Хроматограммы сушка

Аппаратура для бумажной хроматографии. Основными элементами аппаратуры для БХ являются хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки и элюирования, пульверизаторы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения / /, планиметры и денситометры для количественных определений. [c.353]

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

На хроматограмму размером 20 х 20 см после окрашивания осторожно наливают 50 мл указанного выше раствора. Во избежание утечки хроматограмму обрамляют тесьмой из лейкопластыря шириной 1 см. После сушки коллодийную пленку разрезают вдоль полоски лейкопластыря. Хроматограмму затем легко снимают с пластинки в виде упругой пленки. Для окончательного хранения эту пленку наклеивают на лист бумаги с помощью прозрачной пластмассовой. ленты. [c.50]

После окончательной сушки на воздухе хроматограммы наклеивают на картон и в таком виде сохраняют. [c.51]

Хорошие показатели по разрешающей способности дали две первые смеси с фенолом. Некоторые трудности в работе (ядовитость фенола, необходимость добавки цианидов, длительная сушка хроматограмм и разложение аминокислот при температуре выше 60° [9, 101, особенно, если фенол не удален полностью) ограничивают применение этих растворителей. От указанных недостатков свободны растворители на основе предельных спиртов. [c.213]

При анализе на распределительной колонке в газовой фазе первого опыта были обнаружены лишь углеводороды G5—Се, по-видимому, остатки растворителя, которые выделились из смолы при нагревании. В последующих опытах, которым предшествовала более тщательная сушка смолы в вакууме, соответствующие пики па хроматограммах отсутствовали. Таким образом, при помощи газовой хроматографии можно опре делять полноту удаления растворителя при высушивании. [c.257]

Оборудование для проявления хроматограмм химическим методом (рис. 6). Тонкослойные пластины помещают для проявления в специальные камеры / и опрыскивают из распылителя 2 химическими реагентами, дающими цветные реакции с разделенными веществами. Если химическое воздействие реагента с разделенными веществами происходит только при повышенной температуре, то пластину после опрыскивания помещают в камеру проявления, которая по конструкции идентична камере сушки и активации (см. рис. 3) и отличается только меньшими размерами. [c.20]

Выполнение двухмерной хроматограммы. На лист фильтровальной бумаги, размером 45 X 55 с.м, наносят каплю гидролизата объемом 10—25. мл, содержащую не. меньше 0,2—0,3 мг белка. Каплю по.мещают вблизи одного угла бумаги, на расстоянии 5—б см от обеих сторон. Бу.магу помещают в ванночку, укрепляют в ней тонкой стеклянной пластинкой, которая немного длиннее бумаги, и устанавливают в камере (рис. 2) в ванночку заливают первый растворитель, и камеры плотно закрывают. Когда растворитель пройдет нужное расстояние (35—45 см за 20—30 час.), бумагу вынимают из камеры широкими щипцами (нельзя прикасаться к бумаге пальцами, так как они оставят след, который обнаружится после проявления бу.маги нингидрином) и высушивают в сушильном шкафу при 110° до полного удаления растворителя. Сухая бумага поворачивается через правый угол на 90°, и теперь уже другая ее сторона, по которой распределены аминокислоты, погружается во второй растворитель. За время сушки бумаги от первого растворителя камера должна быть подготовлена для второго растворителя, если не имеется целого ряда камер, используе.мых только для одного растворителя. [c.396]

Реагент для опрыскивания II 1 г хлорида железа(1П) растворяют в смеси 2 мл конц. H I и 20 мл эфира Обработка хроматограмм опрыскивание реагентом I, сушка при комн. температуре, опрыскивание реагентом II [c.110]

Отношение числа импульсов, полученного при сканировании гой стороны хроматограммы, которая при сушке подогревалась, к числу импульсов, полученному при сканировании обратной стороны. [c.60]

После нанесения растворов аминокислот листы бумаги кладут в камеры, добавляют соответствующие растворители и пропускают растворители, как указано вы-ще. После каждого пропускания растворители удаляют из бумаги высушиванием в специальном шкафу для сушки хроматограмм. [c.42]

Оборудование и реактивы. 1) Хроматографические камеры. 2) Шкаф для сушки хроматограмм. 3) Хроматографические колонки. 4) Гомогенизатор. 5) Центрифуга. 6) Водяная баня. 7) Прибор для отгонки спирта в вакууме. 8) Вентилятор. 9) Фен. 10) Пульверизатор. 11) Делительные воронки. I2) Ступки. 13) Пипетки. 14) Микропипетки. 15) Мерные колбы емкостью 1 л, 100, 50 и 10 мл. 16) Фарфоровые чашки. 17) Конические колбы. 18) Стаканы. 19) Хроматографическая бумага. 20) Этиловый спирт 96%-ный и 80%-ный. 21) н-бутиловый спирт. 22) Уксусная кислота. 23) Петролейный эфир. [c.80]

Оборудование и реактивы. 1) Хроматографические камеры. 2) Шкаф для сушки хроматограмм. 3) Вентилятор. 4) Хроматографические колонки. 5) Водяная баня. [c.132]

Влияние неодинаковой сушки разных сторон бумажной хроматограммы на миграцию к поверхности [36] [c.60]

ПРИСПОСОБЛЕНИЯ ДЛЯ СУШКИ ХРОМАТОГРАММ [c.66]

Элюированные в летучих растворителях хроматограммы свободно подвешивают для сушки на воздухе, лучше всего в вытяжном шкафу или в токе воздуха под вытяжным колпаком. При использовании малолетучих растворителей (например фенола, коллидина) или бумаги, пропитанной формамидом или пропиленгликолем, лучше всего сушить хроматограммы в сушильном шкафу с циркуляцией воздуха. Если хроматографируемые вещества достаточно термостойки, хроматограммы можно сушить над нагревательной плиткой. Когда для обнаружения используют индикаторы, надо специально проследить, чтобы с бумаги испарился весь кислотный или основный растворитель, входящий в состав обнаруживающего реагента, а также чтобы сушка хроматограмм проводилась в нейтральной атмосфере. Соляную кислоту нельзя удалить с бумаги полностью. Удаление следов уксусной кислоты с хроматограмм можно ускорить, если подержать хроматограммы горизонтально над паром, идущим от плоской чашки с кипящей водой, или обдувать их горячим паром. [c.94]

Подкисленный или подщелоченный перманганат калия окисляет очень многие соединения, образуя при этом пятна от желтой до белой окраски на фиолетовом фоне хроматограмм. После сушки фон становится коричневым, а через несколько суток даже исчезает. Для обнаружения веществ кислотного или основного характера также пригодны кислотно-основные индикаторы в водном или спиртовом растворе. Раствором динитро-фенилгидразина обнаруживают вещества, содержащие карбонильную группу. В частности, с ним интенсивно реагируют ароматические альдегиды и кетоны. Раствор нингидрина — очень чувствительный реагент на аминокислоты и вообще алифатические амины. [c.95]

Рекомендуют также после разделения веществ и сушки пластинки на воздухе незакрепленный слой сорбента пропитывать проявляющей жидкостью в направлении, перпендикулярном направлению развития хроматограммы. [c.42]

Хроматограммы на слоях силикагеля опрыскивали смесью равных объемов 2,5 %-ного водного раствора щавелевой кислоты и 1,86 %-ного раствора анилина в ацетоне. После сушки пластинки сканировали денситометром [133] или промеряли методом отражательной денситометрии [134]. Конечно, этот [c.572]

Разделение продуктов гидролиза проводят методом распределительной хроматографии со смесью бутанола, ацетона и воды (40 50 10). Для этого в стеклянный сосуд наливают растворитель так, чтобы закрыть дно. После того как желоб, закрепленный в верхней части сосуда, заполнится наполовину, закрытый сосуд оставляют на несколько часов для насыщения воздуха внутри сосуда парами растворителя. Только после этого лист бумаги помещают в сосуд, погрузив верхний край листа в желоб и придерживая его тяжелой стеклянной палочкой так, чтобы базисная линия находилась на 3—5 см ниже края желоба. Сосуд закрывают крышкой, и спустя 2—3 ч фронт растворителя должен пройти четверть бумажной полосы. (В зависимости от конструкции сосуда и желоба хроматограммы будут несколько различаться, поэтому оптимальное время распространения фронта растворителя можно установить, только повторяя опыт.) Бумагу вынимают и сушат на воздухе. Затем обрабатывают анилинфталатом и после сушки на воздухе в течение 10 мин ее помещают в сушильный шкаф при 100°С еще на 10 мин для проявления сахарида в виде фиолетово-коричневых пятен. [c.251]

Влияние толщины слоя на воспроизводимость разделения доказано в работах 69, 86]. В этих же работах показано, что точное соблюдение одинаковых условий при нанесении, сушке и активировании слоев в одинаковой степени сказывается на воспроизводимости значений Яр. Зависимость воспроизводимости хроматографического разделения от толщины слоя показана такл<е и в других работах [21, 33, 34, 40, 41, 98, 99]. Другие авторы изучали влияние зернения силикагеля на воспроизводимость значений Яр и характер разделения веществ [2, 132, 141, 157, 169, 181]. Важным фактором, определяющим воспроизводимость результатов, является активность слоя и соответственно ее контроль [174]. Контроль активности заключается в проведении простой и быстрой операции — в хроматографировании некоторых азокрасителей по их расположению на хроматограмме непосредственно определяется активность [49, 138, 139]. Однако активность слоев еще не является той величиной, которая однозначно определила бы их ад- opбциoннyip способность. Попытка классифицировать отдельные сорбенты по их адсорбционной способности [ИЗ] оказалась безуспешной, поскольку отдельные типы сорбентов отличаются друг от друга величиной поверхностной энергии. Поэтому на основе значений Яр стандартных красителей нельзя сравнить, например, активности силикагеля и окиси алюминия. Активность слоев, на которых компоненты смеси делятся по принципу адсорбции, математически рассчитал Снайдер [133]. Влияние влажности сорбента на воспроизводимость величин Яр изучали многие авторы [6, 29, 50]. Влажности воздуха в момент нанесения образца на хроматограмму приписывают большое значение Даллас [21] и другие авторы [6, 42, 173]. [c.78]

При проведении препаративной хроматографии, особенно при разделении веществ с близкими Яр, часто применяют повторное хроматографирование (разд. 3.1.1). В этих случаях перед каждым новым хроматографированием слой необходимо тщательно высушить. Поскольку толстый слой содержит значительное количество растворителя, сушить препаративные пластинки можно только в вытяжном шкафу. Особую осторожность следует соблюдать при работе с хроматограммами, элюированными в легко воспламеняющихся растворителях. В продаже имеются специальные сушилки, однако для обычной работы вполне достаточно проводить сушку при комнатной температуре. Такая сушка хотя и занимает много времени, однако осуществляется в мягких условиях. [c.135]

При разделении аминов и аминокислот Хонеггер работал с напряжением 440 или 460 в (19,6 или 12,6 ма) и в случае необходимости пропускал ток в течение часа. После сушки пластинок можно осуществить распределительно-или адсорбционнохроматографическое разделение (разд. 19, VI). После этого вещества на хроматограмме можно обнаружить обычными индикаторами. [c.33]

Для быстрого количественного определения глютаминовой кислоты в мелассе, особенно в производственном контроле, можно рекомендовать электрофорез на бумаге [14]. Для этого был использован прибор ЭМИБ, применяемый для разделения белков крови. Электрофоретическое отделение глютаминовой кислоты удовлетворительно проходит в ацетатном буфере с рН-3,7 в течение 3 ч при градиенте потенциала около 10 в см. После сушки и обработки хроматограммы нингидрином количественное определение заканчивается, как описано выше. [c.216]

Рис. 6. хроматографическое разделение смеси аминокислот а — модель прибора для восходящей хроматографии б — полоса хроматографической бумаги с отмеченным на ней местом нанесения смеси аминокислот в — про-явлеыная хроматограмма г — один из возможных способов сушки хроматограммы [c.40]

По окончании разделения хроматограмма извлекается из сосуда с растворителем и высушивается в потоке воздуха, который должен быть по возможности более спокойным. Это особенно важно при работе с толстой хроматографической бумагой, так как меченое соединение во время просушки может не только сместиться вдоль хроматограммы, но и мигрировать с одной поверхности на другую. Например, если влажная хроматограмма лежит на полоске стекла, то растворитель испаряется лишь с открытой поверхности и соединения, особенно с высокими значениями Rf в данном растворителе, также концентрируются у открытой поверхности. Если в дальнейшем такую хроматограмму сканировать с обеих сторон 2я-детектором, то полученные результаты сильно различаются и точные количественные измерения невозможны. Применение 4я-детектора позволяет в основном преодолеть это затруднение, но все же не рекомендуется проводить одностороннюю сушку хроматограмм, так как разные вещества могут еще и испа- [c.55]

Установлено, что при авторадиографировании хроматограмм из толстой бумаги наблюдается небольшое уменьшение чувствительности. Первоначально это пытались объяснить тем, что на более толстой хроматографической бумаге вещество образует более компактную, меньшую по размерам, зону [35], однако, как оказалось, этот эффект — результат миграции вещества к поверхности в процессе сушки хроматограммы. Дунком [36] сравнил результаты, полученные при высушивании влажных хроматограмм потоком горячего воздуха, направленного на одну из сторон бумаги, и при e тe fвeн)-ной сушке в помещении лаборатории. Как и следовало ожидать, на хроматограммах, подвергнутых принудительной сушке, наблюдалась преимущественная миграция вещества к одной из поверхностей, а на полосках, высушенных в спокойном воздухе, вынос вещества на обе поверхности был одинаковым. [c.60]

Интересно отметить, что при естественной сушке миграция различных веществ к поверхностям хроматограммы также происходит, а ее степень зависит от величины Rf. В табл. 3.1 приведены результаты, полученные Дункомом и подтверждающие этот факт. В связи с этим с помощью авторадиографии трудно получить количественные результаты, и для этого рекомендуется использовать такие методы, как сжигание проб или прямой жидкостный сцинтилляционный счет активности в зонах, выявленных авторадиографически. [c.61]

В работе [49] приведен другой вариант разделения неионогенных СПАВ методом тонкослойной хроматографии. Авторы используют пластинки с силикагелем, имнрегнированные раствором щавелевой кислоты. Хроматограмму проявляют смесью хлороформа с метиловым спиртом. Пластинку опрыскивают модифицированным реактивом Драгендорфа или раствором хлорида бария, затем после сушки на воздухе — раствором иода. По данным авторов, метод обеспечивает групповое разделение неиногенных СПАВ на оксиэтилированные спирты, эфиры, азотсодержащие соединения и свободные полигликоли. Для полной идентификации веществ с участков хроматограмм, содержащих СПАВ, эти вещества элюируют четыреххлористым углеродом и снимают ИК-спектрьг. Открываемый минимум 15—50 мг. [c.240]

Учитывая ослабление интереса к бумажной хроматографии, мы рассмотрим только чаще всего употребляемую, доступную или простую аппаратуру для БХ. Более полное описание различных видов аппаратуры можно найти в рекламной литературе и в специальных монографиях по БХ (см., например, [50], а также список литературы в гл. 13). За последнее десятилетие аппаратура и техника БХ почти не совершенствовались. Некоторая работа в этом направлении проведена только Бущем и Кроушоу [19], ее мы обсудим ниже. Список аппаратуры для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, чашки для обнаружения и пропитки, сосуды для элюента, сушильные шкафы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения Rf, а также планиметры и денситометры для количественных определений, ко-лировальные машины и т. д. [c.62]

В лаборатории хроматографического анализа необходимо иметь специальный стол для нанесения пробы анализируемого раствора на полоску бумаги, сушильный шкаф с автоматической регулировкой температуры (60—120°С). Через сушильный шкаф должен проходить ток горячего воздуха, чтобы атмосфера в нем не оставалась насыщенной парами растворителя. Размеры сушильного шкафа определяются размерами хро.матограмм. Для сушки бумагу подвешивают обычно на шнуре или стержне с помощью зажимов. В сушильный шкаф желательно помещать одновременно целую серию хроматограмм. [c.96]

Один из вариантов метода прямого измерения радиоактивности на хроматографической пластинке предусматривает обработку слоя полимерным связующим [317, 335, 337]. После такой обработки хроматограмму удаляют с опорной пластинки, разрезают на полоски и промеряют в приборе, предназначенном для сканирования хроматограмм на бумаге. При опрыскивании пластинки суспензией полимера на поверхность пластинки помещают кусок прозрачной ленты, чтобы легче было снять адсорбент. Слой следует затем повернуть и слегка опрыскать этой же суспензией с обратной стороны, чтобы предотвратить возможность потери частиц адсорбента [335]. Скиб [338] использовал опорный слой из пластмассы. После нанесения пробы, разделения и сушки хроматограмму опрыскивают суспензией полимера, чтобы закрепить хроматограмму на опорной полосе из пластмассы. Всю пластинку разрезают затем на полоски для сканирования в стандартном устройстве. Для покрытия хроматограмм радиоактивными водорастворимыми 23 [c.355]

Бреннер и Нидервизер [23], а также Фэми и др. [24] провели обширное исследование разделения аминокислот на силикагеле О они получили величины для 26 соединений в различных растворителях (табл. 17.1). Разделение. осуществляли на воздушно-сухих пластинах силикагеля в насыщенной атмосфере. Трудноразделимые пары соединений удалось эффективно разделить методом двумерного хроматографирования с различными растворителями. После 10-минутной сушки хроматограмм при 110°С авторы обнаружили пятна аминокислот реактивом Т-178. Получаемая при этом окраска пятен характерна для индивидуальных аминокислот. Длина пути разделения в этом случае составляет 10 см. Бенчер и др. [25] описали методику хроматографирования на пластинках меньших размеров при длине пути [c.479]

Нейвальд и Феттинг [19] изучали продукты окисления холестерина методом хроматографии на слоях силикагеля G, элюируя пробу хлороформом. Для обнаружения пятен пероксидов они использовали реактив Т-207. Эти пероксиды дают на хроматограмме синие пятна с Rf меньше 0,32, т. е. меньше величины Rf, полученной в этом растворителе для холестерина, не содержащего пероксид. После опрыскивания хроматограммы 50 %-ным раствором трихлорида сурьмы в азотной кислоте и 10-минутной сушки при 100°С холестерин дает темно-красное пятно. Аккер и Греве [20] изучали индуцированное радиацией окисление холестерина, содержащегося в продуктах из яичной пасты. Хорват [21], элюируя пробу смесью хлороформ—ацетон (4 1), разделил 22 продукта самопроизвольного окисления холестерина на клиновидных слоях. [c.290]

Пензес и Эртель [140] разделяли на силикагеле производные эстрона, эстриола и эстрадиола, элюируя их смесью хлороформ—бензол—этанол (18 2 1). После сушки хроматограммы опрыскивали смесью изопропанол—триэтиламин (4 1), снова сушили сначала на воздухе, а в заключение 24 ч над силикагелем. При этой обработке порог чувствительности снижался примерно до 1 нг, а область линейной зависимости находилась в пределах от 1 до 25 нг. Хроматографирование вели также на слоях полиамида, элюируя пробы смесью ацетон— метанол—вода (2 8 2), однако обработка таких слоев триэтиламином приводила к снижению интенсивности флуоресценции. Слои силикагеля предварительно элюировали смесью хлороформ—этанол (3 1), а слои полиамида — смесью метиленхлорид—тетрахлорид углерода—метанол (1 1 1) с последующей активацией при 110°С. [c.312]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология