоксигрупп липиды элюировали смесью хлороформ—метанол—вода (85 85 30). При этих условиях фосфолипиды элюировались в первой фракции наряду с липопептидами и глиголипидами. DEAE-целлюлоза оказалась полезна для фракционирования кислых липидов, содержащихся в Es heri hia соИ [88]. Фосфолипиды успешно были выведены также с помощью гель-хроматографии на сефадексе LH-20 [77, 89]. [c.208]

Группа витамина А включает витамины А1 и Ао в виде спиртов, альдегидов, кислот и эфиров и большую группу каротинои-дов. Соединения этого типа неустойчивы на свету, а также в присутствии кислорода или кислот. Обычно вещества этой группы разделяют на основе различного их сродства к окиси алюминия, кремневой кислоте или целлюлозе. В отдельных случаях применяют молекулярные сита и иониты. [c.176]

Для выделения соединений этого типа используют иониты и молекулярные сита, например амберлит XAD-1 и XAD-2 [85], DEAE-целлюлозу [86] и DEAE-сефадекс А-50 [86, 88]. Из катионитов применяют СМ-целлюлозу [89, 90], дауэкс 50W-X2 [90], SP-сефадекс С-25 [91] и СМ-сефадекс С-50 в сочетании с другими молекулярными ситами [86, 92]. [c.197]

С DEAE-целлюлозы корриноиды элюируют в градиенте концентрации и pH фосфатного буфера [87, 92], а с DEAE-сефадекса А-50 — в градиенте хлорида натрия и фосфатного буферного раствора [92]. В случае амберлита в качестве элюентов служат этанол и ацетон [85]. При разделении на молекулярных ситах чаще всего используют трис—натрийхлоридный буферный раствор [93, 96] и фосфатный буферный раствор [95]. [c.198]

Понятие молекулярное сито с большим правом, чем к цеолитам, можно отнести к полупроницаемым мембранам. В первых работах по диализу мембранами служили пленки животного происхождения [7]. В настоящее время для диализа применяют преимущественно пленки из целлюлозы (Visking или Kalle). Эти пленки проницаемы в основном лишь для небольших молекул. Именно поэтому диализ вот уже в течение нескольких десятилетий используется как стандартный метод обессоливания высокомолекулярных соединений в водных растворах. Набухание мембран в растворе хлористого цинка или механическое растягивание значительно увеличивают их проницаемость [8]. Через такие мембраны довольно быстро могут диффундировать даже белки с молекулярным весом до 100 000 [8—10]. Из агара и агарозы получают мембраны, которые в набухшем состоянии полупроницаемы для белков [11] и даже для вирусов [12]. Изме- рение скорости диффузии через модифицированные мембраны из целлюлозы, обладающие ярко выраженной избирательностью, открывает новые возможности для изучения пространственной структуры сахаров [13], аминокислот [14] и пептидов [15]. Для такого тонкого разделения Крэйг предложил термин дифференциальный диализ [16]. [c.13]

При таком двумерном разделении фракция сывороточных белков дает не менее 12 зон. Их расположение на пластинке указывает на то, что при проведении электрофореза эффект молекулярных сит фактически отсутствует. Аномальная миграция при электрофорезе наблюдается лишь в случае а-макроглобу-лина, что может быть обусловлено тормозящим влиянием сетки геля. Вергани и сотр. [25] модифицировали методику путем проведения электрофореза на мембранах из ацетата целлюлозы. Таким способом удалось избежать тормозящего влияния геля на г-макроглобулин и другие высокомолекулярные белки. [c.269]

Хроматография гаироко применяется для разделения и очистки полинуклеотидов. Методы, разработанные для определения РНК и ДНК, будут рассмотрены в следующих главах подробное описание этих методов можно найти в соответствующих обзорах [32, 33]. При разработке методов хроматографирования были испытаны колонки из фосфата кальция [34—36], метилированного альбумина [37, 38], полиметакрилата магния (амберлит ШС-50) [39, 53] и като-2 (катионный крахмал) [54] наилучшие результаты были получены при использовании замещенных производных целлюлозы, например эктеола-целлюлозы (целлюлоза, обработанная апихлоргидрином и триэтаноламином) [19, 23, 31, 40—42] или ДЭАЭ-целлюлозы (диэтиламиноэтилцеллюлоза) [43, 44]. При использовании таких колонок наиболее эффективное разделение олигонуклеотидов, содержащих от двух до семи нуклеотидов, достигается путем градиентной элюции мочевиной. С успехом применяются также колонки с сефадексом, обладающим свойством молекулярного сита [45]. Для очистки информационной РНК употребляют колонки из ДНК [46, 47, 48, 49] (стр. 234). [c.34]

Хелатные смолы являются сшитым полистиролом, содержащим активную группу —СНгН(СН2СООН)2. Другие ионообменные материалы, имеющие ограниченное применение в аналитической химии, включают неорганические ионообменники [13] силикаты, такие как глины, алюмосиликаты и молекулярные сита жидкие ионообменники [14] (см. разд. 23-6) окислительно-восстановительные смолы (см. разд. 16-4) волокна целлюлозы, обработанные для получения ионообменных центров. [c.536]

Самый простой способ обеспечения стабильности электрофоретических зон заключается в том, что в среду для электрофореза вводят вещества, образующие капиллярную структуру. Ан-тиконвекционные свойства такой системы весьма высоки, если площадь поперечного сечения капилляров достаточно мала, так как в канале круглого сечения скорость потока снижается пропорционально четвертой степени радиуса. В качестве поддерживающей среды чаще всего используются фильтровальная бумага, пленки из ацетата целлюлозы, колонки или блоки целлюлозного порошка, гранулированный крахмал или гранулы поливиниловых полимеров, а также агаровый, агарозный, крахмальный или полиакриламидный гели. Зональный электрофорез в поддерживающей среде имеет ряд важных преимуществ. При его проведении можно использовать какой-либо простой и сравнительно недорогой прибор и анализировать одновременно несколько различных препаратов. Процедуры визуализации зон и выделения фракций осуществляются довольно легко. Вещества, обладающие биологической активностью, можно выявить непосредственно на электрофореграммах. Метод легко приспособить как для крупномасштабного разделения веществ, так и для микроразделения. Удается достигнуть очень высокой разрешающей силы, особенно в среде, характеризующейся одновременно антикон векционными свойствами и эффектом молекулярного сита. [c.34]