Полоса хроматографическа

С помощью бумажной распределительной хроматографии легко разделить аминокислоты и определить их в смеси. Этот метод основан на том, что органический растворитель, перемещаясь вдоль полос хроматографической (фильтровальной) бумаги, увлекает за собой растворенные в нем аминокислоты. Каждая аминокислота в своем движении достигает определенного уровня. Этот уровень характеризуется коэ ициентом / /, который является отношением расстояния от середины пятна до места нанесения раствора к состоянию расположения фронта растворителя, например, / / лейцина равен [c.26]

Одномерная восходящая хроматография. 1-—5 мкл исследуемого раствора капилляром наносят на полосу хроматографической бумаги в 2 см от нижнего края. Если неподвижная фаза — вода, то бумагу специально не обрабатывают, так как воздушносухая бумага содержит до 20—22% влаги. Подвижную фазу, насыщенную неподвижной, наливают на дно сосуда для хроматографирования (в цилиндр или пробирку). Полосу бумаги нижним краем опускают в жидкость, а верхний край закрепляют так, чтобы бумага свободно свисала вниз, не касаясь стенок сосуда. Под действием капиллярных сил подвижная жидкость поднимается вверх по бумаге и разделяет компоненты смеси, которые при различных значениях движутся по слою бумаги с неодинаковыми скоростями. [c.75]

Помещают подготовленную полоску верхним краем (выше того места, где нанесены пятна) в узкое отверстие кюветы, предназначенной для подвижной фазы, и закрепляют поставленным на ребро предметным стеклом. Линия старта не должна находиться в кювете, а располагаться на расстоянии 4 см от верхнего ее края на свободно висящей части полосы хроматографической бумаги. [c.528]

Хроматографирование ведут 24 ч. Растворитель проходит путь около 25 см. Через 24 ч полосу хроматографической бумаги осторожно вынимают из камеры вместе с кюветой. Вынимают предметное стекло, удерживающее бумагу в кювете. Полоску бумаги подвешивают в вертикальном положении на толстую нить для подсушивания, предварительно отметив карандашом нижнюю границу фронта подвижной фазы. Пока бумага высыхает, готовят фотографическую кювету, в которую наливают 0,5%-ный раствор нингидрина в безводном ацетоне слоем 3—4 мм. [c.528]

Однако наряду с размыванием полосы хроматографической зоны в процессе разделения в колонке может происходить также и размывание ее в устройстве для ввода пробы, в соединительных капиллярах инжектор — колонка и колонка — детектор, в ячейке детектора и в некоторых вспомогательных устройствах (микрофильтры для улавливания механических частиц из пробы, устанавливаемые после инжектора, пред-колонки, реакторы-змеевики и др.). Размывание при этом тем больше, чем больше внеколоночный объем по сравнению с удерживаемым объемом пика. Имеет также значение и то, в каком месте находится мертвый объем чем уже хроматографическая зона, тем большее размывание даст мертвый объем. Поэтому особое внимание следует уделять конструированию той части хроматографа, где хроматографическая зона наиболее узкая (инжектор и устройства от инжектора до колонки) — здесь внеколоночное размывание наиболее опасно и сказывается наиболее сильно. Хотя считается, что в хорошо сконструированных хроматографах источники дополнительного внеколоночного размывания должны быть сведены до минимума, тем не менее каждый новый прибор, каждая переделка хроматографа должны обязательно заканчиваться тестированием на колонке и сравнением полученной хроматограммы с паспортной. Если наблюдается искажение пика, резкое снижение эффективности, следует тщательно проинспектировать вновь введенные в систему капилляры и другие устройства. [c.12]

Нарезают полосы хроматографической бумаги длиной 50—Г)Г) см и шириной 13—1 ) см или другого размера (в зависимости от диаметра хроматографической камеры), Бумагу разлиновывают графитовым карандашом, оставляя с одной стороны листа одну, а с другой — две контро.чьные по.чосы шириной 2 [c.229]

Для проведения восходящей хроматографии на бумаге используют камеры, в которых сосуд (лодочка) с подвижной фазой располагается в нижней части или на дне. Полоса хроматографической бумаги закрепляется в верхней части камеры так, чтобы обеспечить возможность погружения нижнего конца полосы в лодочку с подвижной фазой. В рабочем положении полосы линия старта должна отстоять от поверхности подвижной фазы на 2—3 см. В остальном приемы работы при проведении восходящей хроматографии на бумаге не отличаются от описанных выше. [c.102]

Разделение веществ методом бумажной хроматографии можно осуществить следующим образом. Раствор, содержащий исследуемую смесь радиоактивных веществ, наносят в виде отдельных капель на так называемую стартовую линию , расположенную недалеко (на расстоянии 3—4 см) от края полосы хроматографической бумаги. После подсушивания этот край погружают в соответствующий растворитель, налитый на дно хроматографической камеры, причем стартовая линия должна быть расположена несколько выше поверхности растворителя (рис. 67). В качестве растворителей обычно используют полярные органические жидкости (алифатические спирты и кетоны с небольшим молекулярным весом, простые эфиры, а также хлороформ, трибутил-фосфат и т. д.) или смеси растворителей, насыщенные водой и органической или минеральной кислотой. В плотно закрытой хроматографической камере, атмосфера которой насыщена парами подвижного растворителя, последний под действием капиллярных сил поднимается вверх по листу бумаги. Как только растворитель достигнет стартовой линии, происходит перераспределение компонентов разделяемой смеси между подвижной и неподвижной фазами в соответствии с коэффициентами распределения каждого компонента. В результате смесь подразделяется на отдельные зоны, перемещающиеся с различной скоростью по потоку растворителя. Через определенное время (от 2—3 ч до нескольких суток — в зависимости от скорости перемещения фронта раствори- [c.194]

Начинать работу следует с выбора оптимальной смеси растворителей. Для этого на полосы хроматографической бумаги пятнами наносят экстракты (в расчете 0,05—0,2 г сухого вещества в пятно), которые подвергают разделению в ряде смесей растворителей. Хроматограммы проявляют указанными выше реактивами на индольные и фенольные соединения. Последняя группа веществ обычно служит своеобразными маркерами, показывающими, удовлетворительно ли разделяются вещества на хроматограммах. [c.12]

Вырезают полосу хроматографической бумаги, намечают простым карандашом линию старта и на ней точки нанесения исследуемых веществ. [c.172]

Можно рекомендовать и другой способ. Полосы хроматографической бумаги равномерно орошают ацетатным буфером и раскладывают на чистый сухой лист фильтровальной бумаги. На середину этих полос накладывают узенькие бумажные полоски (1,5Х Х0,2 см), смоченные соответственно исследуемым раствором гидролизата белка и 1%-ными растворами свидетелей. Подготовленные полосы переносят в электрофоретическую камеру. [c.248]

В самое последнее время в практику вошел электрофорез на бумаге, в известной мере заменяющий исследования на громоздком и дорогостоящем аппарате Тизелиуса. При этом на пропитанную буферным раствором полосу хроматографической бумаги наносят каплю белковой смеси (сыворотка крови, лимфа и т. п.). Сама середина бумаги подвешивается на подставке и ее концы погружаются в катодную и анодную ванны, заполненные буфером, с угольными электродами. На угольные электроды подается известное напряжение. Капля белковой смеси, продвигаясь к тому или иному полюсу, расслаивается. Белки, имеющие наибольший электрокинетический потенциал, продвигаются быстрее, белки с меньшим потенциалом отстают. [c.279]

Достаточно четкое разделение кислот, отличающихся друг от друга на один С-атом, получают в следующей постановке опытов. Смесь кислот наносят на две полосы хроматографической бумаги. Одну из них хроматографируют в смеси [5] [c.19]

Qn находят экспериментально, зная вес полосы хроматографической бумаги до хроматографирования (Л) и процентное содержание в ней Н2О (а) [c.127]

Для определения Ко используют те же растворы солей, что и в предыдущей задаче. Размеры полос хроматографической бумаги указаны там же. [c.127]

Qн находят экспериментально, зная массу полосы хроматографической бумаги до хроматографирования (Р) и процентное содержание в ней влаги (а) [c.175]

Для разделения анализируемую смесь нитратов р.з.э. наносят на полосу хроматографической бумаги рядом со смесью известного состава. После увлажнения бумагу помещают в герметически закрытую камеру, где вдоль полосы в течение определенного времени непрерывно протекает раствор родановой кислоты [2J в метилэтилкетоне. Благодаря различным коэффициентам раснределения роданидов р.з. э. между органической (метилэтилкетон) и водной (заключенной в порах бумаги) фазами осуществляется разделение смеси на зоны отдельных элементов. [c.154]

Обычно измеряют ее ширину или площадь, иногда объем. В отличие от полосы хроматографическая зона может содержать больше одного компонента. [c.21]

Хроматографическая полоса — это пространство в сорбенте, в ионите или на носителе, в бумаге, занятое выделенным компонентом. Обычно измеряют ширину, площадь или объем полосы. В отличие от хроматографической полосы хроматографическая зона может содержать больше одного компонента. [c.26]

Разделение проводят в камере для низковольтного электрофореза (с. 89). Кюветы заполняют цитратным буфером. Вырезают полосы хроматографической бумаги шириной 4—5 см и наносят на них тканевой экстракт и стандартные растворы нуклеотидов- свидетелей в количестве, соответствующем 0,1—0,15 мкмоль каждого нуклеотида Разделение проводят в течение 4—5 ч при градиенте напряжения 15— 20 В/см и силе тока 0,5 мА на 1 см поперечного сечения бумажной полосы. Местоположение нуклеотидов идентифицируют в ультрахемископе. [c.184]

Растворы веществ наносят на линию старта микропипеткой или микрошприцем так, чтобы расстояние между точками нанесения отдельных проб было не менее 3 см. Если минимально необходимое для проведения хроматографирования количество анализируемого раствора может образовывать на бумаге пятно, превышающее в диаметре 10 мм, нанесение проводят в несколько приемов, предотвращая путем подсушивания чрезмерное растекание пятна на линии старта. После нанесения растворов анализируемых веществ и высыхания образовавшихся при этом пятен полосу бумаги закрепляют в рабочем положении в камере и оставляют на 1 /2 ч. Б рабочем положении полоса хроматографической бумаги должна висеть вертикально так, чтобы между ее верхним концом, погруженным в лодочку, и линией, старта был лишь один, по возможности плавный, перегиб. По окончании выдержки начинают хроматографирование, для чего в лодочку вливают подвижную фазу. Хроматографирование обычно заканчивают [c.101]

Полосу хроматографической бумаги размером 9X35 см расчерчивают вдоль на три равные части и на расстоянии 3 см от нижнего края проводят поперечную линию, на которой в цент ре каждой полосы наносят пятно исследуемого раствора. [c.104]

Нанесение раствора смеси на стартовую полосу хроматографической пластинки, как правило, представляет наиболее трудную и ответственную операцию в препаративной хроматографии. Нужно помнить, что, как и в случае колоночной хроматографии, успех разделения зависит от правильного и равномерного нанесения раствора смеси на хроматографический материал. Существует целый ряд приемов нанесения, каждому из которых свойственны свои преимущества и недостатки выбор одного из них определяется цёлью разделения. Если разделяется малое количество смеси или если разница в величинах Яр отдельных веществ достаточно велика, то некоторые неравномерности нанесения разделяемой смеси допустимы. Однако при разделении большего количества веществ, когда целесообразно использовать полностью [c.128]

Жуховицкий и Туркельтауб в серии работ [1, 50—53] теоретически и экспериментально обосновали применение принципиально нового варианта хроматермографического анализа (рис. II.5). Отличительной особенностью хроматермографии является то, что на движение хроматографической полосы по колонке одновременно оказывают воздействие перемещающееся температурное поле (как в варианте теплового вытеснения) и поток проявляющего газа-носителя. В основном варианте метода ( стационарная хроматермография ) направление движения температурного поля и газа-носителя совпадают, а градиент температурного поля направлен в сторону, противоположную направлению потока газа. В результате этого задний слой хроматографической полосы, находящийся при более высокой температуре, движется быстрее, чем передний, находящийся в области более низких температур. Это приводит к непрерывному сжатию полосы в процессе такого комбинированного воздействия потока газа и температурного поля. Получающаяся хроматограмма внешне похожа на проявительную, однако, вследствие указанного выше эффекта сжатия полосы, хроматографические пики получаются весьма острыми и концентрация компонента в их максимуме намного превосходит концентрацию вещества в исходной смеси отсюда следует перспективность хроматермографии при анализе микропримесей. [c.85]

После электрофореза или хроматографии полосы хроматографической бумаги сушат в горизонтальном положении и просматривают в ультрахемископе. Пятна нуклеотидов обводят карандашом и после сравнения со свидетелями элюируют 5 мл [c.50]

Полосы хроматографической бумаги 6X40 см (ватман № ) пропитывают возможно более равномерно 30%-ным раствором ZrO ls в 4 н. соляной кислоте и быстро помещают на 5 мин на куски фильтровальной бумаги для удаления избытка жидкости. Затем полосы сушат при комнатной температуре наложением на другой слой фильтровальной бумаги. Сухие полосы погружают на [c.382]

Рис. 6. хроматографическое разделение смеси аминокислот а — модель прибора для восходящей хроматографии б — полоса хроматографической бумаги с отмеченным на ней местом нанесения смеси аминокислот в — про-явлеыная хроматограмма г — один из возможных способов сушки хроматограммы [c.40]

В свинцовой защите установлены два счетчика Гейгера— Мюллера с тонкими окошками. Расстояние между окошками- счетчиков составляет 0,6 см. Полоса хроматографической бумаги шириной 2,5 см подается с катушки в промежуток между детекторами. Разрешение прибора можно изменять, регулируя ширину щелей коллиматора. При работе с изотопом на таком приборе можно детектировать активности, меньшие 0,2 нКи при фоне 10,5 имп/мин, хотя эффективность счета ниже, чем у газопроточного счетчика. [c.39]

Приготовление стандартных растворов и построение калибровочной кривой. Для приготовления основного стандартного раствора нефтепродуктов отбирают несколько литров воды исследуемого водоема (или берут нефть или продукты ее переработки из преобладающего источника загрязнения водоема). Экстракцией в условиях, аналогичных описанным в прописи метода (см. Ход определения ) извлекают нефтепродукты хлороформом. Экстракт сушат безводным сернокислым натрием (5 г на 30 мл хлороформного экстракта). Затем при комнатной температуре в вытяжном шкафу удаляют хлороформ из экстракта под током воздуха. Экстракт при этом прибавляют небольшими порциями в стеклянный тигель по мере испарения хлороформа. Полученный концентрат переносят количественно на шесть полос хроматографической пластинки, которую помещают в хроматографическую камеру. После трехминутного хроматографирования пластинку извлекают из камеры, оставляют на 15 мин в вытяжном шкафу для испарения органических растворителей и, облучая пластинку ультрафиолетовым светом, очерчивают границы голубой зоны . Очерченный участок слоя окиси алюминия переносят в стеклянный фильтр № 4 и нефтепродукты элюируют 10 мл н-гексана. Гексан удаляют при комнатной температуре под током воздуха и нефтепродукты взвешивают. Затем из полученной навески готовят основной стандартный раствор нефтепродуктов в н-гексане и последовательным его разбавлением готовят серию стандартных растворов в н-гексане в пределах концентрации О—1000 мкг нефтепродуктов в пробе. Объем каждого раствора 10 мл. Измеряют оптическую плотность каждого раствора, откладывая ее значение по оси ординат калиб- [c.204]

Идентификация жирных кислот хроматографией на бумаге. Полосу хроматографической бумаги (35x10 см) пропитывают 10%-ным раствором парафина в бензоле и высушивают в горизонтальном положении между листами фильтровальной бумаги. Затем на расстоянии 3 см,от узкого края бумаги наносят по капле 5%-ные эфирные растворы испытуемой смеси жирных кислот и образцов свидетелей (стеариновой, пальмитиновой, олеиновой и других кислот — см. стр. 36). В качестве растворителя в сосуд для хроматографии заранее заливают 90%-ный метиловый спирт, насыщенный парафином. Подготовленную бумагу укрепляют в сосуде и хроматографируют по восходящему способу 16—20 ч. [c.97]

Методика. Микропипеткой отбирают 0,005 мл исследуемого раствора и наносят на стартовую линию полосы хроматографической бумаги. Пятно высушивают. Затем получают хроматограмму, как описано в работе 30. Время хроматографирования [c.176]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология