Жидкостная хроматография классическая

Аппаратура. Как уже было сказано, жидкостная адсорбционная хроматография возможна в классическом варианте — в колонках без давления (или при незначительных перепадах давления) либо в виде высокоскоростной жидкостной хроматографии на специальных хроматографах, позволяющих проводить анализ при различных температурах и высоких скоростях потока при давлении до сотен атмосфер. [c.41]

Классические хроматографические методы, которые известны уже в течение нескольких десятилетий,— хроматография на колонке с окисью алюминия (Цвет, 1906 г. Кан, Винтерштейн и Ледерер, 1931 г.), хроматография на бумаге (Мартин и Синг, 1941 г.) — основаны на принципе распределения компонентов смесей между подвижной и неподвижной фазами. Последней при адсорбционной хроматографии является активная поверхность твердого адсорбента, а при распределительной хроматографии — тонкая пленка жидкости, удерживаемая твердым носителем и ограниченно смешивающаяся с подвижной фазой. Разновидность распределительной хроматографии, при которой подвижной фазой является газ, называется газовой хроматографией [134а]. Этот метод пригоден для разделения газов, а также жидких или твердых веществ, которые могут быть превращены в пары без разложения. В зависимости от системы, в которой проводится разделение, различают две принципиальные разновидности газовой хроматографии хроматографию в системе газ — твердое вещество (адсорбционная газовая хроматография) и хроматографию в системе газ — жидкость (газо-жидкостная хроматография). В первом случае разделение происходит за счет адсорбции веществ на активной поверхности твердого адсорбента, во втором — за счет их растворения в тонкой пленке нелетучей жидкости с достаточно большой поверхностью. Практически далеко не всегда можно провести четкую грань между обоими принципами разделения. Так, при хроматографии в системе газ — адсорбент пленка адсорбированного вещества может иметь такие свойства, что на некоторых этапах работы возникают условия для хроматографии в системе газ — жидкость. Вследствие этого происходит дезактивации- некоторых активных центров адсорбента, которую иногда вызывают умышленно [74—76]. С другой стороны, при хроматографии в системе газ — жидкость носитель, на котором закреплена жидкая фаза, может обладать и некоторыми адсорб-цйонными свойствами. Это, как правило, мешает разделению и поэтому нежелательно. [c.487]

Классическое устройство ддя жидкостной хроматографии предусматривает наличие следующих модулей [c.265]

Начиная с работ М. С. Цвета, открывшего элютивную жидкостно-адсорбционную хроматографию, ее развитие сопровождалось ростом числа приложений в области биологии и медицины. Разработка А. Мартином и Р. Синджем (1941) жидкостной распределительной хроматографии значительно расширила возможности хроматографических методов. Преимуществами распределительной хроматографии является возможность работы в области линейной изотермы сорбции, что позволяет избавиться от деформации хроматографических полос. Кроме того, использование органических жидкостей в качестве неподвижной фазы улучшает возможность подбора необходимого сорбента. Она с успехом применяется для анализа и разделения лекарственных препаратов, гормонов, пестицидов, антибиотиков и других веществ. Основным недостатком классической жидкостной хроматографии является длительность процесса, достигающая суток. [c.78]

Возможен и другой, качественно иной, подход при использовании газо-хроматографических методов к исследованию высокомолекулярных соединений — применение обращенной газовой хроматографии. В обращенной газовой хроматографии исследуемой системой является, в отличие от классического варианта, неподвижная фаза, на которой разделяются известные летучие соединения (стандарты). Обращенная газовая хроматография основана на использовании непосредственного взаимодействия стандартных хроматографируемых соединений с исследуемой полимерной системой и установлении определенной связи между величинами хроматографических характеристик стандартных соединений и составом, строением и другими свойствами полимерной системы, используемой как неподвижная фаза. Поэтому метод обращенной газовой хроматографии можно рассматривать как прямой метод исследования высокомолекулярных соединений. На значение газо-жидкостной хроматографии для изучения термодинамики взаимодействия летучих веществ с неле- [c.253]

Применение современной техники разделения, особенно высокоэффективной жидкостной хроматографии, позволяет относительно хорошо очистить пептиды, содержащие 3—10 аминокислотных остатков. Для построения длинных полипептидов и небольших белковых молекул подходит только классический метод конденсации фрагментов. Синтез фрагментов производят либо в растворе путем ступенчатого удлинения пептидной цепи, либо [c.226]

Несмотря на вышеупомянутую политику использования классических методов анализа, бывают случаи, когда онределенные сложные вещества (наиример, блеомицины) могут быть адекватно испытаны только с помощью сложного метода, такого как жидкостная хроматография высокого давления . Поэтому ука- [c.8]

Сравнивая тонкослойную хроматографию с колоночной, можно отметить следующие преимущества первого метода 1) простоту приемов и оборудования 2) невысокую стоимость анализа 3) большие потенциальные возможности (для управления процессом разделения используют не только жидкую, но и газовую фазу возможно качественное и количественное определение всех анализируемых соединений независимо от их хроматографической подвил<ности). Необходимо указать, однако, и на некоторые недостатки классического метода по сравнению с колоночной детекторной жидкостной хроматографией, а именно на существенную длительность высокая трудоемкость и продолжительность характерна также для методики количественного определения. [c.6]

Разделение с помощью жидкостной хроматографии обычно требует значительных затрат времени. Особенно длительное время приходится затрачивать при работе с классическим вариантом хроматографии, в котором жидкость протекает через колонку под действием силы тяжести. Много времени требует также проведение препаративного разделения. Однако с помощью таких вариантов метода, как хроматография в сухих колонках (разд. 7.4.3) и [c.432]

Обычная длина колонок в классической жидкостной хроматографии 10-25 см, в газовой — 1-3 м. В высокоэффективной жидкостной хроматографии длина может увеличиваться до 50-100 см и более. Для увеличения числа теоретических тарелок в газовой хроматографии иногда изготавливают колонки большей длины, равной десяткам и даже сотням метров. Длинные колонки для газовой хроматографии сворачивают в спираль, в жидкостной обычно их делают секционными, используя соединительные устройства с минимальным мертвым. объемом. Различие приемов объясняется тем, что эффективность свернутых в спираль колонок в жидкостной хроматографии оказывается ниже, чем прямых секционных колонок той же длины. Эффект неравномерности потока подвижной фазы при изменении /гла наклона колонки относительно оси земного притяжения проявляется тем сильнее, чем больше ее диаметр. [c.186]

Ввиду того что классическое бактериологическое исследование занимает не менее 5 — 6 сут для решения клинических вопросов, при остром течении инфекции применяется экспресс-диагностика. С этой целью проводят микроскопию патологического материала, определение специфических метаболитов (летучих жирных кислот) методом газо-жидкостной хроматографии, а в некоторых случаях — выявление НК возбудителей. [c.186]

Для анализа, и контроля производства ПАВ используют физикохимические и химические методы, дозволяющие определить как содержание целевых групп соединений, так и содержание побочных продуктов, непрореагировавших соединений, минеральных солей, воды и т. д. Наиболее универсальными являются хроматографические методы, они широко и эффективно применяются для разделения и анализа всех классов ПАВ. Наряду с методами жидкостной колоночной, тонкослойной и газо-жидкостной хроматографии, используемыми для анализа и контроля сырья и полупродуктов для ПАВ (см. часть I), для анализа анионоактивных, катионоактивных и не-ионогенных ПАВ, кроме того, нашли применение методы кислотной и щелочной пиролизной хроматографии. Из других менее универсальных современных методов важную роль в анализе и контроле играют метод двухфазного титрования (определение содержания анионоактивных ПАВ) и метод ЯМР (анализ неионогенных ПАВ). Методические разработки последних лет позволяют также применять. (в зависимости от конкретных условий и целей) такие известные классические методы разделения и анализа, как экстракция, гидролиз, ИК-спектроскопия,спектрофотометрия и т. д. [c.178]

В жидкостной адсорбционной хроматографии (в ее классическом варианте) наиболее часто пользуются фракционным методом анализа. Непрерывный метод анализа в основном используют в скоростной жидкостной хроматографии. Проведение анализа и расчет концентраций этим методом будет рассмотрен далее в газоадсорбционной хроматографии. [c.53]

Модернизация аппаратуры, применяемой в классической жидкостной колоночной хроматографии, сделала ее едпим из наиболее перспективных и совершенных методов анализа. Он по.пучнл название высокоэффективной жидкостной. хроматографии (ВЖХ). В н 1Стоя(цее премя этот метод является одним из главных методов анализа органических соединений. [c.595]

Выделение алкалоидов в чистом виде обычно является весьма трудной задачей. В настоящее время уже редко используют классические методы раскристаллизации, которые часто не приводят к успеху из-за сложности смеси алкалоидов, поя> чаемой при первичной экстракции растительной массы. Как правило, для разделения смесей алкалоидов теперь широко применяют разные виды хроматографии, в том числе и ионообменную, прот ивоточное распределение, препаративную газожидкостную хроматографию, жидкостную хроматографию высокого давления и др> тие методы современной аналитической органической химии. [c.547]

Хроматографическое разделение в открытой колонке занимает много времени. Это является основным недостатком классической колоночной хроматографии. Высокоэффективная жидкостная хроматография лишена этого недостатка. В этом высокопроизводительном методе наиболее широко применяют поверхностно-пористые ионообменники, обладающие рядом преимуществ по сравнению с обычными ионитами 1) они хорошо выдерживают давление 2) мас-сопередача в тонком поверхностном слое ионита осуществляется быстро, что обеспечивает установление равновесия за очень короткое время. [c.606]

Адсорбционную хроматографию с использованием в качестве наполнителя колонок силикагеля очень широко применяют в классическом варианте жидкостной хроматографии. При однократном разделении силикагель оказывается достаточно удобным, эффективным и недорогим сорбентом. Очень интенсивно используют силикагель в качестве адсорбента для ТСХ (также однократно). Адсорбционная активность силикагеля достаточно легко воспроизводится путем определенных операций гидроксилирования, сушки, активации. Большой опыт применения силикагеля в ТСХ и колоночной хроматографии, естественно, стимулировал широкое его использование на ранних стадиях развития ВЭЖХ. [c.16]

Ион-парная хроматография давно находила применение в жидкостной хроматографии и экстракции для извлечения лекарств и их метаболитов из биологических жидкостей в органическую фазу. Как самостоятельный раздел ВЭЖХ ион-парная хроматография, называвшаяся также экстракционной, парно-ионной, хроматографией с использованием ПАВ, хроматографией с жидким ионообменником, стала развиваться с середины 70-х годов. Метод занимает промежуточное положение между ионообменной хроматографией и адсорбционной, распределительной или обращенно-фазной. Недостатки ионообменных материалов, а именно невоспроизводимость от партии к партии, меньшая активность и стабильность по сравнению с другими сорбентами и небольшой выбор наполнительного материала, исключающий изменение селективности за счет сорбента, привел к некоторому ограничению применения ионообменной хроматографии. В ион-парной хроматографии большинство этих недостатков можно преодолеть. Метод ион-парной хроматографии характеризуется универсальностью и обладает преимуществом по сравнению с классической ионообменной хроматографией, в котором активные центры фиксированы. Вследствие более быстрой массопередачи в ион-парной системе хроматографическое разделение более эффективно, чем на ионообменнике с фиксированными и активными зонами. [c.74]

Кардинальные изменения произошли в конце 1960-х гс дов, когда были введены в употребление частицы диметром от 3 до 10 мкм и повое поколение оборудования. Классическая жидкостная хроматография используется в настоящее время в препаративных целях, а также для демонстрационных экспериментов. В этом разделе будут рассмотрены наиболее важные элементы скоростной жидкостной хроматографии —вь соко5 ект вной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). [c.264]

Принципиально должна существовать также возможность использования в КЗЭ испытанного в классическом электрофорезе и в жидкостной хроматографии анионного ПАВ ДДСН. Однако в систематических исследованиях кислых белков оказывается, что добавка ДДСН в количествах от ррт до одного процента к пробе и к буферу приводит к очень неопределенным результатам. В общем случае не улучшается ни эффективность, ни селективность, а даже наблюдается некоторое ухудшение этих характеристик. Возможным объяснением этого может быть хорошо известное действие денатурации, оказываемое ДДСН на белок. Наряду с этим, в наблюдаемой потере селективности большую роль играет, конечно, адсорбция ПАВ на биомолекулах и связанное с этим появление заряда пробы. Первоначальная структура заряда белков может полностью исчезнуть или перекрываться этим эффектом, так что разделение в электрическом поле произойдет только лишь по адсорбированным зарядам детергентов. [c.69]

С другой стороны, высокоэффективные колонки имеют значительно меньший размер, чем колонки для классической жидкостной хроматографии. Следовательно, меньше должен быть объем вводимой пробы и меньше становится объем растворителя, соответствующего хроматографическому пику. К такому же результату приводит и повышение эффективности самого разделения. Малые объемы пиков и вводимых проб определяют требования к миниатюризации детекторов и устройств ввода. Так, совершенно ясно, что детектор регистрирует сигнал, полностью адекватный процессу разделения, произошедшему в колонке, лишь если объем его чувствительного элемента значительно меньше объема пика. Из табл. 5.1, где сопоставлены некоторые характеристики, типичные для колонок различной эффективности и размеров, видно, что все варианты ВЭЖХ требуют применения давлений (при хорошей проницаемости колонок) в пределах 50—200 атм. Кроме того, рабочий объем чувствительного [c.181]

Классическую жидкостную колоночную хроматографию при низких давлениях и неоднородных сорбентах используют в основном для предварительного разделения. В подавляющем большинстве случаев применяют жидкостную хроматографию высокой эффективности (ВЭЖХ) с высокими давлениями, обусловливающими высокие скорости разделения, и сорбентами высокой степени однородности. [c.225]

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) продолжает активно развиваться и в настоящее время Миниатюризация размеров колонки - одно из важных направлений принципиального улучшения характеристик этого метода Микромасштабная колоночная ВЭЖХ по сравнению с классической имеет следующие преимушества 1) повышенная эффективность, 2 большая экономичность в результате уменьшения расхода подвижной и неподвижной фаз, 3) лучшие характеристик процессов с програмированием температуры, 4) простота сочетания с масс-спектрометром в качестве детектора, 4) более простая реализация оптимальных условий разделения [c.5]

Газовая и в особенности газо-ншдкостная хроматография — наиболее молодая отрасль классической хроматографии, разработанной М. С. Цветом в 1903 г. Значение газо-жидкостной хроматографии особо выявилось в 1952 г. в результате работы Джеймса и Мартина, которые применили инертный пористый носитель с нанесенной на него высококипящей органической жидкостью и этим существенно ускорили десорбцию веществ с высокой температурой кипения. Разделение на такой насадке оказывалось более полным. Это значительно расширило возможности применения хроматографии на практике. С тех пор количество работ по газо-жидкостной хроматографии резко растет и область применения этого метода непрерывно расширяется. Наибольших результатов газо-жидкостная хроматография достигла в анализе органических веществ, в области органического синтеза, нефтеперерабатывающей и нефтехимической промышленности. [c.5]

В последнее десятилетие бурно развивается ряд новых направлений газовой хроматографии анализ с нрограм-мированием температуры, капиллярная хроматография, препаративная хроматография, ступенчатая хроматография и др. Все эти направления по сравнению с классическим вариантом, предложенным А. Джемсом и А. Мартиным [1] для газо-жидкостной хроматографии, характеризуются новым использованием той или иной физической переменной температуры, диаметра колонок и т. п. [c.5]