Зонное центрифугирование

Центрифугирование в градиенте плотности используют для разделения компопептов смеси нолимеров па дискретные зоны (т. наз. зонное центрифугирование). В аналитич. УЦ возможно обнаружение микрогеля, оценка его мол. массы, определение различия в плотностях компонентов в р-ре, получение распределения гю мол. массам и химич. составу, оценка средних мол. масс (включая М ), изучение избирательной сорбции одного из растворителей полимером. Метод не чувствителен к наличию примесей, даже если они высокомолекулярны или присутствуют в больших количествах. [c.200]

При изучении метаболизма РНК различные фракции РНК обычно идентифицируют зонным центрифугированием или, что еще лучше, электрофорезом в полиакриламидном геле. Для этого же можно использовать и гель-проникающую хроматографию в геле агарозы. Пример такого разделения показан на рис. 8-20. [c.204]

Полукоксование осуществляют во вращающихся барабанных печах. В топочной камере расположен вращающийся барабан (6) и змеевики (7) для перегрева пара и для подогрева остатка после центрифугирования. Остаток после центрифугирования в подогревателе (7) нагревают до 320°С и выводят на полукоксование. Зона змеевиков отделена от барабана огнеупорным перекрытием. Отопительный газ вводят в горелки, расположенные в подовой час- [c.151]

Полученную взвесь спор прогревают при температуре от 60 до 70 °С в течение 30 мин. Затем промывают стерильной дистиллированной водой при центрифугировании до полной прозрачности надосадочной жидкости. Промытую взвесь спор вновь прогревают в течение 30 мин при температуре от 60 до 70 °С. Взвесь спор хранят в запаянных стеклянных пробирках при температуре от 4 до 10°С и используют до тех пор, пока интенсивность роста и четкость зон при определении антимикробной активности препаратов удовлетворяют предъявляемым требованиям. [c.220]

Готовят серию двукратных разведений раствора антигена известной концентрации (см. стр. 121). 0,1 мл раствора антигена каждого разведения смешивают с 0,5 мл иммунной сыворотки. В зависимости от активности антисыворотку можно применять либо неразведенной, либо в разведении 1 2 или 1 4. Смесь инкубируют 60 мин при 37°С и оставляют до следующего дня в холодильнике. Образовавшийся преципитат осаждают центрифугированием при 1500 об/мин 10 мин и в надосадочной жидкости определяют оставшийся антиген или антитела, как описано на стр. 120. Проба, в которой надосадочная жидкость не содержит ни антигена, ни антител, позволяет обнаружить зону эквивалентности. [c.123]

Результаты количественной реакции преципитации можно выразить графически, построив кривую зависимости количества азота преципитата от количества добавляемого антигена. Полученную кривую можно разделить на три части. Первая часть кривой — зона избытка антител. В соответствующих пробирках комплексы антиген — антитело образуют преципитат, который осаждается центрифугированием, а в надосадочной жидкости можно обнаружить свободные молекулы антител. Вторая часть кривой (ее вершина) — зона эквивалентности. Надосадочная жидкость в соответствующих пробирках не содержит ни свободного антигена, ни свободных антител. Третья часть кривой — зона избытка антигена надосадочная жидкость в соответствующих пробирках содержит несвязанные молекулы антигена. С увеличением количества добавляемого антигена количество азота преципитата начинает уменьшаться. Дальнейшее увеличение концентрации антигена может привести к еще большему растворению преципитата вплоть до полного перехода его в раствор. [c.126]

При выделении твердой фазы из жидкостей зачастую требуется повысить концентрацию твердой фазы для более эффективного проведения процессов фильтрации, центрифугирования, сушки и т. п. Эта задача решается путем выпаривания жидкости на выпарных аппаратах различных конструкций (см. раздел 11). Как правило, для этих целей применяются трубчатые аппараты с естественной или принудительной циркуляцией и вынесенной зоной кипения. Последнее требуется для снижения эффекта загрязнения поверхности теплообмена твердой фазой. Возможно также применение для этих целей роторно-пленочных аппаратов. У аппаратов этого типа в процессе работы поверхность теплообмена в той или иной степени очищается лопатками, что позволяет в некоторых случаях выпаривать жидкость практически полностью, получая на выходе из аппарата порошок (см. 11.2.3). Следует отметить, что такой способ удаления твердой фазы из жидкости весьма энергоемкий, особенно когда теплота испарения жидкости велика, как, например, у воды. [c.23]

При растворении вещество, переходящее в раствор, на протяжении всего процесса контактирует с движущейся жидкостью через ламинарный пристенный слой небольшой толщины. В случае экстрагирования такой механизм наблюдается только в самом начале процесса, когда происходит вымывание растворяющегося вещества с поверхности твердых тел и из устьев пор. В дальнейшем граница межфазного взаимодействия непрерывно продвигается в глубь инертного носителя, контакт растворяющегося вещества с движущейся жидкостью утрачивается. Скорость процесса экстрагирования, при прочих равных условиях, ниже скорости растворения, так как путь диффузионного массопереноса при экстрагировании включает не только толщину ламинарного пристенного слоя, но и участки капилляров от зоны растворения до поверхности твердого тела, заполненные неподвижной жидкостью. И растворение, и экстрагирование завершаются переходом извлекаемого вещества в раствор. Однако по окончании процесса экстрагирования часть раствора содержится в порах инертного носителя и теряется после его отделения (фильтрацией или центрифугированием) от основного объема жидкости. [c.49]

В промышленной практике полукоксование осуществляют во вращающихся барабанных печах (см. рис. 6.18). В нижней части топочной камеры 8 расположен вращающийся барабан 9, а в верхней — змеевики 10 (для перегрева пара) и 11 (для подогрева остатка после центрифугирования). Зона змеевиков отделена от барабана огнеупорным перекрытием 12. Отопительный газ вводят в горелки 13. расположенные в подовой части обеих зон. Наружная температура корпуса барабана 530 °С, внуренняя 450 °С. Корпус вращающегося барабана через проемы в боковых кладках печи соединен с атмосферой. С одной стороны расположен привод 14 с двигателем, а с другой — узел 15 выгрузки твердого остатка. Твердый остаток содержит 40— 70% золы, 1—2% масла и может быть использован в топочных камерах или в газогенераторах. Остаток после центрифугирования в подогревателе 11 нагревают до 320 °С и выводят на полукоксование через специальную форсунку 16. [c.203]

Изменение радиоактивности раствора в процессе титрования может явиться результатом образования труднорастворимого осадка или экстрагируемого комплекса. В первом случае продукт удаляется из зоны реакции в виде труднорастворимого осадка либо фильтрованием через пористый стеклянный фильтр, либо центрифугированием [188—191]. [c.98]

Дихлорэтан обладает высокой плотностью поэтому раствор депарафинированного масла образует тяжелую фазу и цри центрифугировании отбрасывается к периферии, а раствор петролатума—к центральной зоне ротора центрифуги. В петролатуме содержится 30—40% масла, которое необходимо удалить. Обезмасливание осуществляется за счет второй ступени центрифугирования петролатума первой ступени, после дополнительной обработки его растворителем при несколько более высокой температуре. [c.61]

Метод получения твердых полимеров принципиально не отличается от предыдущего выделение и очистка полимеров более сложны, так как их необходимо просушить при помощи центрифугирования. Чтобы избежать вредного эффекта разбавления продукта водяным паром, в зоне реакции сырье предварительно просушивается. [c.319]

Азотнокислый висмут. Металлический висмут, очищенный от примесей зонной плавкой, растворяют в НКОз. Затем берут требуемое количество раствора, добавляют винную кислоту и доводят при помощи КОН pH раствора до 7—8. После 3—4-крат-ного дробного осаждения сероводородной водой осадки отделяют центрифугированием. Полученный фильтрат используют в работе. [c.302]

Техника выполнения опыта разделения очень проста. Хроматографирующие смеси получают растиранием сухих носителей и окислителей в соотношениях 1 10 и 1 15. В трубке диаметром 3—4 мм смесь уплотняют постукиванием или центрифугированием затем пропускают 2—5 капель исследуемой жидкости. По мере фильтрования на колонке идет образование зон. Так удается разделить на колонке следующие смеси. [c.384]

Одна из первых отечественных работ по определению аэрозоля металлического бериллия в воздухе рабочей зоны [288] основана на образовании летучего хелата бериллия с трифторацетилацетоном (ТФА) и детектировании полученного комплекса с помощью ЭЗД. Около 400 л воздуха со скоростью 20 л/мин аспирировали через высокодисперсный перхлорвиниловый фильтр АФА-ХП и после специальной обработки фильтра (озоление, сплавление с бифторидом калия, растворение в соляной и серной кислотах) к полученному раствору добавляли 1 мл 0,005 М раствора ТФА в бензоле и 1 мл 1 М раствора ацетата натрия. После экстракции и центрифугирования 1 мкл бензольного раствора хе- [c.383]

Весьма интересным оказалось применение метода скоростной седиментации к исследованию взаимодействующих [42] ассоциирующих частиц. Большие центробежные поля в ультрацентри-фуге являются одной из причин диссоциации рибосомных белков при их выделении методом зонного центрифугирования. Это интересное явление, обнаруженное Бреслером [43], указывает на влияние гидростатического давления на диссоциацию олигомерных белков и рибосом на субъединицы. [c.22]

Преимущество метода зонного центрифугирования — возможность определения 5 и Л для весьма малого количества полимера. Но еще более ценна возможность разделения гетеродисперсного полимера на составляющие компоненты, каждый из которых, отделяясь в градиенте плотности, седиментирует в виде отдельной зоны. Последнее широко используют для разделения биологических объектов. [c.23]

Центрифугирование в градиенте плотности, предложенное Ме-сельсоном [60], — ценный метод исследования природных и синтетических полимеров, основанный на различии в плотностях или скоростях седиментации его используют для разделения компонентов смеси полимеров на дискретные зоны (зонное центрифугирование). Например, сошлемся на развитие методики изучения равновесного центрифугирования в капиллярах [61 ]. [c.30]

Центрифугирование в градиенте плотности основано на том же принципе. Как и в вышеуказанном случае, градиент плотности создается градиентом концентрации. В колонке градиент концентрации достигается тем, что слои с различной концентрацией помещают друг над другом, после чего начинается медленная диффузия, постепенно выравнивающая градиент. Роль сил тяготения сводится главным образом к стабилизации системы путем снижения до минимума конвекционных токов. Наоборот, при центрифугировании в градиенте плотности градиент концентрации является результатом сил, действующих в центрифуге, и достигает равновесного значения. Установленный таким образом градиент плотности достаточно стабилен. Этот эффект был использован Пикельсом [2] для снижения конвекции в опытах по центрифугированию. Такой же принцип применяли Калер и Ллойд [31 в своих опытах с так называемой стабилизированной движущейся границей в препаративной ультрацентрифуге. Другим применением градиента плотности является зонное центрифугирование —методика, разработанная Брекке [4], которая позволяет разделять компоненты смеси полимеров на дискретные зоны. Предварительно создают градиент плотности, так что ни в одной точке плотность не превышает плотности любого из компонентов исследуемого образца, раствор которого помещают сверху, а затем подвергают центрифугированию. Различные компоненты мигрируют в разные зоны, которые все более и более разделяются по мере центрифугирования. Еще до того, как движущаяся с наибольшей скоростьЕо зона достигнет дна кюветы, центрифугу останавливают и анализируют различные зоны. Очевидно, что метод основан на различиях в скоростях седиментации. Градиенту плотности принадлежит второстепенная ролы стабилизация системы и влияние плотности жидкости на скорость седиментации. [c.418]

Зонное центрифугирование при условии, что плотность вблизи дна кюветы выше, чем плотность любого из компонентов образца, было названо Андерсоном [51 изопикническим градиентным центрифугированием . В эксперименте этого типа ни один из компонентов не достигает дна ячейки, как бы долго ни продолжалось центрифугирование. Чрезвычайно удобный для такого рода препаративной работы ротор был описан Андерсоном [61. Он представляет собой полый цилиндр, разделенный на 36 секторов. [c.418]

Способ отделения твердой фазы. В процессах депарафинизации в дихлорэтан-бензоловых растворах твердую фазу отделяют центрифугированием. Поскольку в этих процессах растворитель, а следовательно, и раствор масла являются более тяжелыми, чем взвесь выкристаллизовавшегося парафина, то центрифугирование осуществляют на центрифугах с выводом суспензии твердой фазы из центральной зоны. Обычно для этой цели используют закрытые центрифуги тарельчатого типа диаметром ротора 333 мм и высотой 233 мм, работающее нри 6300 об1мин. [c.202]

Кристаллофизические методы очистки, основанные на распределении примеси между твердой и жидкой фазами, такие, как зонная плавка, вытягивание кристалла и направленная кристаллизация, начали применяться в технологии (сначала для очистки германия, а потом и других элементов) с пятидесятых годов. Однако особая легкоплавкость галлия послужила причиной того, что для его очистки еще в тридцатых годах был предложен подобный метод — дробная кристаллизация металла. В металл, расплавленный под слоем разбавленной соляной кислоты и охлажденный до температуры кристаллизации, вносят затравку чистого металла. Кристаллизацию проводят до тех пор, пока в жидком состоянии не останется 8—10% от исходного галлия, после чего отделяют кристаллы от расплава, например, центрифугированием. Так как почти все примеси, если их содержание в галлии превышает0,0003%, концентрируются в оставшейся жидкости, кристаллы оказываются чище исходного металла. Кристаллы промывают дистиллированной водой, и цикл кристаллиазции повторяют. После 6—10 таких циклов из галия чистотой 99,999% можно получить металл чистотой 99,9999% [1121. [c.265]

Очевидно, что процесс фирмы Филлипс непрерывной кристаллизации дает определенные преимущества с точки зрения отсутствия включений маточного раствора в полостях внутри кристалла или групп кристаллов. При перемещении кристаллов из охлаждаемой зоны колонны в обогреваемую включения маточного раствора в кристалле будут увеличиваться в результате плавления (растворения) стенок и в конце концов окажутся на поверхности и без труда перейдут в ядро жидкой фазы. Кроме того, при противоточпом методе, в результате последовательного достижения равновесий с прогрессивно обогащающимися растворами по мере продвижения кристалла в слое жидкости изменяющегося состава, удаляется пленка жидкости, адсорбированная на кристаллах. Поэтому процесс кристаллизации в аппарате типа колонны обеспечивает эффективное удаление всех трех типов включений маточного раствора, в то время как при обычном центрифугировании или фильтрации удаляется только жидкость, удерживаемая под действием капиллярных сил. Следовательно, теоретически противоточная очистка в колонне непрерывного действия при работе со смесями, образующими эвтектики, позволяет приблизиться к 100% эффективности единтгчной ступени очистки, что является принципиальным отличием ее от всех других известных процессов. [c.68]

В зоне загрузки гранулята в экструдер корпус воронки оснащают регулируемым водяным охлаждением. Этим предотвращается пластификация загружаемого материала и прилипание его к поверхности шнека, препятствующее его захвату шнеком. Шнеки изготовляют из специальной хромоникелевой стали и,так же как и цилиндр, подвергают термообработке. Внутренние стенки цилиндра (гильзы) футеруют ксалоем — износоустойчивой лигатурой. Нанесение ксалоевой футеровки методом центрифугирования горячей лигатуры обеспечивает равномерный обогрев через стенки биметаллического цилиндра. Обогрев цилиндра по зонам осуществляют электрическими нагревателями, состоящими из нихромовой спирали и керамических изоляторов. [c.192]

Пря улыпрацентрифугировании для разделения используется седиментация, зависящая от размера, плотности и формы молекулы белка. Центрифугирование в градиенте плотности (зональное центрифугирование) часто применяется для разделения белков, а также для разделения органелл и вирусов. Одной из характеристик белка служат данные седиментационного анализа в ультрацентрифуге (разд. 3.5.4). Положение возникающих белковых зон можно наблюдать с помощью оптических методов. [c.349]

Полнота отделения механических примесей и воды от масла при центрифугировании зависит также от времени пребывания масла в зоне действия ценробежных сил и от производительности [c.67]

Используя соответствующую соль, можно создать устойчивый в условиях центрифугирования градиент ее концентрации, а тем самым и градиент плотности растворителя. Если природа соли и распределение ее концентрации таковы, что плавучая плотность биополимера выше, чем плотность растворителя на мениске, но ниже, чем у дна пробирки, то по мере перемещения к дну пробирки биополимер достигнет участка, где множитель 1 - / о/р станет равным нулю и дальнейшая седиментация прекратится, т.е. возникнет устойчивая зона нахождения биополимера. Наиболее широкое применение для этой цели нашли растворы солей цезия, которые позволяют получить растворы с плотностью, достаточной для остановки перемещения нуклеиновых кислот. Эксперименты подобного рода весьма дороги, так как требуют длительной, обычно на протяжении нескольких суток, работы ультрацентрифуг. Однако они открывают некоторые уникальные возможности. Например, удается разделить биополимеры, различающиеся лишь изотопным составом. Молекулы ДНК из одного вида микроорганизма, выращенные на средах, содержащих в качестве источника азота соли аммония и 15NH4, не отличаются по объему, но имеют разные массы и, следовательно, различные плавучие плотности. Поэтому при равновесном центрифугировании и градиенте плотности хлорида цезия они образуют отдельные зоны. Пример применения этого метода для доказательства полуконсервативного характера репликации ДНК приведен в 5.1. [c.244]

К определенному количеству фракции нефти или другого нефтепродукта при комнатной температуре и при перемешивании пипеткой дозируется 8пС14 (обычно из расчета 1—2 моля на 1 г-атом серы, содержащейся в образце). Нефтепродукты с высокой вязкостью предварительно разбавляются нентаном или гексаном в объемном отношении от 1 1 до 3 1. После перемешивания смеси в течение 5 мип гетерогенный комплекс, если он образуется, отделяется путем центрифугирования. Жидкая фаза заливается в колонну, заполненную силикагелем АСК. В отличие от общепринятых методов предварительного приготовления сорбентов из-за высокой склонности комплексов к адсорбции в данном случае не требуется жестких условий прокаливания. Силикагель после прогрева при 120—150°С в течение 3 ч засыпается в колонну, которая заполняется сухим нентаном или гексаном и герметизируется. Жидкая фаза после отделения гетерогенного комплекса заливается в колонну при открытом нижнем кране. Контроль за адсорбируемостью комплексов осуществляется визуально, поскольку они окрашены. После прекращения продвижения окрашенной зоны па-рафино-нафтеновые углеводороды смываются к-гексаном (контроль по показателю преломления). Десорбция комп- [c.83]

В пробирку (0,6X5 см) помещают 100 мкл, сыворотки, 100 мкл абсолютного этанола и 150 мкл петролейного эфира (т. кип. 40—60 °С),. После тщательного перемешивания слой петролейного эфира отделяют центрифугированием (2000— 3000 об/мин, 10 мин) и переносят в другую пробирку. Петролейный эфир удаляют током азота, остаток растворяют в 5 мкл петролейного эфира и наносят на микроколонку (внутр, диаметр 0,15X15 см) с окисью алюминия (более 200 меш), содержащей 5% воды. Предварительно сорбент смачивают 5 мкл петролейного эфира. Элюирование проводят в темноте смесью циклогексанон—ацетон (95 5). В аналогичных условиях хроматографируют смесь ретинола и ретинилпальмитата в петролейном эфире Разделяемы е соединения обнаруживают при освещении УФ-светом верхняя зона содержит ретинол, нижняя— ретинйл-пальмитат. Колонку разрезают на две части, вещества элюируют 150 мкл хлороформа. Остатки сорбента отделяют на центрифуге (2000—3000 об/мин, 10 мин), 100 мкл надосадочной жидкости переносят в пробирку и добавляют 100 мкл трифторуксусной кислоты (разбавленной хлороформом в отношении [c.177]

При центрифугировании небольшого количества ДНК в концентрированном растворе хлористого цезия вскоре достигается равновесие. Действующие при этом противоположные процессы седиментации и диффузии приводят к установлению стабильного градиента концентраций хлористого цезия с непрерывным повышением плотности в центробеишом направлении. Макромолекулы ДНК сдвигаются под действием центробежной силы в зону, где плотность раствора равна собственной плотности ДНК. Этой тенденции противостоит процесс диффузии, в результате чего в условиях равновесия определенный вид ДНК оказывается сосредоточенным в узком слое. При наличии нескольких видов ДНК с различной плотностью каждый из них образует определенный слой в том месте, где плотность раствора хлористого цезия равна плотности данного вида ДНК. [c.65]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология