пептидов рацемизация

Общими проблемами синтеза пептидов являются низкая растворимость пептидов, рацемизация в ходе синтеза, выход нужного вещества. [c.121]

Другая очень сложная проблема в синтезе пептидов — рацемизация. Образование пептидной связи почти во всех используемых методах, кроме азидного и немногих других, сопровождается частичной или полной рацемизацией Карбодиимидный метод не составляет исключения [c.121]

Гидролиз пептидов (и белков) приводит к освобождению аминокислот, участвовавших в их построении. Расщепление проводят, как правило, кипячением с соляной или серной кислотами. При этом все аминокислоты выделяются в виде солей, например хлоргидратов. Исключение составляет триптофан, который разрушается в ходе гидролиза, и поэтому для его определения требуются иные способы. Щелочи также гидролизуют пептиды (и белки), но этот процесс протекает менее гладко и приводит к значительной рацемизации аминокислот. Гидролиз полипептидов до аминокислот можно проводить и при помощи ферментов (трипсин, эрепсин). [c.383]

При синтезе дипептидов рацемизация не наблюдается, но в синтезе высших пептидов она происходит. Однако рацемизация отсутствует, если вместо гидрохлоридов применять свободные эфиры аминокислот. Выходы удовлетворительные, и метод весьма удобен, так как этилацетат легко удаляется отгонкой. Реакция, очевидно, не включает стадии образования ангидридов, так как пептиды образуются с более высоким выходом, чем ангидриды. [c.683]

Замещение азидогруппы на аминогруппу лежит в основе весьма важного азидного метода синтеза пептидов, при котором не наблюдается рацемизации [c.119]

Реакция протекает быстро без рацемизации и с высокими выходами пептидов. Оба метода широко используются для синтеза полипептидов как линейных, так и циклических (см. ниже). [c.494]

Реакция идет чрезвычайно легко и при этом не происходит рацемизации пептидов. Существенно, что реакцию можно проводить в водных и спиртовых растворах. [c.494]

Одной из главных проблем синтеза пептидов является легкая рацемизация хиральных аминокислот с активированной карбоксильной группой при действии оснований. Такая изомеризация особенно вероятна у аминокислот, имеющих ацильную группу при атоме азота, так как в этом случае возможно промежуточное образование 5-оксазолона. При этом рацемизация протекает через енольную форму [c.561]

Все операции при синтезе пептидов, которые проводятся по функциональным группам, связанным с асимметрическим центром, таят в себе опасность рацемизации. [c.169]

В этой главе описаны те методы введения защитных групп и их избирательного отщепления, которые оказались наиболее эффективными в синтезе пептидов (табл. 1). Кроме того, рассматривается влияние защитных групп на возможную рацемизацию аминокислот при образовании новых пептидных связей и устойчивость этих [c.158]

Однако при нагревании пептиды могут разрушаться, а также в значительной степени претерпевать рацемизацию. Были исследованы и другие методы введения фталильной защиты например, обработка эфира аминокислоты о-карбоэтокси-тиобензойной кислотой и последующая реакция с водной НВг в уксусной -кислоте привела к получению Ы-фталиламинокислоты. Наиболее общий метод — [c.72]

Поэтому после завершения реакции в органической среде непрореагировавший карбодиимид и мочевину удается просто отмыть водой. Следует отметить, что вследствие образования азлактонов из ангидридоподобных промежуточных соединений в довольно значительной степени при синтезе белков (пептидов) может проходить рацемизация. Однако при синтезе коротких пептидов эта помеха минимальна. [c.85]

Определение качественного и количественного аминокислотного состава белков и пептидов проводят после их гидролиза кислотой или щелочью. Оба вида гидролиза разрушают некоторые аминокислоты. При щелочном гидролизе частично разрушаются цистеин, серии, треонин и происходит частичная рацемизация некоторых аминокислот. При гидролизе соляной кислотой (5,7 н., 105—110° С), которая обычно используется при кислотном гидролизе пептидных связей, практически полностью разрушается триптофан. В связи с этим содержание триптофана в пробах обычно определяют после щелочного гидролиза или спектрофотометрическим методом Кроме того, наблюдаются значительные потери оксиаминокислот (серина, треонина, тирозина), се-русодержащих аминокислот (цистеина, метионина) и частично пролива. При этом степень разрушения аминокислот зависит от чистоты и концентрации НС1, используемой для гидролиза, а также длительности и температуры гидролиза. Следует отметить, что примеси альдегидов при кислотном гидролизе приводят к значительной потере тирозина, а также цистеина, гистидина, глутаминовой кислоты и лизина, а примеси углеводов в больших концентрациях — к разрушению аргинина. [c.123]

При конденсации карбобензилокси- или фталоилпроизвод-ных а-ациламинокислоты с дипептидом можно было ожидать рацемизации в меньшей степени, чем при конденсации ацстили-рованного дипептида с аминокислотой. Одиако трипептиды и высшие пептиды более подвержены рацемизации, чем дипептиды, и чтобы сохранить- оптическую чистоту, следует пользоваться методами, в которых пе применяют п eлoчпык растворов. [c.179]

Гринстейн [33] вычислил вероятность того, что все аминокислотные остатки в пептиде, состоящем из п остатков, будут обладать одной и той же оптической конфигурацией в зависимости от оптической чистоты исходного вещества. Для декапеп- тида эта вероятность составляет 0,90, если в каждой из исходных аминокислот содержится 1 % оптической энантиоморфной структуры, и 0,35, если содержится 10% энантиоморфной структуры. Поскольку рацемизация также приводит к введению оптической энантиоморфной структуры, очевидно, что даже 5%-ная рацемизация на каждой стадии недопустима при синтезе высших пептидов. [c.180]

Можею также избежать рацемизации, ссли конденсировать бблыпио фрагменты пептида с остатками глицина нлн пролина или если синтез осуществлять через азид. [c.183]

Хотя по методу с использованием а-хлорэфиров были получены оптически чистые эфиры карбобензилокси- и фталоилди-пепткдов, вероятно, имела бы место рацемизация, если бы в качестве кислотного компонента был использован ацилди-пептид. [c.239]

Карбобепзилоксипроизводные глицина, DL-алаиина и L-лейцина были превращены в смешанные ангидриды на основе ди-этилфосфата и были использованы для ацилирования эфиров или натриевых солей аминокислот и пептидов. 0бщие выходы продуктов реакции колебались от 61 до 87%. Можно ожидать, что этот метод будет сопровождаться рацемизацией, если она вообще ВО.ЧМОЖНЙ- [c.286]

Применение азидного метода, предложенного Курциусом, с одновременным использованием карбобензоксизащиты оказалось чрезвычайно плодотворным. Метод позволяет получать пептиды, состоящие из любых аминокислот при работе с оптически деятельными аминокислотами не наблюдается рацемизации. [c.491]

Особое значение в синтезе пептидов имеет выбор таких защитных и активирующих групп и условий реакции, при которых не происходит рацемизации, так как в противном случае не только образуется смесь трудно разделимых стерео изомеров, но синтез не достигает основной цели — получения природных соединений. Лучше всего отвечают этому требованию синтезы с применением дициклогексилкарбодиимида (карбодиимидный метод) или этоксиацетилена и азидный метод. Недавно было обнаружено, что пептиды подвергаются наименьшей рацемизации, если проводить синтез последовательным нанизыванием ами- oки лoтныx остатков со стороны карбоксильной группы. [c.496]

Химический синтез пептидов чрезвычайно важен, тем более что разработанные для этого методы могут быть применены также для синтеза белков. Между первым получением пептида Фишером и Фурне (глицилгли-цин, 1901 г.) и автоматическим синтезом полипептидов и белков в наше время лежит три четверти века интенсивного развития органической химии. Разработаны многочисленные методы направленного синтеза пептидов. Важнейшие из этих методов рассмотрены в этой главе (наряду с методами защиты амино- и карбоксильных групп и функций боковых цепей). Обсуждаются также проблемы рацемизации, стратегии и тактики пептидного синтеза, принципы образования циклических пептидов. В конце главы помещен обстоятельный обзор важнейших пептидов, встречающихся в природе, причем наряду с описанием соединений и получением их с помощью химического синтеза уделяется внимание связи строения и действия. [c.92]

Метиловые эфиры (-ОМе) и этиловые эфиры (-ОЕ1) применялись в пептидном синтезе уже Фишером и Курциусом. Снятие этих защит по окончании пептидного синтеза проводят мягким щелочным гидролизом в диокса-не, метаноле (этаноле), ацетоне, ДМФ с добавлением различных количеств воды. Названные алкиловые эфиры следует применять для синтеза коротких пептидов, так как с ростом цепи гидролитическое расщепление затрудняется, а применение жестких условий гидролиза повышает опасность побочных реакций. Следует избегать избытка щелочи, в противном случае может произойти рацемизация и другие побочные реакции. Оба алкильных эфира устойчивы к гидрогенолизу и мягкому ацидолизу. При гидразиноли-зе они переходят в гидразиды, что можно использовать для дальнейшей конденсации фрагментов с помощью азидного метода. При аммонолизе метиловые и этиловые эфиры дают амиды. Это применяют в тех случаях, когда С-концевая аминокислота должна нести амидную группу. [c.117]

При синтезе пептидов с О-незащищенными гидроксиаминокислотами все-таки часто наблюдаются нежелательные побочные реакции. Так, в кислых условиях может происходить N — О-аминоацильная миграция [193] с последующими нежелательными реакциями. При деблокировании N"-аминозащитной группы посредством НС1 в уксусной кислоте существует опасность О-ацетилирования. В основной среде, как, например, при гидразинолизе, была отмечена рацемизация гидроксиаминокислот. По этим причинам блокирование гидроксильной функции представляется целесообразным. Некоторые защитные группы приведены в табл. 2-5. [c.132]

Эта добавка, предложенная Фуджино и сотр. [314, 315], вызывала лишь незначительную рацемизацию. Она была испытана иа примерах синтеза некоторых важных пептидов (АКТГ, люлиберина и др.). Можно вести реакцию также с выделением соответствующего эфира. [c.156]

При синтезе длинноцепочечных оптически активных пептидов отсутствие рацемизации в ходе конденсации имеет решающее значение, так как стереоизомеры крупных фрагментов почти невозможно разделить с помощью таких операций очистки, как кристаллизация, иоиообмениая хроматография и др. Оптическая чистота синтетических пептидов зависит от степени рацемизации на каждой стадии конденсации. Если представить себе, что на каждой стадии синтеза рацемизация составляет только 1%, то после 100 конденсаций продукт будет содержать всего 61% желаемого стерео-изомера. Этот пример показывает, какое огромное значение имеет проблема рацемизации при пептидных синтезах. Поскольку целью пептидных синтезов является получение биологически активных пептидных и белковоподобных веществ, биологическая активность которых зависит от оптической чистоты, то следует уделять особое внимание вопросам снижения рацемизации при пептидных синтезах. [c.170]

Рис. 2-11. Азлактонный механизм рацемизации. К — остаток С-концевой аминокислоты, — остаток пептида, X — активирующая группа, К2 — остаток аминокомпонента, В — основание.

Раскрытие кольца происходит с различной скоростью [360]. Соотношение полученных диастереомеров определяется принципом Куртина — Гаммета. При размыкании азлактонного кольца эфирами ь-аминокислот доминирует образование оь-пептида. При образовании пептидной связи по азлактонному механизму степень рацемизации зависит как от тенденции образования азлактона, так и от скорости размыкания азлактонного кольца аминокомпонентом. Важную роль играет при этом нуклеофильность аминокомпонента. [c.172]

Активирование Ы-защищенных фрагментов пептидов с С-концевым пролином. При введении карбоксикомпонента с С-концевым пролином образование азлактона невозможно, так что такие пептиды можно активировать, не опасаясь рацемизации. Нет опасности рацемизации также при активировании фрагментов с С-концевым глицином из-за отсутствия хиральности у этой аминокислоты. [c.172]

Степень рацемизации прн конденсации и стерическую однородность полученного пептида нельзя ставить в непосредственную связь друг с другом. Так, к примеру, считают, что процесс протекает без рацемизации, если в результате операций очистки происходит более или менее полное разделение стереонзомеров. Из большого числа 0Ш1санных тестов рацемизации ясно, что идеального метода определения рацемизации нет. Все химические тесты испытываются на модельных пептидах. Поэтому распространение полученных результатов на огромное множество пептидных последовательностей, полученных нз 20 протеиногенных аминокислот, по меньшей мере спорно. За неимением лучших методов новые методы сочетания следует испытывать на нескольких различных модельных системах. [c.175]

Тест Андерсона — Каллагана [371]. В случае модельного пептида Z-GIy-Phe-GIy-OEt (пептид Андерсона), полученного нз Z-GIy-Phe-OH и Gly-OEt, можно разделить стереонзомеры образовавшегося рацемата фракционной кристаллизацией. Чувствительность определения степени рацемизации 1—2 7о. [c.175]

При отщеплении с помощью щелочного гидролиза или катализируемь1х основаниями превращений в присутствии сильных ионообменников существует опасность рацемизации и возможность переэтерификации бензиловых эфиров боковых цепей. В принципе возможно также и аминолитическое и гидразинолитическое отщепление пептида. Для получения амидов и гидра-зидов следует использовать уже обсуждавшиеся модифицированные якорные группировки. [c.193]

Эта реакция не пригодна для отщепления С-концевых остатков пролина, так как они не образуют тиогидантоин, остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, которые образуют циклические ангидриды, а не тиогидантоины (аспарагин и глутамин, наоборот, дают тиогидантоины [301]), а также остатков серина, треонина, цистина, аргинина и лизина [19, 301], которые неустойчивы при циклизации или регенерации аминокислоты из тиогидантоинового производного. Таким образом, этот метод находит весьма ограниченное применение для прямого определения строения пептидов и белков. Для определения С-концевого остатка по разности [107] реакция может оказаться более полезной, но ее все же нельзя использовать для определения аспарагиновой и глутаминовой кислот и пролина. Однако путем микробиологического анализа [107], специфичного для остатков /-аминокислот, эти аминокислоты могут быть определены по потере оптической активности на 50% вследствие рацемизации в том случае, когда они являются С-концевыми. [c.247]

При синтезе дипептидов с помощью этоксиацетилена рацемизации не присходит, но при синтезе высших пептидов из хлоргидратов аминокислот иногда наблюдается частичная рацемизация. Это затруднение можно почти полностью устранить, если применять свободные аминокислоты [170]. [c.165]

ИЛИ пептидов [3—7, 33, 35, 42, 181, 187]. При этом обычно получаются хорошие результаты, если применять такие растворители, как хлористый метилен, хлороформ или ацетонитрил, которые ускоряют образование пептидных связей. При конденсации Ы-трифе-нилметиламинокислот по этому методу рацемизации не наблюдается. [c.173]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология